SUSCEPTIBILIDAD A LA ENFERMEDAD PERIODONTAL EN PACIENTES CON EL POLIMORFISMO DEL GEN DE LA IL-1

1. Universidad El Bosque
Facultad de Odontología
Postgrados
Cátedra: Biología Oral
Docente: Dr. Juan Carlos Munevar
Gen de la IL-1α
PRESENTADO POR:
Jean Fernando Duran
Fernando Falcon
Ingrid Katherine Quintero
Grace Obando
Andrea Cortés
Jorge Gruber

2. SUSCEPTIBILIDAD A LA
ENFERMEDAD PERIONDONTAL EN
PACIENTES CON EL POLIMORFISMO
DEL GEN DE LA IL-1

3. TABLA DE CONTENIDO
• INTRODUCCION • MARCO TEORICO
• PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA – DEFINICION ENFERMEDAD
PERIODONTAL
• JUSTIFICACIÓN
– PERIODONTITIS CRONICA
• OBJETIVOS
– PERIODONTITIS AGRESIVA
– OBJETIVO GENERAL – DEFINICION DE IL-1
– OBJETIVO ESPECÍFICO – LOCALIZACIÓN DE IL-1
• HIPOTEISIS – FAMILIAS DE LA IL-1
– Nula – DEFINICION DE POLIMORFISMOS
– Alterna – TIPOS DE POLIMORFISMOS
– PRESENCIA DEL POLIMORFISMO
EN LA POBLACION
LATINOAMERCIANA
• METODOLOGIA
• MATERIALES Y MÉTODOS

4. INTRODUCCIÓN
La enfermedad periodontal es un proceso
inflamatorio de carácter crónico, desencadenado
por una serie de bacterias periodonto-patógenas
específicas. En este proceso inflamatorio, la
interleuquina 1 (IL-1), junto a otros productos
bioquímicos, son los compuestos encargados de
iniciar la destrucción en los tejidos de inserción
del diente. Por tal motivo, la síntesis de IL-1n está
notablemente relacionada con la severidad y
progresión de la enfermedad periodontal.

5. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
¿En qué porcentaje aumenta el riesgo de
desarrollar enfermedad Periodontal en
pacientes que presentan el polimorfismo del
gen de la IL- 1?

6. JUSTIFICACIÓN
• Al conocer cuánto aumenta el porcentaje de riesgo
en pacientes que presentan el polimorfismo del
gen de la IL-1 podremos determinar que tan
importante es esta condición para la presencia de
la enfermedad Periodontal.
• Riesgo de enfermedad periodontal aumente
– implementar protocolos de identificación del
polimorfismo genético
– concientización
– tratamiento de los pacientes que lo presenten

7. OBJETIVO GENERAL
Determinar el porcentaje de presentar
enfermedad periodontal en pacientes que
presenten polimorfismo del gen de la IL-1.

8. OBJETIVOS ESPECÍFICOS
• Conocer la respuesta del huésped frente a la
progresión de la periodontitis en pacientes con
alteración en el Gen de la IL-1.
• Comprender los cambios moleculares que ocurren
en la respuesta inmune del huésped en pacientes
con Polimorfismo Genético de la IL-1.
• Establecer los mecanismos desencadenantes de la
enfermedad periodontal y su asociación con
Polimorfismo Genético de la IL-1.

9. HIPOTESIS NULA
La susceptibilidad de enfermedad
Periodontal en pacientes que tienen un alto
porcentaje de polimorfismo de IL-1 es igual a la
susceptibilidad a los pacientes que no tienen
polimorfismo de IL-1.

10. HIPOTESIS ALTERNA
La susceptibilidad de enfermedad
Periodontal en pacientes que tienen un
alto porcentaje de polimorfismo de IL-1 no
es igual a la susceptibilidad a los pacientes
que no tiene el polimorfismo de la IL-1.

11. INTERLEUQUINA-1 (IL-1)
Potente citoquina inflamatoria e
inmunorreguladora
Su producción y liberación prolongada, pueden
aumentar el riesgo de daños patológicos,
como la iniciación y progresión de la
destrucción del tejido conectivo
Broch JA, et al,2001. Krumar, et al, 2000. Smith, et al, 2000; Vélez-Castrillón S, et al, 2004

12. INTERLEUQUINA-1 (IL-1)
disponibilidad en el
IL-1 regulada sitio
Producción patógenos
receptores
células monocitos
epiteliales macrófagos Prophyromonas gingivales,
Tannerella forsythya
Treponema denticola
indicativo desarrollar enfermedad
niveles altos de IL-1β periodontal.
Vélez-Castrillón S, et al, 2004; Broch JA, et al,2001. Taylor J, et al, 2004).
Goutoudi, P., E. Diza, and M. Arvanitidou. 2004. Effect of periodontal therapy on crevicular fluid interleukin-1beta and interleukin-10 levels
inchronic periodontitis. J. Dent. 32:511–520).

