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Verificación de la calidad y aplicación de cromatografía
líquida (HPLC), para la detección de residuos de
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comercializada en la Ciudad de México
Karina G. Zaldívar Paz
Antibióticos
El antibiótico según su etimología proviene del griego “αντί” que significa
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• Amplio
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Macrólidos Inhibidor enzimático Por ejemplo:Azitromicina, Eritromicina,
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Nitrofuranos Inhibidor enzimático Sólo en preparados tópicos PROHIBIDO el empleo en animales de
consumo humano
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β- lactámicos Inhibidor de
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Sulfonamidas Inhibidor de vía
metabólica
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Polipéptidos Inhibidor de síntesis protéica Polimixina B, polimixina E y colistina
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Glándula
mamaria
Administación local: Intramamaria
Administración sistémica Intramuscular
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ATB
Se requieren
400 -500l de
sangre para 1 l
de leche
NO se respeta el tiempo de retiro
Atraviesan por difusión pasiva
y están unidos a proteínas
del plasma = DISTRIBUCIÓN
TISULAR
Al consumir una leche
contaminada con antibióticos
genera repercusiones a la salud .
Los antibióticos son sintetizados
vía renal y hepática conduciendo a
los antimicrobianos vía porta
mediante la unión a proteínas
plasmáticas
Más de 6 000 millones de personas en el mundo
consumen leche y productos lácteos; la mayoría
de ellas vive en los países en desarrollo.
(FAO,2015)
México es el noveno país en producción de
leche fluida para consumo humano.
Anualmente se (SAGARPA, 2013).
Tiempo de retiro
En la leche el plazo de seguridad es de
dos ordeños en 24horas (el primer ordeño,
12 horas luego del último tratamiento).
(Ocampo, 2013)
En la leche el plazo de seguridad es de
dos ordeños en 24horas (el primer ordeño,
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(Ocampo, 2013)
La determinación de estos períodos de supresión por parte
de las sociedades farmacéuticas y las autoridades sanitarias
competentes, depende de muchos factores como son la
tolerancia permitida para los residuos, la estructura química
del principio activo, la sensibilidad analítica de los métodos
de detección, la dosificación, la vía de administración, la
formulación del fármaco y factores inherentes al animal como
son: la especie, estado sanitario y producción.(Early R, 2015)
Definición del problema
De acuerdo con trabajos y reportes realizados sobre el tema de
residuos de antibióticos en leche, se refleja un incumplimiento de la
normatividad debido a malas prácticas pecuarias, afectando a los
estándares sobre la calidad e inocuidad de ésta; siendo factor de
riesgo para la salud humana.
Por lo que resulta trascendente realizar mediante técnicas
cromatográficas de alta definición en leche ultrapasteurizada (UHT),
comercializada en supermercados de la ciudad; debido que sólo se
han llevado a cabo estudios de cromatografía líquida de alta definición
con leche pasteurizada. Así mismo observar si el proceso de
ultrapasteurización interviene positiva o negativamente en la presencia
de estos residuos.
Los residuos de antibióticos en la leche
deben ser evitados por las siguientes
razones:
El uso de leche contaminada con antibióticos
no es idónea para productos y subproductos
lácteos.
Reportes de presencia de antibióticos en leche por década
En 1953 se observó que existía perturbación en el proceso de acidificación,
fermentación y maduración en valores agregados elaborados con leche fluida de vaca
(Ovejero y col).
En el año de 1965 se realizaron pruebas para la detección de penicilina utilizando
germinados con bacterias sarcina subflava, llegando a una relación matemática
mediante ecuaciones se pudo definir la presencia de penicilina en 0.0036 ppm
(Voogde)
En 1977 (Pozo et al ), utilizaron la prueba de reducción de azul de metileno para
comprobar el grado de contaminación por antibióticos obteniendo el 63.64% positivas a
kanamicina y neomicina.
1986 (Cruz y col) analizaron 125 muestras de leche pasteurizada de las cuales sólo el
9.6% de las pruebas dieron negativas a la presencia residuos de antibióticos utilizando
técnicas microbiológicas siendo identificados antibióticos β lactámicos como la
penicilina G.
1986 (Cruz y col) analizaron 125 muestras de leche pasteurizada de las cuales sólo el
9.6% de las pruebas dieron negativas a la presencia residuos de antibióticos utilizando
técnicas microbiológicas siendo identificados antibióticos β lactámicos como la
penicilina G.
1992 (Lidong) refirió un 80% de muestras positivas con sustancias extrañas, entre
ellas antibióticos, en leches crudas procedente de diferentes regiones de China.
En el año 2010 (Ramírez et al) realizaron la detección de
antibióticos en leche mediante cromatografía en capa fina y
autobiografía en leches ultrapasteurizadas (UHT)
comercializadas en la ciudad de México; teniendo como
resultado la presencia de cloranfenicol en una proporción de
3/23 muestras positivas, cifras que son de alta significancia en
perjuicio a la salud de la población.
