Inseminación Artificial y Reproducción Animal II

1. Mag. Alfonso Vigo Quiñones

2. Estructura del espermatozoide
Se compone de una cabeza y una cola, dividida por una pieza
intermedia:
Cabeza: Se encuentra el núcleo que contiene el código genético,
el Acrosoma que contiene enzimas para la penetración de la
corona radiada y la zona pelúcida del óvulo. Si el Acrosoma está
dañado este esperma no participa en la fertilización. En el punto
donde la cabeza se une con la cola se llama centriolo proximal. La
cabeza y cola se separan durante la fertilización.
núcleo
La zona intermedia contiene al
manto mitocontrial que tiene
enzimas que convierten la frucosa
en alimentos de alta energía para el
espermatozoide
Mag. Alfonso Vigo
Quiñones

3. Cola: una de las características de la cola es el filamento
axial que al contraerse provocan el latigueo de la cola lo
cual impulsa hacia delante al esperma.
Plasma Seminal
Es la porción líquida del semen
obtenida de las glándulas
accesorias. Sirve de medio
nutritivo, contiene iones
inorgánicos (sodio y cloro),
amortiguadores (bicarbonato)
que evita los cambios del pH;
substratos de energía
(fructuosa, sorbitol)

4. CARACTERISTICAS DEL SEMEN
Volumen Concentración Total Motilidad Morfología Eyaculaciones/
Animal
(ml) semen (109/ml) espermas espermas normal (%) semana
(109) (%)
Toro 5,0 1,1 5,5 67 80 4
Carnero 1,0 3,0 3,0 75 90 20
Verraco 225 0,2 45 60 60 3
Gallo 1,0 3,5 1,8 85 90 3
Chivato 0,8 2,4 2,0 80 90 20
Pavo 0,5 7,0 3,5 60 85 3
Potro 60 0,15 9,0 70 70 3
Conejo 0,6 0,5 0,03 80 80 6
Perro 5,0 0,3 1,5 85 80 3
Gato 0,05 1,5 0,1 75 90 -

5. Vida fértil en horas
Espermas Övulo
Vacuno 24 – 48 8 – 12
Cerdo 24 – 48 8 – 10
Ovino 30 – 48 16 – 24
caballo 72 - 120 6-8

6. Pubertad en machos
En el macho la pubertad se inicia con la producción de espermatozoides, dando
lugar a ciertos cambios en la conformación del cuerpo, aumento de la
agresividad y deseo sexual, rápido crecimiento y separación del pene del
prepucio. Este cambio es controlado por la LH (hormona luteinizante) que
incentiva a las células leydig a producir testosterona, a esta hormona se une la
FSH (hormona folículo estimulante) que hacen que las células de Certoli
produzcan proteína y preparen a los túbulos seminíferos para la producción de
espermatozoides. La pubertad varía según las especies
10 – 12 meses en toros Pubertad no es sinónimo de madurez
4 – 6 meses en moruecos sexual
4 – 8 meses en berracos
13 – 18 meses en garañones MADUREZ SEXUAL
3 – 4 meses en cuyes 18 meses en Moruecos y berracos
3 – 5 meses en conejos 3 años en toros
7 – 8 meses en alpacas 4 años en caballos

7. Pubertad en hembras
Se define como la edad en la que se observa el primer estro (celo)
con ovulación. Si las hembras se cubren a esta edad tendrán gran
porcentaje de partos distósicos. La edad y el peso a la pubertad
son afectados por factores genéticos en razas de una misma
especie. Por lo que se tienen animales de buen tamaño y peso
que ingresan a la pubertad antes que otras pequeñas y débiles.
Diferencias de edad y peso a la pubertad
Edad en meses Peso en Kg.
Marrana 4-7 68 – 90
Oveja 7 – 10 27 – 34
Yegua 15 – 24 150 – 200
Vacas 8 - 13 160 - 270

