La espectroscopia ultravioleta-visible es una técnica analítica que permite determinar la concentración de compuestos en solución midiendo la absorción de la luz UV-visible. Se basa en la capacidad de las moléculas para absorber radiaciones en este rango del espectro electromagnético. Se utiliza comúnmente para cuantificar iones metálicos y compuestos orgánicos en solución siguiendo la Ley de Lambert-Beer. Los espectrofotómetros UV-visible constan de una fuente de luz, un monoc

2. ESPECTROSCOPIA
ULTRAVIOLETA-VISIBLE
¿Qué es la espectroscopia
ultravioleta-visible?
La espectroscopia ultravioleta-visible es
una técnica analítica que permite
determinarla concentración de un
compuesto en solución.

3. ESPECTROSCOPIA
ULTRAVIOLETA-VISIBLE
Fundamento
El fundamento de la espectroscospia se
debe a la capacidad de las moléculas
para absorber radiaciones, entre ellas las
radiaciones dentro del espectro UVvisible.

4. ESPECTROSCOPIA
ULTRAVIOLETA-VISIBLE
Función
Se utiliza de manera general en la
determinación cuantitativa de los
componentes de soluciones de iones de
metales de transición y compuestos
orgánicos altamente conjugados.

5. ESPECTROSCOPIA
ULTRAVIOLETA-VISIBLE
Historia
Aunque el descubrimiento de la dispersión de la luz
por Newton data de 1704 el desarrollo de las técnicas
experimentales en este campo fue muy lento. Sólo
más de un siglo después Fraunhofer creó un sistema
óptico, que mediante uso de prismas y rendija,
permitió detectar en el espectro de la luz solar las
líneas de absorción que llevan su nombre

7. ESPECTROSCOPIA
ULTRAVIOLETA-VISIBLE
Ley de Lambert-Beer
El enunciado de la ley de Lambert-Beer
dice: "La intensidad de un haz de luz
monocromática, que incide perpendicular
sobre una muestra, decrece
exponencialmente con la concentración de
la muestra."

8. Ley de Lambert-Beer
FÓRMULA

9. ESPECTROSCOPIA
ULTRAVIOLETA-VISIBLE
Espectro electromagnético
La región UV se define como el rango de
longitudes de onda de 195 a 400nm. Es
una región de energía muy alta provoca
daño al ojo humano así como quemadura
común

11. Longitud de onda del
espectro UV
ESPECTROSCOPIA
ULTRAVIOLETA-VISIBLE

14. ESPECTROSCOPIA
ULTRAVIOLETA-VISIBLE
Instrumentación para la medición de absorbancias de la
luz visible y ultravioleta: espectrofotómetro UV-visible
Todos los espectrofotómetros
constan de:

15. ESPECTROSCOPIA
ULTRAVIOLETA-VISIBLE
Una fuente de energía radiante: lámpara de deuterio y
tungsteno.
Un monocromador para la selección de radiaciones de una
determinada longitud de onda: filtros, prismas, redes de
difracción.
Un compartimento donde se aloja un recipiente
transparente que contenga la muestra pueden ser de
vidrio, cuarzo o plástico transparente. Para medir en UV
se deben usar las de cuarzo o sílice fundido, porque el
vidrio no transmite la radiación UV.
Un detector de luz y un amplificador convertidor de las
señales luminosas en señales eléctricas.
Un registrador o sistema de lectura de datos.
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17. Usos
En el campo de las ciencias de la vida,
normalmente se aplica la espectroscopia
ultravioleta-visible en el análisis de ácidos
nucleídos, proteínas y cultivos de células
bacterianas.
ESPECTROSCOPIA
ULTRAVIOLETA-VISIBLE

18. ESPECTROSCOPIA
ULTRAVIOLETA-VISIBLE
Determinación de la concentración de ácidos nucleicos
Pureza de ácidos nucleicos
Determinación de la concentración de proteínas mediante medición directa o
ensayos colorimétricos, estudio de reacciones enzimáticas y control de curvas de
crecimiento de suspensiones de células bacterianas
Análisis cuantitativo y cualitativo
Estandarización de colores de diversos materiales
Determinación de niveles de contaminación
Determinación de trazas de impurezas

21. BIBLIOGRAFIA
Mettler-Toledo International Inc. all rights reserved. (2020). Conjunto de herramientas
de espectroscopia ultravioleta-visible para las ciencias de la vida.
https://www.mt.com/mx/es/home/library/guides/laboratory-division/life-science/uvvis-
toolbox-for-life-
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20aplicaciones
Facultad de Química. (2021). Espectroscopía de Infrarrojo y UV-Visible.
https://quimica.unam.mx/investigacion/servicios-para-la
investigacion/usaii/espectroscopia-de-infrarrojo-y-uv-visible/
https://utanuror7.files.wordpress.com/2012/07/espectroscopia-uv-visible1.pdf
Díaz, N. A., Ruiz, J. A. B., Reyes, E. F., Cejudo, A. G., Novo, J. J., Peinado, J. P., ... &
Fiñana, I. T. (2000). Espectrofometría: Espectros de absorción y cuantificación
colorimétrica de biomoléculas. sf http://www. uco. es/dptos/bioquimica-
biolmol/pdfs/08_ESPECTROFOTOMETR% C3% 8DA. pdf (último acceso: 9 de febrero
de 2016).
Espectrofotometría UV-VIS. (2019). Cromtek.
https://www.cromtek.cl/espectrofotometria-uv-vis/