13. ACCIÓN BIOLÓGICA
Las acciones biológicas de la IL-1 se basan en la inducción de
genes que codifican para la ciclooxigenasa tipo 2 (COX2), la
fosfolipasa A tipo 2 (PLAT2) y la óxido nítrico sintetiza
inducible (iNOS).
Consecuencias Respuesta
biológicas inflamatoria
vía de
IL-1 une tipo I (IL-1RI) señalización Fosforilación
intracelular
IRAKs

14. INTERLEUQUINA-1 (IL-1)
POLIMORFISMO
•Existencia de dos o más posibles fenotipos en una determinada población
•poli= muchas, morfismo= forma, composición o estructura
•Diferentes fenotipos están determinados por los alelos de los genes.
•Existen diferentes tipos de polimorfismos:
Polimorfismo de nucleótido único (PNU)
Polimorfismo simple de número variable tándem (NVRT)
Polimorfismo de repetición en transposón
Goutoudi, P., E. Diza, and M. Arvanitidou. 2004. Effect of periodontal therapy on crevicular fluid
interleukin-1beta and interleukin-10 levels inchronic periodontitis. J. Dent. 32:511–520).

15. ENFERMEDAD PERIODONTAL
Proceso inflamatorio de crónico, desencadenado por
bacterias periodonto-patógenas específicas
La interleuquina 1 (IL-1), junto a otros productos
bioquímicos, son los compuestos encargados de iniciar la
destrucción en los tejidos de inserción del diente
la síntesis de IL-1 está notablemente relacionada con la
severidad y progresión de la enfermedad periodontal
Valderrama G, et al, 2005

16. ASPECTOS METODOLÓGICOS
CRITERIOS DE INCLUSION CRITERIOS DE EXCLUSION
Pacientes con enfermedad Sin enfermedad sistémica
periodontal Pacientes con enfermedad
Edad entre 15 y 25 años periodontal de etiología conocida
Pacientes femeninos y Tabaquismo
masculinos Ingesta de alcohol
Tipo de estudio
Estudio transversal
Población de Referencia
La muestra será tomada en 50 pacientes que asisten a la Clínica
odontológica de la Universidad El Bosque diagnosticados con Periodontitis
agresiva.

17. METODOLOGÍA
Consideraciones éticas
- La legislación de la Constitución Política de Colombia de 1991
- Normas científicas, técnicas y administrativas para la investigación
en salud
- Estipulada en la Resolución N° 8430 del 4 de Octubre de 1993
Análisis estadístico
- Se realizara un análisis descriptivo (tablas de frecuencia y promedios)
según la naturaleza de la variable
- La Prueba estadística Chi-Cuadrado (valor-p < 0.05)
- Utilizando el paquete estadístico SPSS® 12.

18. METODOLOGÍA
Impacto ambiental
- Procedimientos clínicos; toma de muestra de sangre periférica
- Procedimiento de laboratorio de biología oral
Este proyecto tiene un bajo impacto ambiental ya que se manejaran las
precauciones y protocolos establecidos para cada procedimiento
Importancia Social
Alto impacto social → orientar políticas publicas → detección del
polimorfismo
- tomar medidas preventivas con los pacientes de alto riesgo
- implementar un protocolo de tratamiento especial para los pacientes
Contribución Educativa
- Contribución a la educación de los estudiantes de postgrado de
odontología
- Publicación del estudio
- Presentación en congresos

19. TOMA DE MUESTRA
Trasportadas en una nevera
dispuesta para esto a una
temperatura de 2-8°C hacia
UIBO.
Procesadas antes de 12 horas
y serán almacenadas a una
5 ml de sangre temperatura de -20°C.
(1 tubo de ensayo)

20. QIAamp® DNA Blood Mini Kit
Simplifica el aislamiento de
ADN de la sangre y los fluidos
corporales relacionados con el
giro rápido y columna de vacío
o procedimientos.

