factores que influyen sobre la actividad enzimatica

1. PRACTICA No.7: FACTORES QUE
INFLUYEN SOBRE LA ACTIIVIDAD
ENZIMATICA

2. INTRODUCCION
 Las enzimas son proteínas que catalizan todas
las reacciones bioquímicas en el metabolismo
de los seres vivos
 contiene uno o más sitios activos, donde se llevan
a cabo las interacciones con los sustratos.
Nota: Un catalizador es un agente químico que acelera
una reacción
-El metabolismo se divide en: catabolismo y anabolismo

3. La sacarasa
 En el metabolismo de las levaduras la
sacarosa se convierte en glucosa y
fructosa. Esta transformación ocurre por
medio de la enzima sacarasa.
 Como la sacarosa no es un azúcar
reductor, podemos detectar la actividad
de la sacarasa por transformación de
azúcares reductores.

4. Funciones de las enzimas
 Catálisis: ruptura de una molécula grande
para aprovechar las unidades monomericas
(𝑠𝑎𝑐𝑎𝑟𝑜𝑠𝑎 → 𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 + 𝑓𝑟𝑢𝑐𝑡𝑜𝑠𝑎)

5. Funciones de las enzimas
 Anabolismo: las reacciones químicas que
combinan sustancias simples para formar
moléculas más complejas.
 𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 + 𝑓𝑟𝑢𝑐𝑡𝑜𝑠𝑎 → 𝑠𝑎𝑐𝑎𝑟𝑎𝑠𝑎)

6. características de la actividad
enzimática
 Las enzimas no permiten la formación de
productos secundarios
 La actividad de las enzimas se puede
regular para ajustarla a las necesidades
del metabolismo celular.
 La velocidad del metabolismo celular es
determinada por las enzimas.

7. Factores que influyen sobre la
actividad enzimática
 Concentración del sustrato
 pH
 Temperatura
 Inhibidores: son sustancias químicas que
no permiten el acoplamiento del sustrato
con el sitio activo de la enzima

8. Características de la sacarasa
 -Rompe el enlace β-glicosídico de la
sacarosa o de compuestos muy similares
 La sacarasa actúa sobre su sustrato
natural que es la sacarosa

9. OBJETIVOS
 DETECTAR LOS PRODUCTOS DE LA HIDROLISIS DE
LA SACAROSA, PARA DEMOSTRAR LA ACTIVIDAD
ENZIMATICA FUERA DEL ORGANISMO.
 RELACIONAR LA CANTIDAD DE GLUCOSA CON EL
TIEMPO DE REACCION ENZIMA- SUSTRATO PARA
DEMOSTAR QUE LA CATIDAD DE PRODUCTOS
DEPENDE DEL TIEMPO TRANSCURRIDO.
 DEMOSTRAR LA PRODUCCION DE LA AMILASA EN
LAS SEMILLAS DE GERMINACION .

10. PROBLEMA BIOLOGICO
 AFERCTARA LA CONCENTRACION DEL
SUSTRATO Y LA TEMPERATURA LA
ACTIVIDAD
ENZIMATICA?

11. Hipótesis:
 Al saber que las sacarasa es la enzima
especifica de la sacarosa se tratara de
evidenciar que esta puede degradar al
romper el enlace β-gucosidico en sus
productos finales glucosa y fructosa por
ello mismo se demostrara la actividad
enzimática.

12. DESARROLLO EXPERIMENTAL
1) extracción de una enzima
a)
• Suspender 0.5g de levadura seca
• En acetona fría
b)
• Dejar reposar la suspensión de levadura en acetona
• por 20-30 min
c)
• Decantar acetona secar levadura en papel ab.
• De 15 a 20 min
d)
• Suspenda el polvo acetonico de levadura
• En 5ml de sol. Amortiguadora
• Agitar por 15 minutos
• Recuperar el sobrenadante (contiene la enzima)

13. 2) Observación de la acción
catalítica del extracto
enzimático libre de células
a)
• Cortar 8 tiras de glucocinta de 1.5cm de largo
• Hacer 2 filas A y B
b)
• Vidrio de reloj A poner 0.5ml de H2O dest.
• Vidrio de reloj B 0.5ml de sacarosa
c)
• Agregar 0.5ml e sol. De enzima a los dos vidrios de reloj
• Mezclar inmediatamente con un palito para cada vidrio
c)
• Poner gotas a las tiras correspondientes A y B
• Comparar colores y hacer tabla

14. 3) Reacción de Benedict para
identificar azucares
reductores
a)
• En tubo de ensayo 2ml de sol. De glucosa + 10 gotas del reactivo
benedict
a)
• calentar en lampara de alcohol o baño maria por 5 min
• Anotar cambio de color y repetir con sol. De sacarosa.
b)
• En 2 tubos de ensaye poner 2ml de sol. De sacarosa
• Al 1°, 2ml de extracto enzimatico de levadura
• Al 2° H2O dest. Y esperar por 15 min
• Agregar a ambos tubos 10 gotas de reactivo benedict
• Calentar por 5 min, anotar cambios de color

15. 4)Acción enzimática de
germinados vegetales
1.-
•Machacar en mortero 5g de diferentes germinados
•Con 10ml de H2O dest.
2.-
•En 2 cajas petri con gelosa-almidón
•Dividir en 4 sectores la base
3.-
•Hacer en cada sector una perforación con un tubo de ensaye
de 10mm de diámetro y poner 5 gotas del mancerado
3.-
•Se perforara el centro de la caja + 5 gotas de saliva
4.-
•caja 1 se dejara en reposo a tem. Ambiente por 24 hrs
• caja 2 en el refrigerador

16. 5.-
•Pasando las 24hrs se añadirá lugol hasta
cubrir toda la superficie
6.-
•Si aparecen halos blancos alrededor se
medirán los diametros
7.-
•Dejar 2 cajas petri a temp. Ambiente por 1h
•Para verificar que los halos se mantengan
del mismo diámetro