El documento describe el potencial de ∆FosB como diana terapéutica en el tratamiento de la adicción a la cocaína. ∆FosB es un factor de transcripción implicado en la plasticidad neuronal asociada a la adicción. El documento propone utilizar pequeños ARN de interferencia (siRNA) específicos contra ∆FosB para reducir su expresión y acelerar la recuperación de personas en tratamiento por adicción a la cocaína, previniendo recaídas. Los resultados esperados son una disminución progresiva

1. ∆FOSB COMO DIANA TERAPÉUTICA TEÓRICA
EN EL TRATAMIENTO PARA LA ADICCIÓN
A COCAÍNA
• Eduardo de la Usada
• Fernando Fernández
• Laura Martín
• Javier Merino
• Lorena Torres

2. ADICCIÓN
Dependencia física o psicofisiológica de una determinada
sustancia química cuya supresión causa síntomas de
privación al individuo, hasta el punto de que detenerla
resulta difícil y causa alteraciones psíquicas graves.
• Negación
• Memoria eufórica
• Falta de autocontrol
• Deseo automático
• Trastorno de congelamiento emocional
• Conducta autodestructiva
• Búsqueda compulsiva
SÍNTOMAS

3. VÍA DE RECOMPENSA
Vía mesolímbica dopaminérgica asociada con la
modulación de la conducta frente a estímulos
de gratificación y motivación.
Es el mecanismo cerebral que media la recompensa.
Área tegmental ventral (VTA)
Núcleo accumbens (NAc)
Corteza prefrontal (mPFC)
Tomado de: Russo SJ, Nestler EJ. (2013)

4. Tomado y modificado de: Holgate JY y Bartlett SE. (2015)
ANATOMÍA

5. DROGA
Cualquier sustancia adictiva en distinto grado
- Blandas: poco adictivas
- Duras: muy adictivas
- De diseño: modificada a partir de otra

6. COCAÍNA
Alcaloide obtenido de las hojas de la planta de coca.
(Erythroxylum coca)
Vías de
administración
Efectos Fisiología
Esnifada Euforia ↑ Temperatura
Sobre mucosas Estado de alerta Taquicardia
Fumada Hipersensibilidad Vasoconstricción
Inyectada Anorexigenia Dilatación pupila
Vías de
administración
Efectos Fisiología
Esnifada Euforia ↑ Temperatura
Sobre mucosas Estado de alerta Taquicardia
Fumada Hipersensibilidad Vasoconstricción
Inyectada Anorexigenia Dilatación pupila
Vías de
administración
Efectos Fisiología
Esnifada Euforia ↑ Temperatura
Sobre mucosas Estado de alerta Taquicardia
Fumada Hipersensibilidad Vasoconstricción
Inyectada Anorexigenia Dilatación pupila

7. Cannabis Anfetaminas
HeroínaÉxtasis Cocaína
PREVALENCIA

8. MECANISMO DE ACCIÓN
La cocaína bloquea la
recaptación de dopamina por
DAT (Dopamine Transporter)
provocando su acumulación en
la hendidura sináptica. Esto
desemboca en una enorme
sobreestimulación de la neurona
post-sináptica.
Tomado de: NIDA
(www.drugabuse.gov/)

9. SEÑALIZACIÓN

10. SEÑALIZACIÓN

11. Δ
SEÑALIZACIÓN

12. Tomado de: Nestler EJ. (2004)
DINORFINA

13. Δ
Δ
SEÑALIZACIÓN

14. Δ
Δ
SEÑALIZACIÓN

15. Δ
Δ
SEÑALIZACIÓN

16. Diana de ΔFosB Función Efecto inducido por ΔFosB
GluR2
Subunidad
receptores AMPA
Disminuye conductancia del canal 
Aumenta mecanismos de recompensa
Cdk5
Desarrollo,
supervivencia y
señalización
Aumenta expansión de dendritas 
Paradójicamente disminuye mecanismos
de recompensa.
NF-κB
Respuesta
inflamatoria en
NAc y desarrollo.
Aumenta expansión de dendritas 
Aumentan mecanismos de recompensa
Dinorfina κOR en VTA
Inhibe transmisión dopaminérgica 
Aumenta mecanismos de recompensa
SEÑALIZACIÓN
Tomadas y modificadas de: Nestler EJ. (2013)

17. POSIBLES DIANAS

18. RECEPTOR D1

19. PKA

20. P-ERK

21. DARPP-32

22. ΔFOSB

23. ¿POR QUÉ ΔFOSB?
ΔFosB es un factor de transcripción
implicado en plasticidad neuronal que
sólo se expresa en adicción. Al igual
que FosB, se asocia con Jun. De todas
las posibles dianas, esta es la más
selectiva y la menos susceptible de
interferir con otras vías de señalización,
pues FosB continúa expresándose.

24. SPLICING DE ΔFOSB
Tomado de:
Carle T. (2006)

25. ¿POR QUÉ USAR siRNA?
Puesto que ΔFosB es una forma de
splicing alternativo de FosB que sólo se
diferencia en la ausencia de los 101
aminoácidos del extremo C-terminal, el
siRNA es la única forma de actuar de
manera selectiva.

