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María del Pilar Castañeda Serrano
Diego Braña Varela
Cecilia Rosario Cortés
Wendy Martínez Valdés
Facultad de Medicina y Zootecnia. Universidad Nacional Autónoma de México.
Centro Nacional de Investigación Disciplinaria en Fisiología y Mejoramiento Animal,
Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias
Ajuchitlán, Colón, Querétaro Octubre de 2013
Libro técnico No. 9 ISBN: 978-607-37-0096-2
Calidad Microbiológica
de la Carne de Pollo
DIRECTORIO INSTITUCIONAL
SECRETARIA DE AGRICULTURA, GANADERÍA, DESARROLLO
RURAL, PESCA Y ALIMENTACIÓN
LIC. ENRIQUE MARTÍNEZ Y MARTÍNEZ
Secretario
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AGRÍCOLAS Y PECUARIAS
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FISIOLOGÍA Y MEJORAMIENTO ANIMAL
DR. CÉSAR AUGUSTO MEJÍA GUADARRAMA
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María del Pilar Castañeda Serrano
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Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad
Nacional Autónoma de México.
Centro Nacional de Investigación Disciplinaria en Fisiología y
Mejoramiento Animal. Instituto Nacional de Investigaciones
Forestales, Agrícolas y Pecuarias.
Editor Dr. Diego Braña Varela, coordinador del Macroproyecto
“Indicadores de calidad en la cadena de producción de carne
fresca en México” con registro y fondos de SAGARPA-
CONACYT No. 109127.
Ajuchitlán, Colón, Querétaro Octubre de 2013
Libro Técnico No. 09 ISBN: 978-607-37-0096-2
Cecilia Rosario Cortes´
´Wendy Martínez Valdez
Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas
y Pecuarias
Progreso No. 5, Barrio de Santa Catarina
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Editor Dr. Diego Braña Varela
Primera Edición, Octubre 2013
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medio, ya sea electrónico, mecánico, fotocopia, por registro u
otro método, sin el permiso previo y por escrito de la Institución.
1. Introducción .............................................................................. 1
2. Principales patógenos en la carne de pollo............................... 3
a. Salmonella spp............................................................... 4
b. Campylobacter jejuni. .................................................. 11
c. Listeria monocytogenes ............................................... 14
d. Escherichia coli ............................................................ 15
3. Criterios microbiológicos ......................................................... 16
4. Métodos de detección de patógenos ...................................... 18
a. Cultivo Microbiológico .................................................. 18
b. Inmunológicos.............................................................. 20
c. Técnicas de biología molecular: PCR........................... 21
d. Métodos de muestreo .................................................. 22
5. Efecto del procesamiento sobre la microbiota de las canales. 25
a. Recepción del pollo de engorda................................... 27
b. Escaldado .................................................................... 30
c. Desplumado................................................................. 33
d. Eviscerado ................................................................... 34
e. Lavado ......................................................................... 35
f. Enfriado de la canal ..................................................... 36
g. Corte y deshuese......................................................... 38
h. Empacado.................................................................... 40
6. Descontaminación de canales ................................................ 44
7. Métodos de conservación ....................................................... 48
a. Refrigeración................................................................ 48
b. Congelación ................................................................. 49
c. Cadena de frío ............................................................. 50
d. Importancia de la cadena de frío.................................. 51
8. Manejo adecuado de la carne de pollo ................................... 52
9. Vida de anaquel ...................................................................... 54
10. Establecimientos Tipo Inspección Federal (TIF) .................. 62
a. Calidad microbiológica en plantas TIF ......................... 63
b. Comercialización de la carne de pollo en México......... 67
11. Referencias Bibliográficas..................................................... 74
Glosario…………………………………………………………81
La demanda mundial de carne de pollo se ha
incrementado en los últimos años debido a su precio
comparativamente bajo con otras carnes y ser, además, una
excelente fuente de proteína (FAO 2008). La producción
estimada mundial de carne de ave en 2012 fue de 104.9
millones de toneladas, con un pronóstico para 2013 de 106.8
millones de toneladas, lo que implica un aumento del 1.8% con
respecto del 2012 al 2013, siendo la carne que mayor
crecimiento muestra en cuanto a producción mundial (FAO
2013).
El consumo per-cápita de carne de pollo fue de 25.8 kg en
2012 (Unión Nacional de Avicultores, 2013), aunque los hábitos
de consumo en las diferentes regiones del país dependen de
factores sociales, económicos y culturales. En general la carne
de pollo se consume en sus diferentes cortes: pechuga, pierna
y muslo, retazo y surtida. El centro del país demanda
aproximadamente el 70% de la producción nacional.
En México aproximadamente:
 52’247,420 toneladas de la producción nacional de pollo
se procesa en rastros Tipo Inspección Federal (TIF),
 119,070 toneladas en rastros municipales
 5’364,100 toneladas en rastros privados.
1
La importancia de estos datos, es reconocer el impacto
del manejo del pollo en la incidencia de Enfermedades
Transmitidas por Alimentos (ETAs). Es decir las enfermedades
que se transmiten por consumo de alimentos y en este caso de
la carne de pollo en específico. Un ámbito prioritario de la
cadena de producción avícola es la mejora en la manera de
procesar y manejar los alimentos para evitar que los
consumidores enfermen por consumo de estos. Para lograr
este objetivo es necesario desarrollar e implementar programas
de reducción de patógenos como el sistema Tipo Inspección
Federal (TIF) y otro programa llamado Análisis de peligros y
puntos críticos de control (HACCP), por sus siglas en inglés.
Estos programas tienen como objetivo procesar los alimentos
bajo las mejores condiciones (sanitarias) para evitar que
representen un riesgo para los consumidores, en otras
palabras tienen como meta el procesamiento de alimentos
inocuos.
Por lo tanto este manual tiene el objetivo de explicar
algunos aspectos de la calidad microbiológica de la carne de
pollo, esto significa brindar información que sea útil para los
consumidores de pollo, acercarlos con algunos aspectos
relacionados con el significado de la presencia de bacterias en
las canales de pollo. Sin olvidar que el tipo de bacterias que
podemos encontrar en una canal deben ser consideradas en
dos grupos; las que causan descomposición y las que causan
enfermedad en los consumidores. Las bacterias que causan
descomposición en la carne de pollo son aquellas relacionadas
2
con la vida útil o vida de anaquel, lo que significa el periodo de
tiempo en el cual el alimento es apto de ser consumido.
Mientras que las bacterias presentes en un producto cárnico
que causan enfermedad gastrointestinal o ETA (por sus siglas:
Enfermedad de Transmisión Alimentaria) en las personas que
lo consumen, se les conoce como bacterias patógenas.
Los tipos de microorganismos que pueden causar
enfermedad en los consumidores se dividen en: virus,
bacterias, hongos y parásitos, de los cuales las bacterias son
responsables de más del 90% de los casos confirmados de
ETA´s. Las 5 bacterias asociadas a ETA´s, más frecuentes son:
Campylobacter spp., Salmonella (no tifoidea), Escherichia coli
O157: H7, Escherichia coli y Listeria monocytogenes (Eberle,
2012).
Las poblaciones bacterianas en las canales de pollo,
están determinadas por el tipo de poblaciones de bacterias en
el tracto gastrointestinal de las aves en la granja, así como de
las bacterias que se agregan cuando se maneja el ave antes
de su matanza y después de ella. Sin embargo en nuestro país
la comercialización es muy diversa y muchas ocasiones por
idiosincrasia la carne no es manejada bajo buenas prácticas de
higiene lo que causa que la carne de ave sea un alimento
frecuentemente implicado en enfermedad gastrointestinal.
3
Los patógenos reportados en productos avícolas son:
Campylobacter spp., Clostridium botulinum, Clostridium
perfringens, Erysipelothrix rhusiopathiae, Escherichia coli
O157: H7, Listeria monocytogenes, Mycoplasma gallisepticum,
Mycoplasma synoviae, Pasteurella multocida, Riemerella
anatipestifer, Salmonella spp., Staphylococcus aureus, Vibrio
spp. y Yersinia enterocolitica. Sin embargo recientes estudios
demuestran que en caso de carne de ave, Salmonella spp. y
Campylobacter spp. son las causas más comunes de ETAs
vinculadas, mientras que L. monocytogenes es un problema
grave asociado a productos procesados de carne de ave
(Keklik, 2010). A continunuación se describen estos patógenos:
a. Salmonella spp.
Salmonella ha sido establecida como una de las causas
más importantes de enfermedad de transmisión alimentaria en
el mundo (Adams y Moss, 2008). La enfermedad causada por
esta bacteria se conoce como salmonelosis, la cual es una
infección gastrointestinal causada por varios serotipos de
Salmonella (se conoce con este nombre a las variedades de un
mismo agente, éstas son determinadas por pruebas de
laboratorio). Salmonella es un bacilo gram-negativo, móvil, no
formador de esporas perteneciente a la familia
Enterobacteriaceae. Su crecimiento ha sido reportado desde
5°C hasta 47°C con un óptimo de 37°C, aunque Samonella es
sensible al calor y es fácilmente destruida a temperaturas de
pasteurización (Adams y Moss, 2008).
4
Entre ellas se puede encontrar Salmonella entérica
serovar. Typhi y Paratyphi A,B, y C, responsables de la fiebre
tifoidea. Pero también podemos encontrar la salmonelosis no-
tifoidea causada por otros serotipos diferentes a S. Typhi y S.
Paratyphi A. Sin embargo reportes científicos han determinado
que los 6 serotipos más frecuentemente aislados de humanos
son: Salmonella Typhimurium (19.2%), Salmonella Enteritidis
(14.1%), Salmonella Newport (9.3%), Salmonella Javiana (5%),
Salmonella Heidelberg (4.9%), y Salmonella Montevideo (2.4%)
(Anderson 2004)
Como se mencionó anteriormente, Salmonella puede
causar dos tipos de enfermedad, que dependen del serotipo, y
se describen a continuación:
Salmonelosis no-tifoideas:
Estas enfermedades son causadas por otros serotipos
diferentes a S. typhi y S. paratyphi A. Los síntomas de
Salmonelosis no-tifoidea son bastante desagradables, sin
embargo esta enfermedad es auto-limitante, es decir tiene un
ciclo que comienza y termina en un tiempo programado, entre
personas sanas con un sistema inmune intacto (aunque puede
causar enfermedad grave aún en personas sanas).
Mortalidad: Menor a 1%, sin embargo S. enteritidis tiene
reportes de hasta 3.6% de mortalidad en brotes en hospitales y
asilos, por lo que la gente anciana es afectada más
severamente.
5
Aparición: 6 a 72 horas después de la exposición.
Dosis infectante: Tan baja como una célula, dependiendo de la
edad y salud del huésped, así como de la cepa por las
diferencias que existen entre miembros del mismo género.
Síntomas: Nausea, vómito, dolores abdominales, diarrea, fiebre
y dolor de cabeza.
Complicaciones: Puede presentarse deshidratación y
desbalance electrolítico como resultado de la diarrea y del
vómito. Esto puede desencadenar la muerte en personas
jóvenes, ancianos y personas inmunocomprometidas si no son
tratadas inmediatamente. Otra presentación grave se puede
presentar cuando Salmonella puede escapar del tracto
gastrointestinal hacia el cuerpo y puede causar septicemia, por
tanto ésta puede migrar a órganos internos y articulaciones.
Ruta de entrada: oral (ingestión de alimento contaminado,
partículas fecales o agua contaminada).
Vía: Penetración en el organismo y paso de Salmonella del
tracto gastrointestinal al epitelio del intestino delgado donde se
presenta inflamación (Lampel 2012).
Fiebre Tifoidea
Enfermedad severa la cual posee un alto índice de
mortalidad, causada por serotipos de S. typhi y S. paratyphi A,
los cuales son encontrados solamente en humanos.
6
Mortalidad: En pacientes no tratados, tan alta como 10%
Aparición: Generalmente de 1 a 3 semanas, pero puede llegar
a ser tan larga como 2 meses después de la exposición.
Dosis infectante: Menor a 1000 células
Síntomas: Fiebre elevada de 39.4 a 40°C. letargia, síntomas
gastrointestinales que incluyen dolor abdominal, diarrea,
constipación, dolor de cabeza, pérdida del apetito.
Duración: Generalmente 2 a 4 semanas
Complicaciones: Septicemia con colonización de otros tejidos y
órganos, puede presentarse artritis séptica, en la cual la
infección afecta directamente articulaciones y puede amenazar
la vida. Puede ocurrir también infección crónica de la vesícula
biliar, lo cual puede causar que la persona infectada se
convierta en portadora.
Ruta de entrada: Oral (ingestión de alimento contaminado,
partículas fecales o agua contaminada) (Mossel, 2003).
Vía: Penetración y paso de los microorganismos de Salmonella
del lumen del tracto gastrointestinal hacia el epitelio del
intestino delgado y de ahí al torrente sanguíneo, por lo tanto
puede causar una septicemia, lo que puede producir que el
microorganismo pase a otros sitios en el organismo, donde
ocurre la inflamación (Lampel 2012).
7
Salmonella y la avicultura
En la avicultura el principal riesgo de Salmonella es
cuando existe un estado sanitario deficiente en los
alojamientos, y se descuidan la salud de los animales, la
calidad del alimento, agua y material de cama, así como la
presencia de fauna nociva y la entrada de vehículos
contaminados. Cuando se introduce Salmonella a las granjas
se propaga rápidamente a través de polvo, heces que arrastran
los trabajadores dentro de la granja y contaminación del agua.
Este microorganismo se establece rápidamente en las
superficies de la caseta y se mantiene gracias a la formación
de biocapas (biofilms). Marin (2009) evaluó el desarrollo de
biofilms a lo largo de la crianza de pollo de engorda mediante
un método de fluorescencia para determinar la presencia de
Salmonella. Se tomaron muestras de heces, polvo, superficies,
tanque de agua, bebederos, basura y superficies de los
camiones de transporte. El serotipo más frecuentemente
aislado fue Salmonella enteritidis y alrededor 50% de los
serotipos fueron capaces de producir biofilm. Se observó que el
uso de glutaraldehído, formaldehído, y de peroxígeno al 1% en
condiciones de campo son insuficientes para la eliminación de
Salmonella. Se ha observado que Salmonella enteritidis,
Salmonella seftenberg, Salmonella typhimurium, Salmonella
braenderup y Salmonella mikawasima aislados de pollo de
engorda y gallinas de postura tiene la capacidad de formar
biofilms muy resistentes.
8
La alta prevalencia de Salmonella en productos avícolas
ha llevado a varios estudios para reducir la contaminación de
los alimentos. El uso de bacterias ácido lácticas ha tenido éxito
en la reducción de diversos patógenos en carne molida de res
y ganado, incluida la Salmonella.
Para evitar la transmisión deben tomarse medidas en el
manejo de los animales en granja, incluyendo adecuados
sistemas de cría, medidas de protección para agua y alimento,
con lo que se evita su contaminación, y se logra la disposición
higiénica de desperdicios y el mantenimiento de un ambiente
limpio. Asimismo es importante evitar la transferencia de
Salmonella entre los animales, ya que situaciones donde estos
son sometidos a condiciones de estrés y hacinamiento, tales
como el transporte o la espera en andén de las parvadas para
su entrada a la planta de procesamiento, aumentan las
posibilidades de transmisión de la enfermedad. Por lo que
siempre será mejor minimizar estos efectos, al evitar las
situaciones estrés, así como asegurando ambientes limpios
(Adams y Moss, 2008).
Un factor importante por el que se ha mantenido el ciclo
de infección por Salmonella en el alimento para animales ha
sido la práctica de usar sub-productos de animales para
elaborarlo, tales como pastas de carne y hueso. Por lo tanto es
fundamental someter a estos productos a procesos térmicos
para destruir cualquier Salmonella presente.
9
Sin embargo, es importante considerar que pueden
quedar sujetos a contaminación post-proceso, ya sea en la
planta o en la granja, por contacto con material no-procesado,
con aves, o heces de roedores u otra fauna (Adams y Moss,
2008).
Figura 1. Ave tratando de eliminar calor a través del jadeo, favorece la
presentación de estrés y por lo tanto el inicio de problemas de calidad de la
carne, desde el punto de vista bioquímico y microbiológico.
Un factor importante por el que se ha mantenido el ciclo
de infección por Salmonella en el alimento para animales ha
sido la práctica de usar sub-productos de animales para
elaborarlo, tales como pastas de carne y hueso.
10
Por lo tanto es fundamental someter a estos productos a
procesos térmicos para destruir cualquier Salmonella presente.
Sin embargo, es importante considerar que pueden quedar
sujetos a contaminación post-proceso, ya sea en la planta o en
la granja, por contacto con material no-procesado, con aves, o
heces de roedores u otra fauna (Adams y Moss, 2008).
b. Campylobacter jejuni
Campylobacter en una bacteria perteneciente a la familia
Campylobacteraceae. Las dos especies más comunes,
Campylobacter jejuni y Campylobacter coli, representan
aproximadamente el 89% de las campilobacteriosis humana.
Es el patógeno más frecuente de gastroenteritis bacteriana, es
responsable de 400 a 500 millones de casos de infección cada
año en todo el mundo (EFSA, 2010 y CDC, 2011).
Existe una fuerte asociación entre Campylobacter jejuni
y las aves de corral, pues se ha observado que más de 80% de
las parvadas listas para procesar son positivas a este patógeno
(Herman 2003, EFSA, 2010). Además existe evidencia de que
las aves de corral pueden ser la principal fuente de infección
por campilobacteriosis en humanos (Hermans 2012, Line,
2013). Estudios epidemiológicos han demostrado que del 50 al
70% de campilobacteriosis en humanos se debe al consumo de
productos avícolas (Harris 1986, Keener 2004).
La campilobacterosis causa diarrea, dolor abdominal,
fiebre, dolor de cabeza, náuseas y vómitos.
11
Entre los padecimientos más graves causados por este
patógeno se observa un trastorno autoinmune del sistema
nervioso periférico, conocido como síndrome de Guillain-Barré
en el que los individuos experimentan una disminución de la
fuerza muscular en las extremidades y el sistema respiratorio.
La transmisión puede darse por consumo de leche sin
pasteurizar, carne de pollo cruda o poco cocida, agua
contaminada o por alimentos contaminados con heces de
personas o animales infectados (Eberle 2012). La
campilobacteriosis tiende a ser auto limitante, aunque puede
provocar efectos secundarios a largo plazo tales como la artritis
reactiva y contribuir a la patogénesis de las enfermedades
crónicas gastrointestinales (Melero 2013).
Las aves pueden portar este microorganismo en piel,
plumas y en el tracto gastrointestinal principalmente. La
prevalencia de Campylobacter en las parvadas de pollo de
engorda puede llegar al 100% una vez que se introduce en las
explotaciones (Jeffrey 2001). Se ha reportado una prevalencia
de 11,2% en el ciego de pollos, mientras que en piel es de 51%
(Chokboonmongkol 2013). Por otro lado Padungtod y Kaneene
(2005), reportan una prevalencia del 64% en muestras fecales.
Sin embargo, en muchas unidades de producción se
acostumbra el uso de promotores de crecimientos que
consisten en la aplicación de antimicrobianos en pollitos con la
finalidad de disminuir patógenos en el tracto digestivo.
12
Estos datos sugieren que durante el procesamiento se
facilita la contaminación cruzada entre contenido cecal y piel.
Estos efectos están relacionados a los cambios tecnológicos y
prácticas de higiene durante el procesamiento
El principal reservorio, es decir el sitio donde
Campylobacter se establece y se reproduce es el tracto
gastrointestinal de las aves especialmente el ciego y buche.
Durante el procesamiento, cuando se realiza la remoción de
vísceras una vez que la canal fue desplumada y enjuagada, se
presenta la posibilidad de ruptura de estas estructuras por lo
que este microorganismo puede ser transferido a la canal en
donde sobrevive en la ausencia de la microbiota (población
bacteriana que se mantiene en el tracto gastrointestinal)
competidora.
Debido a que durante el procesamiento de las aves el
ambiente no es estéril, muchas bacterias psicrófilas
comúnmente asociadas al deterioro de las canales, pueden
reducir los números de C. jejuni, Aunque P. aeruginosa puede
afectar la supervivencia de C. jejuni, la dinámica microbiana de
la carne es muy compleja y el antagonismo bacteriano es
variable para diferentes productos procesados bajo diversas
situaciones (Davis 2007).
Durante la implantación de programas HACCP, es
fundamental prestar total atención a las medidas de control que
proveen este sistema para asegurar el abastecimiento de carne
de pollo libre de Campylobacter.
13
Arcobacter, otro miembro de la familia
Campylobacteraceae se ha relacionado como fuente de
infección en humanos debido al consumo de productos crudos
de ave o poco cocinados. Se ha aislado de canales de aves y
de equipos de plantas de procesamiento, pero no del contenido
intestinal, fecal y plumas, por lo que la colonización de las aves
con este microorganismo es actualmente contradictorio, sin
embargo, algunos autores han reportado el aislamiento a partir
de muestreos con hisopos cloacales (Kabeya 2003, Atabay
2006). Van Driessche (2007) examinó muestras intestinales y
de piel de pollos de engorda y no encontró a Arcobacter en
ninguna muestra, por lo que sugiere que probablemente no es
habitante normal en la carne de aves y que el agua de proceso
puede ser una fuente potencial de contaminación. La aplicación
de estrictas medidas de bioseguridad en las explotaciones
agrícolas de manera integrada es capaz de reducir la
prevalencia de Campylobacter en las parvadas de pollos de
engorda, sin embargo, la contaminación cruzada durante el
procesamiento podría generar altas prevalencias de
Campylobacter en las canales (Chokboonmongkol 2013).
c. Listeria monocytogenes
La listeriosis es una importante enfermedad causada por
la bacteria llamada Listeria monocytogenes, el cual es un
problema de salud pública debido a las graves consecuencias
como: meningitis o meningoencefalitis, septicemia y aborto
(Melero 2013).
14
La carne de pollo cruda, o mal cocinada, es la principal
fuente de infección en humanos, y se ha observado que la
multiplicación de este microorganismo no se da en carne
empacada bajo atmósferas modificadas (bióxido de carbono)
durante su almacenamiento en refrigeración. Otros reportes
indican su presencia en alimentos listos para consumo.
Van Nierop (2005) examinó muestras de canales de
pollo en punto de venta y encontró 19.2% positivas a Listeria.
Por su parte Lewis y Corry (1991) informaron que el 56% del
pollo crudo en Reino Unido están contaminados. Osaili et al.
