Espectrofotometría, Absorbancia, Transmitancia, Ley de Beer, Longitud de Onda, Celdas, Monocromador, Concentración, Curva de calibración, Química Analítica
Espectrofotometría, Absorbancia, Transmitancia, Ley de Beer, Longitud de Onda, Celdas, Monocromador, Concentración, Curva de calibración, Química Analítica
La tinción de Gram o coloración de Gram es un tipo de tinción diferencial empleado en bacteriología para la visualización de bacterias, sobre todo en muestras clínicas.
INTRODUCCIÓN
Para el estudio satisfactorio del frotis sanguíneos, es necesario colorearlos. En la mayoría de los laboratorios los colorantes más empleados para la tinción hematológica se basan en el de Romanowsky constituido fundamentalmente con la mezcla de eosina (ácido) y azul de metileno (básico). Además se han incorporado el empleo de derivados por oxidación del azul de metileno que se conoce con el nombre de azures (A, B, C). Son los azures los responsables de la coloración púrpura o roja de ciertas estructuras.
Tanto la eosina como el azul de metileno son muy sensibles a las variaciones de pH de las diferentes estructuras celulares, de forma que las que tienen carácter básico fijan la eosina mientras que las que poseen propiedades ácidas fijan principalmente el azul de metileno. Esto explica que las estructuras basófilas se tiñan de color azul mientras que los competente acidófilas adquieren un color rosado. La diferente afinidad de ciertas granulaciones citoplasmáticas por dichos colorantes permite clasificar a los leucocitos polimorfonucleares.
TINCIÓN DE WRIGHT
Esta coloración es conocida como policromática debido a que produce varios colores. Es una solución de alcohol metílico de un colorante ácido (eosina) y otro básico (azul de metileno). El alcohol sirve como un fijador del frotis sanguíneo al portaobjetos. El amortiguador, que consiste en una solución tamponada, mantiene el pH del colorante y favorece la mejor absorción por los diferentes componentes celulares.
La tinción de Wright.
Es de gran trascendencia clínica ya que gracias a ella es capaz de identificarse diversas estructuras en una célula así como la morfología y en su caso patología celular no solo de las células del sistema inmunológico sino de todas aquellas que componen la sangre ya sea en un paciente sano o con un estado patológico.
MATERIALES
Colorante Wright
Laminas porta objeto
Laminas cubre objetos
Aceite de inmersión
Agua destilada
Gotero
Rejilla
Materiales extracción de muestra:
• Guantes
• Algodón
• Ligadura
• Jeringa
• Tubo lila con EDTA
• Plumón
• Alcohol
• Capilar
EQUIPO
o Microscopio óptico con luz incorporada.
MUESTRA
Sangre periférica
EXTRACCIÓN DE LA MUESTRA SANGUÍNEA.
• Cuando el paciente esté cómodo echamos un vistazo a sus brazos para decidir un sitio para la punción. El brazo debe ser extendido y lo relajado posible.
• Palpamos la vena para averiguar sus características (tamaño, elasticidad o rigidez, determinar si de desplaza o no) y su curso.
• Limpiamos con alcohol la zona elegida para la punción.
• Colocamos el torniquete, este puede ayudarnos para decidir dónde pincha, pedir al paciente de cerrar el puño para aumentar el volumen de sangre intravenosa (Un tiempo de compresión demasiado largo causa la acumulación de sangre y ciertas sustancias en la vena que pueden alterar el resultado de
La tinción de Gram o coloración de Gram es un tipo de tinción diferencial empleado en bacteriología para la visualización de bacterias, sobre todo en muestras clínicas.
INTRODUCCIÓN
Para el estudio satisfactorio del frotis sanguíneos, es necesario colorearlos. En la mayoría de los laboratorios los colorantes más empleados para la tinción hematológica se basan en el de Romanowsky constituido fundamentalmente con la mezcla de eosina (ácido) y azul de metileno (básico). Además se han incorporado el empleo de derivados por oxidación del azul de metileno que se conoce con el nombre de azures (A, B, C). Son los azures los responsables de la coloración púrpura o roja de ciertas estructuras.
Tanto la eosina como el azul de metileno son muy sensibles a las variaciones de pH de las diferentes estructuras celulares, de forma que las que tienen carácter básico fijan la eosina mientras que las que poseen propiedades ácidas fijan principalmente el azul de metileno. Esto explica que las estructuras basófilas se tiñan de color azul mientras que los competente acidófilas adquieren un color rosado. La diferente afinidad de ciertas granulaciones citoplasmáticas por dichos colorantes permite clasificar a los leucocitos polimorfonucleares.
TINCIÓN DE WRIGHT
Esta coloración es conocida como policromática debido a que produce varios colores. Es una solución de alcohol metílico de un colorante ácido (eosina) y otro básico (azul de metileno). El alcohol sirve como un fijador del frotis sanguíneo al portaobjetos. El amortiguador, que consiste en una solución tamponada, mantiene el pH del colorante y favorece la mejor absorción por los diferentes componentes celulares.
