Técnica de análisis que convierte las moléculas en iones para poder moverlos y manipularlos por medio de campos eléctricos y magnéticos.

1. ESPECTROMETRÍA
DE MASAS
ING. MARTHA ALICIA ESPINOZA SÁNCHEZ

2. 1966
1920’s
Desarrollo de
Ionización
Química
Impacto
Electrónico
Arthur J.
Dempster
1912
Habilidad para
separar
moléculas
(masa/carga).
J.J. Thompson
1940’s
Aparecen
espectrómetros
de masas
comerciales
1956
Primeras
muestras
biológicas
(esteroides)
analizadas.
1980´s
Matrix-assisted
laser desorption
ionization
(MALDI).

5. ESPECTROMETRÍA DE MASAS
Es una técnica de análisis que convierte las moléculas en iones para
poder moverlos y manipularlos por medio de campos eléctricos y
magnéticos.
• Es la manera* de determinar las masas moleculares.
• Destruye la muestra.
• Cantidades muy pequeñas son suficientes para análisis (µg a
pg).
• La muestra se vaporiza en un alto vacío y se expone a un rayo
de electrones de alta energía.
• La energía del rayo es usualmente ~70 eV (67100J/mol).
• Se produce un radical catiónico.

6. ESPECTROMETRÍA DE MASAS
ESPECTRÓMETRO DE MASAS
Es un dispositivo que permite
analizar la composición de
diferentes elementos químicos e
isótopos atómicos, separando los
núcleos atómicos en función de su
relación carga-masa (z/m).
IONIZACIÓN ELECTRÓNICA
Se miden razones carga/masa de iones,
calentando un haz de material del
compuesto a analizar hasta vaporizarlo e
ionizar los diferentes átomos.
1. La muestra es ionizada, usualmente a cationes por pérdida de un electrón.
“The Ion Source”
2. Los iones son ordenados y separados de acuerdo a su carga y masa.
“The mass analyzer”
3. Los iones separados son medidos, y los resultados se muestran en una gráfica.
“The detector”

7. MASS SPECTRA

8. MASS SPECTRA

10. 1.
Electrospray and
Tandem Mass
Spectrometry
“Atmospheric pressure ionization API”

11. ELECTROSPRAY IONIZATION
◎Técnica usada para producir iones usando un
electrospray en el cual un alto voltaje es aplicado a un
líquido para crear un aerosol.
◎Es conocida como una técnica “soft ionization”.
ESI
Fue reportada por primera ves en 1984
por John Fenn y Masamichi Yamashita,
Novel prize in chemistry in 2002. “ESI for
the analysis of biological
macromolecules”.

13. ELECTROSPRAY IONIZATION
ESI
Es usada especialmente en producción de
iones de macromoléculas ya que supera la
propensión de estas moléculas a
fragmentarse una vez ionizadas.

14. TANDEM MASS SPECTROMETRY
Esta técnica ofrece información adicional acerca de iones
específicos. Con este enfoque diferentes iones de interés
son seleccionados por su relación m/z por la primera EM y
se fragmentan por disociación.
Los fragmentos son separados en base a su relación m/z
en una segunda ronda de EM es usada para secuenciar
proteínas y oligonucleidos ya que los fragmentos pueden
ser usados para secuencias nucleicas y peptídicas
previstas.

15. TANDEM MASS SPECTROMETRY

16. PEPTIDE MASS
FINGERPRINTING
Peptide Mass Mapping
2.

17. PEPTIDE MASS FINGERPRINTING
◎La manera de abordar para identificar proteínas
incluye la separación de proteínas por electroforesis o
cromatografía líquida.
◎Las proteínas son separadas por endoproteasas
específicas, normalmente tripsina.
◎Después de la digestión los péptidos generados son
investigados por determinación de masas moleculares.
◎Comparación de los resultados con bases de datos.
DESVENTAJA
A pesar de ser muy útil para
identificación de proteínas puras,
suele fallar para identificar mezclas
de proteínas.

18. PEPTIDE MASS FINGERPRINTING

19. PEPTIDE MASS FINGERPRINTING

20. POST SOURCE
DECAY (PSD)
MALDI-MS
2.

21. POST SOURCE DECAY
◎Es una extensión de MALDI/MS que permite
observar e identificar fragmentos
estructurales de iones del decaimiento,
tomando lugar en la región libre después de la
fuente de ionización.

22. POST SOURCE DECAY

23. POST SOURCE DECAY

24. POST SOURCE DECAY

25. PSD in MALDI/MS

27. ¡GRACIAS!
¿Dudas?