(2011) indicó que la prevalencia de L. monocytogenes en pollo
crudo fue del 9%. Otros estudios han mostrado altos
porcentajes de L. monocytogenes en carne cruda por ejemplo:
36.1% en España, 60% en Portugal, 11.5% en Turquía y 21.6%
en Italia (Goh 2012). Algunos países como Estados Unidos,
Australia y Nueva Zelanda requieren tolerancia cero de L.
monocytogenes en alimentos listos para el consumo, aunque
en nuestro país no existe esta restricción reglamentaria,
muchas plantas implementan controles para reducir este
patógeno, sobre todo las empresas exportadoras.
d. Escherichia coli
Escherichia coli se encuentra en el tracto digestivo de
mamíferos y aves. Algunas cepas se encuentran formando
parte de la microbiota normal del intestino, sin embargo, ciertas
cepas pueden causar enfermedad lo que representa un riesgo
significativo para la salud.
15
Algunas cepas causan enfermedad en animales y el
hombre, entre ellas se encuentra la E. coli entero hemorrágica
(EHEC) O157:H7, es decir causa enfermedad que cursa con
cuadros de diarrea con sangre, debido a la hemorragia en
intestino. La E. coli uropatógena (UPEC), es decir la que causa
enfermedad del aparato urinario y la E. coli avian (APEC), cepa
O1:K1:H7 que provoca cuadros de enfermedad (colibacilosis)
en aves de corral.
Se ha comprobado que E. coli posee un extenso
espectro de resistencia a los antibióticos, lo cual representa un
gran riesgo a la inocuidad alimentaria y una amenaza para la
salud pública (Forgetta 2012). Un estudio realizado por
Diarrassouba et al. (2007) sobre la resistencia a los antibióticos
en granjas de pollos de engorda, mostró que E. coli. ECD-227,
es resistente a 22 de 25 antibióticos probados.
El criterio microbiológico para los alimentos define la
aceptabilidad de éstos, sustentado en la ausencia o presencia
de un microorganismo, en la cantidad basada en Unidades
Formadoras de Colonia (UFC por sus iniciales, enumera a las
bacterias, ya que cada una de ellas es capaz de formar una
colonia bacteriana) o en la cantidad de toxinas producidas por
la bacteria.
16
Los criterios microbiológicos constan de una descripción
de los microorganismos de interés, los métodos analíticos para
su detección y/o cuantificación, definición del número de
muestras de campo que hay que tomar, los límites
microbiológicos que se consideran apropiados para el alimento
y finalmente las medidas que deban adoptarse cuando no se
cumple con dicho criterio (Codex alimentarius).
Durante la aplicación de los criterios microbiológicos, se
debe tener en cuenta lo siguiente:
 Efecto del procesamiento sobre la microbiota del
alimento.
 La probabilidad de contaminación o incremento en el
número de bacterias que pueden causar enfermedad
durante el almacenamiento o procesamiento posterior.
 Perfil inmunológico de los consumidores a quien está
dirigido el alimento.
 El uso del alimento en cuestión (listo para consumo, pre
cocido, etc.)
Los límites microbiológicos deberán basarse en datos
microbiológicos apropiados para el alimento y tomando en
cuenta datos recopilados en distintos establecimientos de
producción que trabajan conforme a las buenas prácticas de
higiene y aplican el sistema de HACCP. También hay que
considerar las condiciones previstas de manipulación y
consumo del alimento (Codex alimentarius).
17
Los métodos de laboratorio para evaluar la presencia
de microorganismos en alimentos y superficies que tienen
contacto directo con estos, se basan en identificar y contar las
bacterias en cuestión. Las técnicas más utilizadas son: cultivo
microbiológico, inmunoensayo (ELISA) y biología molecular
(PCR), esta última es utilizada por su gran sensibilidad,
especificidad y rapidez. Los métodos de detección de
microorganismos en alimentos deben seleccionarse teniendo
en cuenta las siguientes características:
a. Produzcan resultados en tiempo real
b. Posean alta sensibilidad (detecten cantidades muy
pequeñas) y especificidad (que detecten la bacteria
específica y no se confundan con bacterias que
puedan ser parecidas)
c. No destructivos
d. Que no requieran que la línea de procesamiento se
detenga
a. Cultivo Microbiológico
El cultivo microbiológico se puede definir como la
técnica de laboratorio para reproducir una bacteria, ya que
ésta se expone a un medio que posee los nutrientes
necesarios para su reproducción y en una cantidad suficiente
que permita que sea identificada, ya que una bacteria es
capaz de reproducirse hasta formar una colonia, es decir una
población de bacterias.
18
´
Por lo tanto la identificación de microorganismos en
medios de cultivo se realiza mediante visualización directa de
las colonias, ya que presentan características morfológicas,
además de otras características cuando son colocadas en
medios de cultivo que poseen elementos específicos que
facilitan su identificación, llamadas pruebas bioquímicas.
Cuadro 1. Indicadores sanitarios en alimentos
Indicador Superficie Límite Referencia
Mesófilos
aerobios
Superficie
viva
< 3 000 UFC/cm2
NOM-093-
SSA1-1994
Superficie
inerte
< 10 UFC/cm2
Coliformes
totales
Superficie
viva
< 400 UFC/cm2
Superficie
inerte
< 200 UFC/cm2
Carne
cocida
< 10 UFC/g
Salmonella Superficie
viva
Ausencia NOM-114-
SSA1-1994
Superficie
inerte
Depende del
serotipo
Algunas bacterias como coliformes totales, coliformes
fecales, mesófilos aerobios y patógenos específicos como
Salmonella y Staphylococcus son utilizados en la industria
como “indicadores sanitarios”, la razón es porque su
presencia indica prácticas sanitarias deficientes en el manejo
19
de alimentos e higiene en los equipos. En el cuadro 1 se
mencionan los indicadores sanitarios en alimentos, así como
los límites que poseen cada uno de ellos y que las Normas
Oficiales Mexicanas exigen.
b. Inmunológicos
Existen pruebas de laboratorio que tienen el objetivo de
determinar la presencia de la bacteria en el alimento, algunas
de ellas son capaces de cuantificar al microorganismo, además
de que se consideran pruebas inmunológicas porque utilizan
anticuerpos como los agentes que detectan estructuras de las
bacterias (lipopolisacáridos, flagelos y fimbrias), lo cual permite
su correcta identificación. Estas pruebas son muy utilizadas ya
que son altamente específicas, lo que indica que es muy difícil
que se unan a otro tipo de bacteria y se pueda obtener un
resultado equivocado (falso positivo), es decir un resultado
erroneo debido a que el anticuerpo se unió a otra bacteria
presente, pero que no es la bacteria buscada.
Entre las pruebas de laboratorio que se pueden utilizar
se encuentra la conocida como ELISA (Enzime Linked
Inmunosorbent Assay por sus siglas en inglés), ésta utiliza
anticuerpos contra bacterias específicas. Existen pruebas
comerciales variantes de las pruebas ELISA para la industria
alimentaria, las cuales se basan en una serie de reacciones
seriadas de anticuerpos (conocidas como pruebas en
sándwich).
20
Consisten en placas reactivas con anticuerpos
específicos adheridos a la superficie de pequeños pozos, al
colocar la muestra preenriquecida del alimento ocurre la
reacción, si la bacteria está presente (antígeno), es capturada
por el anticuerpo, al adicionar un conjugado de anticuerpos
marcados con enzimas se completa el sándwich. Esta
interacción anticuerpo-antígeno-anticuerpo se revela al
adicionar un sustrato, la reacción genera cambios de coloración
en las placas, lo cual se puede interpretar según las
especificaciones del proveedor. Uno de los métodos más
utilizados para la búsqueda de microorganismos en muestras
de alimentos y muestras similares es el TECRA® validado por
la AOAC (Association of Analytical Communities).
c. Tecnicas de biología molecular: PCR
La Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) es la
única prueba de laboratorio que ha llegado a ser conocida por
el común de las personas debido a que posee aplicación tanto
en la criminalística como en la genética (pruebas de
paternidad), ya que es capaz de detectar material genético.
Por tanto, esta prueba también tiene aplicación en el
área de la microbiología de alimentos, ya que no solo detecta
material genético de origen animal, sino también de origen
bacteriano, de ahí su importancia en la detección de bacterias
que causan enfermedad de transmisión alimentaria.
21
´
En la industria de los alimentos, esta técnica se emplea
como método de referencia para la validación de sistemas de
inocuidad como el HACCP y de otros métodos comerciales de
monitoreo de limpieza. En plantas de alimentos donde las
poblaciones bacterianas existentes en superficies y materias
primas son variadas, además que es posible la presencia de
varios agentes microbiológicos causantes de enfermedad, se
emplea la técnica de PCR multiplex que permite identificar
varios microorganismos en una misma prueba.
La PCR a partir de muestras no enriquecidas, es decir,
directamente de los alimentos, sería una alternativa viable y
rápida en la industria, sin embargo, su sensibilidad puede ser
reducida cuando el alimento contiene sales, lípidos, proteínas,
y otros microorganismos. Un aspecto que se debe tomar en
cuenta al utilizar PCR para detectar material genético de origen
bacteriano, es que éste puede proceder de bacterias muertas,
las cuales son incapaces de causar enfermedad de transmisión
alimentaria.
d. Metodos de muestreo
Los métodos o planes de muestreo se refieren a la
manera como se realiza, y al número de canales de pollo o
alimentos que se utilizan para aplicar alguna técnica de
laboratorio, para detectar bacterias de importancia en el
producto o alimento.
22
´
Esto surge porque es imposible desde el punto de vista
práctico y económico que todas las canales procedentes de
una parvada sean objeto de un análisis de laboratorio, de ahí
que se utiliza un grupo de ellas que pueda representar al lote.
Los planes de muestreo deben considerar la
probabilidad de detección de microorganismos en un lote,
teniendo en cuenta que ningún plan de muestreo puede
asegurar la ausencia de un determinado organismo. Los planes
de muestreo deben ser administrativa y económicamente
factibles para las plantas de procesamiento.
Los aspectos a considerar en la elección del método de
muestreo son: que pueda llevarse a cabo sobre la línea de
procesamiento y considerar la distribución heterogénea y
mecanismo de adhesión de los microrganismos en la superficie
de la canal; buscando que las canales o muestras a utilizar
sean representativas de lo que sucede en el lote.
El mecanismo de contaminación bacteriana consiste en
la retención de una película de agua en la superficie de la
canal, la cual se absorbe en los folículos de la pluma, esto
protege a las bacterias de ser eliminadas durante un posterior
proceso de lavado, e incluso, durante la descontaminación con
agentes químicos, finalmente las bacterias se adhieren al tejido
conjuntivo presente en el músculo. Las lesiones en la piel que
pueden ocurrir durante las diferentes fases del procesamiento,
contribuyen a la retención y mayor adsorción de
microorganismos (ICMSF 2001)
23
El tiempo que transcurra entre la toma de las muestras
de campo y su análisis deberá ser lo más breve posible, y
durante el transporte al laboratorio las condiciones de
temperatura de la muestra deben permitir la viabilidad de los
microorganismos (Codex alimentarius). Entre los métodos de
muestreo utilizados en la línea de procesamiento se pueden
mencionar: enjuague de la canal, raspado de piel, hisopado,
incisión de piel y músculo (con sus respectivas variaciones
según las necesidades del estudio como puede ser mezclado
en stomacher o maceración de las muestras). Los métodos
destructivos como la toma de muestras de piel tienen la
desventaja de indicar el grado de contaminación del sitio
exacto de toma de muestra y no de la canal completa (Klinger
1981).
El método de lavado de la canal es el más utilizado para
determinar la incidencia de Salmonella y Escherichia coli, así
como para determinar la vida de anaquel del producto final.
Este método consiste en colocar la canal individualmente en
una bolsa de plástico estéril a la cual se le añaden 100 ml de
agua peptonada estéril, se agita vigorosamente durante 1
minuto, cubriendo superficies internas y externas de la canal,
una vez lavada la canal se retira de la bolsa y el agua
resultante constituye la unidad de muestra. Existen variaciones
en la aplicación de este método como son la adición de arena
en el enjuague para promover el desprendimiento de la
bacteria de las superficies o usar una mayor cantidad de agua
de enjuague (hasta 300 ml).
24
El método de lavado de la canal proporciona una
estimación global del número de bacterias presentes en la
canal, sin embargo, no permite determinar el grado de
contaminación en diferentes zonas ya que el número de
bacterias de diversas áreas de la misma canal pueden diferir.
Por ejemplo, se pueden recuperar más bacterias en muestras
de muslos que de la pechuga, algunos estudios reportan que
en piel de pechuga y en cavidad interna de canales de pavo los
números de E. coli son menores que los recuperados de la
parte posterior de la canal y en la piel del muslo (Kotula 1966,
Bodnaruk et al. 1998).
Las aves sanas portan de forma natural diversos
microorganismos en la piel, plumas y aparato digestivo,
muchas de estas bacterias no son patógenas para las aves ni
para los seres humanos, pero en ocasiones pueden causar
descomposición de los alimentos. Por otro lado, las bacterias
patógenas o causantes de enfermedad pueden llegar a
transferirse a los alimentos durante su producción y
conservación y causar enfermedades (ETAs). Durante la
producción de pollo de engorda, muchos factores pueden
favorecer su contaminación: en la granja, durante el transporte
y procesamiento, así como en el manejo de la carne.
25
Como ya se mencionó anteriormente, entre los
patógenos reportados en productos avícolas se encuentran:
Campylobacter spp., Clostridium botulinum, Clostridium
perfringens, Erysipelothrix rhusiopathiae, Escherichia coli
O157: H7, Listeria monocytogenes, Mycoplasma gallisepticum,
Mycoplasma synoviae, Pasteurella multocida, Riemerella
anatipestifer, Salmonella spp., Staphylococcus aureus, Vibrio
spp. y Yersinia enterocolitica. Mientras que L. monocytogenes
es un problema grave asociado a productos procesados de
carne de ave (Keklik, 2010).
La contaminación de las canales de pollo es inevitable,
sin embargo, el grado de contaminación y la gravedad de sus
consecuencias depende de las medidas de control aplicadas
durante el procesamiento, como son: buenas prácticas de
manufactura, procedimientos de limpieza y desinfección de
equipo y utensilios, así como de los programas de reducción de
patógenos implementados (Sistema TIF, HACCP e ISO 22000).
Procesamiento Avícola
La presencia de bacterias causantes de enfermedad de
transmisión alimentaria pueden tener su origen desde la granja
productora de pollo de engorda, sin embargo, los sistemas de
inocuidad actuales en las plantas de procesamiento, tienen el
objetivo de llevar a un nivel de control los microorganismos
patógenos en caso de estar presentes y que éstos sean
incapaces de causar enfermedad.
26
Por lo tanto a continuación se revisarán algunos pasos
del procesamiento primario del pollo de engorda que tienen un
papel relevante en la carga microbiana total de una canal.
a. Recepción del pollo de engorda
Las áreas de recepción del pollo de engorda, colgado en
la línea de procesamiento e insensibilización no parecen
representar un riesgo sobre la calidad microbiológica de las
canales, sin embargo, se han detectado microorganismos
como E. coli, Listeria monocytogenes, P. aeruginosa,
Staphylococcus spp. y Bacillus cereus en el ambiente de estas
áreas, y se ha comprobado que éstos proceden principalmente
del aleteo de las aves, del personal operativo, así como del
ambiente exterior de las plantas, favorecido por la insuficiente
ventilación (Lues 2007). Se han realizado estudios sobre la
microbiota ambiental de las áreas previas al sacrificio, los
resultados reportados por Lues (2007) se muestran en el
cuadro 2. Además, encontró altos recuentos de E.coli, la cual
indica contaminación fecal. Asimismo, reportó la presencia de
Staphylococcus spp. como el microorganismo más frecuente
en el área de recepción. Existe una alta prevalencia en el
ambiente, esto se atribuye al aleteo y a los movimientos
excesivos de las aves durante la manipulación de las aves para
el colgado a la línea de procesamiento.
27
Cuadro 2. Microbiota ambiental en áreas de procesamiento
Listeria
monocytogenes
Bacillus
cereus
Pseudomonas
aeruginosa
Área de
recepción y
sacrificio
9.3×103
UFC/
m3
1.8 x 104
UFC/m3
1.9×103
UFC/m3
Área de
Desplumado
3.9×103
UFC/
m3
8.04×103
UFC/m3
Área de
Eviscerado
2.5×103
UFC/m3
1.5×102
a
3.3×102
UFC/m3
Elaborado a partir de información de Lues (2007)
Los conteos en el ambiente indican que S. aureus puede
alcanzar 104
UFC/m3
en varias áreas de procesamiento,
excepto en las áreas frías, donde los recuentos promedio son
de 3.9 × 101
UFC/m3
. S. aureus es un microorganismo capaz
de adherirse fácilmente a las superficies, esto adquiere mayor
relevancia cuando se trata de superficies en contacto directo
con las canales (Lues 2007). En resumen, y basados en esta
información, es posible decir que existe una alta prevalencia
de bacterias en el ambiente de las plantas de procesamiento,
de ahí la importancia en los sistemas de control de patógenos
establecidos.
28
Figura 2. Parvada en espera en andén.
Se ha observado que aves vivas infectadas que llegan a
los rastros, son la principal fuente de contaminación por
Campylobacter ya que se puede recuperar de pollos antes del
procesamiento (Kotula y Pandya 1995). Stern (1995) encontró
que después del transporte de las aves a planta de
procesamiento, los niveles de Campylobacter en piel y plumas
aumentan significativamente, alcanzando niveles de 10 6,8
a 10
8,7
UFC/g. Por su parte, Berndtson (1992) reportó que en la piel
se puede llegar a encontrar hasta 103
UFC/g aislándose en
más del 89% de las canales muestreadas.
Sin embargo, el intestino siempre será el sitio donde se
encuentre esta bacteria con mayor frecuencia, esta
aseveración está basada en estudios (Jefrey 2001) que indican
que la prevalencia en intestino fue de 94%, seguido de la piel
(78%), y la más baja prevalencia en buche (48%).
29
Antes del escaldado se encuentran altos conteos de
Campylobacter en plumas y piel, sin embargo, se observa
mayor número de bacterias en piel de pechuga (106.9
UFC/g)
que en muslo, por otro lado las muestras de plumas de
pechuga también tienen elevados conteos (107,5
UFC/g).
Figura 3. Aves colgadas en línea de producción.
b. Escaldado
El escaldado por otro lado es un factor muy importante,
si bien el método de escaldado se trata de una inmersión en
agua caliente (temperatura de 53 a 60°C), que parecería ser el
adecuado para no permitir la proliferación bacteriana e incluso
eliminar microorganismos, también puede contribuir a la
contaminación de las canales. La temperatura de escaldado
suave a 53°C durante 120 segundos (Sams 2001) no elimina la
epidermis.
30
Temperaturas más altas aplicadas por menos tiempo
(escaldado fuerte) pueden tener un efecto letal sobre los
microorganismos, sin embargo, al eliminar la epidermis,
las bacterias que sobreviven encuentran un sustrato más
adecuado para su crecimiento.
El agua de escaldado puede
albergar microorganismos como
Salmonella spp, Staphylococcus
spp y otros, ya que durante esta
fase se liberan tanto materia fecal
como plumas, condicionando una
contaminación cruzada de las
canales. Bacterias del género
Salmonella se han detectado en
canales después del escaldado,
señalándose valores de reducción
decimal, es decir el número de
minutos o segundos precisos para
destruir el 90% de una población de microorganismos, de
D52ºC=150 segundos y D62ºC=8 segundos para Salmonella.
La materia orgánica acumulada en el agua de escaldado
protege de cierta manera al microorganismo, la temperatura no
es un obstáculo determinante para la destrucción de
Salmonella en esta etapa, sin embargo, la disminución del pH
puede afectar la resistencia al calor de la bacteria.
Figura 4. Escaldado.
31
En estudios realizados al respecto con 7 diferentes
cepas de Salmonella, se observó que valores de D52ºC
permitieron su supervivencia entre 10.2 a 34.5 minutos en
escaldado con un pH alrededor de 6. En otro estudio
Salmonella sobrevive al escaldado a 55ºC por 105 segundos y
no son detectadas cuando son escaldadas a 60 ºC por 200
segundos (Nothermans 1975).
Osiriphun et al. (2011) reportan que deben considerarse
los pasos de escaldado y enfriamiento como etapas que
representan un riesgo para la contaminación por
Campylobacter jejuni en las canales, señalando que el pH y
concentración de cloro son factores sensibles que permiten la
sobrevivencia de este microorganismo, así como la
temperatura del agua durante el escaldado, por lo tanto el
estudio sugiere incluir el control del pH durante el enfriamiento,
así como la reducción de materia orgánica en el tanque de
escaldado.
McKee et al. (2008) han reportado que el uso de aditivos
alcalinos en el agua de escaldado puede reducir la carga
bacteriana de las canales. Humphrey et al. (1981) reportaron
una reducción de la materia fecal en las plumas y una
reducción en el recuento total de bacterias cuando el pH del
agua de escaldado se ajustó a 9,0 ± 0,2 mediante la adición de
hidróxido de sodio.
32
La modificación del pH (superior a 9) en el agua de
escaldado, disminuye la contaminación bacteriana de las
canales de pollos, ya que reduce notablemente patógenos
como Salmonella, E. coli y Campylobacter. Su efecto es la
alteración del funcionamiento enzimático y transporte de
nutrientes, además de actuar como un tensioactivo protegiendo
a las canales de la contaminación cruzada (Mckee 2008,
Berrang 2011).
c. Desplumado
Durante el desplumado la
difusión de microorganismos en los
dedos de goma se ve favorecida
por la humedad y el calor que las
canales transmiten al equipo. Un
estudio analizó el empleo de cuatro
desplumadoras en el procesamiento
de pavos, y mostró que 14 lotes
infectados con Salmonella de
manera natural, contaminaron el
equipo. La primera desplumadora
resultó contaminada durante el
procesamiento de 12 de los lotes
(85.7%), la segunda resultó
contaminada tras procesar 11 lotes (78.6%), la tercera durante
el procesamiento de 7 lotes (50%) y la cuarta durante el
procesamiento de 12 lotes (85.7%).
Figura 5. Desplumadora
con dedos de goma.
33
En el mismo estudio se observó que el equipo que se
emplea después del desplumado, también se contaminaba
(Bryan 1968). El aumento de Campylobacter y Salmonella
puede ser significativo durante el desplumado, y se debe a la
contaminación cruzada generada por las maquinas
desplumadoras en contacto con plumas contaminadas con
materia fecal. Salmonella, a diferencia de Campylobacter,
tiende a estar presente en las canales en bajas cantidades y
por lo tanto generalmente se evalúa como presencia o
ausencia en lugar de buscar números reales (Berrang, 2011).
d. Eviscerado
La evisceración constituye una de las etapas de mayor
riesgo en el procesamiento, los microorganismos pueden ser
transferidos a las canales por la ruptura del tracto
gastrointestinal, por las maquinas evisceradoras o por los
operarios. Rahimi (2010) determinó la frecuencia de
contaminación de canales de pollo de engorda infectados con
Campylobacter y encontró que después del desplumado 54.8%
de las canales estaban contaminadas y después del eviscerado
sólo 51.2%, lo cual es cercano a lo reportado por Franchin et
al. (2007) quien reportó 68% de canales contaminadas
después del desplumado y 69.4% después del eviscerado.