La tinción de Wright.
Es de gran trascendencia clínica ya que gracias a ella es capaz de identificarse diversas estructuras en una célula así como la morfología y en su caso patología celular no solo de las células del sistema inmunológico sino de todas aquellas que componen la sangre ya sea en un paciente sano o con un estado patológico.
MATERIALES
Colorante Wright
Laminas porta objeto
Laminas cubre objetos
Aceite de inmersión
Agua destilada
Gotero
Rejilla
Materiales extracción de muestra:
• Guantes
• Algodón
• Ligadura
• Jeringa
• Tubo lila con EDTA
• Plumón
• Alcohol
• Capilar
EQUIPO
o Microscopio óptico con luz incorporada.
MUESTRA
Sangre periférica
EXTRACCIÓN DE LA MUESTRA SANGUÍNEA.
• Cuando el paciente esté cómodo echamos un vistazo a sus brazos para decidir un sitio para la punción. El brazo debe ser extendido y lo relajado posible.
• Palpamos la vena para averiguar sus características (tamaño, elasticidad o rigidez, determinar si de desplaza o no) y su curso.
• Limpiamos con alcohol la zona elegida para la punción.
• Colocamos el torniquete, este puede ayudarnos para decidir dónde pincha, pedir al paciente de cerrar el puño para aumentar el volumen de sangre intravenosa (Un tiempo de compresión demasiado largo causa la acumulación de sangre y ciertas sustancias en la vena que pueden alterar el resultado de
Ley de Lambert-Beer (Espectrofotometría)Miguel Barba
Resumen rápido sobre los fundamentos de la espectrofotometría de absorción, y de la ley de Lambert-Beer, y su aplicación. (Esta presentación no es de mi autoría, pero la publico para su uso)
La espectrofotometría uv-visible (UV-VIS) es una práctica analítica que permite determinar la concentración de un compuesto en solución. La espectrofotometría uv-visible se basa en la medición de absorción de radiación UV o visible por determinadas moléculas, la radiación correspondiente a estas regiones del espectro electromagnético causa transiciones electrónicas a longitudes de onda característica de la estructura molecular de un compuesto.
Aplicación de la espectrofotometría uv-visible
La espectrofotometría uv-visible es utilizada generalmente en la valoración cuantitativa de soluciones de iones metálicos de transición y compuestos orgánicos, ambos absorben la luz. La Ley de Beer-Lambert estipula que la absorbancia de una solución es directamente proporcional de la concentración de la solución, por lo que la espectrofotometría uv-visible puede usarse para determinar la concentración de la solución.
Espectrofotómetro uv-visible
El espectrofotómetro uv-visible es un instrumento óptico que tiene la capacidad de resolver radiaciones de diferentes longitudes de onda dentro del rango ultravioleta y visible (por lo general este rango se encuentra dentro de los valores de 190 a 1,100 nm).
Descripción del equipo:
Está compuesto por una fase luminosa, monocromador, elementos fotodetectores y un sistema de registro.
• Fase luminosa: una bombilla pequeña de filamento enrollado es ideal para concentrar la luz en un haz intenso. La incandescencia causada por la luz visible de la lámpara de tungsteno-halógeno se basa en las altas temperaturas de calentamiento que alcanzan el filamento.
• Moncromadores: descompone la luz incidente de un espectro de luz, es decir, se encarga de separar y seleccionar la radiación de onda que se quiere analizar. Está compuesto por las rendijas de entradas y salida de, colimadores y el elemento de dispersión, en los monocromadores convencionales se usa el prisma como elemento de dispersión.
Ponencia en I SEMINARIO SOBRE LA APLICABILIDAD DE LA INTELIGENCIA ARTIFICIAL EN LA EDUCACIÓN SUPERIOR UNIVERSITARIA. 3 de junio de 2024. Facultad de Estudios Sociales y Trabajo, Universidad de Málaga.
LA PEDAGOGIA AUTOGESTONARIA EN EL PROCESO DE ENSEÑANZA APRENDIZAJEjecgjv
La Pedagogía Autogestionaria es un enfoque educativo que busca transformar la educación mediante la participación directa de estudiantes, profesores y padres en la gestión de todas las esferas de la vida escolar.
La Unidad Eudista de Espiritualidad se complace en poner a su disposición el siguiente Triduo Eudista, que tiene como propósito ofrecer tres breves meditaciones sobre Jesucristo Sumo y Eterno Sacerdote, el Sagrado Corazón de Jesús y el Inmaculado Corazón de María. En cada día encuentran una oración inicial, una meditación y una oración final.
Presentación de la conferencia sobre la basílica de San Pedro en el Vaticano realizada en el Ateneo Cultural y Mercantil de Onda el jueves 2 de mayo de 2024.
