Ponencia presentada en el marco de las I Jornadas Científicas del Instituto de Investigación Sanitaria Aragón (8-9 noviembre, 2010. Zaragoza)

1. Estrategias para incrementar la
actividad regenerativa de células
progenitoras
Ángel-Luis García Otín
GIPASC
Laboratorio de Investigación Molecular
Hospital Universitario Miguel Servet
Zaragoza, 8 de Noviembre de 2010

2. CEPCs: un campo relativamente nuevo
Asahara T et al. Science (1997); 275: 964-967.
Células CD34+/VEGFR2 (Flk-1, KDR)+ en la circulación sanguínea se
diferencian a células endoteliales y tienen capacidad angiogénica

3. CEPCs in vivo
Células capaces de:
Mantener el endotelio
Participar en angiogénesis
Promover vasculogénesis

4. Origen de las CEPCs
Médula ósea
Población heterogénea y escasa (0,01-0,0001% de las células mononucleares

5. CEPCs en el modelo de trabajo actual
Permite una perspectiva regenerativa basada en la
intervención sobre las CEPCs

6. Actividad de células progenitoras
Mobilización
Migración
Proliferación
Adhesión
Integración

7. CEPCs en terapia celular

8. CEPCs in vitro
Hirschi, K. K. et al. Arterioscler Thromb Vasc Biol 2008;28:1584-1595

9. Morfología de CEPCs

10. Marcadores de CEPCs
Azul: DAPI / Verde: Lectina Ulex europaeus / Rojo: AcLDL

11. Marcadores de CEPCs
CD3 CD14 CD31 CD34
CD45 CD105 CD117 CD133
CD144 CD146 CXCR4 KDR

12. Funcionalidad de CEPCs in vitro
HUVEC CEPCs HUVEC/CEPCs
Sonda Fluorescente Sonda Fluorescente Superposición
Verde Roja
Incorporación a monocapas de células HUVEC

13. Funcionalidad de CEPCs in vitro
HUVEC/CEPCs HUVEC CEPCs HUVEC/CEPCs
Campo Claro SFV SFV/SFR Superposición
Formación de estructuras tubulares

14. Funcionalidad de CEPCs in vivo
Modelo de isquemia femoral unilateral y seguimiento de la perfusión del tejido
mediante imagen basada en laser-doppler
Próximamente disponible en UATI de Valoración Funcional

15. Uso de nanopartículas
Ferritina
Proteína multimérica (450 kDa)
24 subunidades de 19-21 kDa
12 nm de diámetro
Almacenamiento fisiológico de Fe
Objetivo
Incorporar a nanopartículas de ferritina
LPGFPC péptidos que promuevan el anclaje de
CEPCs para su aplicación en tejidos
GTFALRGDNGQ isquémicos o como adyuvantes en
esquemas de terapia celular

16. CEPCs e hipoxia
140
120
100
80
%
60
40
20
0
Normoxia 1 Hipoxia
Efecto en proliferación celular

17. CEPCs e hipoxia
CD31 CD105 CD144
CD146 VEGF-R2 CD34
CD117 CD133 CXCR4
Marcadores de superficie
Rojo: hipoxia / Azul: Normoxia

18. Colaboraciones y agradecimientos
Miguel Pocoví [Universidad de Zaragoza - Dpto. Bioquimica]
Fernando Civeira/Estíbaliz Jarauta [HUMS - Medicina Interna/LIM]
Isabel Calvo/Juan Sánchez-Rubio/Mª Cruz Ferrer [HUMS - Cardiología/Hemodinámica]
Pilar Martín-Duque [I+CS/ARAID/HUMS - UIT]
Ana Isabel Gracia/Carlos Gómez-Moreno [INA/Universidad de Zaragoza]
Mª Ángeles Navarro [I+CS/HUMS - UIT]
Jesús Osada [Universidad de Zaragoza - Dpto. Bioquímica]
José Martínez [Hospital Sant Pau - ICCC-CSIC]
Iñaki Ochoa [CIBER-BBN - Universidad de Zaragoza/GEMM]
Pedro Moreo/Víctor Alastrué [EBERS Medical Technology]
María Royo [UATI Microscopía e Imagen-I+CS]
Javier Godino/Mª Carmen Carreras [UATI Citometría y Separación Celular-I+CS]
Eduardo Romanos [UATI Valoración Funcional-I+CS]
PS09/00355 PIPAMER09/08

19. Gracias
Noelia Fandos Sonia Santander Irene Rubio Sarah Fiddyment