En el año 2010 (Ramírez et al) realizaron la detección de
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Métodos de análisis para la detección
de antibióticos en leche
De campo
Delvotest®
Utiliza púrpura de bromocrestol, se
añaden en los pocillos individuales
que contienen esporas de Gb
stearothermophilus
Detecta :Tetraciclinas ,β
lactámicos y sulfonamidas
Delvotest®
Utiliza púrpura de bromocrestol, se
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Resscreen®
Se basa en la inhibición del
crecimiento de geobacillus
stearothermophilus var.
calidolactis ; si la leche está libre de
antibióticos permitirá el crecimiento
bacteriano .
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antibióticos permitirá el crecimiento
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Análisis instrumental
HPLC HPTLC
Objetivo general
• Verificar la inocuidad de la leche entera
ultrapasteurizada (UHT) que se
comercializa en supermercados de la
ciudad de México , aplicando la técnica
instrumental cromatográfica de líquidos
(HPLC)
Objetivo específico
• En México no hay estudios realizados con
(UHT) mediante la técnica de (HPLC),
siendo un factor de relevancia conocer si
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Claves Obstétricas roja, azul y amarilla
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LECHE ANTIBIÓTICOS

  • 1. Verificación de la calidad y aplicación de cromatografía líquida (HPLC), para la detección de residuos de antibióticos en leche entera ultrapasteurizada (UHT), comercializada en la Ciudad de México Karina G. Zaldívar Paz
  • 2. Antibióticos El antibiótico según su etimología proviene del griego “αντί” que significa el prefijo “Anti o en contra” y “βιοτικός” “Dado a la vida o Con la vida“ • Amplio • Reducido • Pared bacteriana • Síntesis proteica • ADN • Membrana citoplasmática • Vías metabólicas • Tx de patologías • Prevención de patologías • Estimulantes de crecimiento
  • 4. Situación actual en el uso de antibióticos en México
  • 5. Familia Mecanismo de acción Nombre de antibióticos LMR µg/ Kg Aminoglucósidos Inhibidor de síntesis proteica Amikacina, dihidroestreptomicina, estreptomicina, gentamicina, kenamicina, neomicina, netilmicina, espectinomicina, netilmicina, tobramicina 50 Macrólidos Inhibidor enzimático Por ejemplo:Azitromicina, Eritromicina, Tilosina No permitida en leche Nitrofuranos Inhibidor enzimático Sólo en preparados tópicos PROHIBIDO el empleo en animales de consumo humano No permitida en leche β- lactámicos Inhibidor de formación de la pared bacteriana Penicilina: G procaínica, benzatínica, ampicilina, amoxicilina, carbenicilina, cloxacilina, dicloxacilina, oxacilina, becampicilina, azidocilina etc. 100 Sulfonamidas Inhibidor de vía metabólica Sulfametoxasol, sufameracina, sulfametacina, sulfafenasol, sulfadoxina, sulfabromometasina. sulfametoxipiridasina 100 Estudio de mercado de antibióticos en México
  • 6. Polipéptidos Inhibidor de síntesis protéica Polimixina B, polimixina E y colistina Tetraciclinas Inhibidor de síntesis proteica Clortetraciclina, oxitetraciclina, tetraciclina, doxiciclina, metaciclina, rolitetraciclina y declomicina Fusidanos Inhibidos de síntesis proteica Ácido fusidico, fusidato sódico y fusidato de dietanolamina Diaminopiridinas Inhibidor de vía metabólica Trimetropim. Ormetoprim, aditoprim, baquiloprim Quinolonas Inhibidor de ADN Ácido oxilinico, Ac pipemidico, Ac nalidixico, danofloxacina, entofloxacina, ciprofloxacina Lincoamidas Inhibidor de ADN Lincomicina, clindamicina y pirlimicina
  • 7. Glándula mamaria Administación local: Intramamaria Administración sistémica Intramuscular Administración de ATB Se requieren 400 -500l de sangre para 1 l de leche NO se respeta el tiempo de retiro Atraviesan por difusión pasiva y están unidos a proteínas del plasma = DISTRIBUCIÓN TISULAR Al consumir una leche contaminada con antibióticos genera repercusiones a la salud . Los antibióticos son sintetizados vía renal y hepática conduciendo a los antimicrobianos vía porta mediante la unión a proteínas plasmáticas Más de 6 000 millones de personas en el mundo consumen leche y productos lácteos; la mayoría de ellas vive en los países en desarrollo. (FAO,2015) México es el noveno país en producción de leche fluida para consumo humano. Anualmente se (SAGARPA, 2013).
