La práctica consiste en realizar pruebas de floculación para determinar VDRL e inmunocromatografía para determinar HCG, HIV, Dengue, Cocaína, Marihuana, Malaria y COVID-19. Las pruebas de VDRL, HCG, Cocaína y Marihuana se basan en principios inmunológicos, mientras que para confirmar resultados se recomiendan pruebas como Western Blot para HIV, PCR para COVID-19 y gota gruesa para Malaria.

1. UNIVERSIDAD DE ORIENTE
NUCLEO BOLIVAR
DEPARTAMENTO DE BIOANALISIS
Prácticas de Inmunología I
(200-3152)
Prof. Gey Esmeralda Partidas
Práctica N°4 Floculación / Pruebas rápidas de Inmunocromatografia
• F: Determinación de VDRL
• PR: determinación de HCG
• PR: determinación de HIV
• PR: determinación de Dengue
• PR: determinación de Cocaína/ Marihuana
• PR: determinación de Malaria
• PR: determinación de COVID 19

2. Pruebas de Floculación: Determinación de VDRL
• La prueba del VDRL (Venereal Disease
Research Laboratory) constituye una
técnica serológica con la suficiente
sensibilidad y especificidad para
complementar el diagnóstico de sífilis y
analizar la respuesta al tratamiento
específico.
• El VDRL es una técnica de floculación que
utiliza el antígeno de cardiolipina para
detectar anticuerpos antitreponémicos
inespecíficos producidos por el individuo
ante una infección sifilítica

3. Determinación de VDRL
Reporte: No Reactivo
Reactivo + titulo de dilución

4. Pruebas Rápidas de diagnóstico
(Inmunocromatografías)
La inmunocromatografía se basa en la
migración de una muestra a través de una membrana
de nitrocelulosa.
La muestra es añadida en la zona del conjugado, el cual
está formado por un anticuerpo específico contra uno
de los epítopos del antígeno a detectar y un reactivo de
detección.
Si la muestra contiene el antígeno problema, éste se
unirá al conjugado formando un complejo inmune y
migrará a través de la membrana de nitrocelulosa. Si
no, migrarán el conjugado y la muestra sin unirse.

5. Pruebas Rápidas de diagnóstico: HCG
Inmunoensayo cromatográfico rápido
La gonadotropina corionica humana (hCG)
es una hormona glucoproteica producida por
la placenta en desarrollo poco después de la
fertilización.
• En el embarazo humano la hCG puede
detectarse tanto en orina como
en suero a los 7-10 días de la concepción.
• Su aparición, y posterior aumento rápido
durante el principio de la gestación,
convierten esta hormona en un excelente
marcador para la detección precoz del
embarazo.
• Sensibilidad de los test 25 Mui/Ml.

6. Pruebas Rápidas para detección de COCAINA
Inmunoensayo cromatográfico rápido
basado en el principio de uniones
competitivas.
• La prueba COC es un ensayo
inmunocromatográfico rápido, de un
solo paso para la detección cualitativa
de metabolitos de drogas en la orina
humana en un límite de concentración.
• Establecido como una pauta por
EE.UU.
• No requiere instrumentos
• Valor de referencia : 300ng/ml
Sensibilidad: 100%
Especificidad: 100%

7. Pruebas Rápidas para detección de MARIHUANA
Inmunoensayo cromatográfico rápido basado en el
principio de uniones competitivas.
• La droga que puede estar presente en la muestra
de orina compite frente al conjugado de la misma
en los puntos de unión al anticuerpo.
• Durante la prueba, la muestra de orina migra hacia
arriba por acción capilar. Si la Marihuana se
encuentra presente en la orina en concentración
inferior a 50 ng/mL, no saturará los puntos de
unión de las partículas recubiertas de anticuerpo
en la Tira de la prueba. Las partículas recubiertas
de anticuerpo serán capturadas por el conjugado
inmovilizado de THC y una línea visible de color
aparecerá en la zona de la prueba. Esta línea de
color no se formará en la zona de la prueba si el
nivel de Marihuana está por encima de 50 ng/mL
porque saturará todos los puntos de unión de los
anticuerpos de anti-Marihuana.