Según Rahimi (2010) este hallazgos plantean la posibilidad de
que la etapa de eviscerado no es el principal factor responsable
de la contaminación cruzada, ya que después de esta etapa se
observa una reducción en la frecuencia de contaminación.
34
Figura 6. Evisceradora.
e. Lavado
El lavado se realiza por aspersión, generalmente se
efectúa solamente uno después del eviscerado, sin embargo,
es más eficaz realizar varios lavados durante el procesamiento
con el fin de prevenir el incremento de la contaminación. Esta
fase es la primera enfocada a reducir la contaminación de las
canales, aunque únicamente se basa en una reducción
cualitativa ya que emplea el criterio de ausencia de materia
fecal en la superficie de las canales.
Algunos estudios sugieren que la contaminación
bacteriana difiere entre las zonas internas y externas de la
canal, por lo que algunas plantas procesadoras han
incorporado el criterio de lavado dentro-fuera, sin embargo, la
eficacia del lavado también depende de otros factores como:
cantidad de agua utilizada, presión del agua y dirección del
chorro de agua.
35
Figura 7. Lavado de canales
Smith (2007b), señala que la diferencia en la
contaminación externa e interna de la canal puede deberse a
que las bacterias se adhieren más fácilmente a la superficie de
la piel y folículos de las plumas, además de que esta superficie
está permanentemente expuesta. Este tipo de lavado reduce la
incidencia de Campylobacter y Salmonella en las canales
visiblemente contaminadas (Smith 2007a).
f. Enfriado de la canal
El enfriamiento de las canales es un paso crucial del
procesamiento que puede prevenir el crecimiento microbiano
para maximizar la seguridad de las canales y su vida útil. Éste
puede ser por inmersión en tanques de agua con o sin hielo,
por aspersión de agua fría o por circulación de aire frío. El
enfriamiento por inmersión en agua puede ocasionar la
dispersión de microorganismos.
36
Green (1984) encontró que casi 55% de las muestras de
agua fueron negativas a Salmonella, aunque se detectaron
19% de canales contaminadas de las cuales alrededor del 8%
de las muestras presentaron cuentas de hasta 100 o más
salmonelas por mililitro.
Una alternativa del enfriamiento por inmersión es el
efecto de lavado con un flujo contracorriente, agitación del
agua y cloración. Otros sistemas de enfriamiento, como el de
aspersión, tienen la ventaja de disminuir la contaminación de
las canales debido a que estas son colgadas individualmente
en la línea. Por otra parte, el sistema de enfriamiento con
corriente de aire ofrece una mejor calidad microbiológica de las
canales ya que adicionalmente el aire daña a las bacterias
como consecuencia de la deshidratación superficial (Carroll y
Alvarado 2008).
Figura 8. Enfriado de canales por inmersión en Chiller.
37
En general, es evidente que la eficacia del sistema de
enfriamiento depende de la carga inicial de microorganismos
en las canales y calidad del agua (Demirok 2013). Rahimi,
(2010) encontró un aumento significativo de Campylobacter
spp. en muestras obtenidas de la canal 20 min después de la
etapa de enfriamiento así como de agua del tanque de
enfriamiento, lo que indica contaminación cruzada. Sin
embargo, puede observarse una reducción en el número de
canales positivas a este microorganismo por efecto del secado
de la superficie de la piel en un enfriado posterior con ráfaga de
aire, o bien por los factores estresantes a los que están
expuestos los microorganismos y que hacen que expresen
genes de respuesta al estrés como son el estado viable no
cultivable, lo cual afecta el aislamiento de microrganismo por
métodos convencionales de cultivo. En este caso la detección
de patógenos por métodos moleculares es conveniente.
Etapas posteriores al enfriamiento de las canales deben
ser controladas con el fin de evitar riesgos microbiológicos, ya
que ninguna etapa posterior, (exceptuando la cocción)
eliminará los microrganismos añadidos.
g. Corte y deshuese
El riesgo microbiológico durante el corte y deshuese de
las canales depende de las buenas prácticas de manufactura
(BPM) y los procedimientos de limpieza y saneamiento de
equipos y utensilios (POES).
38
Figura 9. Corte y deshuese de pechuga de pollo.
Figura 10. Corte y deshuese de muslo de pollo.
39
Los microorganismos detectados en esta área con
frecuencia derivan de los seres humanos, y son favorecidos por
la insuficiente ventilación en relación con el número de
personas y actividades involucradas, así como de la
condensación excesiva y humedad en paredes y techos (Lues
2007). En un estudio, Davis y Conner (2007) reportan que la
incidencia de Campylobacter en carne cruda es de 76% en
pollo enteros y se reduce a 48% en pechuga sin piel y a sólo
2% en carne deshuesada.
h. Empacado
El área de empaque de productos crudos, es una de las
zonas más limpias del establecimiento, sin embargo, no está
exenta de contaminación microbiológica, se ha observado que
en esta área prevalecen entre otras bacterias: Staphylococcus
spp. y E. coli, esta última con un recuento promedio de 1,5×103
UFC/m3
, lo que indica contaminación fecal posiblemente debido
a la rotura de intestino durante el eviscerado del pollo o bien
debido a malas prácticas de higiene, según reportó Lues
(2007). El método de conservación de carne de pollo, ya sea
refrigeración o congelación, no elimina la microbiota,
incluyendo bacterias patógenas; Campylobacter se ha aislado
en 55.2% de carne de pollo refrigerado y en 49.3% de pollo
congelado (Kanarat et al, 2004;. Padungtod et al., 2008).
40
Figura 11. Envasado de cortes de pollo en bolsas al vacío.
El grado de contaminación de las canales al final del
procesamiento depende de factores inherentes a las aves,
prevalencia de microorganismos durante la crianza y
finalización de las aves, susceptibilidad de las aves a las
infecciones debido al estrés generado durante el manejo previo
al procesamiento (ayuno y transporte), y de la contaminación
añadida durante el procesamiento. Independientemente de los
factores mencionados, el grado de contaminación de las
canales es variable. En la mayoría de los países, del 50 al 80%
de las canales de pollo están contaminadas con Campylobacter
y Salmonella spp., siendo el primero aislado más
frecuentemente.
41
Un estudio evaluó el porcentaje de canales positivas a
C. jejuni y C. coli en plantas de procesamiento por 13 semanas
y el resultado indicó que del 67 al 100% fueron positivas,
también se ha observado que las canales contienen niveles de
103
a 106
UFC. Otro estudio evaluó la incidencia de Salmonella
en 5 plantas de procesamiento durante 13 semanas, el
resultado indica que la incidencia de Salmonella osciló de 9 a
77% en cada planta con valores medios de 10 células por canal
(ICMSF 2001).
La comercialización de la carne ha experimentado
cambios en los últimos años a través de la utilización de
envases en atmósferas modificadas con almacenamiento a
baja temperatura. Esto contribuye a controlar la población
microbiana y la oxidación de lípidos, a aumentar la vida útil del
producto, y a un mejor almacenamiento y distribución de la
carne. El éxito de esta tecnología depende de la mezcla de
gases en relación con el producto, el perfil microbiológico de la
carne, el control de la temperatura, las propiedades de barrera
de la película de embalaje y la eficacia de los equipos (Taylor,
1996). El uso de CO2 extiende la vida útil de carne de ave
cruda mediante la inhibición de la actividad de psicrófilos,
bacterias gram negativas y Pseudomonas spp. Aunque
posteriormente se da un deterioro y cambio en las
características organolépticas por el lento crecimiento de
bacterias como: Carnobacterium spp., Brochothrix
termosphacta, Lactobacillus spp. (Fraqueza y Barreto, 2009,
2011).
42
Las películas impermeables al oxígeno promueven la
acumulación de CO2, inhibiendo el crecimiento de
Pseudomonas spp. pero creando un medio adecuado para el
crecimiento de S. putrefaciens, Brochothrix thermosphacta,
Enterobacteriaceae y Aeromonas spp. (Tuncer 2008). El
deterioro de las canales envasadas en películas permeables al
oxígeno puede ser causado por Pseudomonas spp.
(Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas putida,
Pseudomonas fragi), mientras Shewanella putrefaciens,
Acinetobacter spp. y Moraxella spp. son menos deteriorantes.
La aplicación de CO2 al 100% inhibe completamente el
crecimiento de L. monocytogenes (Sheridan et al. 1995), pero
se ha observado su crecimiento en 30% CO2 / 70% N2 en
pechuga de pollo crudo (Shin et al., 2010).
La bioconservación es un método que mejora la
seguridad y la estabilidad de los productos alimenticios sin
alterar sus cualidades sensoriales, mediante el uso de
microorganismos, sus metabolitos, o ambos (Holzapfel et al,
1995, Lücke, 2000). Las bacterias ácido lácticas (BAL) tienen
un efecto inhibidor frente otros microorganismos como
resultado de competencia por los nutrientes, producción de
bacteriocinas u otros compuestos antagonistas tales como
ácidos orgánicos, peróxido de hidrógeno y enzimas. Las BAL
son eficaces contra L. monocytogenes y C. jejuni., aunque las
bacterias gram negativas tienen una resistencia inherente
debido a su membrana exterior, que actúa como una barrera
eficaz contra microbicidas (Melero, 2013).
43
Durante el procesamiento de las aves de corral, las
bacterias se pueden eliminar o controlar usando tratamientos
antimicrobianos en el agua de escaldado, lavado y enfriado de
las canales. El agua clorada es ampliamente utilizada para el
lavado de canales, enfriado por inmersión o por aerosol,
también se ha utilizado dióxido de cloro, cloruro de sodio,
ozono, peróxido de hidrógeno, ácido láctico, clorito de sodio y
menos frecuentemente: metasilicato de sodio, ácido cítrico
mezclado con ácido clorhídrico y fosfato ácido fosfórico,
monocloraminas y soluciones de hipoclorito con pH controlado.
El uso de agua caliente clorada en el lavado de canales mejora
la remoción de material extraño y reduce efectivamente los
recuentos microbianos de superficie de la canal. Se ha
demostrado que el uso de agua a 63°C mejora la eficiencia del
lavado ya que suaviza la grasa y rompe la tensión superficial
de la capa de grasa en la piel (Bashor et al. 2004)
La irradiación es el tratamiento más eficaz en la
eliminación de agentes patógenos de la carne. Sin embargo, su
uso es limitado debido a la preocupación de los consumidores
acerca de los productos irradiados. La acción bactericida de la
radiación ionizante se basa principalmente en daño al ADN
bacteriano, el grado de daño es dependiente de la dosis; causa
daño oxidativo a las membranas celulares lo cual interfiere con
el metabolismo normal para la generación de energía, inhibe el
crecimiento celular, e induce a la muerte (Dong 2013).
44
La sensibilidad de los microrganismos a la irradiación
puede variar de acuerdo a su complejidad, los virus tienen la
mayor sensibilidad, seguidos por las esporas bacterianas,
bacterias y hongos. Las bacterias en fase exponencial son más
sensibles. La mayoría de los patógenos comunes en los
alimentos como Campylobacter jejuni, E. coli O157:H7,
Staphylococcus aureus, Salmonella spp., L. monocytogenes y
Aeromonas hydrophila pueden disminuir significativamente o
eliminarse con dosis bajas de irradiación (<3,0 kGy) (Dong
2013).
El pH, temperatura y composición química del alimento
tienen un impacto en la supervivencia de los microorganismos
durante la irradiación. La presencia de oxígeno sensibiliza a las
células a la radiación, es por eso que la destrucción de
microorganismos puede reducirse en condiciones anaeróbicas
o en muy baja actividad de agua. Debido a la menor tasa de
reacciones oxidantes, se generan radicales libres de oxígeno
que pueden ser tóxico en los productos (Dong 2013).
Figura 12. Logo “Radura” muestra que un alimento ha sido irradiado.
Versión internacional (izq.) y de la FDA (der.)
45
El pH, temperatura y composición química del alimento
tienen un impacto en la supervivencia de los microorganismos
durante la irradiación. La presencia de oxígeno sensibiliza a las
células a la radiación, es por eso que la destrucción de
microorganismos puede reducirse en condiciones anaeróbicas
o en muy baja actividad de agua. Debido a la menor tasa de
reacciones oxidantes, se generan radicales libres de oxígeno
que pueden ser tóxico en los productos (Dong 2013).
Las principales ventajas de la irradiación de la carne son:
 Conserva la integridad del producto.
 Destruye microorganismos patógenos.
 Reduce considerablemente microrganismos
deteriorantes aumentando la vida útil de los productos.
 No altera la calidad de los nutrientes.
 No deja residuos.
 Se puede aplicar posterior al envasado evitando la
contaminación ulterior.
Desventajas:
 Promueve cambios oxidativos de los lípidos afectando
significativamente la aceptación del consumidor.
 Produce un aroma característico, altera sabor y color.
 El alto contenido de proteínas en la carne neutraliza a
los radicales libres.
 La generación de un color rosado en carne cocida se
asocia a la presencia de contaminantes o reacciones
químicas indeseables (Dong, 2013).
46
 Los microorganismos tienen mayor sensibilidad a la
irradiación a temperatura ambiente que a temperaturas
bajo cero, ya que la baja Aw (actividad de agua) del
hielo impide la migración de libre radicales dentro del
producto. (Nam et al., 2002).
 La descontaminación de carne utilizando irradiación es
más eficaz cuando la carne es de buena calidad
microbiológica, la presencia de grandes poblaciones de
microorganismos reduce la eficacia de la radiación.
El peróxido de hidrógeno es un agente antimicrobiano
potente y es utilizado en una variedad de aplicaciones de
alimentos. Se ha utilizado en productos lácteos y para la
esterilización de tuberías, filtros, superficies en contacto con
alimentos y áreas de empaque. Investigadores evaluaron
concentraciones de 1,100 a 12,000 ppm en agua de enfriado
de canales por 30 minutos lo que resultó en un 95 a 99,5% de
reducción de aerobios, sin embargo, tuvo efectos indeseables
en las canales como piel elástica y blanqueada, por lo que se
descarta su uso en el enfriado de canales, pero podría ser
aplicable en carne de pollo deshuesada (Fletcher 1993). Los
ácidos orgánicos (láctico, acético y cítrico) se utilizan en el
lavado de canales para disminuir la carga microbiana
superficial, a concentraciones superiores al 3% y ácido láctico
al 1% o superior, causan cambios en la apariencia de las
canales por decoloración, hinchazón, y en otros casos,
oscurecimiento de la piel, también se ha reportado cambio de
sabor en pechuga de pollo (Dickens 1994).
47
Los métodos de conservación de canales de pollo tienen
el objetivo de alargar su vida útil, conservando sus
características organolépticas intactas e inhibiendo el
crecimiento bacteriano, permitiendo mantener los alimentos
inocuos. Los métodos de mayor utilidad en la carne de pollo
son: conservación por frío (refrigeración y congelación),
irradiación y uso de aditivos en productos transformados.
a. Refrigeración
La refrigeración consiste en disminuir la temperatura de
las canales por encima de su punto de congelación, retardando
el crecimiento bacteriano y afectando de forma mínima sus
características organolépticas y nutricionales. La refrigeración,
a temperaturas entre 0 a 4°C, evita el crecimiento de los
microorganismos termófilos y de algunos mesófilos. Los
métodos más comunes para la refrigeración de canales de
pollo son: inmersión en agua fría, agua fría con hielo y aire frío
(Tuncer 2008). La determinación del tiempo de refrigeración
depende del tiempo necesario para que las canales alcancen
temperaturas por debajo de 4°C en su centro térmico, muchas
plantas realizan un prechiller (pre-enfriado por inmersión) de 10
a 15 min, donde en general se observa una reducción
bacteriana en piel. La calidad microbiológica de las canales
después del enfriamiento está influenciada por la cantidad de
microorganismos presentes en la canal, en el prechiller, chiller.
48
´
También depende de las condiciones del proceso:
relación entre el volumen de agua y el número de canales, flujo
del agua, concentración de desinfectantes, tiempo de contacto,
temperatura, y pH del agua. La reducción en el número de
bacterias persistentes en las canales se debe a la acción
mecánica de la inmersión y a las propiedades del desinfectante
(Northcutt 2008).
b. Congelación
La congelación es un método de conservación de
canales que proporciona un alto grado de seguridad,
conservando el valor nutricional y cualidades sensoriales de la
carne. Consiste en bajar la temperatura por debajo de su punto
de congelación (entre 0° a -18°C) con mínimos cambios
bioquímicos y microbianos. La congelación consiste en reducir
una fracción del agua contenida en las canales, denominada
agua libre, en cristales de hielo, lo cual inmoviliza el agua
produciendo un efecto de desecación, lo que reduce su
actividad (Aw). Dependiendo del método de congelación, la
reducción de temperatura puede resultar en daño físico de las
canales o en complejos cambios bioquímicos de la carne. La
congelación lenta y recristalización originan la pérdida de
componentes celulares, causado por el daño celular provocado
por los cristales de gran tamaño de la recongelación, lo que se
manifiesta como un exudado en el que se pierden diversos
compuestos de valor nutricional y puede dar lugar a
características organolépticas indeseables.
49
c. Cadena de frío
La cadena de frío consiste en el control de temperaturas
de refrigeración o congelación de manera continua en cada
fase de conservación de las canales de pollo, desde el enfriado
durante el procesamiento hasta su consumo o preparación por
el consumidor final (figura 13).
 La cadena de frío consta de control de temperatura en
los siguientes puntos:
o Enfriado durante el procesamiento
o Almacenamiento en el centro de producción
o Distribución
o Almacenamiento en frigorífico y punto de venta
o Almacenamiento en el hogar
Figura 13. Cadena de Frío.
Chiller
Refrigeración
Distribución
Punto de venta
Refrigeración
en hogar
Planta de
proceso
Transporte
refrigerado
Consumidor
50
d. Importancia de la cadena de frío
La inocuidad y calidad microbiológica de las canales de
pollo dependen de la conservación de la cadena de frío durante
las fases de almacenamiento y comercialización hasta antes
del consumo y/o preparación. Los puntos más sensibles de la
cadena de frío son el transporte y distribución a los siguientes
eslabones de la cadena, ya que durante la carga y descarga
existen variaciones de temperatura, aun contando con los
controles adecuados, y en el peor de los casos estos controles
no existen.
Para conservar la cadena
frío es necesario evitar
variaciones de temperatura en las
cámaras frigoríficas, ya que las
bacterias mesófilas y psicrófilas
se multiplican rápidamente bajo
estas condiciones, provocando
alteración de las canales y
pérdida de la inocuidad. Por tanto, es fundamental un
monitoreo constante de la temperatura, para lograrlo existen
los instrumentos llamados termógrafos, que permiten guardar
una gran cantidad de lecturas de temperatura durante periodos
prolongados, con la ventaja de que estos dispositivos pueden
colocarse entre el producto para monitorear los rangos de
temperatura a los que están expuestos los productos avícolas.
Figura 14. Termógrafo.
51
La manipulación adecuada de los alimentos es la clave
para prevenir las ETAs, que son un grave problema de salud
pública, y la producción inocua de los alimentos no es
suficiente cuando la manipulación previa al consumo se realiza
bajo condiciones de insalubridad. Los productos de carne de
ave precocinados, refrigerados, o congelados, listos para
consumir han ganado el interés de un amplio mercado, ya que
no requieren una elaborada preparación para su consumo.
Estos productos son susceptibles a contaminación
microbiológica, y en caso de no contar con controles
adecuados, no ser inocuos.
La Organización Mundial de Salud (OMS) formuló cinco
claves de oro para la preparación inocua de los alimentos
(figura 15), las cuales consisten en:
Figura 15. Las 5 llaves de la inocuidad de los alimentos.
1. Mantenga la limpieza
 Lávese las manos antes de preparar alimentos y con
frecuencia durante su preparación.
 Lávese las manos después de ir al baño.
52
 Lave y desinfecte todas las superficies y equipos
usados en la preparación de los alimentos.
 Proteja los alimentos y las áreas de cocina de
insectos y otros animales.
2. Separe alimentos crudos y cocinados
 Separe carnes rojas, carne de ave y pescado crudo
de los demás alimentos.
 Use equipos y utensilios diferentes, como cuchillos y
tablas de cortar, para manipular alimentos crudos.
 Conserve a los alimentos en recipientes para evitar el
contacto entre los crudos y los cocinados.
3. Cocine completamente
 Cocine completamente los alimentos, especialmente
carnes rojas, carne de ave, huevos y pescado.
 Hierva los alimentos como sopas y guisos para
asegurarse que ha alcanzado los 70°C. En caso de
carnes rojas y de ave, asegúrese de que los jugos
sean claros y no rosados. Se recomienda el uso de
un termómetro adecuado para alimentos.
 Recaliente completamente los alimentos cocinados.
4. Mantenga los alimentos a temperaturas seguras
 No deje los alimentos cocinados a temperatura
ambiente por más de 2 horas.
 Refrigere lo antes posible los alimentos cocinados y
los perecederos (por debajo de los 5° C).
 Mantenga la comida muy caliente (a más de 60°C
antes de servir).
53
 No guarde los alimentos por mucho tiempo aunque
sea en el refrigerador.
 No descongele los alimentos a temperatura
ambiente.
5. Use agua y materias primas seguras
 Use agua segura o trátela para que lo sea
 Seleccione alimentos sanos y frescos.
 Elija alimentos procesados para su inocuidad, como
la leche pasteurizada.
 Lave frutas, verduras y hortalizas, especialmente si
se van a consumir crudas.
 No utilice alimentos caducados.
La carne fresca de pollo puede tener un nivel de
contaminación inicial de 104
a 105
microorganismos por
centímetro cuadrado en los puntos de venta, y se pueden
guardar en refrigeración (3 a 5°C) por 1 ó 2 días manteniendo
su frescura. Sin embargo, después de este tiempo los
microorganismos psicrófilos causan putrefacción y deterioro de
la carne aún a temperaturas de refrigeración.
La vida de anaquel de la carne de pollo (8 a 10 días)
puede incrementarse hasta 15 o 17 días cuando se envasa en
atmosferas modificadas con 60 a 80% de CO2 ya que inhibe la
mayoría de microbiota aerobia (Jiménez et al. 1997).
