Volumetría de neutralización - Método Directo y por Retroceso del Ácido sulfú...Noelia Centurion
Informe Escrito de la Titulación Directa y por Retroceso del ácido sulfúrico. En el anexo se encuentra el link del videotutorial que acompaña el trabajo.
La romatografía de gases es una técnica de separación de los componentes de una muestra por medio de una fase estacionaria y una fase móvil. También se aplica para realizar análisis cuantitativo y cualitativos. En el mapa conceptual se muestra los aspectos mas importantes de esta técnica de análisis.
Ley de Lambert-Beer (Espectrofotometría)Miguel Barba
Resumen rápido sobre los fundamentos de la espectrofotometría de absorción, y de la ley de Lambert-Beer, y su aplicación. (Esta presentación no es de mi autoría, pero la publico para su uso)
Cuaderno de problemas de cinética química y catálisisayabo
El cuaderno contiene, un conjunto de fundamentos al inicio de cada tema, en los que se presentan las bases teóricas que dan sustento a la solución matemática presentada en los problemas resueltos. Los fundamentos teóricos no incluyen un análisis profundo de la deducción matemática usada para llegar a las ecuaciones presentadas, pues estas son debidamente presentadas en clase, y el uso del cuaderno pretende ser un apoyo a la clase impartida por el profesor, no sustituirla por completo.
Finalmente, se presenta un conjunto de problemas propuestos para que el alumno desarrolle la habilidad adquirida durante la clase y de la lectura y análisis de los problemas aquí resueltos. Además, para que el alumno pueda comparar con sus resultados de acuerdo a su procedimiento, se anexa también el resultado correcto de los problemas propuestos.
Volumetría de neutralización - Método Directo y por Retroceso del Ácido sulfú...Noelia Centurion
Informe Escrito de la Titulación Directa y por Retroceso del ácido sulfúrico. En el anexo se encuentra el link del videotutorial que acompaña el trabajo.
La romatografía de gases es una técnica de separación de los componentes de una muestra por medio de una fase estacionaria y una fase móvil. También se aplica para realizar análisis cuantitativo y cualitativos. En el mapa conceptual se muestra los aspectos mas importantes de esta técnica de análisis.
Ley de Lambert-Beer (Espectrofotometría)Miguel Barba
Resumen rápido sobre los fundamentos de la espectrofotometría de absorción, y de la ley de Lambert-Beer, y su aplicación. (Esta presentación no es de mi autoría, pero la publico para su uso)
Cuaderno de problemas de cinética química y catálisisayabo
El cuaderno contiene, un conjunto de fundamentos al inicio de cada tema, en los que se presentan las bases teóricas que dan sustento a la solución matemática presentada en los problemas resueltos. Los fundamentos teóricos no incluyen un análisis profundo de la deducción matemática usada para llegar a las ecuaciones presentadas, pues estas son debidamente presentadas en clase, y el uso del cuaderno pretende ser un apoyo a la clase impartida por el profesor, no sustituirla por completo.
Finalmente, se presenta un conjunto de problemas propuestos para que el alumno desarrolle la habilidad adquirida durante la clase y de la lectura y análisis de los problemas aquí resueltos. Además, para que el alumno pueda comparar con sus resultados de acuerdo a su procedimiento, se anexa también el resultado correcto de los problemas propuestos.
1. INTRODUCCIÓN
1. Ley de Lambert-Beer
2. Determinación de proteínas
1. Absorbancia 280
2. Biuret
3. Lowry
4. Bradford
2. PARTE II: REVISIÓN DE MÉTODOS
ESPECTROSCÓPICOS Y ELABORACIÓN
DE CURVA ESTÁNDAR DE PROTEÍNA
Objetivos
Aplicar un método espectrofotométrico para medir
la concentración de una proteína.
Conocer el manejo de micropipetas y
espectrofotómetros.
Construir curvas de calibración y comprender su
importancia.
Determinar el intervalo de sensibilidad de una curva
estándar.
3. ESPECTROFOTOMETRÍA
Definición
Método de análisis óptico más usado en las
investigaciones biológicas.