  • 8. Tiempo de retiro En la leche el plazo de seguridad es de dos ordeños en 24horas (el primer ordeño, 12 horas luego del último tratamiento). (Ocampo, 2013) En la leche el plazo de seguridad es de dos ordeños en 24horas (el primer ordeño, 12 horas luego del último tratamiento). (Ocampo, 2013) La determinación de estos períodos de supresión por parte de las sociedades farmacéuticas y las autoridades sanitarias competentes, depende de muchos factores como son la tolerancia permitida para los residuos, la estructura química del principio activo, la sensibilidad analítica de los métodos de detección, la dosificación, la vía de administración, la formulación del fármaco y factores inherentes al animal como son: la especie, estado sanitario y producción.(Early R, 2015)
  • 9. Definición del problema De acuerdo con trabajos y reportes realizados sobre el tema de residuos de antibióticos en leche, se refleja un incumplimiento de la normatividad debido a malas prácticas pecuarias, afectando a los estándares sobre la calidad e inocuidad de ésta; siendo factor de riesgo para la salud humana. Por lo que resulta trascendente realizar mediante técnicas cromatográficas de alta definición en leche ultrapasteurizada (UHT), comercializada en supermercados de la ciudad; debido que sólo se han llevado a cabo estudios de cromatografía líquida de alta definición con leche pasteurizada. Así mismo observar si el proceso de ultrapasteurización interviene positiva o negativamente en la presencia de estos residuos.
  • 10. Los residuos de antibióticos en la leche deben ser evitados por las siguientes razones: El uso de leche contaminada con antibióticos no es idónea para productos y subproductos lácteos.
  • 11. Reportes de presencia de antibióticos en leche por década En 1953 se observó que existía perturbación en el proceso de acidificación, fermentación y maduración en valores agregados elaborados con leche fluida de vaca (Ovejero y col). En el año de 1965 se realizaron pruebas para la detección de penicilina utilizando germinados con bacterias sarcina subflava, llegando a una relación matemática mediante ecuaciones se pudo definir la presencia de penicilina en 0.0036 ppm (Voogde) En 1977 (Pozo et al ), utilizaron la prueba de reducción de azul de metileno para comprobar el grado de contaminación por antibióticos obteniendo el 63.64% positivas a kanamicina y neomicina. 1986 (Cruz y col) analizaron 125 muestras de leche pasteurizada de las cuales sólo el 9.6% de las pruebas dieron negativas a la presencia residuos de antibióticos utilizando técnicas microbiológicas siendo identificados antibióticos β lactámicos como la penicilina G. 1986 (Cruz y col) analizaron 125 muestras de leche pasteurizada de las cuales sólo el 9.6% de las pruebas dieron negativas a la presencia residuos de antibióticos utilizando técnicas microbiológicas siendo identificados antibióticos β lactámicos como la penicilina G.
  • 12. 1992 (Lidong) refirió un 80% de muestras positivas con sustancias extrañas, entre ellas antibióticos, en leches crudas procedente de diferentes regiones de China. En el año 2010 (Ramírez et al) realizaron la detección de antibióticos en leche mediante cromatografía en capa fina y autobiografía en leches ultrapasteurizadas (UHT) comercializadas en la ciudad de México; teniendo como resultado la presencia de cloranfenicol en una proporción de 3/23 muestras positivas, cifras que son de alta significancia en perjuicio a la salud de la población. En el año 2010 (Ramírez et al) realizaron la detección de antibióticos en leche mediante cromatografía en capa fina y autobiografía en leches ultrapasteurizadas (UHT) comercializadas en la ciudad de México; teniendo como resultado la presencia de cloranfenicol en una proporción de 3/23 muestras positivas, cifras que son de alta significancia en perjuicio a la salud de la población.
  • 13. Métodos de análisis para la detección de antibióticos en leche De campo Delvotest® Utiliza púrpura de bromocrestol, se añaden en los pocillos individuales que contienen esporas de Gb stearothermophilus Detecta :Tetraciclinas ,β lactámicos y sulfonamidas Delvotest® Utiliza púrpura de bromocrestol, se añaden en los pocillos individuales que contienen esporas de Gb stearothermophilus Detecta :Tetraciclinas ,β lactámicos y sulfonamidas Resscreen® Se basa en la inhibición del crecimiento de geobacillus stearothermophilus var. calidolactis ; si la leche está libre de antibióticos permitirá el crecimiento bacteriano . Detecta: β lactámicos y sulfonamidas Resscreen® Se basa en la inhibición del crecimiento de geobacillus stearothermophilus var. calidolactis ; si la leche está libre de antibióticos permitirá el crecimiento bacteriano . Detecta: β lactámicos y sulfonamidas
  • 15. Objetivo general • Verificar la inocuidad de la leche entera ultrapasteurizada (UHT) que se comercializa en supermercados de la ciudad de México , aplicando la técnica instrumental cromatográfica de líquidos (HPLC)
  • 16. Objetivo específico • En México no hay estudios realizados con (UHT) mediante la técnica de (HPLC), siendo un factor de relevancia conocer si el proceso de ultrapasteurización tiene modificaciones positiva o negativa en razón de la inocuidad de dicho producto