54
Sin embargo, la inhibición de patógenos como L.
monocytogenes no es efectiva. En otro estudio se amplió la
vida de anaquel de hamburguesas de carne de pollo hasta 17 a
24 días, en embalaje bajo atmósferas modificadas, utilizando
CO2 a concentraciones superiores al 30% (Melero 2013,
Jiménez et al. 1997, Patsias et al. 2008).
La combinación de 20% de CO2 , 70% de O2, y 10% de
N2, da una vida útil de aproximadamente 8 días. Sin embargo,
otras mezclas de gases pueden conducir a una prolongación
de la vida útil hasta de 3 semanas, variable de acuerdo con la
calidad de la carne (Fraqueza y Barreto, 2009, 2011). Los
aditivos utilizados en productos marinados de pollo también
tienen cierta influencia en la vida útil, ya que inhiben el
crecimiento bacteriano, aunque su principal finalidad es la
mejora en sus características organolépticas (Smaoui 2012).
La cuantificación de aminas biógenas en carne y
productos cárnicos es un indicador de frescura. Las aminas
biógenas se forman por la descarboxilación de aminoácidos por
el metabolismo bacteriano, por la influencia de la temperatura,
disponibilidad de oxígeno, potencial redox y pH. El tipo y la
cantidad de aminas biógenas depende de la naturaleza del
alimento y del tipo de microorganismos contaminantes. Durante
el almacenamiento prolongado de carne de pollo se forman
altos niveles de putrescina, histamina, tiramina, y cadaverina.
En muestras de carne podrida se han encontrado
concentraciones mayores a 1,000 mg/kg (Bauer et al. 1994).
55
En carne de cerdo y carne de res almacenadas a 4ºC
durante 35 días, se encontró que las concentraciones de
putrescina, cadaverina, tiramina e histamina no excedieron los
150 mg/kg. Muchas enterobacterias y lactobacilos son
productores de una o más aminas biógenas. Específicamente
la descarboxilación de histidina por Escherichia, Salmonella,
Clostridium, Bacillus y Lactobacillus da lugar a histamina,
caracterizada por ser mediador de graves manifestaciones
anafilácticas. Por su parte Pseudomonas spp., microorganismo
dominante de deterioro de la carne fresca, produce putrescina,
mientras que Enterobacteriaceae forma cadaverina.
Figura 16. Ejemplo de piezas en prolongado almacenamiento.
La apariencia de estas piezas
es todavía aceptable, pero al
abrir el empaque se percibe
un olor desagradable, lo que
indica que ya inició el proceso
de descomposición.
Piezas con un mayor número
de días de almacenamiento,
lo que ya generó cambios en
el color (verdoso) y la
consistencia de la carne.
(Se observa un termógrafo
entre las piezas, utilizado
para monitorear si la cámara
fría trabaja adecuadamente).
56
a. Tecnica de lavado para determinar contenido
microbiológico en pollo.
La cantidad de
microorganismos puede ser
determinada a través de la
técnica de lavado de la canal
o pieza de pollo.
Colocar la pieza o canal
(muestra) en una bolsa de
plástico.
Verter dentro de la bolsa 100
ml de solución buferada de
fosfatos (PBS).
57
´
Agitar la bolsa cerrada durante
1 minuto para realizar el
lavado de la canal o pieza.
Sacar la canal o pieza de la
bolsa. El lavado que queda es
la muestra para la siembra
bacteriológica que será
trabajada en el laboratorio.
Figura 17. Preparación de muestras para técnica de lavado.
Una vez realizados todos los lavados necesarios las
muestras deben colocarse en una hielera con hielo para ser
transportadas al laboratorio de microbiología.
En el laboratorio deberá contarse con el material necesario
para trabajar las muestras de los lavados, el cual consiste en:
 5 tubos con 9 ml. de PBS estéril por cada muestra
 Homogenizador o Vortex
 Pipeta de 1 ml.
 Puntas desechables
 Mechero
 Placas para siembra de aerobios totales
58
Preparar el material
necesario.
Tomar 1 ml del líquido de
lavado.
Colocar en un tubo que
contenga 9 ml de PBS
estéril.
59
Homogenizar este tubo.
Tomar 1 ml de este tubo
para transferirlo a otro
tubo que contenga 9 ml
de PBS estéril, realizando
la primera dilución.
Repetir este paso 5 veces
para completar 5
diluciones decuples
seriadas.
De las últimas tres
diluciones, tomar 1 ml y
sembrar en una
microplaca de cultivo para
aerobios totales (estas
placas ahorran tiempo en
la preparación de cajas de
petri con medio de
cultivo).
60
Incubar las microplacas
por 48 horas a 37° C.
Transcurridas las 48
horas, contabilizar las
colonias en cada una de
las microplacas.
De acuerdo a la dilución,
se obtendrá el número
total de colonias y se
obtendrá el logaritmo de
este número.
También se puede hacer
evaluación de coliformes
como indicador sanitario.
Figura 18. Sembrado de las muestras de lavado en laboratorio.
61
Los establecimientos TIF son instalaciones donde se
procesan animales de abasto y se envasan, empacan,
refrigeran o industrializan productos y subproductos de origen
animal para consumo humano. Estos establecimientos están
sujetos a regulación de la Secretaría de Agricultura, Ganadería,
Desarrollo Rural, Pesca y Alimentación, a través de la
reglamentación que establece la Ley Federal de Sanidad
Animal y su reglamento, así como las normas NOM-033-ZOO-
1995, NOM-008-ZOO-1994, NOM-009-ZOO-1994 y sus
modificaciones. En estas leyes se establecen las condiciones
zoosanitarias y sistemas de reducción de peligros de
contaminación, física, química y microbiológica a través de la
aplicación de Buenas Prácticas de Producción, Buenas
Prácticas de Manufactura, Procedimientos Operacionales
Estandarizados de Saneamiento, Análisis de Peligros y Control
de Puntos Críticos en los establecimientos, así como el
bienestar animal. El sistema TIF se autoriza a petición de parte
y previo cumplimiento de las disposiciones que se establecen
en la reglamentación antes mencionada (SENASICA, 2013).El
sello TIF es símbolo de calidad higiénico-sanitaria debido al
control de los procesos con fines de prevención de riesgos, por
esto debe contar con médicos veterinarios oficiales o
responsables autorizados que realicen la inspección o
verificación de los procesos para garantizar que los alimentos
sean inocuos (Ley Federal de Sanidad Animal, Artículos 1, 2, 3,
4, 6 51, 107, 154, SENASICA 2013).
62
Los beneficios del sistema TIF para la industria cárnica
son principalmente la aceptación del consumidor, ya que ofrece
garantía de calidad sanitaria con la que fue elaborado el
producto. Además facilita la movilización dentro del país, y en
cuanto al mercado internacional, los establecimientos TIF son
los únicos elegibles para exportar, ya que son equivalentes a
estándares internacionales de calidad e higiene (SENASICA
2013).Los principales giros que se certifican como TIF son:
sacrificio de animales de abasto, corte y deshuese, frigoríficos,
productos de transformación como son los productos
embutidos, marinados, enlatados, alimentos listos para
consumo, etc. (SENASICA 2013). En México actualmente
existen 24 plantas de procesamiento de aves certificadas como
TIF. En los cuales se procesaron en 2012: 792,135,016 aves
(Unión Nacional de Avicultores 2013).
a. Calidad microbiológica en plantas TIF
La microbiota de las canales después del eviscerado
consta principalmente de mesófilos, los cuales pueden alcanzar
de 102
a 104
bacterias/cm2
. Esta microbiota varía dependiendo
de las condiciones de manipulación en el resto del
procesamiento. Las plantas TIF llevan a cabo controles con la
finalidad de evitar el incremento de peligros microbiológicos
principalmente. El control más importante es la refrigeración, ya
que evita la multiplicación de enterobacterias, las cuales
prevalecen en condiciones de mala refrigeración arriba de 4°C
(Dainty y Mackey 1992).
63
Bajo condiciones de refrigeración, en corto tiempo las
bacterias psicrófilas como Pseudomonas spp. constituyen del
50 al 90% de la población microbiana, inhibiendo de alguna
forma la multiplicación de bacterias patógenas (Dainty y
Mackey 1992).
Gracias al Macroproyecto “Indicadores de calidad en la
cadena de producción de carne fresca en México”, fue posible
realizar un muestreo en rastros TIF procesadores de carne de
pollo ubicados en el Centro y Sur de México. Se utilizó la
técnica de lavado para obtener los conteos bacterianos, los
resultados obtenidos se muestran a continuación:
Cuadro 3. Conteos en rastros TIF procesadores de pollo
UFC/ml Log10
Mesófilos aerobios Coliformes
Centro 4.99 3.81
Sur 3.88 2.79
Los indicadores sanitarios publicados en la NOM-093-
SSA1-1994, muestran únicamente los valores recomendados
para el caso de carne cocida, por lo que no existe una
referencia para este tipo de indicadores sanitarios para la carne
de pollo. Sin embargo, es importante considerar que la carga
inicial de las canales, es decir el número de bacterias que
posee una canal al finalizar su procesamiento y estar lista para
su comercialización, afecta la vida de anaquel.
64
Es conocido que un incremento en la carga inicial resulta
en un decremento de la vida de anaquel. Smith et al. (2007)
reportaron que la carga bacteriana de una canal procesada
muestra valores de coliformes de 3.7 log de UFC/ml, mientras
que cuando se presenta contaminación interna este valor se
incrementa a 4.5 log de UFC/ml, y con contaminación externa
el valor se incrementa aún más (5.0 log UFC/ml).
En los resultados obtenidos en los rastros TIF, los
conteos de coliformes son menores a los resultados de Smith
et al (2007) en los casos de contaminación externa e interna, y
similares a los conteos de coliformes en el caso de los rastros
ubicados en el centro del país, mientras que los resultados
obtenidos en los rastros al sur muestran conteos menores. Lo
anterior indica que el sistema TIF logra conteos bajos de
coliformes y aerobios totales, además de que promueven la
reducción de riesgos de contaminación de los productos
avícolas.
Como ya se mencionó anteriormente, la vida de anaquel
representa el periodo de tiempo en almacenaje en que un
producto alimenticio es apto para consumo. Más allá de este
periodo, la carne presenta cambios en olor, color, sabor,
textura y apariencia que hace que el producto sea inaceptable.
Por sus características bioquímicas la carne experimenta
deterioro progresivamente desde la matanza hasta el consumo.
La composición nutricional de la carne representa un medio
óptimo para el crecimiento microbiano.
65
En el caso de la carne de pollo, el crecimiento
microbiano es por mucho el factor más importante en la
descomposición, siendo la temperatura de almacenamiento el
segundo factor que determina la duración de la vida de
anaquel. Bilgili (2001) mostró que las cargas microbianas
iniciales de 104
células/cm2
desarrollaron limo (signo de
descomposición) en 16 días bajo una temperatura de
almacenamiento de cero grados centígrados. Es importante
considerar que cuando se realiza el conteo de cargas
microbianas por lavado, comparado con la determinación por
cm2
, la primera será mayor comparada con la segunda, debido
a que la técnica de lavado hace un barrido de la superficie
interna y externa de la canal o pieza, lo que debe considerarse
cuando se comparan resultados experimentales.
En el caso de los muestreos en rastros TIF, los conteos
de mesófilos muestran que las canales obtenidas de la zona
centro poseen una carga microbiana mayor, lo que hace que el
manejo de este pollo debe ser con una rigurosa vigilancia de la
cadena de frío, ya que en el mismo estudio de Bilgili (2001)
muestra que las canales de pollo con la carga inicial de
104
células/cm2
pero almacenado bajo condiciones de 5°C la
vida de anaquel se redujo a 5 días. En cuanto a los rastros en
la zona Sur, los conteos de mesófilos aerobios fueron menores
a 4 Log10 UFC/ml, sin embargo la diferencia es solo 0.12 Log10
UFC/ml por lo que del mismo modo será crítica la temperatura
de almacenamiento para lograr una vida de anaquel
prolongada.
66
b. Comercialización de la carne de pollo en
Mexico.
Los tejidos internos en un animal sano se encuentran
libres de bacterias al momento de la matanza, sin embargo,
cuando a la misma ave ya procesada se le examina su calidad
microbiológica a nivel de comercialización, se observa una
variación en número y tipos de bacterias. Además una canal
completa tiende a mostrar conteos bacterianos menores
comparados con las piezas.
La mayoría de los microorganismos se encuentran en la
superficie, por esta razón se realiza conteo de bacterias por
cm2
. Sin embargo, es importante considerar que en este tipo de
muestreo existe la probabilidad de tomar el hisopo en un área
altamente contaminada que no sea representativa de la
superficie total de la canal. Mulder (1996) mostró como los
conteos se incrementan a través de las etapas sucesivas del
procesamiento, ya que su estudio reportó que canales
completas de seis plantas de procesamiento, la carga inicial fue
de 3.30 log10 UFC/cm2
. Después de que el pollo fue cortado la
media total se incrementó a 3.80 log10 UFC/cm2
. Después del
empaque se observó nuevamente un incremento a 4.08 log10
UFC/cm2
. Mientras que después del transporte de los cortes se
observó un incremento de 4.76 log10 UFC/cm2. De aquí la
importancia de mantener un eficiente programa de limpieza y
desinfección de equipos e instrumentos para tratar de que los
incrementos en los conteos bacterianos sean mínimos.
67
´
Pero además, se deberán tomar medidas durante la
comercialización de la carne de pollo para evitar que ésta
represente una oportunidad para incrementar de manera
significativa las cargas bacterianas.
La clasificación comercial del pollo en México en 2012
está dividida en 6 tipos, los cuales se presentan a continuación
con el porcentaje que comprende cada uno (Unión Nacional de
Avicultores, 2013).
Figura 19. Clasificación comercial de pollo en México.
En la comercialización del pollo, el mayor sector
corresponde al mercado de pollo vivo, éste es llamado así
porque los comercializadores compran un lote de aves, las
cuales son transportadas al punto de venta, el cual cuenta con
corrales donde las aves son descargadas, esta instalación
cuenta con bebederos y comederos, donde las aves
descansan, se alimentan y están listas para su venta.
Pollo vivo
33%
Mercado
público
19%
Piezas
6%
PVA
4%
PVA: Productos con Valor Agregado (Alitas, nuggets, etc).
68
Super
mercado
12%
Rosticero
26%
Este tipo de clasificación mostró un incremento de 2%
con respecto a 2011. Los consumidores pueden observar a las
aves y escoger el pollo que desean comprar, una vez que
indican cual desean, el personal del punto de venta procede a
matar al ave de modo artesanal y le entrega al consumidor una
canal con vísceras y “caliente”. El término pollo “caliente” se
refiere al hecho de que después de la remoción de las plumas
de la canal, esta no es enfriada y se entrega al consumidor.
El pollo tipo Mercado público es el tipo de presentación
donde las aves son pigmentadas (se adicionan pigmentos
naturales en el alimento), de 49 días, con pesos promedio entre
2.8 y 3 Kilogramos. Estas aves se procesan en rastros, ya sea
TIF, privados o municipales, de los cuales se obtienen canales
completas y evisceradas. Este tipo de presentación se redujo
1% con respecto a 2011. Se comercializa en mercados
establecidos o fijos, expendios, supermercados, mercados de
abasto y mercados sobreruedas.
Figura 20. Pollo tipo mercado público.
69
El tipo pollo rostizado mostró un incremento de 2% con
respecto a 2011, este tipo de aves son de menor tamaño,
corresponden a la edad de 35 días, con peso promedio entre
1.8 a 2.2 Kilogramos. Se procesan igualmente en rastros TIF,
privados o municipales, para obtener canales blancas (no se
les adiciona pigmento en su alimento) y evisceradas para ser
pintadas durante su procesamiento. Este tipo de canales se
comercializa en puntas de venta donde son cocinados y se
vende como un producto listo para consumirse.
El pollo tipo supermercado
disminuyó 3% con respecto a 2011, este
tipo de pollo se procesa únicamente en
rastros TIF, ya que es requerimiento de
este tipo de tiendas. Puede ser pollo
pigmentado o pollo blanco según la zona
geográfica donde se encuentre el punto
de venta y es comercializado pollo de 49
días, como canal completa.
El consumo y producción de carne de pollo ha mostrado
un notorio crecimiento a nivel nacional y mundial, gracias a la
diversificación de productos disponibles en el mercado, lo da a
los consumidores alternativas de adquirir productos con un bajo
nivel de preparación (cortes o piezas) hasta productos listos
para su consumo como son los productos con valor agregado.
Figura 21. Pollo tipo
supermercado.
70
Figura 22. Pollo en piezas.
El pollo en piezas es aquella
canal que es cortada y empacada
en la planta de procesamiento,
esta presentación se considera
parte de los productos con valor
agregado debido a que el corte se
considera ya un procesamiento
adicional a todos los pasos que
comprenden obtener una canal
completa (procesamiento
primario).
El valor es adicional, dadas las necesidades del
consumidor de utilizar solo partes del pollo para su consumo.
Este tipo de pollo mostró un descenso de 1% con respecto a
2011, ya que actualmente corresponde a 6%. Este tipo de pollo
es procesado en plantas TIF, rastros privados y municipales.
Los productos con valor agregado, comprenden todos
aquellos productos listos para consumirse y que van desde los
marinados, hasta productos cocidos como los nuggets. Este
tipo de productos mostró un incremento de 1% con respecto a
2011. Este tipo de productos pueden ser elaborados en plantas
TIF, rastros privados o municipales, sin embargo estos
establecimientos deben contar con cierto nivel de tecnificación
para lograr marinados, cubiertas o empanizados, cocciones u
horneados a gran escala.
71
Figura 23. Productos con Valor Agregado
A continuación se presentan los resultados de los
muestreos bacteriológicos realizados en puntos de venta a
nivel nacional.
Cuadro 4. Resultados de muestreos en puntos de venta.
Punto de venta Zona
Geográfica
Mesófilos
aerobios
Log UFC/ml
Coliformes
Log UFC/ml
Distribución a
mayoreo
Centro 6.96 6.58
Norte 5.31 4.57
Expendio Sur 5.74 4.63
Mercado Centro 5.99 5.124
Público Norte 5.97 4.65
Sur 6.08 4.96
Mercado
sobreruedas
Centro 6.19 5.27
Supermercado Centro 5.02 4.04
Norte 4.17 5.50
Sur 5.68 4.92
72
Estos resultados denotan el inadecuado manejo que se
realiza de la carne de pollo en nuestro país, ya que si
comparamos que en la zona Sur, el pollo obtenido en plantas
TIF obtuvo un resultado en mesófilos de 3.88 UFC Log10, en los
puntos de venta de esa zona es posible observar que existe un
incremento en estos conteos de 1.86 de logaritmo cuando el
pollo proviene de expendio, mientras que en el mercado
público este incremento es de 2.2 logaritmos, y el menor
incremento corresponde al supermercado, el cual fue de 1.8 de
logaritmo.
En cuanto a coliformes, se mostraron incrementos
mayores, ya que el pollo que proviene de expendio presenta
una diferencia de 1.84 de logaritmo, el pollo de mercados
públicos tiene el incremento más alto, ya que se observa una
diferencia de 2.17 de logaritmo con respecto a las poblaciones
de coliformes obtenidas en plantas TIF de la misma zona,
finalmente el incremento observado para el supermercado en
esta misma zona fue de 2.13 de logaritmo. Esto indica que las
condiciones de manejo de canales deben mejorarse una vez
que estas salen de la planta de procesamiento. Sin embargo,
esto no será suficiente si no se logra una cadena de frío que
asegure que no existen oportunidades de crecimiento de las
bacterias que posee la canal como carga total una vez que
finaliza el procesamiento primario.
73
Adams R.M. and Moss M.O. Food microbiology. 3
rd
Edition. 2008. Guildford
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Calidad microbiológica de la carne de pollo.

  • 1. María del Pilar Castañeda Serrano Diego Braña Varela Cecilia Rosario Cortés Wendy Martínez Valdés Facultad de Medicina y Zootecnia. Universidad Nacional Autónoma de México. Centro Nacional de Investigación Disciplinaria en Fisiología y Mejoramiento Animal, Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias Ajuchitlán, Colón, Querétaro Octubre de 2013 Libro técnico No. 9 ISBN: 978-607-37-0096-2 Calidad Microbiológica de la Carne de Pollo
  • 2. DIRECTORIO INSTITUCIONAL SECRETARIA DE AGRICULTURA, GANADERÍA, DESARROLLO RURAL, PESCA Y ALIMENTACIÓN LIC. ENRIQUE MARTÍNEZ Y MARTÍNEZ Secretario LIC. JESÚS AGUILAR PADILLA Subsecretario de Agricultura PROF. ARTURO OSORNIO SÁNCHEZ Subsecretario de Desarrollo Rural LIC. RICARDO AGUILAR CASTILLO Subsecretario de Alimentación y Competitividad DR. FRANCISCO JOSÉ GURRÍA TREVIÑO Coordinador General de Ganadería INSTITUTO NACIONAL DE INVESTIGACIONES FORESTALES, AGRÍCOLAS Y PECUARIAS DR. PEDRO BRAJCICH GALLEGOS Director General DR. SALVADOR FERNÁNDEZ RIVERA Coordinador de Investigación, Innovación y Vinculación MSc. ARTURO CRUZ VÁZQUEZ Coordinador de Planeación y Desarrollo CENTRO NACIONAL DE INVESTIGACIÓN DISCIPLINARIA EN FISIOLOGÍA Y MEJORAMIENTO ANIMAL DR. CÉSAR AUGUSTO MEJÍA GUADARRAMA Director
  • 3. María del Pilar Castañeda Serrano Diego Braña Varela Cecilia Rosario Corté s Wendy Martínez Valdé s Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad Nacional Autónoma de México. Centro Nacional de Investigación Disciplinaria en Fisiología y Mejoramiento Animal. Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias. Editor Dr. Diego Braña Varela, coordinador del Macroproyecto “Indicadores de calidad en la cadena de producción de carne fresca en México” con registro y fondos de SAGARPA- CONACYT No. 109127. Ajuchitlán, Colón, Querétaro Octubre de 2013 Libro Técnico No. 09 ISBN: 978-607-37-0096-2 Cecilia Rosario Cortes´ ´Wendy Martínez Valdez
  • 4. Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias Progreso No. 5, Barrio de Santa Catarina Delegación Coyoacán C.P. 04010 México, D.F. Tel (55)38718700 ISBN: 978-607-37-0096-2 Editor Dr. Diego Braña Varela Primera Edición, Octubre 2013 No está permitida la reproducción total o parcial de esta publicación, ni la transmisión de ninguna forma o por cualquier medio, ya sea electrónico, mecánico, fotocopia, por registro u otro método, sin el permiso previo y por escrito de la Institución.
