Medios de cultivo caseros

1. Andrea Ramirez Mata 201121870
Ariana UmañaTorres 201114337

2.  Gabinete con aire estéril
 Tanque para peces volcado
 Olla a presión (para esterilización de
instrumentos, agua, papel toalla…)
 Envases de vidrio (con tapa que soporten calor)
 Pinzas y bisturí
 Papel toalla (para cortar el material)

3.  Mechero de alcohol
(etanol para flamear
instrumentos)
 Spray con alcohol de 70%
(para rociar las superficies
al transferir)
 Cloro diluido (1/4 del cloro
para lavar ropa para
esterilizar la superficie del
material)

4.  2 tazas de agua
 ¼ de taza de azúcar
 Fertilizante soluble en agua
 (1 taza de fertilizante todo propósito 10:10:10 NPK
en 1 L de agua)
 Tabletas de inositol (1/2 tableta)

5.  Tabletas de vitaminas (1/2 tiamina con
cualquier multivitamínico)
 Hojuelas de agar (4 cucharadas)
 Se mezclan los ingredientes en una olla hasta
hervir y el agar se disuelva. Se dispensan en
los envases de vidrio y se ponen en la olla a
presión por 15 minutos luego de alcanzar 15
lbs de presión

6.  Leche de coco :
multiplicación y
enraizamiento
 Puré de tomate verde
 Jugo de naranja recién
exprimido
 Ácido cítrico o
bircarbonato de sodio
(para ajustar pH entre
5 y6)

8.  Trapo.
 Papel de aluminio .
 Gasa estéril.
 Cinta adhesiva y
etiquetas.
 Cloro + Ácido clorhídrico.
 Hidróxido sódico.
 Lavajillas.
 Frascos
• Olla de presión.
• Guantes.
• Mascarilla de papel.
• Espátula.
• Bisturí.
• Mechero de alcohol.
• Soporte y rejilla.
• Varilla de vidrio.
• Pinzas metálicas.

9.  100g de plátano
maduro (puré o
licuado)
 10 g de agar.
 15 g de azúcar.
 900 ml de agua
destilada.
 1,2 g Tiamina
(para un litro)

10. a) Preparación de los frascos.
Se lavan bien los frascos y tapas
con jabón y cloro.
b) Preparación y esterilización del
medio de cultivo.
1. Poner en una olla : 180 ml de
agua destilada, 20g de plátano
maduro hecho puré o licuado, 1 g
de azúcar y 0.24 g Tiamina. Una
vez disuelto se añaden 2 g de
agar agar y se hierve el medio.
2. Medir el pH y ajústalo. Debe de
quedar entre 5.5 y 6.
3. Distribuye el medio de cultivo en
los tubos de ensayo y frascos,
para ello utiliza un embudo de
vidrio.
4. Verter en cada frasco en el fondo
una cantidad de preparado de
más o menos 1 centímetro .

11. c) Esterilización del medio de
cultivo
Los frascos se esterilizan en una
olla a presión. Los pasos para la
esterilización son los siguientes:
Se pone un pedazo de tela en el
fondo de la olla para impedir así
que los frascos toquen el fondo
de la olla y se revienten con el
calor.
Se añaden dos o tres centímetros
de agua.
Colocamos los frascos (con el
medio) tapados, pero sin cerrar
del todo.
Cerrar y calentar, dejar a 15 PSI
unos 20 o 30 minutos a fuego
suave.
Apagar una vez trascurrido el tiempo
y esperar a que la olla baje y esté
totalmente enfriada. No se debe
abrir la olla antes porque la
diferencia de presión o
temperatura hará que entre aire
“no estéril” a los frascos, creando
un peligro de contaminación.
Se dejan enfriar hasta que el medio
gelifique (se solidifique) por
acción del agar. Con guantes
desinfectados con alcohol, se
terminan de cerrar los botes para
evitar la entrada de aire no
estéril.
Los frascos se pueden guardar por
varios días y meses en la nevera
o congelados.

12. d) Preparación de las semillas.
Las semillas se esterilizan de la
siguiente forma:
Preparar dos recipientes con agua (a
la mitad de su capacidad) y uno
vacío y se cubren con tapas
dobles de aluminio. Se esterilizan
en una olla a presión. Dejar
enfriar todo el material. La
esterilización se puede hacer en
el microondas (5-10 min) pero en
este caso los frascos se tapan
con papel plástico. Dejar enfriar
antes de usarlo para la
esterilización de las semillas.
Las semillas se envuelven en una
gasa y se sumergen en una
solución 50% cloro con unas
gotas de lavavajillas.
. Las pinzas metálicas deben ser
flameadas antes espátula en el
mechero de alcohol y se corta la
cápsula con el bisturí cerca de la
llama, antes de introducirlas en
los frascos y se debe intentar
trabajar en un ambiente estéril.

13.  Plantas acuáticas:
 Loto americano (Nelumbo lutea)
 Cola de zorro (Myriophyllum aquaticum)
 Lirios (Nymphaea sp)