Este documento resume las pruebas bioquímicas utilizadas para identificar enterobacterias, incluyendo pruebas como TSI (Triple Sugar Iron), LIA (Lysine Iron Agar), citrato de Simmons, urea y MIO (Motilidad-Indol-Ornitina). Explica los principios, componentes y resultados esperados de cada prueba para ayudar en la identificación de géneros comunes de enterobacterias como Escherichia, Klebsiella y Proteus.

1. Pruebas bioquimas para
enterobacterias.
Lic. Benjamín Castillo

2. Características de las enterobacterias
 Crecen en agar MacConkey
 Bacilos Gram negativas
 Desdoblan los nitratos a nitritos
 Aerobios facultativos
 Oxidasa (-) Catalasa (+)
 Fermentan glucosa

3. Bioquímica
LIA UREA

4. TSI (Triple Sugar Iron)
• Color: rojo ladrillo
• Inhibidores: no tiene
• Indicador: rojo de fenol
• Sustratos principales: lactosa, sacarosa y
glucosa (la proporción en el medio de lactosa y
sacarosa es de 10: 1 con la glucosa)
• Sustratos secundarios: tiosulfato sódico,
peptona, citrato férrico amoniacal y extractos.
• Se siembra por picadura profunda con aguja y
luego se siembra por estrías en el pico

5. TSI (Triple Sugar Iron)

6. TSI (Triple Sugar Iron)

7. TSI (Triple Sugar Iron)
1.- Rx en bacterias glucosa, lactosa y sacarosa +
A/A +;-
Ej.:
Escherichia
coli
A/A -;-

8. TSI (Triple Sugar Iron)
A/A ++, ++
Ej.: Citrobacter freundii

9. TSI (Triple Sugar Iron)
2.- Rx en bacterias solo fermentadoras de glucosa (glucosa +;
lactosa y sacarosa -)
K/A -, ++++
Ej.: Proteus
mirabilis
K/A -;-
Ej.: Shigella
flexneri

10. TSI (Triple Sugar Iron)
N/N -;-
Pseudomonas
* Este resultado no es de una
enterobacteria
3.- Bacilos no fermentadores

11. LIA (Lysine Iron Agar)
• Color: lila
• Inhibidores: no tiene
• Indicador: púrpura de bromocresol
• Sustratos principales: lisina y glucosa
• Sustratos secundarios: peptona, tiosulfato de
sodio, extracto de levaduras.
• Se siembra por picadura profunda con aguja y
luego por estrías en el pico

12. LIA (Lysine Iron Agar)

13. LIA (Lysine Iron Agar)

14. LIA (Lysine Iron Agar)
1.- Lisina descarboxilasa +
Lisina cadaverina (alcaliniza el
medio)
lisina
descarboxilasa
Ej.: Escherichia coli

15. LIA (Lysine Iron Agar)
2.- Lisina descarboxilasa +, H2S +
Ej.: Salmonella

16. LIA (Lysine Iron Agar)
3.- Lisina descarboxilasa -
Ej.: Shigella

17. LIA (Lysine Iron Agar)
4.- Lisina deaminasa +
Lisina alfa cetácido
Lisina deaminasa
Ej.: Proteus mirabilis

18. LIA (Lysine Iron Agar)
N/N -;-
Pseudomonas
* Este resultado no es de una
enterobacteria

20. Citrato de Simmons
• Color: verde
• Inhibidor: no tiene
• Indicador: azul de bromotimol
• Sustrato principal: citrato de sodio
• Sustratos secundarios: fosfato
dipotásico, cloruro de sodio, sulfato de
magnesio y fosfato monoamónico.
• Se siembra por picadura profunda con
aguja y luego por estrías en el pico.

21. Citrato de Simmons

22. Citrato de Simmons
Este medio nos permite comprobar la capacidad de la
bacteria de utilizar el citrato como fuente exclusiva de
carbono.
La degradación del citrato conlleva a la alcalinización del
medio y el viraje del indicador azul de bromotimol de verde a
azul prusia.

23. Citrato de Simmons
1.- Citrato positivo:
La bacteria consume el citrato
como fuente exclusiva de carbono
Cit- Na+
Cit+ Na+
OH –
alcaliniza el
medio
Ej.: Klebsiella pneumoniae
citritasa

24. Citrato de Simmons
2.- Citrato negativo
La bacteria no consume el
citrato como fuente de carbono.
Ej.: Escherichia coli

25. Úrea
En este medio se observa la capacidad de la bacteria de
degradar la úrea por medio de la enzima ureasa formando
amoniaco y carbonato de amonio, que alcalinizan el medio por lo
cual el rojo de fenol vira a un rojo cereza.
• Bacterias úrea + rápida: Proteus y Providencia
• Bacterias úrea + retardada: Klebsiella, Citrobacter y
Enterobacter.
• Bacterias úrea negativa: Escherichia coli, Salmonella, Shigella

26. Urea
Ej.: Escherichia coli Ej.: Morganella morganiiEj.: Klebsiella pneumoniae

27. MIO (Motilidad-Indol-Ornitina)
• Color: lila
• Inhibidor: no tiene
• Indicador: púrpura de bromocresol
• Sustratos principales: ornitina y glucosa.
• Sustratos secundarios: peptona, triptona
y extractos.
• Se siembra por picadura profunda

28. MIO (Motilidad-Indol-Ornitina)
Este medio se usa para la identificación de enterobacterias
en base a su movilidad, producción de indol y actividad de ornitina
descarboxilasa.

29. MIO (Motilidad-Indol-Ornitina)
M: negativa
I: positivo
O: negativo
Ej.: Klebsiella oxytoca

30. MIO (Motilidad-Indol-Ornitina)
M: positiva
I: negativo
O: positiva
Ej: Enterobacter aerogenes

31. MIO (Motilidad-Indol-Ornitina)
M: positiva
I: positivo
O: positivo
Ej.: Escherichia coli

34. GRACIAS!!!!!!