  • 5. 1. Introducción .............................................................................. 1 2. Principales patógenos en la carne de pollo............................... 3 a. Salmonella spp............................................................... 4 b. Campylobacter jejuni. .................................................. 11 c. Listeria monocytogenes ............................................... 14 d. Escherichia coli ............................................................ 15 3. Criterios microbiológicos ......................................................... 16 4. Métodos de detección de patógenos ...................................... 18 a. Cultivo Microbiológico .................................................. 18 b. Inmunológicos.............................................................. 20 c. Técnicas de biología molecular: PCR........................... 21 d. Métodos de muestreo .................................................. 22 5. Efecto del procesamiento sobre la microbiota de las canales. 25 a. Recepción del pollo de engorda................................... 27 b. Escaldado .................................................................... 30 c. Desplumado................................................................. 33 d. Eviscerado ................................................................... 34 e. Lavado ......................................................................... 35 f. Enfriado de la canal ..................................................... 36 g. Corte y deshuese......................................................... 38 h. Empacado.................................................................... 40 6. Descontaminación de canales ................................................ 44 7. Métodos de conservación ....................................................... 48 a. Refrigeración................................................................ 48 b. Congelación ................................................................. 49 c. Cadena de frío ............................................................. 50 d. Importancia de la cadena de frío.................................. 51 8. Manejo adecuado de la carne de pollo ................................... 52 9. Vida de anaquel ...................................................................... 54 10. Establecimientos Tipo Inspección Federal (TIF) .................. 62 a. Calidad microbiológica en plantas TIF ......................... 63 b. Comercialización de la carne de pollo en México......... 67 11. Referencias Bibliográficas..................................................... 74 Glosario…………………………………………………………81
  • 6. La demanda mundial de carne de pollo se ha incrementado en los últimos años debido a su precio comparativamente bajo con otras carnes y ser, además, una excelente fuente de proteína (FAO 2008). La producción estimada mundial de carne de ave en 2012 fue de 104.9 millones de toneladas, con un pronóstico para 2013 de 106.8 millones de toneladas, lo que implica un aumento del 1.8% con respecto del 2012 al 2013, siendo la carne que mayor crecimiento muestra en cuanto a producción mundial (FAO 2013). El consumo per-cápita de carne de pollo fue de 25.8 kg en 2012 (Unión Nacional de Avicultores, 2013), aunque los hábitos de consumo en las diferentes regiones del país dependen de factores sociales, económicos y culturales. En general la carne de pollo se consume en sus diferentes cortes: pechuga, pierna y muslo, retazo y surtida. El centro del país demanda aproximadamente el 70% de la producción nacional. En México aproximadamente:  52’247,420 toneladas de la producción nacional de pollo se procesa en rastros Tipo Inspección Federal (TIF),  119,070 toneladas en rastros municipales  5’364,100 toneladas en rastros privados. 1
  • 7. La importancia de estos datos, es reconocer el impacto del manejo del pollo en la incidencia de Enfermedades Transmitidas por Alimentos (ETAs). Es decir las enfermedades que se transmiten por consumo de alimentos y en este caso de la carne de pollo en específico. Un ámbito prioritario de la cadena de producción avícola es la mejora en la manera de procesar y manejar los alimentos para evitar que los consumidores enfermen por consumo de estos. Para lograr este objetivo es necesario desarrollar e implementar programas de reducción de patógenos como el sistema Tipo Inspección Federal (TIF) y otro programa llamado Análisis de peligros y puntos críticos de control (HACCP), por sus siglas en inglés. Estos programas tienen como objetivo procesar los alimentos bajo las mejores condiciones (sanitarias) para evitar que representen un riesgo para los consumidores, en otras palabras tienen como meta el procesamiento de alimentos inocuos. Por lo tanto este manual tiene el objetivo de explicar algunos aspectos de la calidad microbiológica de la carne de pollo, esto significa brindar información que sea útil para los consumidores de pollo, acercarlos con algunos aspectos relacionados con el significado de la presencia de bacterias en las canales de pollo. Sin olvidar que el tipo de bacterias que podemos encontrar en una canal deben ser consideradas en dos grupos; las que causan descomposición y las que causan enfermedad en los consumidores. Las bacterias que causan descomposición en la carne de pollo son aquellas relacionadas 2
  • 8. con la vida útil o vida de anaquel, lo que significa el periodo de tiempo en el cual el alimento es apto de ser consumido. Mientras que las bacterias presentes en un producto cárnico que causan enfermedad gastrointestinal o ETA (por sus siglas: Enfermedad de Transmisión Alimentaria) en las personas que lo consumen, se les conoce como bacterias patógenas. Los tipos de microorganismos que pueden causar enfermedad en los consumidores se dividen en: virus, bacterias, hongos y parásitos, de los cuales las bacterias son responsables de más del 90% de los casos confirmados de ETA´s. Las 5 bacterias asociadas a ETA´s, más frecuentes son: Campylobacter spp., Salmonella (no tifoidea), Escherichia coli O157: H7, Escherichia coli y Listeria monocytogenes (Eberle, 2012). Las poblaciones bacterianas en las canales de pollo, están determinadas por el tipo de poblaciones de bacterias en el tracto gastrointestinal de las aves en la granja, así como de las bacterias que se agregan cuando se maneja el ave antes de su matanza y después de ella. Sin embargo en nuestro país la comercialización es muy diversa y muchas ocasiones por idiosincrasia la carne no es manejada bajo buenas prácticas de higiene lo que causa que la carne de ave sea un alimento frecuentemente implicado en enfermedad gastrointestinal. 3
  • 9. Los patógenos reportados en productos avícolas son: Campylobacter spp., Clostridium botulinum, Clostridium perfringens, Erysipelothrix rhusiopathiae, Escherichia coli O157: H7, Listeria monocytogenes, Mycoplasma gallisepticum, Mycoplasma synoviae, Pasteurella multocida, Riemerella anatipestifer, Salmonella spp., Staphylococcus aureus, Vibrio spp. y Yersinia enterocolitica. Sin embargo recientes estudios demuestran que en caso de carne de ave, Salmonella spp. y Campylobacter spp. son las causas más comunes de ETAs vinculadas, mientras que L. monocytogenes es un problema grave asociado a productos procesados de carne de ave (Keklik, 2010). A continunuación se describen estos patógenos: a. Salmonella spp. Salmonella ha sido establecida como una de las causas más importantes de enfermedad de transmisión alimentaria en el mundo (Adams y Moss, 2008). La enfermedad causada por esta bacteria se conoce como salmonelosis, la cual es una infección gastrointestinal causada por varios serotipos de Salmonella (se conoce con este nombre a las variedades de un mismo agente, éstas son determinadas por pruebas de laboratorio). Salmonella es un bacilo gram-negativo, móvil, no formador de esporas perteneciente a la familia Enterobacteriaceae. Su crecimiento ha sido reportado desde 5°C hasta 47°C con un óptimo de 37°C, aunque Samonella es sensible al calor y es fácilmente destruida a temperaturas de pasteurización (Adams y Moss, 2008). 4
  • 10. Entre ellas se puede encontrar Salmonella entérica serovar. Typhi y Paratyphi A,B, y C, responsables de la fiebre tifoidea. Pero también podemos encontrar la salmonelosis no- tifoidea causada por otros serotipos diferentes a S. Typhi y S. Paratyphi A. Sin embargo reportes científicos han determinado que los 6 serotipos más frecuentemente aislados de humanos son: Salmonella Typhimurium (19.2%), Salmonella Enteritidis (14.1%), Salmonella Newport (9.3%), Salmonella Javiana (5%), Salmonella Heidelberg (4.9%), y Salmonella Montevideo (2.4%) (Anderson 2004) Como se mencionó anteriormente, Salmonella puede causar dos tipos de enfermedad, que dependen del serotipo, y se describen a continuación: Salmonelosis no-tifoideas: Estas enfermedades son causadas por otros serotipos diferentes a S. typhi y S. paratyphi A. Los síntomas de Salmonelosis no-tifoidea son bastante desagradables, sin embargo esta enfermedad es auto-limitante, es decir tiene un ciclo que comienza y termina en un tiempo programado, entre personas sanas con un sistema inmune intacto (aunque puede causar enfermedad grave aún en personas sanas). Mortalidad: Menor a 1%, sin embargo S. enteritidis tiene reportes de hasta 3.6% de mortalidad en brotes en hospitales y asilos, por lo que la gente anciana es afectada más severamente. 5
  • 11. Aparición: 6 a 72 horas después de la exposición. Dosis infectante: Tan baja como una célula, dependiendo de la edad y salud del huésped, así como de la cepa por las diferencias que existen entre miembros del mismo género. Síntomas: Nausea, vómito, dolores abdominales, diarrea, fiebre y dolor de cabeza. Complicaciones: Puede presentarse deshidratación y desbalance electrolítico como resultado de la diarrea y del vómito. Esto puede desencadenar la muerte en personas jóvenes, ancianos y personas inmunocomprometidas si no son tratadas inmediatamente. Otra presentación grave se puede presentar cuando Salmonella puede escapar del tracto gastrointestinal hacia el cuerpo y puede causar septicemia, por tanto ésta puede migrar a órganos internos y articulaciones. Ruta de entrada: oral (ingestión de alimento contaminado, partículas fecales o agua contaminada). Vía: Penetración en el organismo y paso de Salmonella del tracto gastrointestinal al epitelio del intestino delgado donde se presenta inflamación (Lampel 2012). Fiebre Tifoidea Enfermedad severa la cual posee un alto índice de mortalidad, causada por serotipos de S. typhi y S. paratyphi A, los cuales son encontrados solamente en humanos. 6
  • 12. Mortalidad: En pacientes no tratados, tan alta como 10% Aparición: Generalmente de 1 a 3 semanas, pero puede llegar a ser tan larga como 2 meses después de la exposición. Dosis infectante: Menor a 1000 células Síntomas: Fiebre elevada de 39.4 a 40°C. letargia, síntomas gastrointestinales que incluyen dolor abdominal, diarrea, constipación, dolor de cabeza, pérdida del apetito. Duración: Generalmente 2 a 4 semanas Complicaciones: Septicemia con colonización de otros tejidos y órganos, puede presentarse artritis séptica, en la cual la infección afecta directamente articulaciones y puede amenazar la vida. Puede ocurrir también infección crónica de la vesícula biliar, lo cual puede causar que la persona infectada se convierta en portadora. Ruta de entrada: Oral (ingestión de alimento contaminado, partículas fecales o agua contaminada) (Mossel, 2003). Vía: Penetración y paso de los microorganismos de Salmonella del lumen del tracto gastrointestinal hacia el epitelio del intestino delgado y de ahí al torrente sanguíneo, por lo tanto puede causar una septicemia, lo que puede producir que el microorganismo pase a otros sitios en el organismo, donde ocurre la inflamación (Lampel 2012). 7
  • 13. Salmonella y la avicultura En la avicultura el principal riesgo de Salmonella es cuando existe un estado sanitario deficiente en los alojamientos, y se descuidan la salud de los animales, la calidad del alimento, agua y material de cama, así como la presencia de fauna nociva y la entrada de vehículos contaminados. Cuando se introduce Salmonella a las granjas se propaga rápidamente a través de polvo, heces que arrastran los trabajadores dentro de la granja y contaminación del agua. Este microorganismo se establece rápidamente en las superficies de la caseta y se mantiene gracias a la formación de biocapas (biofilms). Marin (2009) evaluó el desarrollo de biofilms a lo largo de la crianza de pollo de engorda mediante un método de fluorescencia para determinar la presencia de Salmonella. Se tomaron muestras de heces, polvo, superficies, tanque de agua, bebederos, basura y superficies de los camiones de transporte. El serotipo más frecuentemente aislado fue Salmonella enteritidis y alrededor 50% de los serotipos fueron capaces de producir biofilm. Se observó que el uso de glutaraldehído, formaldehído, y de peroxígeno al 1% en condiciones de campo son insuficientes para la eliminación de Salmonella. Se ha observado que Salmonella enteritidis, Salmonella seftenberg, Salmonella typhimurium, Salmonella braenderup y Salmonella mikawasima aislados de pollo de engorda y gallinas de postura tiene la capacidad de formar biofilms muy resistentes. 8
  • 14. La alta prevalencia de Salmonella en productos avícolas ha llevado a varios estudios para reducir la contaminación de los alimentos. El uso de bacterias ácido lácticas ha tenido éxito en la reducción de diversos patógenos en carne molida de res y ganado, incluida la Salmonella. Para evitar la transmisión deben tomarse medidas en el manejo de los animales en granja, incluyendo adecuados sistemas de cría, medidas de protección para agua y alimento, con lo que se evita su contaminación, y se logra la disposición higiénica de desperdicios y el mantenimiento de un ambiente limpio. Asimismo es importante evitar la transferencia de Salmonella entre los animales, ya que situaciones donde estos son sometidos a condiciones de estrés y hacinamiento, tales como el transporte o la espera en andén de las parvadas para su entrada a la planta de procesamiento, aumentan las posibilidades de transmisión de la enfermedad. Por lo que siempre será mejor minimizar estos efectos, al evitar las situaciones estrés, así como asegurando ambientes limpios (Adams y Moss, 2008). Un factor importante por el que se ha mantenido el ciclo de infección por Salmonella en el alimento para animales ha sido la práctica de usar sub-productos de animales para elaborarlo, tales como pastas de carne y hueso. Por lo tanto es fundamental someter a estos productos a procesos térmicos para destruir cualquier Salmonella presente. 9
  • 15. Sin embargo, es importante considerar que pueden quedar sujetos a contaminación post-proceso, ya sea en la planta o en la granja, por contacto con material no-procesado, con aves, o heces de roedores u otra fauna (Adams y Moss, 2008). Figura 1. Ave tratando de eliminar calor a través del jadeo, favorece la presentación de estrés y por lo tanto el inicio de problemas de calidad de la carne, desde el punto de vista bioquímico y microbiológico. Un factor importante por el que se ha mantenido el ciclo de infección por Salmonella en el alimento para animales ha sido la práctica de usar sub-productos de animales para elaborarlo, tales como pastas de carne y hueso. 10
  • 16. Por lo tanto es fundamental someter a estos productos a procesos térmicos para destruir cualquier Salmonella presente. Sin embargo, es importante considerar que pueden quedar sujetos a contaminación post-proceso, ya sea en la planta o en la granja, por contacto con material no-procesado, con aves, o heces de roedores u otra fauna (Adams y Moss, 2008). b. Campylobacter jejuni Campylobacter en una bacteria perteneciente a la familia Campylobacteraceae. Las dos especies más comunes, Campylobacter jejuni y Campylobacter coli, representan aproximadamente el 89% de las campilobacteriosis humana. Es el patógeno más frecuente de gastroenteritis bacteriana, es responsable de 400 a 500 millones de casos de infección cada año en todo el mundo (EFSA, 2010 y CDC, 2011). Existe una fuerte asociación entre Campylobacter jejuni y las aves de corral, pues se ha observado que más de 80% de las parvadas listas para procesar son positivas a este patógeno (Herman 2003, EFSA, 2010). Además existe evidencia de que las aves de corral pueden ser la principal fuente de infección por campilobacteriosis en humanos (Hermans 2012, Line, 2013). Estudios epidemiológicos han demostrado que del 50 al 70% de campilobacteriosis en humanos se debe al consumo de productos avícolas (Harris 1986, Keener 2004). La campilobacterosis causa diarrea, dolor abdominal, fiebre, dolor de cabeza, náuseas y vómitos. 11
  • 17. Entre los padecimientos más graves causados por este patógeno se observa un trastorno autoinmune del sistema nervioso periférico, conocido como síndrome de Guillain-Barré en el que los individuos experimentan una disminución de la fuerza muscular en las extremidades y el sistema respiratorio. La transmisión puede darse por consumo de leche sin pasteurizar, carne de pollo cruda o poco cocida, agua contaminada o por alimentos contaminados con heces de personas o animales infectados (Eberle 2012). La campilobacteriosis tiende a ser auto limitante, aunque puede provocar efectos secundarios a largo plazo tales como la artritis reactiva y contribuir a la patogénesis de las enfermedades crónicas gastrointestinales (Melero 2013). Las aves pueden portar este microorganismo en piel, plumas y en el tracto gastrointestinal principalmente. La prevalencia de Campylobacter en las parvadas de pollo de engorda puede llegar al 100% una vez que se introduce en las explotaciones (Jeffrey 2001). Se ha reportado una prevalencia de 11,2% en el ciego de pollos, mientras que en piel es de 51% (Chokboonmongkol 2013). Por otro lado Padungtod y Kaneene (2005), reportan una prevalencia del 64% en muestras fecales. Sin embargo, en muchas unidades de producción se acostumbra el uso de promotores de crecimientos que consisten en la aplicación de antimicrobianos en pollitos con la finalidad de disminuir patógenos en el tracto digestivo. 12
  • 18. Estos datos sugieren que durante el procesamiento se facilita la contaminación cruzada entre contenido cecal y piel. Estos efectos están relacionados a los cambios tecnológicos y prácticas de higiene durante el procesamiento El principal reservorio, es decir el sitio donde Campylobacter se establece y se reproduce es el tracto gastrointestinal de las aves especialmente el ciego y buche. Durante el procesamiento, cuando se realiza la remoción de vísceras una vez que la canal fue desplumada y enjuagada, se presenta la posibilidad de ruptura de estas estructuras por lo que este microorganismo puede ser transferido a la canal en donde sobrevive en la ausencia de la microbiota (población bacteriana que se mantiene en el tracto gastrointestinal) competidora. Debido a que durante el procesamiento de las aves el ambiente no es estéril, muchas bacterias psicrófilas comúnmente asociadas al deterioro de las canales, pueden reducir los números de C. jejuni, Aunque P. aeruginosa puede afectar la supervivencia de C. jejuni, la dinámica microbiana de la carne es muy compleja y el antagonismo bacteriano es variable para diferentes productos procesados bajo diversas situaciones (Davis 2007). Durante la implantación de programas HACCP, es fundamental prestar total atención a las medidas de control que proveen este sistema para asegurar el abastecimiento de carne de pollo libre de Campylobacter. 13
  • 19. Arcobacter, otro miembro de la familia Campylobacteraceae se ha relacionado como fuente de infección en humanos debido al consumo de productos crudos de ave o poco cocinados. Se ha aislado de canales de aves y de equipos de plantas de procesamiento, pero no del contenido intestinal, fecal y plumas, por lo que la colonización de las aves con este microorganismo es actualmente contradictorio, sin embargo, algunos autores han reportado el aislamiento a partir de muestreos con hisopos cloacales (Kabeya 2003, Atabay 2006). Van Driessche (2007) examinó muestras intestinales y de piel de pollos de engorda y no encontró a Arcobacter en ninguna muestra, por lo que sugiere que probablemente no es habitante normal en la carne de aves y que el agua de proceso puede ser una fuente potencial de contaminación. La aplicación de estrictas medidas de bioseguridad en las explotaciones agrícolas de manera integrada es capaz de reducir la prevalencia de Campylobacter en las parvadas de pollos de engorda, sin embargo, la contaminación cruzada durante el procesamiento podría generar altas prevalencias de Campylobacter en las canales (Chokboonmongkol 2013). c. Listeria monocytogenes La listeriosis es una importante enfermedad causada por la bacteria llamada Listeria monocytogenes, el cual es un problema de salud pública debido a las graves consecuencias como: meningitis o meningoencefalitis, septicemia y aborto (Melero 2013). 14
  • 20. La carne de pollo cruda, o mal cocinada, es la principal fuente de infección en humanos, y se ha observado que la multiplicación de este microorganismo no se da en carne empacada bajo atmósferas modificadas (bióxido de carbono) durante su almacenamiento en refrigeración. Otros reportes indican su presencia en alimentos listos para consumo. Van Nierop (2005) examinó muestras de canales de pollo en punto de venta y encontró 19.2% positivas a Listeria. Por su parte Lewis y Corry (1991) informaron que el 56% del pollo crudo en Reino Unido están contaminados. Osaili et al. (2011) indicó que la prevalencia de L. monocytogenes en pollo crudo fue del 9%. Otros estudios han mostrado altos porcentajes de L. monocytogenes en carne cruda por ejemplo: 36.1% en España, 60% en Portugal, 11.5% en Turquía y 21.6% en Italia (Goh 2012). Algunos países como Estados Unidos, Australia y Nueva Zelanda requieren tolerancia cero de L. monocytogenes en alimentos listos para el consumo, aunque en nuestro país no existe esta restricción reglamentaria, muchas plantas implementan controles para reducir este patógeno, sobre todo las empresas exportadoras. d. Escherichia coli Escherichia coli se encuentra en el tracto digestivo de mamíferos y aves. Algunas cepas se encuentran formando parte de la microbiota normal del intestino, sin embargo, ciertas cepas pueden causar enfermedad lo que representa un riesgo significativo para la salud. 15
  • 21. Algunas cepas causan enfermedad en animales y el hombre, entre ellas se encuentra la E. coli entero hemorrágica (EHEC) O157:H7, es decir causa enfermedad que cursa con cuadros de diarrea con sangre, debido a la hemorragia en intestino. La E. coli uropatógena (UPEC), es decir la que causa enfermedad del aparato urinario y la E. coli avian (APEC), cepa O1:K1:H7 que provoca cuadros de enfermedad (colibacilosis) en aves de corral. Se ha comprobado que E. coli posee un extenso espectro de resistencia a los antibióticos, lo cual representa un gran riesgo a la inocuidad alimentaria y una amenaza para la salud pública (Forgetta 2012). Un estudio realizado por Diarrassouba et al. (2007) sobre la resistencia a los antibióticos en granjas de pollos de engorda, mostró que E. coli. ECD-227, es resistente a 22 de 25 antibióticos probados. El criterio microbiológico para los alimentos define la aceptabilidad de éstos, sustentado en la ausencia o presencia de un microorganismo, en la cantidad basada en Unidades Formadoras de Colonia (UFC por sus iniciales, enumera a las bacterias, ya que cada una de ellas es capaz de formar una colonia bacteriana) o en la cantidad de toxinas producidas por la bacteria. 16
