El documento describe la espectroscopia ultravioleta-visible (UV-VIS), explicando que mide la absorción de la luz UV-VIS por moléculas entre 380-780nm. Esto causa transiciones electrónicas que identifican grupos funcionales y determinan la concentración de sustancias según la ley de Beer. El espectrómetro UV-VIS mide la luz absorbida por una muestra para analizar su composición y cantidad.
La espectrofotometría uv-visible (UV-VIS) es una práctica analítica que permite determinar la concentración de un compuesto en solución. La espectrofotometría uv-visible se basa en la medición de absorción de radiación UV o visible por determinadas moléculas, la radiación correspondiente a estas regiones del espectro electromagnético causa transiciones electrónicas a longitudes de onda característica de la estructura molecular de un compuesto.
Aplicación de la espectrofotometría uv-visible
La espectrofotometría uv-visible es utilizada generalmente en la valoración cuantitativa de soluciones de iones metálicos de transición y compuestos orgánicos, ambos absorben la luz. La Ley de Beer-Lambert estipula que la absorbancia de una solución es directamente proporcional de la concentración de la solución, por lo que la espectrofotometría uv-visible puede usarse para determinar la concentración de la solución.
Espectrofotómetro uv-visible
El espectrofotómetro uv-visible es un instrumento óptico que tiene la capacidad de resolver radiaciones de diferentes longitudes de onda dentro del rango ultravioleta y visible (por lo general este rango se encuentra dentro de los valores de 190 a 1,100 nm).
Descripción del equipo:
Está compuesto por una fase luminosa, monocromador, elementos fotodetectores y un sistema de registro.
• Fase luminosa: una bombilla pequeña de filamento enrollado es ideal para concentrar la luz en un haz intenso. La incandescencia causada por la luz visible de la lámpara de tungsteno-halógeno se basa en las altas temperaturas de calentamiento que alcanzan el filamento.
• Moncromadores: descompone la luz incidente de un espectro de luz, es decir, se encarga de separar y seleccionar la radiación de onda que se quiere analizar. Está compuesto por las rendijas de entradas y salida de, colimadores y el elemento de dispersión, en los monocromadores convencionales se usa el prisma como elemento de dispersión.
La espectrofotometría uv-visible (UV-VIS) es una práctica analítica que permite determinar la concentración de un compuesto en solución. La espectrofotometría uv-visible se basa en la medición de absorción de radiación UV o visible por determinadas moléculas, la radiación correspondiente a estas regiones del espectro electromagnético causa transiciones electrónicas a longitudes de onda característica de la estructura molecular de un compuesto.
Aplicación de la espectrofotometría uv-visible
La espectrofotometría uv-visible es utilizada generalmente en la valoración cuantitativa de soluciones de iones metálicos de transición y compuestos orgánicos, ambos absorben la luz. La Ley de Beer-Lambert estipula que la absorbancia de una solución es directamente proporcional de la concentración de la solución, por lo que la espectrofotometría uv-visible puede usarse para determinar la concentración de la solución.
Espectrofotómetro uv-visible
El espectrofotómetro uv-visible es un instrumento óptico que tiene la capacidad de resolver radiaciones de diferentes longitudes de onda dentro del rango ultravioleta y visible (por lo general este rango se encuentra dentro de los valores de 190 a 1,100 nm).
Descripción del equipo:
Está compuesto por una fase luminosa, monocromador, elementos fotodetectores y un sistema de registro.
• Fase luminosa: una bombilla pequeña de filamento enrollado es ideal para concentrar la luz en un haz intenso. La incandescencia causada por la luz visible de la lámpara de tungsteno-halógeno se basa en las altas temperaturas de calentamiento que alcanzan el filamento.
• Moncromadores: descompone la luz incidente de un espectro de luz, es decir, se encarga de separar y seleccionar la radiación de onda que se quiere analizar. Está compuesto por las rendijas de entradas y salida de, colimadores y el elemento de dispersión, en los monocromadores convencionales se usa el prisma como elemento de dispersión.
Espectrofotometría UV-Vis. Panorama general sobre el vasto tema de la Espectrofometría. Incluye problemas sobre el tema, así como soluciones de los mismos. Buscanos en YouTube como Carboxilocos
Ley de Lambert-Beer (Espectrofotometría)Miguel Barba
Resumen rápido sobre los fundamentos de la espectrofotometría de absorción, y de la ley de Lambert-Beer, y su aplicación. (Esta presentación no es de mi autoría, pero la publico para su uso)
presentación, mecanismos de acción, clasificación y diferenciación entre un antídoto y un antagonista. Cuidado en el suministros de antídotos a mujeres en gestación.