8. Periodos del ciclo estral
Los períodos del ciclo estral son el estro, metaestro, diestro y proestro. Estos
ocurren de manera secuencial y cíclica, excepto por los períodos de anestro en
animales estacionales como la oveja y yegua, así como el anestro de la preñez
y el período de postparto en todas las especies.
Vaca Oveja Cerda Yegua
Ciclo estral (días) 21 17 20 22
Metaestro (días) 3–4 2–3 2–3 2–3
Diestro (días) 10 – 14 10 – 12 11 – 13 10 – 12
Proestro (días) 3–4 2–3 3–4 2–3
Estro (horas) 12 – 18 24 – 36 48 – 72 h. 4–8
Ovulación 10 – 12 (h. después 1 – 2 días antes
del estro) h. final del estro mitad del estro del final del estro
Mag. Alfonso Vigo
Quiñones

9. TIEMPO DE
ANIMAL LARGO DEL ESTRO
OVULACION
CICLO ESTRAL (DIAS)
Vaca 18 hrs. 21
10-15 hrs
Yegua 5-7 días 21-22
1-2 días
Oveja 36 hrs. 16-17
12-24 hrs
Cabra 48 hrs. --- 20-21
Cerda 2-3 días 21
30-36 hrs
Conejo Estro constante --- 14
Rata 14 hrs. --- 4-5
Perro (1) 7-9 días ---
1-2 días
Gato 4-7 días --- 8-14
1) La perra no tiene ciclos, generalmente presenta dos períodos de celo en el año,
uno en el otoño y otro en la primavera.

10. Periodos del ciclo estral
METAESTRO:
Empieza al finalizar el estro y dura 3 días aprox. Es el período donde se inicia la formación del cuerpo lúteo e inicia la
ovulación. Ocurre también el fenómeno del sangrado en vacas
DIESTRO:
Se caracteriza como el período del ciclo donde
el cuerpo lúteo es totalmente funcional. En la
vaca empieza en el día 5 del ciclo. Se detecta
por primera vez gran concentración de
progesterona y termina con la regresión del
CONCENTRACION
cuerpo lúteo el día 16 o 17
PROESTRO:
Empieza con la regresión del cuerpo lúteo y la
baja de progesterona y elevación del
estrógeno entre los los días 17 a 21
ESTRO:
Es el período en que la hembra es receptiva al
macho y acepta la cópula, dura de 12 a18 horas 4 8 12 16 21 1 4
en vacas y es donde el estrógeno muestra su
pico mas elevado METAESTRO DIESTRO DIAS PROESTRO ESTRO METAESTRO
Progesterona Estrogeno

11. Especies estacionales
OVEJAS:
La mayoría de razas de ovejas tienen un
patrón estacional de reproducción. Las ovejas
nativas de los trópicos son una excepción y
estarán ciclando todo el año.
Las ovejas se aparean los días con períodos
de luz corta. Se inicia a medida que la
proporción de luz diurna disminuye y termina
cuando la duración de los días aumenta y se
hacen casi iguales a la duración de la noche.
YEGUAS:
Son reproductoras de días largos, su estación se
inicia medida que aumenta la proporción de luz
diurna y termina cuando los días se acortan. A
veces se observa manifestaciones de estro en
días de poca luz, pero estos son sin ovulación
Tanto en Yeguas como en ovejas los estímulos de
luz mandan señales a lo largo del nervio óptico
mediante la glándula pinneal al hipotálamo en
donde se inicia la liberación de gonadotropinas para
empezar el ciclo

12. Control
endocrino del
ciclo sexual
La hormona liberadora
de gonadotropina
(GnRH) es producida
normalmente en el
hipotálamo, ubicado en
la base del cerebro.
Éste envía una señal a
la hipófisis o pituitaria
para que libere las
hormonas FSH y LH,
las que a su vez envían
una señal a los
folículos en los ovarios
para que se
desarrollen (FSH) y
para que
maduren/ovulen (LH).

