1. CELULAS MADRE Y TERAPIA
REGENERATIVA
Dr. Edgar Matos Benavides
Médico Inmunólogo
Lic.Tecnólogo Médico
Instituto de Hemaferesis y Terapia Celular
IHEMATEC
3. Celulas Madre y Terapia Celular
Biología
Celular
Medicina
Regenerativa
4. ¿El término “Célula Madre “ es correcto ?
El término inglés es “Stem cells”
(CÉLULAS TRONCO)
Células Troncales o Tronco.
Ha trascendido socialmente el
término Célula Madre y a ellas nos
referiremos…
5. ¿Qué son las células madre?
Las células
madre o s t em
cel l s se
define como
una célula
progenitora,
6. CLASIFICACIÓN
SEGÚN EL MOMENTO DEL DESARROLLO
– CM EMBRIONARIAS
– CM FETALES
– CM ADULTAS
SEGÚN POTENCIALIDAD
– TOTIPOTENCIALES
– PLURIPOTENCIALES
– MULTIPOTENCIALES
– UNIPOTENCIALES
7. TIPOS DE CELULAS MADRE
Embrión deEmbrión de
5-7 días5-7 días
Células MadreCélulas Madre
EmbrionariasEmbrionarias
Embrión deEmbrión de
6 semanas6 semanas
Células GerminalesCélulas Germinales
PrimordialesPrimordiales
Células MadreCélulas Madre
FetalesFetales
Células MadreCélulas Madre
PlacentariasPlacentarias
FetoFeto
Células MadreCélulas Madre
AdultasAdultas
AdultoAdulto
EdadEdadEdadEdad
8. Tipo de
celula madre Descripción Ejemplos
Toti
potente
Cada celula puede
desarrollar un
nuevo individuo
Celulas
procedentes
de embriones
de 1 a 3 días
Pluri
potente
Celulas pueden
diferenciarse en
uno de las de 200
tipos de celulas
Algunas
células del
blastocysto (5
a 14 días)
Multi
potente
Celulas
diferenciadas que
pueden formar
células de otros
tejidos
Tejidos
fetales, cordón
umbilical y
celulas madre
adulto
12. Muscle regeneration by bone marrow-derived myogenic
progenitors.
Ferrari G, Cusella-De Angelis G, Coletta M, et al.
Science 1998;279:1528-30
Hematopoietic cells differentiate into both microglia and
macroglia in the brains of adult mice.
Eglitis MA, Mezey E.
Proc Natl Acad Sci U S A 1997;94:4080-5
Bone marrow as a potential source of hepatic oval cells.
Petersen BE, Bowen WC, Patrene KD, et al.
Science 1999;284:1168-70
Diferenciación a microglía y macroglía
Diferenciación a músculo esquelético
Diferenciación a células ovales (hepáticas)
JCA - Enero del 2006JCA - Enero del 2006
13. Purified hematopoietic stem cells can differentiate into
hepatocytes in vivo.
Lagasse E, Connors H, Al-Dhalimy M, et al.
Nat Med 2000;6:1229-34.
Turning blood into brain: cells bearing neuronal antigens
generated in vivo from bone marrow.
Mezey E, Chandross KJ, Harta G, Maki RA, McKercher SR.
Science 2000;290:1779-82
Bone marrow cells regenerate infarcted myocardium.
Orlic D, Kajstura J, Chimenti S, et al.
Nature 2001;410:701-5
Diferenciación a neuronas
Diferenciación a hepatocitos
Diferenciación a miocardio
JCA - Enero de 2006JCA - Enero de 2006
20. CM más utilizadas en Terapia Celular:
CM de médula ósea
JCA - Enero de 2006JCA - Enero de 2006
21. Células Madre de MO
Por qué las más utilizadas?:
•Fáciles de obtener
•CM muy proliferativas
•Diversidad de CM
JCA - Enero del 2006JCA - Enero del 2006
22. Células Madre de MO
Diversidad celular:
• Multiples poblaciones de CM y progenitores:
•CM hematopoyéticas: CD34 + / CD45 +
CD34 + / CD38 -
CD133 +
•Células progenitoras endoteliales
•CM mesenquimales
•MAPCs
•Hemangioblastos ? JCA - Enero del 2006JCA - Enero del 2006
23. Obtención de Células MadreObtención de Células Madre
HematopoyeticasHematopoyeticas
Punción de Cresta iliaca
Aspirado de M.O
Llenado de Bolsa M.O
24. Células Madre de MO
Glóbulos
rojos
Plasma
Mononucleares
SC CD34 (+)
SC CD133 (+)
SC mesenquimales
Hemangioblatos ?
MAPCs
CPE
Separación:
JCA - Enero de 2006JCA - Enero de 2006
41. Mayor rendimiento que la Medula Ósea 1:100
No requiere estimulación
Bajo costo
Fácil de obtener
Celulas Madre Mesenquimales
de la grasa (lipoaspirado)
42. Extracción de Celulas Madre
(lipoaspirado)
Realizado por el cirujano
plástico
Proceso con anestesia local
Minima incisión ( 1 cm.)