  • 22. Los criterios microbiológicos constan de una descripción de los microorganismos de interés, los métodos analíticos para su detección y/o cuantificación, definición del número de muestras de campo que hay que tomar, los límites microbiológicos que se consideran apropiados para el alimento y finalmente las medidas que deban adoptarse cuando no se cumple con dicho criterio (Codex alimentarius). Durante la aplicación de los criterios microbiológicos, se debe tener en cuenta lo siguiente:  Efecto del procesamiento sobre la microbiota del alimento.  La probabilidad de contaminación o incremento en el número de bacterias que pueden causar enfermedad durante el almacenamiento o procesamiento posterior.  Perfil inmunológico de los consumidores a quien está dirigido el alimento.  El uso del alimento en cuestión (listo para consumo, pre cocido, etc.) Los límites microbiológicos deberán basarse en datos microbiológicos apropiados para el alimento y tomando en cuenta datos recopilados en distintos establecimientos de producción que trabajan conforme a las buenas prácticas de higiene y aplican el sistema de HACCP. También hay que considerar las condiciones previstas de manipulación y consumo del alimento (Codex alimentarius). 17
  • 23. Los métodos de laboratorio para evaluar la presencia de microorganismos en alimentos y superficies que tienen contacto directo con estos, se basan en identificar y contar las bacterias en cuestión. Las técnicas más utilizadas son: cultivo microbiológico, inmunoensayo (ELISA) y biología molecular (PCR), esta última es utilizada por su gran sensibilidad, especificidad y rapidez. Los métodos de detección de microorganismos en alimentos deben seleccionarse teniendo en cuenta las siguientes características: a. Produzcan resultados en tiempo real b. Posean alta sensibilidad (detecten cantidades muy pequeñas) y especificidad (que detecten la bacteria específica y no se confundan con bacterias que puedan ser parecidas) c. No destructivos d. Que no requieran que la línea de procesamiento se detenga a. Cultivo Microbiológico El cultivo microbiológico se puede definir como la técnica de laboratorio para reproducir una bacteria, ya que ésta se expone a un medio que posee los nutrientes necesarios para su reproducción y en una cantidad suficiente que permita que sea identificada, ya que una bacteria es capaz de reproducirse hasta formar una colonia, es decir una población de bacterias. 18 ´
  • 24. Por lo tanto la identificación de microorganismos en medios de cultivo se realiza mediante visualización directa de las colonias, ya que presentan características morfológicas, además de otras características cuando son colocadas en medios de cultivo que poseen elementos específicos que facilitan su identificación, llamadas pruebas bioquímicas. Cuadro 1. Indicadores sanitarios en alimentos Indicador Superficie Límite Referencia Mesófilos aerobios Superficie viva < 3 000 UFC/cm2 NOM-093- SSA1-1994 Superficie inerte < 10 UFC/cm2 Coliformes totales Superficie viva < 400 UFC/cm2 Superficie inerte < 200 UFC/cm2 Carne cocida < 10 UFC/g Salmonella Superficie viva Ausencia NOM-114- SSA1-1994 Superficie inerte Depende del serotipo Algunas bacterias como coliformes totales, coliformes fecales, mesófilos aerobios y patógenos específicos como Salmonella y Staphylococcus son utilizados en la industria como “indicadores sanitarios”, la razón es porque su presencia indica prácticas sanitarias deficientes en el manejo 19
  • 25. de alimentos e higiene en los equipos. En el cuadro 1 se mencionan los indicadores sanitarios en alimentos, así como los límites que poseen cada uno de ellos y que las Normas Oficiales Mexicanas exigen. b. Inmunológicos Existen pruebas de laboratorio que tienen el objetivo de determinar la presencia de la bacteria en el alimento, algunas de ellas son capaces de cuantificar al microorganismo, además de que se consideran pruebas inmunológicas porque utilizan anticuerpos como los agentes que detectan estructuras de las bacterias (lipopolisacáridos, flagelos y fimbrias), lo cual permite su correcta identificación. Estas pruebas son muy utilizadas ya que son altamente específicas, lo que indica que es muy difícil que se unan a otro tipo de bacteria y se pueda obtener un resultado equivocado (falso positivo), es decir un resultado erroneo debido a que el anticuerpo se unió a otra bacteria presente, pero que no es la bacteria buscada. Entre las pruebas de laboratorio que se pueden utilizar se encuentra la conocida como ELISA (Enzime Linked Inmunosorbent Assay por sus siglas en inglés), ésta utiliza anticuerpos contra bacterias específicas. Existen pruebas comerciales variantes de las pruebas ELISA para la industria alimentaria, las cuales se basan en una serie de reacciones seriadas de anticuerpos (conocidas como pruebas en sándwich). 20
  • 26. Consisten en placas reactivas con anticuerpos específicos adheridos a la superficie de pequeños pozos, al colocar la muestra preenriquecida del alimento ocurre la reacción, si la bacteria está presente (antígeno), es capturada por el anticuerpo, al adicionar un conjugado de anticuerpos marcados con enzimas se completa el sándwich. Esta interacción anticuerpo-antígeno-anticuerpo se revela al adicionar un sustrato, la reacción genera cambios de coloración en las placas, lo cual se puede interpretar según las especificaciones del proveedor. Uno de los métodos más utilizados para la búsqueda de microorganismos en muestras de alimentos y muestras similares es el TECRA® validado por la AOAC (Association of Analytical Communities). c. Tecnicas de biología molecular: PCR La Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) es la única prueba de laboratorio que ha llegado a ser conocida por el común de las personas debido a que posee aplicación tanto en la criminalística como en la genética (pruebas de paternidad), ya que es capaz de detectar material genético. Por tanto, esta prueba también tiene aplicación en el área de la microbiología de alimentos, ya que no solo detecta material genético de origen animal, sino también de origen bacteriano, de ahí su importancia en la detección de bacterias que causan enfermedad de transmisión alimentaria. 21 ´
  • 27. En la industria de los alimentos, esta técnica se emplea como método de referencia para la validación de sistemas de inocuidad como el HACCP y de otros métodos comerciales de monitoreo de limpieza. En plantas de alimentos donde las poblaciones bacterianas existentes en superficies y materias primas son variadas, además que es posible la presencia de varios agentes microbiológicos causantes de enfermedad, se emplea la técnica de PCR multiplex que permite identificar varios microorganismos en una misma prueba. La PCR a partir de muestras no enriquecidas, es decir, directamente de los alimentos, sería una alternativa viable y rápida en la industria, sin embargo, su sensibilidad puede ser reducida cuando el alimento contiene sales, lípidos, proteínas, y otros microorganismos. Un aspecto que se debe tomar en cuenta al utilizar PCR para detectar material genético de origen bacteriano, es que éste puede proceder de bacterias muertas, las cuales son incapaces de causar enfermedad de transmisión alimentaria. d. Metodos de muestreo Los métodos o planes de muestreo se refieren a la manera como se realiza, y al número de canales de pollo o alimentos que se utilizan para aplicar alguna técnica de laboratorio, para detectar bacterias de importancia en el producto o alimento. 22 ´
  • 28. Esto surge porque es imposible desde el punto de vista práctico y económico que todas las canales procedentes de una parvada sean objeto de un análisis de laboratorio, de ahí que se utiliza un grupo de ellas que pueda representar al lote. Los planes de muestreo deben considerar la probabilidad de detección de microorganismos en un lote, teniendo en cuenta que ningún plan de muestreo puede asegurar la ausencia de un determinado organismo. Los planes de muestreo deben ser administrativa y económicamente factibles para las plantas de procesamiento. Los aspectos a considerar en la elección del método de muestreo son: que pueda llevarse a cabo sobre la línea de procesamiento y considerar la distribución heterogénea y mecanismo de adhesión de los microrganismos en la superficie de la canal; buscando que las canales o muestras a utilizar sean representativas de lo que sucede en el lote. El mecanismo de contaminación bacteriana consiste en la retención de una película de agua en la superficie de la canal, la cual se absorbe en los folículos de la pluma, esto protege a las bacterias de ser eliminadas durante un posterior proceso de lavado, e incluso, durante la descontaminación con agentes químicos, finalmente las bacterias se adhieren al tejido conjuntivo presente en el músculo. Las lesiones en la piel que pueden ocurrir durante las diferentes fases del procesamiento, contribuyen a la retención y mayor adsorción de microorganismos (ICMSF 2001) 23
  • 29. El tiempo que transcurra entre la toma de las muestras de campo y su análisis deberá ser lo más breve posible, y durante el transporte al laboratorio las condiciones de temperatura de la muestra deben permitir la viabilidad de los microorganismos (Codex alimentarius). Entre los métodos de muestreo utilizados en la línea de procesamiento se pueden mencionar: enjuague de la canal, raspado de piel, hisopado, incisión de piel y músculo (con sus respectivas variaciones según las necesidades del estudio como puede ser mezclado en stomacher o maceración de las muestras). Los métodos destructivos como la toma de muestras de piel tienen la desventaja de indicar el grado de contaminación del sitio exacto de toma de muestra y no de la canal completa (Klinger 1981). El método de lavado de la canal es el más utilizado para determinar la incidencia de Salmonella y Escherichia coli, así como para determinar la vida de anaquel del producto final. Este método consiste en colocar la canal individualmente en una bolsa de plástico estéril a la cual se le añaden 100 ml de agua peptonada estéril, se agita vigorosamente durante 1 minuto, cubriendo superficies internas y externas de la canal, una vez lavada la canal se retira de la bolsa y el agua resultante constituye la unidad de muestra. Existen variaciones en la aplicación de este método como son la adición de arena en el enjuague para promover el desprendimiento de la bacteria de las superficies o usar una mayor cantidad de agua de enjuague (hasta 300 ml). 24
  • 30. El método de lavado de la canal proporciona una estimación global del número de bacterias presentes en la canal, sin embargo, no permite determinar el grado de contaminación en diferentes zonas ya que el número de bacterias de diversas áreas de la misma canal pueden diferir. Por ejemplo, se pueden recuperar más bacterias en muestras de muslos que de la pechuga, algunos estudios reportan que en piel de pechuga y en cavidad interna de canales de pavo los números de E. coli son menores que los recuperados de la parte posterior de la canal y en la piel del muslo (Kotula 1966, Bodnaruk et al. 1998). Las aves sanas portan de forma natural diversos microorganismos en la piel, plumas y aparato digestivo, muchas de estas bacterias no son patógenas para las aves ni para los seres humanos, pero en ocasiones pueden causar descomposición de los alimentos. Por otro lado, las bacterias patógenas o causantes de enfermedad pueden llegar a transferirse a los alimentos durante su producción y conservación y causar enfermedades (ETAs). Durante la producción de pollo de engorda, muchos factores pueden favorecer su contaminación: en la granja, durante el transporte y procesamiento, así como en el manejo de la carne. 25
  • 31. Como ya se mencionó anteriormente, entre los patógenos reportados en productos avícolas se encuentran: Campylobacter spp., Clostridium botulinum, Clostridium perfringens, Erysipelothrix rhusiopathiae, Escherichia coli O157: H7, Listeria monocytogenes, Mycoplasma gallisepticum, Mycoplasma synoviae, Pasteurella multocida, Riemerella anatipestifer, Salmonella spp., Staphylococcus aureus, Vibrio spp. y Yersinia enterocolitica. Mientras que L. monocytogenes es un problema grave asociado a productos procesados de carne de ave (Keklik, 2010). La contaminación de las canales de pollo es inevitable, sin embargo, el grado de contaminación y la gravedad de sus consecuencias depende de las medidas de control aplicadas durante el procesamiento, como son: buenas prácticas de manufactura, procedimientos de limpieza y desinfección de equipo y utensilios, así como de los programas de reducción de patógenos implementados (Sistema TIF, HACCP e ISO 22000). Procesamiento Avícola La presencia de bacterias causantes de enfermedad de transmisión alimentaria pueden tener su origen desde la granja productora de pollo de engorda, sin embargo, los sistemas de inocuidad actuales en las plantas de procesamiento, tienen el objetivo de llevar a un nivel de control los microorganismos patógenos en caso de estar presentes y que éstos sean incapaces de causar enfermedad. 26
  • 32. Por lo tanto a continuación se revisarán algunos pasos del procesamiento primario del pollo de engorda que tienen un papel relevante en la carga microbiana total de una canal. a. Recepción del pollo de engorda Las áreas de recepción del pollo de engorda, colgado en la línea de procesamiento e insensibilización no parecen representar un riesgo sobre la calidad microbiológica de las canales, sin embargo, se han detectado microorganismos como E. coli, Listeria monocytogenes, P. aeruginosa, Staphylococcus spp. y Bacillus cereus en el ambiente de estas áreas, y se ha comprobado que éstos proceden principalmente del aleteo de las aves, del personal operativo, así como del ambiente exterior de las plantas, favorecido por la insuficiente ventilación (Lues 2007). Se han realizado estudios sobre la microbiota ambiental de las áreas previas al sacrificio, los resultados reportados por Lues (2007) se muestran en el cuadro 2. Además, encontró altos recuentos de E.coli, la cual indica contaminación fecal. Asimismo, reportó la presencia de Staphylococcus spp. como el microorganismo más frecuente en el área de recepción. Existe una alta prevalencia en el ambiente, esto se atribuye al aleteo y a los movimientos excesivos de las aves durante la manipulación de las aves para el colgado a la línea de procesamiento. 27
  • 33. Cuadro 2. Microbiota ambiental en áreas de procesamiento Listeria monocytogenes Bacillus cereus Pseudomonas aeruginosa Área de recepción y sacrificio 9.3×103 UFC/ m3 1.8 x 104 UFC/m3 1.9×103 UFC/m3 Área de Desplumado 3.9×103 UFC/ m3 8.04×103 UFC/m3 Área de Eviscerado 2.5×103 UFC/m3 1.5×102 a 3.3×102 UFC/m3 Elaborado a partir de información de Lues (2007) Los conteos en el ambiente indican que S. aureus puede alcanzar 104 UFC/m3 en varias áreas de procesamiento, excepto en las áreas frías, donde los recuentos promedio son de 3.9 × 101 UFC/m3 . S. aureus es un microorganismo capaz de adherirse fácilmente a las superficies, esto adquiere mayor relevancia cuando se trata de superficies en contacto directo con las canales (Lues 2007). En resumen, y basados en esta información, es posible decir que existe una alta prevalencia de bacterias en el ambiente de las plantas de procesamiento, de ahí la importancia en los sistemas de control de patógenos establecidos. 28
  • 34. Figura 2. Parvada en espera en andén. Se ha observado que aves vivas infectadas que llegan a los rastros, son la principal fuente de contaminación por Campylobacter ya que se puede recuperar de pollos antes del procesamiento (Kotula y Pandya 1995). Stern (1995) encontró que después del transporte de las aves a planta de procesamiento, los niveles de Campylobacter en piel y plumas aumentan significativamente, alcanzando niveles de 10 6,8 a 10 8,7 UFC/g. Por su parte, Berndtson (1992) reportó que en la piel se puede llegar a encontrar hasta 103 UFC/g aislándose en más del 89% de las canales muestreadas. Sin embargo, el intestino siempre será el sitio donde se encuentre esta bacteria con mayor frecuencia, esta aseveración está basada en estudios (Jefrey 2001) que indican que la prevalencia en intestino fue de 94%, seguido de la piel (78%), y la más baja prevalencia en buche (48%). 29
  • 35. Antes del escaldado se encuentran altos conteos de Campylobacter en plumas y piel, sin embargo, se observa mayor número de bacterias en piel de pechuga (106.9 UFC/g) que en muslo, por otro lado las muestras de plumas de pechuga también tienen elevados conteos (107,5 UFC/g). Figura 3. Aves colgadas en línea de producción. b. Escaldado El escaldado por otro lado es un factor muy importante, si bien el método de escaldado se trata de una inmersión en agua caliente (temperatura de 53 a 60°C), que parecería ser el adecuado para no permitir la proliferación bacteriana e incluso eliminar microorganismos, también puede contribuir a la contaminación de las canales. La temperatura de escaldado suave a 53°C durante 120 segundos (Sams 2001) no elimina la epidermis. 30
  • 36. Temperaturas más altas aplicadas por menos tiempo (escaldado fuerte) pueden tener un efecto letal sobre los microorganismos, sin embargo, al eliminar la epidermis, las bacterias que sobreviven encuentran un sustrato más adecuado para su crecimiento. El agua de escaldado puede albergar microorganismos como Salmonella spp, Staphylococcus spp y otros, ya que durante esta fase se liberan tanto materia fecal como plumas, condicionando una contaminación cruzada de las canales. Bacterias del género Salmonella se han detectado en canales después del escaldado, señalándose valores de reducción decimal, es decir el número de minutos o segundos precisos para destruir el 90% de una población de microorganismos, de D52ºC=150 segundos y D62ºC=8 segundos para Salmonella. La materia orgánica acumulada en el agua de escaldado protege de cierta manera al microorganismo, la temperatura no es un obstáculo determinante para la destrucción de Salmonella en esta etapa, sin embargo, la disminución del pH puede afectar la resistencia al calor de la bacteria. Figura 4. Escaldado. 31
  • 37. En estudios realizados al respecto con 7 diferentes cepas de Salmonella, se observó que valores de D52ºC permitieron su supervivencia entre 10.2 a 34.5 minutos en escaldado con un pH alrededor de 6. En otro estudio Salmonella sobrevive al escaldado a 55ºC por 105 segundos y no son detectadas cuando son escaldadas a 60 ºC por 200 segundos (Nothermans 1975). Osiriphun et al. (2011) reportan que deben considerarse los pasos de escaldado y enfriamiento como etapas que representan un riesgo para la contaminación por Campylobacter jejuni en las canales, señalando que el pH y concentración de cloro son factores sensibles que permiten la sobrevivencia de este microorganismo, así como la temperatura del agua durante el escaldado, por lo tanto el estudio sugiere incluir el control del pH durante el enfriamiento, así como la reducción de materia orgánica en el tanque de escaldado. McKee et al. (2008) han reportado que el uso de aditivos alcalinos en el agua de escaldado puede reducir la carga bacteriana de las canales. Humphrey et al. (1981) reportaron una reducción de la materia fecal en las plumas y una reducción en el recuento total de bacterias cuando el pH del agua de escaldado se ajustó a 9,0 ± 0,2 mediante la adición de hidróxido de sodio. 32
  • 38. La modificación del pH (superior a 9) en el agua de escaldado, disminuye la contaminación bacteriana de las canales de pollos, ya que reduce notablemente patógenos como Salmonella, E. coli y Campylobacter. Su efecto es la alteración del funcionamiento enzimático y transporte de nutrientes, además de actuar como un tensioactivo protegiendo a las canales de la contaminación cruzada (Mckee 2008, Berrang 2011). c. Desplumado Durante el desplumado la difusión de microorganismos en los dedos de goma se ve favorecida por la humedad y el calor que las canales transmiten al equipo. Un estudio analizó el empleo de cuatro desplumadoras en el procesamiento de pavos, y mostró que 14 lotes infectados con Salmonella de manera natural, contaminaron el equipo. La primera desplumadora resultó contaminada durante el procesamiento de 12 de los lotes (85.7%), la segunda resultó contaminada tras procesar 11 lotes (78.6%), la tercera durante el procesamiento de 7 lotes (50%) y la cuarta durante el procesamiento de 12 lotes (85.7%). Figura 5. Desplumadora con dedos de goma. 33
  • 39. En el mismo estudio se observó que el equipo que se emplea después del desplumado, también se contaminaba (Bryan 1968). El aumento de Campylobacter y Salmonella puede ser significativo durante el desplumado, y se debe a la contaminación cruzada generada por las maquinas desplumadoras en contacto con plumas contaminadas con materia fecal. Salmonella, a diferencia de Campylobacter, tiende a estar presente en las canales en bajas cantidades y por lo tanto generalmente se evalúa como presencia o ausencia en lugar de buscar números reales (Berrang, 2011). d. Eviscerado La evisceración constituye una de las etapas de mayor riesgo en el procesamiento, los microorganismos pueden ser transferidos a las canales por la ruptura del tracto gastrointestinal, por las maquinas evisceradoras o por los operarios. Rahimi (2010) determinó la frecuencia de contaminación de canales de pollo de engorda infectados con Campylobacter y encontró que después del desplumado 54.8% de las canales estaban contaminadas y después del eviscerado sólo 51.2%, lo cual es cercano a lo reportado por Franchin et al. (2007) quien reportó 68% de canales contaminadas después del desplumado y 69.4% después del eviscerado. Según Rahimi (2010) este hallazgos plantean la posibilidad de que la etapa de eviscerado no es el principal factor responsable de la contaminación cruzada, ya que después de esta etapa se observa una reducción en la frecuencia de contaminación. 34
  • 40. Figura 6. Evisceradora. e. Lavado El lavado se realiza por aspersión, generalmente se efectúa solamente uno después del eviscerado, sin embargo, es más eficaz realizar varios lavados durante el procesamiento con el fin de prevenir el incremento de la contaminación. Esta fase es la primera enfocada a reducir la contaminación de las canales, aunque únicamente se basa en una reducción cualitativa ya que emplea el criterio de ausencia de materia fecal en la superficie de las canales. Algunos estudios sugieren que la contaminación bacteriana difiere entre las zonas internas y externas de la canal, por lo que algunas plantas procesadoras han incorporado el criterio de lavado dentro-fuera, sin embargo, la eficacia del lavado también depende de otros factores como: cantidad de agua utilizada, presión del agua y dirección del chorro de agua. 35
  • 41. Figura 7. Lavado de canales Smith (2007b), señala que la diferencia en la contaminación externa e interna de la canal puede deberse a que las bacterias se adhieren más fácilmente a la superficie de la piel y folículos de las plumas, además de que esta superficie está permanentemente expuesta. Este tipo de lavado reduce la incidencia de Campylobacter y Salmonella en las canales visiblemente contaminadas (Smith 2007a). f. Enfriado de la canal El enfriamiento de las canales es un paso crucial del procesamiento que puede prevenir el crecimiento microbiano para maximizar la seguridad de las canales y su vida útil. Éste puede ser por inmersión en tanques de agua con o sin hielo, por aspersión de agua fría o por circulación de aire frío. El enfriamiento por inmersión en agua puede ocasionar la dispersión de microorganismos. 36