13. Instalaciones
Corrales para la detección de celo
Son áreas con mallas en el caso de ovinos y con cercos en el caso
de vacunos, de preferencia ubicados cerca de la sala de
procesamiento del semen e inseminación, las dimensiones varían
según el número de animales que se tenga.
Local para la Inseminación
Debe tener las características siguientes:
• Habitación cerrada de dimensiones reducidas para que puedan ser
calentadas fácilmente.
• Para el caso de ovejas debe tener un lugar para la colección de
semen, laboratorio e inseminación.
Mag. Alfonso Vigo
Quiñones

14. Bretes y mangas
Para la colección de semen es necesario disponer de un brete
de monta en el que se coloca la hembra y en algunos casos un
caballete forrado con piel. El brete es necesario para colectar
semen de machos de gran tamaño

15. Vasectomía y detección de celo
Vasectomía (deferectomía)
Es una operación quirúrgica consistente en cortar el conducto
deferente evitando así el paso de los espermatozoides. La
vasectomía produce esterilidad del macho sin disminuir los
efectos de la acción hormonal ni la libido sexual, motivo por el
cual cuando se usan, los machos vasectomizados para la
detección de celo. La edad óptima para vasectomizar a los
carneros es a los 2 años y a toros a los 4.
A los vasectomizados se les conoce como retajos o calentadores.
Estos muestran buen comportamiento sexual y pueden montar de
2 a 3 días posteriores a la operación.

16. Detección de
celo en vacas
Las vacas muestran
tendencias sexuales
bastante fuertes, lo que
hace que la detección de
celo (estro) sea fácil incluso
si no hay toros presentes.
Las vacas en estro se dejan
montar y montarán a otras.
Pueden oler la vulva de
otras vacas. Se levantan
con frecuencia y mueven la
cola, pueden abandonar el
hato en busca de macho.
Tienen la vulva
congestionada con moco
cristalino escurriendo.
Vacas en otros períodos del ciclo montaran a las que están en estro, pero no se
dejarán montar. Por lo tanto el dejarse montar es la indicación mas fuerte de estro.

17. Detección de celo en vacas
En general las hembras estarán
intranquilas, irritables y excitables
durante el estro, habrá un aumento de
interés por el macho. Es recomendable
vigilar el celo al amanecer y al
atardecer.

18. Detección de celo en
cerdas
Las cerdas adoptarán una
posición de cópula cuando el
cerdo, otra cerda o la mano del
cuidador hacen presión sobre la
grupa. Esto es un reflejo
conveniente en la inseminación
artificial pues las cerdas se
pueden inseminar sin forcejeo
mientras se mantiene presión
sobre la grupa.
A veces no hay moco visible durante el estro, pero la vulva estará inflamada
y congestionada, mas en las cerdas jóvenes que en las adultas.

19. Detección de celo en ovejas
En comparación con la vaca, la
oveja no muestra signos si no
está presente el macho. La
hembra frotá el cuello y el cuerpo
del macho; ronda alrededor del
macho oliendo sus genitales y
agitando la cola. La vulva de la
oveja no esta tan congestionada
ni hay moco visible, por lo que
generalmente se usa un macho
vasectomizado.

20. Detección de celo en
Yeguas
La yegua permite que el garañon
la huela y muerda. Ella extiende
sus miembros posteriores,
levantará la cola de un lado y baja
su grupa. La vulva esta elongada
e inflamada con los labios
parcialmente evertidos, el clítoris
erecto se expone constantemente
por las contracciones de los
labios. Cualquier intento de pelea
con el macho indicará que la
yegua no está en celo.

21. Detección de celo en
conejas
La coneja en celo se muestra
intranquila y orina
constantemente. Si se
encuentran en grupo monta a
otras hembras. Se nota una
turgencia de la vulva que esta
totalmente inflamada,
enrojecida y brillosa.
Cuando siente la presencia del
macho se acomoda con las
patas hacia atrás y el rabo
levantado.
Mag. Alfonso Vigo
Quiñones

22. Colección de Semen
Vagina Artificial
Es una imitación de la vagina de la hembra que provee estimulación térmica
(temperatura) y mecánica (presión) para poder producir la eyaculación. El
método consiste en usar dispositivos que simulan las condiciones naturales del
aparato genital femenino, donde la temperatura y la presión juegan un papel
importante en el estímulo táctil del pene para un buen eyaculado.

