Este documento describe los principios y usos de la microscopía de contraste de fases y la microscopía electrónica. La microscopía de contraste de fases utiliza diferencias de fase en las ondas de luz para generar imágenes con mayor contraste, lo que permite ver mejor las células sin color. La microscopía electrónica, desarrollada en los años 1930, permite ampliar las imágenes hasta miles de veces su tamaño real y ha sido una herramienta útil en investigaciones biomédicas.

1. AÑO DE LA UNIDAD, LA PAZ Y EL DESARROLLO
INSTITUTO DE EDUCACIÓN SUPERIOR TECNOLÓGICO PRIVADO
DANIELALCIDES CARRION
CURSO :
EQUIPOS E INSTRUMENTOS DEL LABORATORIO CLINICO Y ANATOMIA PATOLOGICA
TEMA :
MICROSCOPIO
Docente : Salinas Sanchez Andrea Pierina
Integrantes : Ayaucan Martinez Nayelli
Barja Mallqui Mercedez Yeni
Quispe Mendoza Marco Antonio
Torres Aguilar Solangel
Zacarias Chavez Juana Liz

2. MICROSCOPÍA DE
CONTRASTES DE
FASES

3. HISTORIA
La microscopía de contraste de fases fue inventada por el físico
neerlandés Frits Zernike en 1932. Este gran invento hizo que le
concedieran el premio Nobel de Física en 1953.
Los primeros microscopios de contraste de fase se empezaron a
fabricar y comercializar en la década de 1940 por parte de la
empresa Carl Zeiss AG en Alemania. Su impacto en el campo de la
investigación científica fue inmediato, especialmente en el campo de
la biología.

4. PARTES

5. ● Funciona como un microscopio compuesto regular, pero contiene algunos
elementos adicionales que permiten detectar cambios de fase en las ondas.
● Primero, hay un punto foco o fuente de luz que ilumina el espécimen. Cuando esta
luz atraviesa la muestra, sus ondas se ven afectadas de varias formas. Por lo
tanto, estas ondas de luz se dividen en dos partes llamadas luz de iluminación y
luz dispersa.
● La luz de iluminación es la luz que atraviesa la muestra sin cambios. La onda
restante, conocida como luz dispersa, es un cambio de fase debido al índice de
refracción de la muestra dentro de la muestra. Esto se debe a que la luz viaja un
poco más lento a medida que viaja a través de la muestra.
● Por lo tanto, cuando la luz sale de la muestra, hay una diferencia de fase entre la
onda de luz incidente y la onda de luz dispersada. La luz dispersa se retrasa
aprox. 90 grados debido a su interacción con la muestra. Además, su amplitud es
significativamente menor que la de la luz de iluminación.
FUNCIONAMIENTO

6. ● Se usa para ver mejor los especímenes vivos sin color. Las partes de
la muestra que de otro modo serían difíciles de ver porque son del
mismo color ahora aparecen más oscuras o más claras que el fondo.
● Se generan imágenes que son ricas en información y detalles. Los
orgánulos celulares se pueden ver mucho mejor. A menudo, las
imágenes de contraste de fase subjetivamente se ven mucho mejor
que las imágenes de campo brillante. Esto se debe en parte al mayor
contraste. Las lentes de contraste de fase se pueden usar para
campos claros convencionales, pero la calidad de imagen es
ligeramente inferior (debido al anillo de fase integrado en las
lentes). Solo tiene que quitar el filtro de contraste de fase del
condensador para usar las lentes para el campo claro o brillante.
VENTAJAS

7. DESVENTAJAS
● Al necesitar lentes de contraste de fase especiales y un filtro de fase
hace que el precio de este microscopio sea alto
● Cada lente necesita su propio filtro de contraste de fase. Si cambia la
ampliación, debe cambiar el filtro. Algunos fabricantes fabrican
condensadores especiales que contienen un porta filtro giratorio. Esto
es práctico, pero muy costoso y puede no estar disponible para todos
los modelos de microscopio.
● El Microscopio de contraste de fases muestras es menos adecuado si
desea observar los colores naturales de una muestra o si está
involucrado en la tinción. Los colores naturales se superponen con las
diferencias de brillo creadas por la óptica de contraste de fase.