El espectrofotómetro es un instrumento
que permite comparar la radiación
absorbida o transmitida por una solución
que contiene una cantidad desconocida de
soluto, y una que contiene una cantidad
conocida de la misma sustancia
5. Ley de Lambert - Beer
Relaciona la absorción de luz
con las propiedades del
material atravesado.
6. LEY DE LAMBERT Y BEER
La ley explica que hay una relación
exponencial entre la transmisión de luz a
través de una sustancia y la concentración de
la sustancia, así como también entre la
transmisión y la longitud del cuerpo que la luz
atraviesa.
A = ε·c·l
Donde: A = absorbencia;
= Coeficiente de extinción molar;
l = longitud de la celda.
7. COEFICIENTE DE
EXTINCIÓN MOLAR
Es una medida de la cantidad de luz
absorbida por unidad de concentración.
Un compuesto con un alto valor de
coeficiente de extinción molar es muy
eficiente en la absorción de luz de la longitud
de onda adecuada y, por lo tanto, puede
detectarse por medidas de absorción cuando
se encuentra en disolución a
concentraciones muy BAJAS.
8. Curva Patrón
Es un marco de referencia que se
construye de cantidades conocidas de una
sustancia:
por ejemplo la albúmina sérica bovina
10. Cuantificación de Proteínas
Determinar la concentración de proteínas en una
muestra biológica es una técnica de rutina básica
cuando se aborda un esquema de purificación de
una proteína concreta:
A) cuando se quiere conocer la actividad específica
de una preparación enzimática,
B) para el diagnóstico de enfermedades,
C) así como para otros muchos propósitos.
11. Cuantificación de Proteínas
Existen diferentes métodos para la
cuantificación de proteínas. Muchos
de estos métodos se basan en:
a) la propiedad intrínseca de las
proteínas para absorber luz en el UV,
b) para la formación de derivados
químicos, o
c) la capacidad que tienen las proteínas
de unir ciertos colorantes.
12. PROTEÍNAS y la absorción en la
región UV
Las bandas de absorción más significativas
se encuentra en el ultravioleta cercano, en
el intervalo de longitud de onda entre 230 y
300 nm.
Aminoácidos aromáticos, la histidina y la
cistina.
La cistina presenta una banda centrada a
250 nm.
13. Cálculo para obtener la
concentración de proteína
Coeficiente de extinción molar del BSA es 43824 M-
1cm-1
o bien
Coeficiente de extinción molar del BSA 6.6 para
una solución de BSA 1% (10mg/mL)
14. REACCIÓN DE BIURET
La reacción debe su
nombre al Biuret, una
molécula formada a
partir de dos de urea
(H2N-CO-NH-CO-NH2).
15. MÉTODO DE LOWRY
Reacción de determinación de proteínas
en dos pasos:
1. Reacción de Biuret.
2. La reducción, también en medio básico,
del reactivo de Folin-Ciocalteau por los
grupos fenólicos de los residuos de
tirosina.
16. PRIMER PASO SEGUNDO PASO
Reacción de
Cu2+ en
medio
alcalino
Reacción con el
Folin-Cicalteau
Enlaces peptídicos tirosina, triptófano, y
en menor grado por cisteína,
cistina e histidina.
17.
18. Tinción de proteínas con Azul
de Coomasie
Ensayo en tubo método de Bradford.
Hacer curva patrón
Tinción de proteínas en gel de
poliacrilamida- SDS
19. BRADFORD
Se basa en la unión de un colorante, Comassie Blue
G-250 (también Serva Blue) a las proteínas.
El colorante, en solución ácida, existe en dos formas
una azul y otra naranja.
Las proteínas se unen a la forma azul para formar un
complejo proteína-colorante con un coeficiente de
extinción mayor que el colorante libre.
Este método es sensible (1-15 μg), simple, rápido,
barato y pocas sustancias interfieren en su
determinación.
Entre las sustancias que interfieren están los
detergentes y las soluciones básicas.
20. EL AZUL DE COOMASIE Y LOS
AMINOÁCIDOS QUE RECONOCE