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La Inmunofluorescencia es una técnica de inmunomarcaje que se vale del uso de anticuerpos marcados con moléculas fluorescentes para demostrar la presencia de una determinada molécula de interés en un tejido. órgano, o solución de estudio.
Espectrofotometría, Absorbancia, Transmitancia, Ley de Beer, Longitud de Onda, Celdas, Monocromador, Concentración, Curva de calibración, Química Analítica
2. Una diferencia entre ciertos compuestos es su color. Las
longitudes de onda visibles cubren un rango aproximado
de 400nm a 800nm. La longitud de onda visible mas larga
es de color rojo y la mas corta es de color violeta. Cuando
la luz blanca pasa a través o se refleja en una sustancia de
color, una parte Característica de las longitudes de onda se
absorben. La luz restante asumirá el color complementario
a la longitud de onda absorbida. Esta relación se
demuestra por la rueda de colores.
3. Espectrometría UV-VIS
La espectroscopia ultravioleta-visible o (UV/VIS) es
una espectroscopia caracterizada por la emisión de fotones
utilizando la radiación electromagnética de las regiones
visible, ultravioleta cercana del espectro con longitud de
onda entre 380nm y 780nm.
Esta radiación absorbida por las moléculas provoca
transiciones electrónicas que pueden ser cuantificadas, la
espectroscopia UV-visible se utiliza para identificar algunos
grupos funcionales de moléculas orgánicas altamente
conjugados ,iones de metales de transición y además, para
determinar el contenido y fuerza de una sustancia.
Esta se rige por la ecuación de Lambert-Beer
4. Ley de Beer: A = ε c l
A: Absorbancia
ε: coeficiente de extinción
(característico de cada sustancia)
l: largo del paso de la cuba (cm)
c: concentración (moles/l)
Permite cuantificar la
concentración de una muestra
por UV
5. COMO OCURRE
La región visible del espectro comprende energías
de los fotones de 36 a 72 Kcal/mol y el ultravioleta
cercano extiende este rango a 143 Kcal/mol, estas
energías son suficientes para promover o excitar
un electrón molecular a un orbital de energía
superior Como regla, la promoción de electrones
energéticamente favorecida será desde el orbital
molecular ocupado mas alto (HOMO)a el orbital
molecular mas bajo (LUMO) y la especie
resultante se llama estado excitado, teniendo
transiciones electrónicas en la molécula.
6.
7. Cuando las moléculas de la muestra se exponen a la
luz que tiene una energía que coincide con una
posible transición electrónica dentro de la
molécula, algo de la energía lumínica será
absorbida y el electrón será promovido a un nivel
de energía superior. El espectrofotómetro registra
las longitudes de onda en las que se produce la
absorción, junto con el grado de absorción a cada
longitud de onda. El espectro resultante se presenta
como un grafico de absorbancia (A) frente a
longitud de onda.
8. Espectrofotómetro UV-VIS
Es un instrumento que permite comparar la radiación
absorbida o transmitida por una solución que contiene una
cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una
cantidad conocida de la misma sustancia, relaciona la
concentración y la absorción en una muestra.
Tiene la capacidad de proyectar un haz de luz
monocromática a través de una muestra y medir la
cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra. Esto
le permite al operador realizar dos funciones:
• Dar información sobre la naturaleza de la sustancia en la
muestra
• Indicar indirectamente qué cantidad de la sustancia que
nos interesa esta presente en la muestra
10. VENTAJAS DE LA TECNICA UV-VIS
• Preparación mínima muestra.
• Posibilidad análisis mayoría materiales no
reflectores, incluyendo materiales muy opacos o
poco absorbentes.
• Análisis de superficies irregulares y materiales
duros.
• Alta sensibilidad (pocos ppm).
• Rápida recogida de espectros
• Cuantificación con precisión
11. DESVENTAJAS
• Está limitada principalmente a muestra diluida.
• El llenado de la celda es poco reproducible sobre
todo cuando se quiere trabajar en análisis
cuantitativo.
• No se puede utilizar en muestras muy aislantes
• Información solo superficial
13. Ejemplos de algunos espectros de absorción
de moléculas
Banda con estructura fina
(fase vapor)
Banda con estructura fina
(fase líquida con baja
interacción con el solvente)
Banda sin estructura
(fase líquida con alta
interacción con el
solvente)
50 nm
14. A mayor conjugación de sistemas aromáticos la
absorción se desplaza al visible
Este
compuesto es
de color
anaranjado