21. PCR
• Después de extraído el ADN de las células
(muestra de sangre) por medio la prueba
QIAamp® se realizara PRC con el Kit PCR
SuperMix de la siguiente manera:
– Llevar el ADN extraído a un tubo PCR.
– -Se adiciona el Primer #1 5_-
CTCAGGTGTCCTCGAAGAAATCA
– AA-3 al tubo de PCR
– Adiciona el Primer #2 5_-
GCTTTTTTGCTGTGAGTCCCG-3_ al tubo de PCR
– Agregar los nucleótidos al tubo de PCR (A, G, C, T)
– Se agrega la ADN polimerasa Termo estable al
tubo de PCR
– Se agrega la enzima de restricción TaqI.
– Buffer
– Llevar el tubo de PCR al termociclador Bio-Rad

22. PCR
• Condiciones:
– Desnaturalización inicial de 95°C
por 5 min, seguida de 35 ciclos
de amplificación
• Desnaturalización de 94°C por 30 s
• Hibridación de 60ºC por 27 s
• Extensión de 72°C por 90 s)
• Extensión final de 72°C por 30 min
• Para la digestión de 10 μl del
producto amplificado
– 10 U de la enzima de restricción
Taq-I, 37°C/3 horas

23. CONSENTIMIENTO INFORMADO

24. FORMATO DE RECOLECCION DE
INFORMACIÓN

25. BASE DE DATOS

26. CRONOGRAMA

27. PRESUPUESTO
VALOR VALOR
MATERIAL CANT. PRESENTACIÓN
UNITARIO TOTAL
Fotocopias de formato de recolección de datos 50 100 5000
Fotocopias de formato de Consentimiento informado 100 100 10.000
PAPELERIA Etiquetas de Identificación falta 50 Paquete 100 10.000 10.000
Esferos 5 Unidad 1000 5000
Marcador 2 Unidad 3000 6000
Guantes desechables 2 Caja de 50 15.000 30.000
Tapabocas 2 Caja de 50 10.000 10.000
agujas con sistema de vacío número 21 1 caja de 100 15.000 15.000
Adaptador para extracción-vacío tipo Vacutainer® plasma 4.5ml 50 caja 100 51.600 51.600
Tubos de PCR 1 caja caja 1000 160.000 160.000
Tubos de vacío para analítica buscar 50 unidad 1500 75.000
Gasas estériles 50 Paquete 550 27.500
Algodón 2 Paquete 8.000 16.000
CLINICA
Alcohol de 70º 1 Frasco 3.500 3.500
Curitas falta 1 Caja de 100 4.350 4.350
Agujas IV 1 Caja de 100 11.000 11.000
Ligadura 50 Unidad 300 15.000
Bolsas rojas de desechos 1 Paquete 6 u 2000 2000
Guardian 2.5 litros 1 Unidad 10.000 10.000
Toallas desechables falta 1 Paquete 9.654 9.654
Jabon anticeptico Bacterion 300 ml 1 Frasco 7.284 7.284

28. PRESUPUESTO
VALOR VALOR
MATERIAL CANT. PRESENTACIÓN
UNITARIO TOTAL
Kits QIAamp® kit de 50 pruebas 1 1 caja de 50 200.000 200.000
Enzima de Restriccion TaqI Invitrogen 1 1000 u 234.500 234.500
Kit PCR SuperMix Invitrogen 1 Caja de 100 300.000 300.000
Tapabocas 1 Caja de 50 10.000 10.000
LABORATORIO Guantes desechables 2 Caja de 50 11.500 11.500
Jabon anticeptico Bacterion 300 ml 1 Frasco 7.284 7.284
Toallas desechables falta 2 Paquete 9.654 9.654
Bolsas verdes de desechos 10 Paquete 6 u 1.700 10.200
Bolsas rojas de desechos 10 Paquete 6 u 1.700 10.200
Investigador principal 1 10 horas 2.000.000 2.000.000
Co investigadores 5 10 horas 500.000 500.000
RECURSO HUMANO
Bacteriologa 1 10 horas 1.500.000 1.500.000
Estadístico 1 6 horas 500.000 500.000
TOTAL 5’777.226

29. RESULTADOS ESPERADOS
Tipos de productos Cantidad
Nuevos conocimientos
Articulo completo en revista indexada 1
Formación de recursos Humanos
Estudiantes Posgrado 6
Productos de Divulgación
Nacional Internacional
Revistas indexadas 1
Congresos, seminarios, Foros 1 1