23. Para lograr buenos resultados en la colección de semen con vagina artificial
es importante tomar las siguientes precauciones:
Los machos seleccionados deben estar bien
alimentados, entrenados y adecuadamente
excitados previa la colección usando de
preferencia hembras en celo o bretes
adecuados. Se debe tener un estricto control
sanitario
La colección debe efectuarse en un ambiente
limpio y libre de polvo. Se recomienda lavar el
prepucio con agua tibia, cortar la lana, o pelos y
secar.

24. La temperatura interior de la vagina
artificial al momento de la eyaculación es
aproximadamente 40°C Y para alcanzar
esta temperatura se recomienda agregar
agua caliente a 45 °C dependiendo del
calor que se pierde hasta el momento
del uso.
La temperatura en la sala de colección de
semen debe variar entre 18 – 25 ° C con un
promedio de 22 °C.
Se debe aplicar una fina capa de lubricante en el
interior de la vagina.

25. La vagina debe sostenerse en un ángulo
de 45° y cuando el macho monta el pene
se desvía lateralmente para introducirlo a
la vagina.
El operador debe ubicarse en el lado
derecho para mayor comodidad

26. Para disponer de una buena calidad de
semen en toros y carneros deben ser
usados con un régimen semanal de 2 a 3
saltos por día por un período de 5 días,
seguido por un descanso de 3 días.
El semen
colectado debe
evitarse que entre
en contacto con
la luz solar
porque
incrementa su
mortalidad.

27. El eyaculado se define como la eyección
del semen del cuerpo, se inicia por la
estimulación de los nervios sensoriales del
glande. La eyaculación varia entre las
especies en varios aspectos:
Especies Tiempo de Volumen Concentración
eyaculado (ml)
Toro Menos 1 seg. 7 1200 millones*ml
Borrego Menos 1 seg. 1 - 1.5 2000 millones*ml
Berraco 10 – 20 min. 300 200 millones*ml
Garañon 10 – 15 seg. 75 150 millones*ml

28. Evaluación del semen
Volumen
Se determina usando tubos o frascos graduados. El volumen varia según
la edad, tamaño y condición corporal, frecuencia de colección, grado de
excitación y régimen alimenticio.
Aspecto y color
Generalmente es de consistencia lechoso o lacto cremoso y de coloración
blanco-lechoso o cremoso pálido. El cambio del color normal tiene relación
con la concentración espermática o la presencia de elementos extraños.
El semen de color amarillo puede contener pus u orina.
El color rojizo indica presencia de sangre
Grises o marrones indican contaminación o infección.
Azulado indica asospermia.
Mag. Alfonso Vigo
Quiñones

29. Motilidad
Es posible observar a simple vista en el tubo de colección los movimientos de
los espermatozoides en forma de remolino y, con mayor nitidez en el
microscopio. Existen escalas para determinar la motilidad del semen puro el
cual se basa en el movimiento del conjunto de espermatozoides en una gota
pendiente a 37°C examinada al microscopio, expresado en grados que fluctúa
de 0 a 5. Así tenemos:
Grado % Espermas Calificativo Observación
vivos
5 80 – 100 Muy bueno Movimiento en remolino
4 60 – 80 Bueno Movimiento en nube
3 40 – 60 Regular Movimiento en ondas
2 20 – 40 Pobre Movimiento en masa
1 10 – 20 Malo Movimiento oscilatorio
0 0 - 10 pobrísimo No hay movimiento.

30. Grado % Espermas vivos Calificativo Observación
5 80 – 100 Muy bueno Movimiento en remolino
4 60 – 80 Bueno Movimiento en nube
3 40 – 60 Regular Movimiento en ondas
2 20 – 40 Pobre Movimiento en masa
1 10 – 20 Malo Movimiento oscilatorio
0 0 - 10 pobrísimo No hay movimiento.