ROMPECABEZAS DE ECUACIONES DE PRIMER GRADO OLIMPIADA DE PARÍS 2024. Por JAVIE...JAVIER SOLIS NOYOLA
El Mtro. JAVIER SOLIS NOYOLA crea y desarrolla el “ROMPECABEZAS DE ECUACIONES DE 1ER. GRADO OLIMPIADA DE PARÍS 2024”. Esta actividad de aprendizaje propone retos de cálculo algebraico mediante ecuaciones de 1er. grado, y viso-espacialidad, lo cual dará la oportunidad de formar un rompecabezas. La intención didáctica de esta actividad de aprendizaje es, promover los pensamientos lógicos (convergente) y creativo (divergente o lateral), mediante modelos mentales de: atención, memoria, imaginación, percepción (Geométrica y conceptual), perspicacia, inferencia, viso-espacialidad. Esta actividad de aprendizaje es de enfoques lúdico y transversal, ya que integra diversas áreas del conocimiento, entre ellas: matemático, artístico, lenguaje, historia, y las neurociencias.
Asistencia Tecnica Cultura Escolar Inclusiva Ccesa007.pdf
MEDICINA
1. INFORMATICA VIRTUAL, TEMA POWER POINT (Espectrofotometría)
Salomé Rendón Ayala
Tutor: Elkin Leonardo Velásquez Pesca
UNIVERSIDAD DE CIENCIAS APLICADAS UDCA
FACULTAD DE MEDICINA
INFORMATICA VIRTUAL
BOGOTÁ D.C
2016
16/03/2016SALOMÉ RENDÓN AYALA 1
2. TABLA DE CONTENIDO
16/03/2016SALOMÉ RENDÓN AYALA 2
Que es la espectrofotometría
Principio de la espectrofotometría
Ley de Lambert-Beer
El funcionamiento del espectrofotómetro
Aplicaciones
Bibliográfica
3. QUE ES LA ESPECTROFOTOMETRIA
• es la medición de la cantidad de
energía radiante que absorbe o
transmite un sistema químico en
función de la longitud de onda; es el
método de análisis óptico más usado
en las investigaciones químicas y
bioquímicas. El espectrofotómetro es
un instrumento que permite comparar la
radiación absorbida o transmitida por
una solución que contiene una cantidad
desconocida de soluto, y una que
contiene una cantidad conocida de la
misma sustancia.
16/03/2016SALOMÉ RENDÓN AYALA 3
4. PRINCIPIO DE LA ESPECTOFOTOMETRÍA
En la espectrofotometría se aprovecha la
absorción de radiación electromagnética en la
zona del ultravioleta y visible del espectro. La
muestra absorbe parte de la radiación incidente
en este espectro y promueve la transición del
analito hacia un estado excitado, transmitiendo
un haz de menor energía radiante. En esta
técnica se mide la cantidad de luz absorbida
como función de la longitud de onda utilizada.
La absorción de las radiaciones ultravioletas,
visibles e infrarrojas depende de la estructura
de las moléculas, y es característica de cada
sustancia química.
16/03/2016SALOMÉ RENDÓN AYALA 4
5. LEY DE LAMBERT-BEER
Esta ley expresa la relación entre absorbancia de luz monocromática (de longitud de onda fija) y
concentración de un cromóforo en solución: A = log I/Io = ε·c·l La absorbancia de una solución es
directamente proporcional a su concentración – a mayor número de moléculas mayor
interacción de la luz con ellas
16/03/2016SALOMÉ RENDÓN AYALA 5
6. también depende de la distancia que recorre la luz por la solución –a igual concentración,
cuanto mayor distancia recorre la luz por la muestra más moléculas se encontrará- ; y por
último, depende de ε, una constante de proporcionalidad -denominada coeficiente de extinción-
que es específica de cada cromóforo
16/03/2016SALOMÉ RENDÓN AYALA 6
7. 16/03/2016SALOMÉ RENDÓN AYALA 7
Ley de Lambert
dice que la cantidad
de luz absorbida
por un objeto
depende de la
distancia recorrida
por la luz.
Ley de Beer
afirma que la
cantidad de luz
absorbida por un
cuerpo depende de
la concentración en
la solución.
Ley de
Lambert-
Beer
9. APLICACIONES
determinar la cantidad de concentración en una solución de algún compuesto utilizando las fórmulas ya
mencionadas
ayudar en la determinación de estructuras moleculares
la identificación de unidades estructurales específicas, ya que estas tienen distintos tipos de absorbancia
(grupos funcionales o isomerías)
determinar constantes de disociación de indicadores ácido-base
16/03/2016SALOMÉ RENDÓN AYALA 9
10. BIBLIOGRAFÍA
JARAMILLO, Juan David. Laboratorio de espectrofotometría (1). {En línea}. {1 agosto de 2013}.
Disponible en:
http://es.slideshare.net/juandavidjaramilloorozhttp://es.slideshare.net/juandavidjaramilloorozco1/l
aboratorio-de-espectrofotometra-1co1/laboratorio-de-espectrofotometra-1
Fundamentos de espectrofotometría. {En línea}. Disponible en:
file:///C:/Users/Usuario/Downloads/Guia_TP_2_Quimica_II_2010%20(1).pdf
16/03/2016SALOMÉ RENDÓN AYALA 10