26. Características:
• Longitud = 20-25 nucleótidos
• %GC = 50%
• Estrategias para aumentar estabilidad
• Específico de ∆FosB
I II III IVa IVb
mRNA FosB
I II III IVa
mRNA ∆FosB
IVa
siRNA ∆FosB
3’ UTR
3’ UTR
3’ UTR
DISEÑO siRNA

27. Posibilidades
-Inyección DNA desnudo
-Liposomas
-Métodos virales
-Nanopartículas
Forma de
administración
-Intravenosa
-Intranasal
Liposomas catiónicos por vía intravenosa (Pulford et al. 2010)
- Lipofectamina
- Péptidos RVG-9R, RVM-9R
ADMINISTRACIÓN

28. Línea celular MCF-7 con construcción inducible de ∆FosB
(Li et al. 2015)
scrambled ∆FosB
Células control - Células control + Células siRNA control Células siRNA
inductor
1 2 3 4
∆FosB
-WB
-RT-PCR
FosB
ENSAYO IN VITRO

29. 3 grupos experimentales
Ratas control -
Ratas control +
Ratas tratadas
siRNA ∆FosB
MIRAR
NIVELES DE
∆FosB Y FosB
ENSAYO IN VIVO

30. RESULTADOS ESPERADOS
Disminución
progresiva de
∆FosB
No podemos
actuar frente
a la proteína
formada
Eficaz
frente a
recaídas

31. • ΔFosB se expresa solo en patologías
• siRNA son específicos off target effects
• Derivados del método  liposomas 
ensayos de toxicidad
EFECTOS SECUNDARIOS
Y TERAPIA COMBINADA
• Agonistas del
receptor
• Antidepresivos

32. OTRAS POSIBLES UTILIZACIONES
Utilización en otras adicciones
Cáncer de mama
dependiente de
MMP-9

33. CONCLUSIONES
• El tratamiento aceleraría la recuperación de las
personas que están en proceso de rehabilitación de la
adicción a cocaína.
• Tendría efectos protectores frente a recaídas.
• Posibilidad de tratamiento a largo plazo.
• Necesidad de terapia combinada frente a los síntomas
del síndrome de abstinencia.
• Posibilidad de uso en otras adicciones e incluso en otras
patologías.

34. 1. Carle T. Biochemical characterization of ∆FosB. Thesis. Texas University. 2006
2. Gil-Verona JA, Pastor JF, de Paz F, Barbosa M, Macias-Fernández JA, Maniega MA, et al.
[Neurobiology of addiction to drugs of abuse]. Rev Neurol. 2003 Feb 15;36(4):361–5.
3. Haber SN. Neuroanatomy of Reward: A View from the Ventral Striatum. In: Gottfried JA, editor.
Neurobiology of Sensation and Reward [Internet]. Boca Raton (FL): CRC Press/Taylor & Francis;
2011 [cited 2016 Feb 18]. Available from: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK92777/
4. Holgate JY, Bartlett SE. Early Life Stress, Nicotinic Acetylcholine Receptors and Alcohol Use
Disorders. Brain Sci. 2015 Jun 30;5(3):258–74.
5. Kenny PJ. Common cellular and molecular mechanisms in obesity and drug addiction. Nat Rev
Neurosci. 2011 Nov;12(11):638–51.
6. Li H, Li L, Zheng H, Yao X, Zang W. Regulatory effects of ΔFosB on proliferation and apoptosis of
MCF-7 breast cancer cells. Tumour Biol J Int Soc Oncodevelopmental Biol Med. 2015 Nov 25;
7. Nestler EJ. Historical review: Molecular and cellular mechanisms of opiate and cocaine
addiction. Trends Pharmacol Sci. 2004 Apr;25(4):210–8.
8. Nestler EJ. ΔFosB: a Molecular Switch for Reward, Journal of Drug and Alcohol Research, 2
(2013), art235651. doi:10.4303/jdar/235651
9. Observatorio Europeo de las drogas y las toxicomanías. Informe europeo sobre drogas:
tendencias y novedades. 2013.
10.Pulford B, Reim N, Bell A, Veatch J, Forster G, Bender H, et al. Liposome-siRNA-Peptide
Complexes Cross the Blood-Brain Barrier and Significantly Decrease PrPC on Neuronal Cells and
PrPRES in Infected Cell Cultures. PLoS ONE. 2010 Jun 14;5(6):e11085.
11.Ron D, Jurd R. The ‘ups and downs’ of signaling cascades in addiction. Sci STKE Signal Transduct
Knowl Environ. 2005 Nov 8;2005(309):re14.
12.Ruffle JK. Molecular neurobiology of addiction: what’s all the (Δ)FosB about? Am J Drug Alcohol
Abuse. 2014 Nov;40(6):428–37.
13.Russo SJ, Nestler EJ. The brain reward circuitry in mood disorders. Nat Rev Neurosci. 2013
BIBLIOGRAFÍA

35. ¡MUCHAS GRACIAS!