8. Pruebas Rápidas para drogas multipanel

9. Pruebas Rápidas de detección de HIV
Pruebas rápidas para la
determinación de anticuerpos
contra el
virus de inmunodeficiencia
humana (VIH).
Las muestras pueden ser: sangre
completa, suero. Se pueden
detectar anticuerpos contra los
serotipos T1 y T2.

10. INTERPRETACION EN CASO DE INFECCÍÓN POR UN MICROORGANISMO
Perfil Serológico:
• IgM
• IgG

11. Pruebas Rápidas para detección del DENGUE
• La aparición de síntomas del dengue se caracteriza por la
presencia del antígeno NS1 (dengue) en el suero del
paciente.
• NS1 es una glicoproteína común a todos los serotipos del
dengue y se la puede utilizar para detectar infecciones
primarias o secundarias en las primeras etapas de la
enfermedad.
• Las pruebas serológicas para los anticuerpos específicos al
dengue, tipos IgG e IgM, pueden ser útiles para confirmar el
diagnóstico primario o secundario.
• En las infecciones primarias y secundarias, IgM se presenta
después de aproximadamente 5 días; mientras que IgG se
produce entre 2 y 4 semanas después de la aparición de la
infección primaria y casi inmediatamente después de la
aparición de una infección secundaria.

13. REACTIVIDAD CRUZADA

16. Diagnóstico de COVID 19

17. Test inmunológicos
Pueden ser de dos tipos: de diagnóstico y de cribado:
• Test de antígenos se utilizan para el diagnóstico. Se trata de test
cuantitativos que, mediante una muestra nasofaríngea que se
analiza en el laboratorio, detectan proteínas del virus. Con ellas
se puede detectar si existe una infección activa.
• Test de anticuerpos que sirven para realizar un cribado de la
enfermedad. Estos test también son cuantitativos. En base a una
muestra de sangre analizada en el laboratorio, detectan
anticuerpos producidos a los siete días aproximadamente desde
el comienzo de los síntomas. Esta es una prueba indirecta de
inmunidad, en la que se analiza si la enfermedad está activa o se
ha superado.
Diagnóstico de COVID 19

18. Test de ARN:
- Los test de ARN se utilizan para el diagnóstico de la
enfermedad. Utilizan una muestra nasofaríngea, que
se analiza en un laboratorio. Este tipo de prueba, en la
que se incluyen los test PCR (reacción en cadena de
la polimerasa) y otros test de ácidos nucleicos, detecta
la presencia de material genético del virus.
- Este tipo de test se usa para ver si hay una infección
activa y en un período de cuatro horas ofrece
resultados con una alta sensibilidad y especificidad.
Diagnóstico de COVID 19

19. Pruebas Rápidas para la detección de COVID 19
• Test rápidos de diagnóstico basados en la
detección de antígenos: estos precisan de una
muestra nasofaríngea que se realiza con o sin
equipos portátiles al lado del paciente. Estos test
son cualitativos: es decir, marcan si el paciente da
positivo o negativo. Están basados en un
inmunoensayo que detecta proteínas del virus, lo
que indica la presencia de una infección activa.
Este test permite obtener los resultados a los 15
minutos de la realización de la prueba
• Test rápidos que analizan la presencia de
anticuerpos: que sirven para el cribado de la
población. Igualmente son test cualitativos y
detectan los anticuerpos aproximadamente a los
siete días desde que se presentan los síntomas en
los pacientes. Al igual que el otro tipo de test
rápidos, los resultados de estas pruebas están
disponibles 10 o 15 minutos después desde que se
realiza la prueba.

20. INTERPRETACION y DIAGNÓSTICO DE COVID19
PRUEBA DE INMUNOGLOBULINAS (IgM-IgG)
Fase 2
Infección activa
aparece IgM
Fase 3 Inicia
disminución de la
infección activa
aparecen IgM e IgG
Fase 4
Convalescencia
solo queda IgG

21. Diagnóstico de COVID 19

23. Pruebas Rápidas para la detección de MALARIA

24. VDRL REACTIVO Infección por Treponema pallidum
 Sífilis screnning con ELISA confirmar con: FTA-ABS
(Inmunofluorescencia).
Pruebas por Inmunocromatografía:
 HIV screnning con ELISA confirmar con: Western blot
 COVID 19 confirmar con PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa)
 Malaria Gota gruesa (análisis de extendido sanguíneo)
Pruebas confirmatorias

25. GRACIAS...