  • 42. Green (1984) encontró que casi 55% de las muestras de agua fueron negativas a Salmonella, aunque se detectaron 19% de canales contaminadas de las cuales alrededor del 8% de las muestras presentaron cuentas de hasta 100 o más salmonelas por mililitro. Una alternativa del enfriamiento por inmersión es el efecto de lavado con un flujo contracorriente, agitación del agua y cloración. Otros sistemas de enfriamiento, como el de aspersión, tienen la ventaja de disminuir la contaminación de las canales debido a que estas son colgadas individualmente en la línea. Por otra parte, el sistema de enfriamiento con corriente de aire ofrece una mejor calidad microbiológica de las canales ya que adicionalmente el aire daña a las bacterias como consecuencia de la deshidratación superficial (Carroll y Alvarado 2008). Figura 8. Enfriado de canales por inmersión en Chiller. 37
  • 43. En general, es evidente que la eficacia del sistema de enfriamiento depende de la carga inicial de microorganismos en las canales y calidad del agua (Demirok 2013). Rahimi, (2010) encontró un aumento significativo de Campylobacter spp. en muestras obtenidas de la canal 20 min después de la etapa de enfriamiento así como de agua del tanque de enfriamiento, lo que indica contaminación cruzada. Sin embargo, puede observarse una reducción en el número de canales positivas a este microorganismo por efecto del secado de la superficie de la piel en un enfriado posterior con ráfaga de aire, o bien por los factores estresantes a los que están expuestos los microorganismos y que hacen que expresen genes de respuesta al estrés como son el estado viable no cultivable, lo cual afecta el aislamiento de microrganismo por métodos convencionales de cultivo. En este caso la detección de patógenos por métodos moleculares es conveniente. Etapas posteriores al enfriamiento de las canales deben ser controladas con el fin de evitar riesgos microbiológicos, ya que ninguna etapa posterior, (exceptuando la cocción) eliminará los microrganismos añadidos. g. Corte y deshuese El riesgo microbiológico durante el corte y deshuese de las canales depende de las buenas prácticas de manufactura (BPM) y los procedimientos de limpieza y saneamiento de equipos y utensilios (POES). 38
  • 44. Figura 9. Corte y deshuese de pechuga de pollo. Figura 10. Corte y deshuese de muslo de pollo. 39
  • 45. Los microorganismos detectados en esta área con frecuencia derivan de los seres humanos, y son favorecidos por la insuficiente ventilación en relación con el número de personas y actividades involucradas, así como de la condensación excesiva y humedad en paredes y techos (Lues 2007). En un estudio, Davis y Conner (2007) reportan que la incidencia de Campylobacter en carne cruda es de 76% en pollo enteros y se reduce a 48% en pechuga sin piel y a sólo 2% en carne deshuesada. h. Empacado El área de empaque de productos crudos, es una de las zonas más limpias del establecimiento, sin embargo, no está exenta de contaminación microbiológica, se ha observado que en esta área prevalecen entre otras bacterias: Staphylococcus spp. y E. coli, esta última con un recuento promedio de 1,5×103 UFC/m3 , lo que indica contaminación fecal posiblemente debido a la rotura de intestino durante el eviscerado del pollo o bien debido a malas prácticas de higiene, según reportó Lues (2007). El método de conservación de carne de pollo, ya sea refrigeración o congelación, no elimina la microbiota, incluyendo bacterias patógenas; Campylobacter se ha aislado en 55.2% de carne de pollo refrigerado y en 49.3% de pollo congelado (Kanarat et al, 2004;. Padungtod et al., 2008). 40
  • 46. Figura 11. Envasado de cortes de pollo en bolsas al vacío. El grado de contaminación de las canales al final del procesamiento depende de factores inherentes a las aves, prevalencia de microorganismos durante la crianza y finalización de las aves, susceptibilidad de las aves a las infecciones debido al estrés generado durante el manejo previo al procesamiento (ayuno y transporte), y de la contaminación añadida durante el procesamiento. Independientemente de los factores mencionados, el grado de contaminación de las canales es variable. En la mayoría de los países, del 50 al 80% de las canales de pollo están contaminadas con Campylobacter y Salmonella spp., siendo el primero aislado más frecuentemente. 41
  • 47. Un estudio evaluó el porcentaje de canales positivas a C. jejuni y C. coli en plantas de procesamiento por 13 semanas y el resultado indicó que del 67 al 100% fueron positivas, también se ha observado que las canales contienen niveles de 103 a 106 UFC. Otro estudio evaluó la incidencia de Salmonella en 5 plantas de procesamiento durante 13 semanas, el resultado indica que la incidencia de Salmonella osciló de 9 a 77% en cada planta con valores medios de 10 células por canal (ICMSF 2001). La comercialización de la carne ha experimentado cambios en los últimos años a través de la utilización de envases en atmósferas modificadas con almacenamiento a baja temperatura. Esto contribuye a controlar la población microbiana y la oxidación de lípidos, a aumentar la vida útil del producto, y a un mejor almacenamiento y distribución de la carne. El éxito de esta tecnología depende de la mezcla de gases en relación con el producto, el perfil microbiológico de la carne, el control de la temperatura, las propiedades de barrera de la película de embalaje y la eficacia de los equipos (Taylor, 1996). El uso de CO2 extiende la vida útil de carne de ave cruda mediante la inhibición de la actividad de psicrófilos, bacterias gram negativas y Pseudomonas spp. Aunque posteriormente se da un deterioro y cambio en las características organolépticas por el lento crecimiento de bacterias como: Carnobacterium spp., Brochothrix termosphacta, Lactobacillus spp. (Fraqueza y Barreto, 2009, 2011). 42
  • 48. Las películas impermeables al oxígeno promueven la acumulación de CO2, inhibiendo el crecimiento de Pseudomonas spp. pero creando un medio adecuado para el crecimiento de S. putrefaciens, Brochothrix thermosphacta, Enterobacteriaceae y Aeromonas spp. (Tuncer 2008). El deterioro de las canales envasadas en películas permeables al oxígeno puede ser causado por Pseudomonas spp. (Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas putida, Pseudomonas fragi), mientras Shewanella putrefaciens, Acinetobacter spp. y Moraxella spp. son menos deteriorantes. La aplicación de CO2 al 100% inhibe completamente el crecimiento de L. monocytogenes (Sheridan et al. 1995), pero se ha observado su crecimiento en 30% CO2 / 70% N2 en pechuga de pollo crudo (Shin et al., 2010). La bioconservación es un método que mejora la seguridad y la estabilidad de los productos alimenticios sin alterar sus cualidades sensoriales, mediante el uso de microorganismos, sus metabolitos, o ambos (Holzapfel et al, 1995, Lücke, 2000). Las bacterias ácido lácticas (BAL) tienen un efecto inhibidor frente otros microorganismos como resultado de competencia por los nutrientes, producción de bacteriocinas u otros compuestos antagonistas tales como ácidos orgánicos, peróxido de hidrógeno y enzimas. Las BAL son eficaces contra L. monocytogenes y C. jejuni., aunque las bacterias gram negativas tienen una resistencia inherente debido a su membrana exterior, que actúa como una barrera eficaz contra microbicidas (Melero, 2013). 43
  • 49. Durante el procesamiento de las aves de corral, las bacterias se pueden eliminar o controlar usando tratamientos antimicrobianos en el agua de escaldado, lavado y enfriado de las canales. El agua clorada es ampliamente utilizada para el lavado de canales, enfriado por inmersión o por aerosol, también se ha utilizado dióxido de cloro, cloruro de sodio, ozono, peróxido de hidrógeno, ácido láctico, clorito de sodio y menos frecuentemente: metasilicato de sodio, ácido cítrico mezclado con ácido clorhídrico y fosfato ácido fosfórico, monocloraminas y soluciones de hipoclorito con pH controlado. El uso de agua caliente clorada en el lavado de canales mejora la remoción de material extraño y reduce efectivamente los recuentos microbianos de superficie de la canal. Se ha demostrado que el uso de agua a 63°C mejora la eficiencia del lavado ya que suaviza la grasa y rompe la tensión superficial de la capa de grasa en la piel (Bashor et al. 2004) La irradiación es el tratamiento más eficaz en la eliminación de agentes patógenos de la carne. Sin embargo, su uso es limitado debido a la preocupación de los consumidores acerca de los productos irradiados. La acción bactericida de la radiación ionizante se basa principalmente en daño al ADN bacteriano, el grado de daño es dependiente de la dosis; causa daño oxidativo a las membranas celulares lo cual interfiere con el metabolismo normal para la generación de energía, inhibe el crecimiento celular, e induce a la muerte (Dong 2013). 44
  • 50. La sensibilidad de los microrganismos a la irradiación puede variar de acuerdo a su complejidad, los virus tienen la mayor sensibilidad, seguidos por las esporas bacterianas, bacterias y hongos. Las bacterias en fase exponencial son más sensibles. La mayoría de los patógenos comunes en los alimentos como Campylobacter jejuni, E. coli O157:H7, Staphylococcus aureus, Salmonella spp., L. monocytogenes y Aeromonas hydrophila pueden disminuir significativamente o eliminarse con dosis bajas de irradiación (<3,0 kGy) (Dong 2013). El pH, temperatura y composición química del alimento tienen un impacto en la supervivencia de los microorganismos durante la irradiación. La presencia de oxígeno sensibiliza a las células a la radiación, es por eso que la destrucción de microorganismos puede reducirse en condiciones anaeróbicas o en muy baja actividad de agua. Debido a la menor tasa de reacciones oxidantes, se generan radicales libres de oxígeno que pueden ser tóxico en los productos (Dong 2013). Figura 12. Logo “Radura” muestra que un alimento ha sido irradiado. Versión internacional (izq.) y de la FDA (der.) 45
  • 51. El pH, temperatura y composición química del alimento tienen un impacto en la supervivencia de los microorganismos durante la irradiación. La presencia de oxígeno sensibiliza a las células a la radiación, es por eso que la destrucción de microorganismos puede reducirse en condiciones anaeróbicas o en muy baja actividad de agua. Debido a la menor tasa de reacciones oxidantes, se generan radicales libres de oxígeno que pueden ser tóxico en los productos (Dong 2013). Las principales ventajas de la irradiación de la carne son:  Conserva la integridad del producto.  Destruye microorganismos patógenos.  Reduce considerablemente microrganismos deteriorantes aumentando la vida útil de los productos.  No altera la calidad de los nutrientes.  No deja residuos.  Se puede aplicar posterior al envasado evitando la contaminación ulterior. Desventajas:  Promueve cambios oxidativos de los lípidos afectando significativamente la aceptación del consumidor.  Produce un aroma característico, altera sabor y color.  El alto contenido de proteínas en la carne neutraliza a los radicales libres.  La generación de un color rosado en carne cocida se asocia a la presencia de contaminantes o reacciones químicas indeseables (Dong, 2013). 46
  • 52.  Los microorganismos tienen mayor sensibilidad a la irradiación a temperatura ambiente que a temperaturas bajo cero, ya que la baja Aw (actividad de agua) del hielo impide la migración de libre radicales dentro del producto. (Nam et al., 2002).  La descontaminación de carne utilizando irradiación es más eficaz cuando la carne es de buena calidad microbiológica, la presencia de grandes poblaciones de microorganismos reduce la eficacia de la radiación. El peróxido de hidrógeno es un agente antimicrobiano potente y es utilizado en una variedad de aplicaciones de alimentos. Se ha utilizado en productos lácteos y para la esterilización de tuberías, filtros, superficies en contacto con alimentos y áreas de empaque. Investigadores evaluaron concentraciones de 1,100 a 12,000 ppm en agua de enfriado de canales por 30 minutos lo que resultó en un 95 a 99,5% de reducción de aerobios, sin embargo, tuvo efectos indeseables en las canales como piel elástica y blanqueada, por lo que se descarta su uso en el enfriado de canales, pero podría ser aplicable en carne de pollo deshuesada (Fletcher 1993). Los ácidos orgánicos (láctico, acético y cítrico) se utilizan en el lavado de canales para disminuir la carga microbiana superficial, a concentraciones superiores al 3% y ácido láctico al 1% o superior, causan cambios en la apariencia de las canales por decoloración, hinchazón, y en otros casos, oscurecimiento de la piel, también se ha reportado cambio de sabor en pechuga de pollo (Dickens 1994). 47
  • 53. Los métodos de conservación de canales de pollo tienen el objetivo de alargar su vida útil, conservando sus características organolépticas intactas e inhibiendo el crecimiento bacteriano, permitiendo mantener los alimentos inocuos. Los métodos de mayor utilidad en la carne de pollo son: conservación por frío (refrigeración y congelación), irradiación y uso de aditivos en productos transformados. a. Refrigeración La refrigeración consiste en disminuir la temperatura de las canales por encima de su punto de congelación, retardando el crecimiento bacteriano y afectando de forma mínima sus características organolépticas y nutricionales. La refrigeración, a temperaturas entre 0 a 4°C, evita el crecimiento de los microorganismos termófilos y de algunos mesófilos. Los métodos más comunes para la refrigeración de canales de pollo son: inmersión en agua fría, agua fría con hielo y aire frío (Tuncer 2008). La determinación del tiempo de refrigeración depende del tiempo necesario para que las canales alcancen temperaturas por debajo de 4°C en su centro térmico, muchas plantas realizan un prechiller (pre-enfriado por inmersión) de 10 a 15 min, donde en general se observa una reducción bacteriana en piel. La calidad microbiológica de las canales después del enfriamiento está influenciada por la cantidad de microorganismos presentes en la canal, en el prechiller, chiller. 48 ´
  • 54. También depende de las condiciones del proceso: relación entre el volumen de agua y el número de canales, flujo del agua, concentración de desinfectantes, tiempo de contacto, temperatura, y pH del agua. La reducción en el número de bacterias persistentes en las canales se debe a la acción mecánica de la inmersión y a las propiedades del desinfectante (Northcutt 2008). b. Congelación La congelación es un método de conservación de canales que proporciona un alto grado de seguridad, conservando el valor nutricional y cualidades sensoriales de la carne. Consiste en bajar la temperatura por debajo de su punto de congelación (entre 0° a -18°C) con mínimos cambios bioquímicos y microbianos. La congelación consiste en reducir una fracción del agua contenida en las canales, denominada agua libre, en cristales de hielo, lo cual inmoviliza el agua produciendo un efecto de desecación, lo que reduce su actividad (Aw). Dependiendo del método de congelación, la reducción de temperatura puede resultar en daño físico de las canales o en complejos cambios bioquímicos de la carne. La congelación lenta y recristalización originan la pérdida de componentes celulares, causado por el daño celular provocado por los cristales de gran tamaño de la recongelación, lo que se manifiesta como un exudado en el que se pierden diversos compuestos de valor nutricional y puede dar lugar a características organolépticas indeseables. 49
  • 55. c. Cadena de frío La cadena de frío consiste en el control de temperaturas de refrigeración o congelación de manera continua en cada fase de conservación de las canales de pollo, desde el enfriado durante el procesamiento hasta su consumo o preparación por el consumidor final (figura 13).  La cadena de frío consta de control de temperatura en los siguientes puntos: o Enfriado durante el procesamiento o Almacenamiento en el centro de producción o Distribución o Almacenamiento en frigorífico y punto de venta o Almacenamiento en el hogar Figura 13. Cadena de Frío. Chiller Refrigeración Distribución Punto de venta Refrigeración en hogar Planta de proceso Transporte refrigerado Consumidor 50
  • 56. d. Importancia de la cadena de frío La inocuidad y calidad microbiológica de las canales de pollo dependen de la conservación de la cadena de frío durante las fases de almacenamiento y comercialización hasta antes del consumo y/o preparación. Los puntos más sensibles de la cadena de frío son el transporte y distribución a los siguientes eslabones de la cadena, ya que durante la carga y descarga existen variaciones de temperatura, aun contando con los controles adecuados, y en el peor de los casos estos controles no existen. Para conservar la cadena frío es necesario evitar variaciones de temperatura en las cámaras frigoríficas, ya que las bacterias mesófilas y psicrófilas se multiplican rápidamente bajo estas condiciones, provocando alteración de las canales y pérdida de la inocuidad. Por tanto, es fundamental un monitoreo constante de la temperatura, para lograrlo existen los instrumentos llamados termógrafos, que permiten guardar una gran cantidad de lecturas de temperatura durante periodos prolongados, con la ventaja de que estos dispositivos pueden colocarse entre el producto para monitorear los rangos de temperatura a los que están expuestos los productos avícolas. Figura 14. Termógrafo. 51
  • 57. La manipulación adecuada de los alimentos es la clave para prevenir las ETAs, que son un grave problema de salud pública, y la producción inocua de los alimentos no es suficiente cuando la manipulación previa al consumo se realiza bajo condiciones de insalubridad. Los productos de carne de ave precocinados, refrigerados, o congelados, listos para consumir han ganado el interés de un amplio mercado, ya que no requieren una elaborada preparación para su consumo. Estos productos son susceptibles a contaminación microbiológica, y en caso de no contar con controles adecuados, no ser inocuos. La Organización Mundial de Salud (OMS) formuló cinco claves de oro para la preparación inocua de los alimentos (figura 15), las cuales consisten en: Figura 15. Las 5 llaves de la inocuidad de los alimentos. 1. Mantenga la limpieza  Lávese las manos antes de preparar alimentos y con frecuencia durante su preparación.  Lávese las manos después de ir al baño. 52
  • 58.  Lave y desinfecte todas las superficies y equipos usados en la preparación de los alimentos.  Proteja los alimentos y las áreas de cocina de insectos y otros animales. 2. Separe alimentos crudos y cocinados  Separe carnes rojas, carne de ave y pescado crudo de los demás alimentos.  Use equipos y utensilios diferentes, como cuchillos y tablas de cortar, para manipular alimentos crudos.  Conserve a los alimentos en recipientes para evitar el contacto entre los crudos y los cocinados. 3. Cocine completamente  Cocine completamente los alimentos, especialmente carnes rojas, carne de ave, huevos y pescado.  Hierva los alimentos como sopas y guisos para asegurarse que ha alcanzado los 70°C. En caso de carnes rojas y de ave, asegúrese de que los jugos sean claros y no rosados. Se recomienda el uso de un termómetro adecuado para alimentos.  Recaliente completamente los alimentos cocinados. 4. Mantenga los alimentos a temperaturas seguras  No deje los alimentos cocinados a temperatura ambiente por más de 2 horas.  Refrigere lo antes posible los alimentos cocinados y los perecederos (por debajo de los 5° C).  Mantenga la comida muy caliente (a más de 60°C antes de servir). 53
  • 59.  No guarde los alimentos por mucho tiempo aunque sea en el refrigerador.  No descongele los alimentos a temperatura ambiente. 5. Use agua y materias primas seguras  Use agua segura o trátela para que lo sea  Seleccione alimentos sanos y frescos.  Elija alimentos procesados para su inocuidad, como la leche pasteurizada.  Lave frutas, verduras y hortalizas, especialmente si se van a consumir crudas.  No utilice alimentos caducados. La carne fresca de pollo puede tener un nivel de contaminación inicial de 104 a 105 microorganismos por centímetro cuadrado en los puntos de venta, y se pueden guardar en refrigeración (3 a 5°C) por 1 ó 2 días manteniendo su frescura. Sin embargo, después de este tiempo los microorganismos psicrófilos causan putrefacción y deterioro de la carne aún a temperaturas de refrigeración. La vida de anaquel de la carne de pollo (8 a 10 días) puede incrementarse hasta 15 o 17 días cuando se envasa en atmosferas modificadas con 60 a 80% de CO2 ya que inhibe la mayoría de microbiota aerobia (Jiménez et al. 1997). 54
  • 60. Sin embargo, la inhibición de patógenos como L. monocytogenes no es efectiva. En otro estudio se amplió la vida de anaquel de hamburguesas de carne de pollo hasta 17 a 24 días, en embalaje bajo atmósferas modificadas, utilizando CO2 a concentraciones superiores al 30% (Melero 2013, Jiménez et al. 1997, Patsias et al. 2008). La combinación de 20% de CO2 , 70% de O2, y 10% de N2, da una vida útil de aproximadamente 8 días. Sin embargo, otras mezclas de gases pueden conducir a una prolongación de la vida útil hasta de 3 semanas, variable de acuerdo con la calidad de la carne (Fraqueza y Barreto, 2009, 2011). Los aditivos utilizados en productos marinados de pollo también tienen cierta influencia en la vida útil, ya que inhiben el crecimiento bacteriano, aunque su principal finalidad es la mejora en sus características organolépticas (Smaoui 2012). La cuantificación de aminas biógenas en carne y productos cárnicos es un indicador de frescura. Las aminas biógenas se forman por la descarboxilación de aminoácidos por el metabolismo bacteriano, por la influencia de la temperatura, disponibilidad de oxígeno, potencial redox y pH. El tipo y la cantidad de aminas biógenas depende de la naturaleza del alimento y del tipo de microorganismos contaminantes. Durante el almacenamiento prolongado de carne de pollo se forman altos niveles de putrescina, histamina, tiramina, y cadaverina. En muestras de carne podrida se han encontrado concentraciones mayores a 1,000 mg/kg (Bauer et al. 1994). 55
  • 61. En carne de cerdo y carne de res almacenadas a 4ºC durante 35 días, se encontró que las concentraciones de putrescina, cadaverina, tiramina e histamina no excedieron los 150 mg/kg. Muchas enterobacterias y lactobacilos son productores de una o más aminas biógenas. Específicamente la descarboxilación de histidina por Escherichia, Salmonella, Clostridium, Bacillus y Lactobacillus da lugar a histamina, caracterizada por ser mediador de graves manifestaciones anafilácticas. Por su parte Pseudomonas spp., microorganismo dominante de deterioro de la carne fresca, produce putrescina, mientras que Enterobacteriaceae forma cadaverina. Figura 16. Ejemplo de piezas en prolongado almacenamiento. La apariencia de estas piezas es todavía aceptable, pero al abrir el empaque se percibe un olor desagradable, lo que indica que ya inició el proceso de descomposición. Piezas con un mayor número de días de almacenamiento, lo que ya generó cambios en el color (verdoso) y la consistencia de la carne. (Se observa un termógrafo entre las piezas, utilizado para monitorear si la cámara fría trabaja adecuadamente). 56