31. La concentración espermática o número de espermatozoides por unidad
de volumen se determina en una cámara de recuento celular (Thoma,
Burker, Neubauer, etc.) a partir de una muestra de semen que se diluye
en una solución salina formolada

32. La motilidad de los espermatozoides se valora depositando una gota de
la muestra seminal sobre un porta-objetos atemperado en una placa
térmica

33. Sobre la gota se sitúa un cubreobjetos y se visualiza la muestra en un
microscopio con el diafragma muy cerrado

34. Al observar la muestra se evalúa de forma subjetiva por una parte el
porcentaje de las células espermáticas que presentan movimiento y por
otra parte la calidad del movimiento, teniendo en consideración que el
movimiento progresivo y en línea recta es el óptimo. Pero además, en
esta misma muestra pueden detectarse aglutinaciones de los
espermatozoides

35. El estado en el que se encuentran las membranas puede analizarse mediante
una tinción vital como la de eosina-nigrosina que distingue de color rosado
aquellos espermatozoides que presentan una membrana alterada, mientras
que los espermatozoides vivos se observan de color blanco

36. Otra técnica que valora la funcionalidad de la membrana es la que utiliza
diacetato de carboxifluoresceina y ioduro de propidio, bajo condiciones de
microscopía de fluorescencia. Con esta técnica se visualizan los
espermatozoides funcionales de color verde frente a los espermatozoides
muertos que se observan de color naranja

37. Para determinar el estado del acrosoma se fija la muestra en una solución
de glutaraldehido (2%) y se visualizan en un microscopio con contraste de
fases. Distinguimos un borde apical nítido que se corresponde con el
acrosoma o bien alteraciones del mismo

38. El estado del acrosoma también puede ser evaluado mediante el empleo de
lectinas como la PNA que junto con el ioduro de propidio permite estudiar el
proceso de reacción acrosómica (Fig. 9).

39. pH
Se realiza inmediatamente después de la colección, normalmente fluctúa entre
6.2 a 6.8 en ovinos, vacunos y cerdos, si tiene un pH mayor de 7 presenta baja
fertilidad y si llega a 8 es estéril.
Concentración espermática
Viene a representar la cantidad de espermatozoides por unidad de volumen, se
puede efectuar por varios métodos, el más conocido es el del recuento en la
cámara de neubauer también conocido como el método del hemocitómetro.
Especies Concentración
Toro 1200 millones*ml
Borrego 2000 millones*ml
Berraco 200 millones*ml
Garañon 150 millones*ml

40. Dilución del semen
Consiste en mezclar el semen con sustancias líquidas llamadas dilutores con el
objeto de aumentar el volumen del eyaculado e incrementar el número de dosis
para inseminar y sacar el máximo provecho de la capacidad reproductiva de los
machos. También es importante porque permite mantener la fertilidad y motilidad
de los espermatozoides por un tiempo mayor de lo normal..
Características de los dilutores
• Proporcionar nutrientes a los espermatozoides
• Tener un pH neutro, ser económico y fácil de usar
• Contener sustancias antibacteriales
• No contener sustancias tóxicas contra los espermatozoides, el aparato
reproductor de la hembra, los procesos de fecundación y la implantación y
desarrollo del huevo fecundado.
• Contener amortiguadores para evitar el shock por cambio de temperatura

41. Dilutores mas comunes
•Yema de huevo – tris – fructosa
•Yema de huevo – glucosa – citrato
•Leche descremada
•Flujo vaginal
•Spermazol “T”
•Yema – Citrato
El semen y el dilutor deben mezclarse a la misma temperatura,
de preferencia el dilutor se debe mantener en baño maría a una
temperatura de 25 – 30°C
Es recomendable agregar el dilutor al semen y no al revés.
Esto debe hacerse en forma suave y sin agitar.

42. Instrumental para la
inseminación
Jeringa o pistola
inseminadora: Permite
depositar el semen en la
entrada de la cérvix.
Vaginoscopio Es el aparato que
se introduce en los genitales de
la hembra por la vulva hasta la
vagina e ilumina su interior con
el objeto de localizar el cuello
del útero, lugar de depósito del
semen.

43. Tanque criogénico o balón de
nitrógeno Contiene nitrógeno
líquido y permite conservar el
semen

44. Mag. Alfonso Vigo
Quiñones