Introducción de una cánula
perforada
Disrupción del tejido por
movimientos mecánicos
43. Procesamiento de la grasa
(lipoaspirado)
Lavado con PBS
Agitación y centrifugación
Eliminación de Células
hematícas, solución salina y
anestésico local
Obtención de la “fracción
vasculo estromal” (SVF)
44. Inactivación de la enzima con medio
de cultivo
Centrifugación: Precipitado de alta
densidad proveniente de las células
del lipoaspirado
Digestión de la matriz extracelular
con colagenasa 0.075%
Condiciones : 30 min a 37 ·C
Procesamiento de la grasa
(lipoaspirado)
46. Ensayos clínicos con Terapia Celular
IAM
Insuficiencia
hepática aguda
Enfermedad de
injerto contra el
huésped
Incontinencia
urinaria y fecall
Reparación corneal
Arteriopatias
Ulceras de decúbito
Enfermedad
inflamatoria
intestinal
Lesión medular
Reparación de
defectos óseos
Fístulas bronquiales
Fístulas digestivas
Pie diabético
47. Trasplante CM Hematopoyéticas
XY/XX
Donantes
XY
ReceptorXX
Trasplante Autólogo
Trasplante Alogénico
Donante/Receptor
Enf. Malignas:
• Leucemias
• Mielodisplasias
• Mieloma
• Linfoma
• Tumores sólidos
Enf. Benignas:
• Anemia aplásica
• Anemia Fanconi
• Talasemia
• ICS
JCA - Enero de 2006JCA - Enero de 2006
48. Trasplante CM Hematopoyéticas
Objetivo del Transplante
Repoblación de tejido hematopoyetico
Regeneracion de otros tejidos en
enfermedades degenerativas metabolicas o
autoinmunes
JCA - Enero de 2006JCA - Enero de 2006
51. Vías de Implante de las Células Madre
autólogas
Vía intracoronaria
Vía intramiocárdica y
subendocárdica
Vía endovenosa
JCA - Enero del 2006JCA - Enero del 2006
52. MEDICINA REGENERATIVA EN BASE A CÉLULAS
TRONCALES
(Terapia Celular)
Extracción de céluas
troncales de la médula
ósea
Inyección en la lesión del
músculo cardíaco
(infarto)
Reparación
de la lesión
53. Terapia Celular para Diabetes Mellitus
Factibilidad del implante de
células madre autólogas por
técnica endovascular en un
paciente con diabetes
mellitus
Fernández-Viña, et al.
ISCT 2005
JCA - Enero del 2006JCA - Enero del 2006
57. Aspecto luego de
siete semanas del
trasplante con
Células Madre
donde se observa
un cambio muy
favorable en el
Quince semanas
postransplante
de Células
Madre, se
observa una
61. Terapia Celular para Extremidades Isquémicas
Angiogenesis terapéutica
por trasplante autólogo de
células de MO en pacientes
con isquemia de miembros
inferiores
Taiteshi-Yuyama, et al.
Lancet 2002
JCA - Enero del 2006JCA - Enero del 2006
66. Los retos
Expansión celular “ Cultivo Celular”
Células con calidad clínica
¿Criópreservación?
¿Autólogas?
¿Alogénicas?
67. Objetivos Principales de los
Ensayos Clínicos
FASE I : Estimación inicial de seguridad y
tolerabilidad
FASE II : Determinación de eficacia en la indicación
propuesta
FASE III: Demostrar/confirmar eficacia en la
indicación propuesta
FASE IV: Completar el conocimiento de la relación
beneficio-riesgo
– Identificar reacciones adversas de baja frecuencia
– Determinar la eficiencia del tratamiento
73. Bibliografía
Choukroun J, Diss A, Simonpieri A, Girard MO, Schoeffler C, Dohan SL, Dohan AJ,
Mouhyi J, Dohan DM (2006) Platelet rich fibrin (PRF): a second generation platelet
concentrate: Part I: technological concepts and evolution. Oral Surg Oral Med Oral Pathol
Oral Radiol Endod 101:E37–E44
Wiltfang J, Terheyden H, Gassling V, Acyl A (2005) Platelet rich plasma (PRP) vs. platelet
rich fibrin (PRF): comparison of growth factor content and osteoblast proliferation and
differentiation in the cell culture. In: Report of the 2nd International Symposium on growth
factors (SyFac 2005). Implantodontie 14:121 (abstract)
Guerrerosantos J (2008) Evolution of technique: face and neck lifting and fat injections.
Clin Plast Surg 35(4):663–676, viii
Alio JL, Abad M, Artola A. Use of autologous platelet rich plasma in the treatment of
dormant corneal ulcers. Opthamology 1:12-13, 2007