  • 62. a. Tecnica de lavado para determinar contenido microbiológico en pollo. La cantidad de microorganismos puede ser determinada a través de la técnica de lavado de la canal o pieza de pollo. Colocar la pieza o canal (muestra) en una bolsa de plástico. Verter dentro de la bolsa 100 ml de solución buferada de fosfatos (PBS). 57 ´
  • 63. Agitar la bolsa cerrada durante 1 minuto para realizar el lavado de la canal o pieza. Sacar la canal o pieza de la bolsa. El lavado que queda es la muestra para la siembra bacteriológica que será trabajada en el laboratorio. Figura 17. Preparación de muestras para técnica de lavado. Una vez realizados todos los lavados necesarios las muestras deben colocarse en una hielera con hielo para ser transportadas al laboratorio de microbiología. En el laboratorio deberá contarse con el material necesario para trabajar las muestras de los lavados, el cual consiste en:  5 tubos con 9 ml. de PBS estéril por cada muestra  Homogenizador o Vortex  Pipeta de 1 ml.  Puntas desechables  Mechero  Placas para siembra de aerobios totales 58
  • 64. Preparar el material necesario. Tomar 1 ml del líquido de lavado. Colocar en un tubo que contenga 9 ml de PBS estéril. 59
  • 65. Homogenizar este tubo. Tomar 1 ml de este tubo para transferirlo a otro tubo que contenga 9 ml de PBS estéril, realizando la primera dilución. Repetir este paso 5 veces para completar 5 diluciones decuples seriadas. De las últimas tres diluciones, tomar 1 ml y sembrar en una microplaca de cultivo para aerobios totales (estas placas ahorran tiempo en la preparación de cajas de petri con medio de cultivo). 60
  • 66. Incubar las microplacas por 48 horas a 37° C. Transcurridas las 48 horas, contabilizar las colonias en cada una de las microplacas. De acuerdo a la dilución, se obtendrá el número total de colonias y se obtendrá el logaritmo de este número. También se puede hacer evaluación de coliformes como indicador sanitario. Figura 18. Sembrado de las muestras de lavado en laboratorio. 61
  • 67. Los establecimientos TIF son instalaciones donde se procesan animales de abasto y se envasan, empacan, refrigeran o industrializan productos y subproductos de origen animal para consumo humano. Estos establecimientos están sujetos a regulación de la Secretaría de Agricultura, Ganadería, Desarrollo Rural, Pesca y Alimentación, a través de la reglamentación que establece la Ley Federal de Sanidad Animal y su reglamento, así como las normas NOM-033-ZOO- 1995, NOM-008-ZOO-1994, NOM-009-ZOO-1994 y sus modificaciones. En estas leyes se establecen las condiciones zoosanitarias y sistemas de reducción de peligros de contaminación, física, química y microbiológica a través de la aplicación de Buenas Prácticas de Producción, Buenas Prácticas de Manufactura, Procedimientos Operacionales Estandarizados de Saneamiento, Análisis de Peligros y Control de Puntos Críticos en los establecimientos, así como el bienestar animal. El sistema TIF se autoriza a petición de parte y previo cumplimiento de las disposiciones que se establecen en la reglamentación antes mencionada (SENASICA, 2013).El sello TIF es símbolo de calidad higiénico-sanitaria debido al control de los procesos con fines de prevención de riesgos, por esto debe contar con médicos veterinarios oficiales o responsables autorizados que realicen la inspección o verificación de los procesos para garantizar que los alimentos sean inocuos (Ley Federal de Sanidad Animal, Artículos 1, 2, 3, 4, 6 51, 107, 154, SENASICA 2013). 62
  • 68. Los beneficios del sistema TIF para la industria cárnica son principalmente la aceptación del consumidor, ya que ofrece garantía de calidad sanitaria con la que fue elaborado el producto. Además facilita la movilización dentro del país, y en cuanto al mercado internacional, los establecimientos TIF son los únicos elegibles para exportar, ya que son equivalentes a estándares internacionales de calidad e higiene (SENASICA 2013).Los principales giros que se certifican como TIF son: sacrificio de animales de abasto, corte y deshuese, frigoríficos, productos de transformación como son los productos embutidos, marinados, enlatados, alimentos listos para consumo, etc. (SENASICA 2013). En México actualmente existen 24 plantas de procesamiento de aves certificadas como TIF. En los cuales se procesaron en 2012: 792,135,016 aves (Unión Nacional de Avicultores 2013). a. Calidad microbiológica en plantas TIF La microbiota de las canales después del eviscerado consta principalmente de mesófilos, los cuales pueden alcanzar de 102 a 104 bacterias/cm2 . Esta microbiota varía dependiendo de las condiciones de manipulación en el resto del procesamiento. Las plantas TIF llevan a cabo controles con la finalidad de evitar el incremento de peligros microbiológicos principalmente. El control más importante es la refrigeración, ya que evita la multiplicación de enterobacterias, las cuales prevalecen en condiciones de mala refrigeración arriba de 4°C (Dainty y Mackey 1992). 63
  • 69. Bajo condiciones de refrigeración, en corto tiempo las bacterias psicrófilas como Pseudomonas spp. constituyen del 50 al 90% de la población microbiana, inhibiendo de alguna forma la multiplicación de bacterias patógenas (Dainty y Mackey 1992). Gracias al Macroproyecto “Indicadores de calidad en la cadena de producción de carne fresca en México”, fue posible realizar un muestreo en rastros TIF procesadores de carne de pollo ubicados en el Centro y Sur de México. Se utilizó la técnica de lavado para obtener los conteos bacterianos, los resultados obtenidos se muestran a continuación: Cuadro 3. Conteos en rastros TIF procesadores de pollo UFC/ml Log10 Mesófilos aerobios Coliformes Centro 4.99 3.81 Sur 3.88 2.79 Los indicadores sanitarios publicados en la NOM-093- SSA1-1994, muestran únicamente los valores recomendados para el caso de carne cocida, por lo que no existe una referencia para este tipo de indicadores sanitarios para la carne de pollo. Sin embargo, es importante considerar que la carga inicial de las canales, es decir el número de bacterias que posee una canal al finalizar su procesamiento y estar lista para su comercialización, afecta la vida de anaquel. 64
  • 70. Es conocido que un incremento en la carga inicial resulta en un decremento de la vida de anaquel. Smith et al. (2007) reportaron que la carga bacteriana de una canal procesada muestra valores de coliformes de 3.7 log de UFC/ml, mientras que cuando se presenta contaminación interna este valor se incrementa a 4.5 log de UFC/ml, y con contaminación externa el valor se incrementa aún más (5.0 log UFC/ml). En los resultados obtenidos en los rastros TIF, los conteos de coliformes son menores a los resultados de Smith et al (2007) en los casos de contaminación externa e interna, y similares a los conteos de coliformes en el caso de los rastros ubicados en el centro del país, mientras que los resultados obtenidos en los rastros al sur muestran conteos menores. Lo anterior indica que el sistema TIF logra conteos bajos de coliformes y aerobios totales, además de que promueven la reducción de riesgos de contaminación de los productos avícolas. Como ya se mencionó anteriormente, la vida de anaquel representa el periodo de tiempo en almacenaje en que un producto alimenticio es apto para consumo. Más allá de este periodo, la carne presenta cambios en olor, color, sabor, textura y apariencia que hace que el producto sea inaceptable. Por sus características bioquímicas la carne experimenta deterioro progresivamente desde la matanza hasta el consumo. La composición nutricional de la carne representa un medio óptimo para el crecimiento microbiano. 65
  • 71. En el caso de la carne de pollo, el crecimiento microbiano es por mucho el factor más importante en la descomposición, siendo la temperatura de almacenamiento el segundo factor que determina la duración de la vida de anaquel. Bilgili (2001) mostró que las cargas microbianas iniciales de 104 células/cm2 desarrollaron limo (signo de descomposición) en 16 días bajo una temperatura de almacenamiento de cero grados centígrados. Es importante considerar que cuando se realiza el conteo de cargas microbianas por lavado, comparado con la determinación por cm2 , la primera será mayor comparada con la segunda, debido a que la técnica de lavado hace un barrido de la superficie interna y externa de la canal o pieza, lo que debe considerarse cuando se comparan resultados experimentales. En el caso de los muestreos en rastros TIF, los conteos de mesófilos muestran que las canales obtenidas de la zona centro poseen una carga microbiana mayor, lo que hace que el manejo de este pollo debe ser con una rigurosa vigilancia de la cadena de frío, ya que en el mismo estudio de Bilgili (2001) muestra que las canales de pollo con la carga inicial de 104 células/cm2 pero almacenado bajo condiciones de 5°C la vida de anaquel se redujo a 5 días. En cuanto a los rastros en la zona Sur, los conteos de mesófilos aerobios fueron menores a 4 Log10 UFC/ml, sin embargo la diferencia es solo 0.12 Log10 UFC/ml por lo que del mismo modo será crítica la temperatura de almacenamiento para lograr una vida de anaquel prolongada. 66
  • 72. b. Comercialización de la carne de pollo en Mexico. Los tejidos internos en un animal sano se encuentran libres de bacterias al momento de la matanza, sin embargo, cuando a la misma ave ya procesada se le examina su calidad microbiológica a nivel de comercialización, se observa una variación en número y tipos de bacterias. Además una canal completa tiende a mostrar conteos bacterianos menores comparados con las piezas. La mayoría de los microorganismos se encuentran en la superficie, por esta razón se realiza conteo de bacterias por cm2 . Sin embargo, es importante considerar que en este tipo de muestreo existe la probabilidad de tomar el hisopo en un área altamente contaminada que no sea representativa de la superficie total de la canal. Mulder (1996) mostró como los conteos se incrementan a través de las etapas sucesivas del procesamiento, ya que su estudio reportó que canales completas de seis plantas de procesamiento, la carga inicial fue de 3.30 log10 UFC/cm2 . Después de que el pollo fue cortado la media total se incrementó a 3.80 log10 UFC/cm2 . Después del empaque se observó nuevamente un incremento a 4.08 log10 UFC/cm2 . Mientras que después del transporte de los cortes se observó un incremento de 4.76 log10 UFC/cm2. De aquí la importancia de mantener un eficiente programa de limpieza y desinfección de equipos e instrumentos para tratar de que los incrementos en los conteos bacterianos sean mínimos. 67 ´
  • 73. Pero además, se deberán tomar medidas durante la comercialización de la carne de pollo para evitar que ésta represente una oportunidad para incrementar de manera significativa las cargas bacterianas. La clasificación comercial del pollo en México en 2012 está dividida en 6 tipos, los cuales se presentan a continuación con el porcentaje que comprende cada uno (Unión Nacional de Avicultores, 2013). Figura 19. Clasificación comercial de pollo en México. En la comercialización del pollo, el mayor sector corresponde al mercado de pollo vivo, éste es llamado así porque los comercializadores compran un lote de aves, las cuales son transportadas al punto de venta, el cual cuenta con corrales donde las aves son descargadas, esta instalación cuenta con bebederos y comederos, donde las aves descansan, se alimentan y están listas para su venta. Pollo vivo 33% Mercado público 19% Piezas 6% PVA 4% PVA: Productos con Valor Agregado (Alitas, nuggets, etc). 68 Super mercado 12% Rosticero 26%
  • 74. Este tipo de clasificación mostró un incremento de 2% con respecto a 2011. Los consumidores pueden observar a las aves y escoger el pollo que desean comprar, una vez que indican cual desean, el personal del punto de venta procede a matar al ave de modo artesanal y le entrega al consumidor una canal con vísceras y “caliente”. El término pollo “caliente” se refiere al hecho de que después de la remoción de las plumas de la canal, esta no es enfriada y se entrega al consumidor. El pollo tipo Mercado público es el tipo de presentación donde las aves son pigmentadas (se adicionan pigmentos naturales en el alimento), de 49 días, con pesos promedio entre 2.8 y 3 Kilogramos. Estas aves se procesan en rastros, ya sea TIF, privados o municipales, de los cuales se obtienen canales completas y evisceradas. Este tipo de presentación se redujo 1% con respecto a 2011. Se comercializa en mercados establecidos o fijos, expendios, supermercados, mercados de abasto y mercados sobreruedas. Figura 20. Pollo tipo mercado público. 69
  • 75. El tipo pollo rostizado mostró un incremento de 2% con respecto a 2011, este tipo de aves son de menor tamaño, corresponden a la edad de 35 días, con peso promedio entre 1.8 a 2.2 Kilogramos. Se procesan igualmente en rastros TIF, privados o municipales, para obtener canales blancas (no se les adiciona pigmento en su alimento) y evisceradas para ser pintadas durante su procesamiento. Este tipo de canales se comercializa en puntas de venta donde son cocinados y se vende como un producto listo para consumirse. El pollo tipo supermercado disminuyó 3% con respecto a 2011, este tipo de pollo se procesa únicamente en rastros TIF, ya que es requerimiento de este tipo de tiendas. Puede ser pollo pigmentado o pollo blanco según la zona geográfica donde se encuentre el punto de venta y es comercializado pollo de 49 días, como canal completa. El consumo y producción de carne de pollo ha mostrado un notorio crecimiento a nivel nacional y mundial, gracias a la diversificación de productos disponibles en el mercado, lo da a los consumidores alternativas de adquirir productos con un bajo nivel de preparación (cortes o piezas) hasta productos listos para su consumo como son los productos con valor agregado. Figura 21. Pollo tipo supermercado. 70
  • 76. Figura 22. Pollo en piezas. El pollo en piezas es aquella canal que es cortada y empacada en la planta de procesamiento, esta presentación se considera parte de los productos con valor agregado debido a que el corte se considera ya un procesamiento adicional a todos los pasos que comprenden obtener una canal completa (procesamiento primario). El valor es adicional, dadas las necesidades del consumidor de utilizar solo partes del pollo para su consumo. Este tipo de pollo mostró un descenso de 1% con respecto a 2011, ya que actualmente corresponde a 6%. Este tipo de pollo es procesado en plantas TIF, rastros privados y municipales. Los productos con valor agregado, comprenden todos aquellos productos listos para consumirse y que van desde los marinados, hasta productos cocidos como los nuggets. Este tipo de productos mostró un incremento de 1% con respecto a 2011. Este tipo de productos pueden ser elaborados en plantas TIF, rastros privados o municipales, sin embargo estos establecimientos deben contar con cierto nivel de tecnificación para lograr marinados, cubiertas o empanizados, cocciones u horneados a gran escala. 71
  • 77. Figura 23. Productos con Valor Agregado A continuación se presentan los resultados de los muestreos bacteriológicos realizados en puntos de venta a nivel nacional. Cuadro 4. Resultados de muestreos en puntos de venta. Punto de venta Zona Geográfica Mesófilos aerobios Log UFC/ml Coliformes Log UFC/ml Distribución a mayoreo Centro 6.96 6.58 Norte 5.31 4.57 Expendio Sur 5.74 4.63 Mercado Centro 5.99 5.124 Público Norte 5.97 4.65 Sur 6.08 4.96 Mercado sobreruedas Centro 6.19 5.27 Supermercado Centro 5.02 4.04 Norte 4.17 5.50 Sur 5.68 4.92 72
  • 78. Estos resultados denotan el inadecuado manejo que se realiza de la carne de pollo en nuestro país, ya que si comparamos que en la zona Sur, el pollo obtenido en plantas TIF obtuvo un resultado en mesófilos de 3.88 UFC Log10, en los puntos de venta de esa zona es posible observar que existe un incremento en estos conteos de 1.86 de logaritmo cuando el pollo proviene de expendio, mientras que en el mercado público este incremento es de 2.2 logaritmos, y el menor incremento corresponde al supermercado, el cual fue de 1.8 de logaritmo. En cuanto a coliformes, se mostraron incrementos mayores, ya que el pollo que proviene de expendio presenta una diferencia de 1.84 de logaritmo, el pollo de mercados públicos tiene el incremento más alto, ya que se observa una diferencia de 2.17 de logaritmo con respecto a las poblaciones de coliformes obtenidas en plantas TIF de la misma zona, finalmente el incremento observado para el supermercado en esta misma zona fue de 2.13 de logaritmo. Esto indica que las condiciones de manejo de canales deben mejorarse una vez que estas salen de la planta de procesamiento. Sin embargo, esto no será suficiente si no se logra una cadena de frío que asegure que no existen oportunidades de crecimiento de las bacterias que posee la canal como carga total una vez que finaliza el procesamiento primario. 73
  • 79. Adams R.M. and Moss M.O. Food microbiology. 3 rd Edition. 2008. Guildford UK. Anderson P. N., M. E. Hume, J. A. Byrd, C. Hernandez, S. M. Stevens, K. Stringfellow , and D. J. Caldwell. 2010. Molecular analysis of Salmonella serotypes at different stages of commercial turkey processing. Poult Sci. 89:2030–2037. Arenas H.A. Caracterización de los consumidores de carne de pollo en la zona metropolitana del valle de México. Tesis de maestría, Colegio de Postgraduados, Institución de enseñanza e investigación en ciencias agrícolas. 2011. Atabay, H. I., M. Waino, and M. Madsen. 2006. Detection and diversity of various Arcobacter species in Danish poultry. Int. J. Food Microbiol. 109:139–145. Bashor, M.P., Curtis, P.A., Keener, K.M., Sheldon, B.W., Kathariou, S. and Orborne J.A. 2004. Effects of carcass washers on Campylobacter contamination in large broiler processing plants. Poult. Sci 83:1232-1239. Bauer, F., I. Seuss, P. Paulsen, and S. Vali. 1994. The formation of biogenic amines in meat and meat products. Proc. of 40th Int. Cong. of Meat Sci. Tech. S-V.25. ICoMST, The Hague, the Netherlands. Berndtson, E., M. Tivemo, and A. Engvall, 1992. Distribution and numbers of Campylobacter in newly slaughtered broiler chickens and hens. Int. J. Food Microbiol. 15:45–50 Berrang M. E., W. R. Windham, and R. J. Meinersmann. 2011. Campylobacter, Salmonella, and Escherichia coli on broiler carcasses subjected to a high pH scald and low pH postpick chlorine dip. Poult. Sci. 90:896–900. Bilgili S. F.(2001). Product shelf life. Worthwhile Operational Guidelines and Suggestions. Broiler Processing Timely Information – December 2001. Poultry Science Department, Auburn University. Online. Bodnaruk, P. W., J. L. Schmelder, P. J. Krakar, and R. B. Tompkin. 1998. A comparison of Escherichia coli levels at four sampling sites on turkey carcasses. Poult. Sci. 77:1531–1533. Bryan FL. Ayers JC. And Kraft AA. 1968. Salmonella associated with feather-processed turkey products. Applied Microbiology. 16:1-9. 74
  • 80. Carroll, C. D., and C. Z. Alvarado. 2008. Comparison of air and immersion chilling on meat quality and shelf life of marinated broiler breast fillets. Poult. Sci. 87:368–372. Chokboonmongkol C., P. Patchanee ,* G. Gölz , K.-H. Zessin , and T. Alter. 2013. Prevalence, quantitative load, and antimicrobial resistance of Campylobacter spp. from broiler ceca and broiler skin samples in Thailand. Poult. Sci. 92:462–467. Codex Alimentarius - Higiene de los Alimentos - Textos Básicos - Segunda Edición. Secretaría del Programa Conjunto FAO/OMS sobre Normas Alimentarias Organización de las Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentación Viale delle Terme di Caracalla 00100 Roma, Italia Dainty, R. H., and B. M. Mackey. 1992. The relationship between the phenotypic properties of bacteria from chill-stored meat and spoilage processes. J. Appl. Bact. 73:103S–114S. Davis M. A. and D. E. Conner. 2007. Antimicrobial Effects of Pseudomonas aeruginosa on Survivability and Recovery of Campylobacter jejuni on Poultry Products. Poultry Science 86:760–764. Davis, M. A., and D. E. Conner. 2000. Incidence of Campylobacter from raw, retail poultry products. Poult. Sci. 79(Suppl. 1):54 Davis M. A. and D. E. Conner. B. 2007. Survival of Campylobacter jejuni on Poultry Skin and Meat at Varying Temperatures. Poultry Science 86:765– 767 Demirok E., G. Veluz, W. V. Stuyvenberg, M. P. Castañeda, A. Byrd, and C. Z. Alvarado. 2013. Quality and safety of broiler meat in various chilling systems. Poultry Science 92 :1117–1126. Diarrassouba, F., M. S. Diarra, S. Bach, P. Delaquis, J. Pritchard, E. Topp, and B. J. Skura. 2007. Antibiotic resistance and virulence genes in commensal Escherichia coli and Salmonella isolates from commercial broiler chicken farms. J. Food Prot. 70:1316–1327. Dong U. Ahn, Il Suk Kim, and Eun Joo Lee. 2013. Irradiation and additive combinations on the pathogen reduction and quality of poultry meat. Poult. Sci. 92:534–545. Eberle K. N. and A. S. Kiess. 2012. Phenotypic and genotypic methods for typing Campylobacter jejuni and Campylobacter coli in poultry. Poult. Sci. 91 :255–264 EFSA (European Food Safety Authority). 2010. Analysis of the baseline survey on the prevalence of Campylobacter in broiler batches and of Campylobacter and Salmonella on broiler carcasses in the EU, 2008, Part A: Campylobacter and Salmonella prevalence estimates. EFSA J. 8:1503. 75
  • 81. EFSA, CDC. 2011. The European Union summary report on trends and sources of zoonoses, zoonotic agents and food-borne outbreaks in 2009. EFSA J. 9:2090 FAO. (2013) Food Outlook, Biannual Report on Global Food Markets http://www.fao.org/docrep/019/i3473e/i3473e.pdf FAO. Perspectivas Alimentarias Análisis del Mercado Mundial. Depósito de documentos de la FAO. Junio de 2008. http://www.fao.org/docrep/011/ai466s/ai466s08.htm Fletcher D. L., Russell S. M. and Walker J.M.1993. An Evaluation of a Rinse Procedure Using Sodium Bicarbonate and Hydrogen Peroxide on the Recovery of Bacteria from Broiler Carcasses. Poult. Sci. 72:2152-2156. Forgetta V., H. Rempel, F. Malouin , R. Jr. Vaillancourt, E. Topp, K. Dewar and M. S. Diarra. 2012. Pathogenic and multidrug-resistant Escherichia fergusonii from broiler chicken. Poult. Sci. 91:512–525. Franchin, P. R., P. J. Ogliari, and C. R. V. Batista. 2007. Frequency of thermophilic Campylobacter in broiler chickens during industrial processing in a Southern Brazil slaughterhouse. Br. Poult.Sci. 48:127–132. Fraqueza M. J. and A. S. Barreto. 2009. The effect on turkey meat shelf life of modified-atmosphere packaging with an argon mixture. Poult. Sci. 88:1991–1998 Fraqueza M. J. and A. S. Barreto. 2011. Gas mixtures approach to improve turkey meat shelf life under modified atmosphere packaging: The effect of carbon monoxide. Poult. Sci. 90:2076–2084. Goh S. G., C. H. Kuan, Y. Y. Loo, W. S. Chang, Y. L. Lye, P. Soopna, J. Y. H. Tang, Y. Nakaguchi, M. Nishibuchi, L. Afsah-Hejri, and R. Son. 2012. Listeria monocytogenes in retailed raw chicken meat in Malaysia. Poult. Sci. 91:2686–2690. Green SS. Result of a national survey: Salmonella in broilers and overflow chill tank water, 1982-1984. Science Division, Food safety and Inspection Service, US Departament of Agriculture, Washington, DC. 1987 Harris, N. V., N. S. Weiss, and C. M. Nolan. 1986. The role of poultry and meats in the etiology of Campylobacter jejuni/coli enteritis. Am. J. Public Health 6:407–411. Herman, L., M. Heyndrickx, K. Grijspeerdt, and D. Vandekerchove. 2003. Routes for Campylobacter contamination of poultry meat: Epidemiological study from hatchery to slaughterhouse. Epidemiol. Infect. 131:1169–1180. Hermans, D., F. Pasmans, W. Messens, A. Martel, F. Van Immerseel, G. Rasschaert, M. Heyndrickx, K. Van Deun, and F. Haesebrouck. 2012. 76