8. Se usa principalmente para aumentar el contraste entre las partes claras y
oscuras de las células sin colorear.
Es ideal para especímenes delgados, o células aisladas. El microscopio de fase
ilumina el espécimen con un cono hueco de luz, como en el microscopio en campo
oscuro.
Sin embargo en el microscopio de fase el cono de luz es más estrecho y entra
en el campo de visión del objetivo, que contiene un dispositivo en forma de
anillo que reduce la intensidad de la luz y provoca un cambio de fase de un
cuarto de la longitud de onda. Este tipo de iluminación provoca variaciones
minúsculas en el índice de refracción de un espécimen transparente, haciéndolo
visible.
Este tipo de microscopio es muy útil a la hora de examinar tejidos vivos, por lo
que se utiliza con frecuencia en biología y medicina
PRINCIPALES USOS

9. MANTENIMIENTO
1.- Para transportar el microscopio a la mesa de trabajo deberá tomarse del brazo con la mano
derecha y de la base con la mano izquierda, en posición vertical.
2.- Antes de usarlo, limpiar perfectamente la fuente de luz, la parte superior del condensador,
oculares y objetivos con un paño limpio y humedecido con agua destilada, secar con papel
absorbente.
3.- No encender la fuente de luz, sino hasta que se vaya a usar.
4.- Colocar la muestra sobre la platina, sujetarla con las pinzas, girar el objetivo seco débil
(10X).
5.- Ver por el ocular y controlar la cantidad de luz adecuada, moviendo el condensador y el
diafragma.
6.- Desplazar suavemente la platina y enfocar con la ayuda del tornillo macrométrico hasta que
se observe claramente la muestra. Hacer los ajustes finos con el tornillo micrométrico,
registrar las observaciones.
7.- Con la ayuda del revolver girar el objetivo seco fuerte (40X) realizar ajustes con el tornillo
micrométrico registrar las observaciones.
8.- Nuevamente girar el revolver al objetivo de inmersión en aceite, pero antes debe colocar una
pequeña gota de aceite de inmersión sobre la muestra procurando que el gotero no toque la
muestra evitando así la contaminación del reactivo, realizar ajustes con el tornillo micrométrico,
registrar observaciones.
9.- Una vez terminadas las observaciones bajar la platina con la ayuda del tornillo macrométrico,
retirar con mucho cuidado la muestra y apagar el microscopio. Limpiar los oculares, objetivos y
platina del microscopio. Enredar el cordón del sistema eléctrico sobre la fuente luminosa,
entregar al maestro auxiliar

10. MICROSCOPÍA
ELECTRONICA

11. Entre 1931-1933 el físico alemán Ernest Ruska y el
ingeniero en electricidad también alemán Max Knoll
desarrollaron el primer microscopio electrónico de
transmisión (MET) para la observación de materiales. La
academia sueca en 1986 galardonó a Ernest Ruska con
el premio Nobel por la invención de este microscopio.
HISTORIA DEL MICROSCOPIO ELECTRÓNICO

12. PARTES DEL MICROSCOPIO ELECTRÓNICO

13. FUNCIONAMIENTO Y PRINCIPALES USOS
El microscopio electrónico ha sido y es una herramienta muy útil en el campo de la
investigación médica y biomédica. Gracias al gran poder de aumento de estos instrumentos, es
posible visualizar la estructura de multitud de microorganismos, células, grandes moléculas,
muestras de biopsias, virus, etc, permitiendo realizar un estudio morfológico.
Se utilizan generalmente en laboratorios de investigación, universidades y otros centros
especializados. Los microscopios electrónicos permiten observar estructuras con gran detalle
aportando la información necesaria sobre su función. A través de ellos podemos explorar la
naturaleza y los mecanismos moleculares de la enfermedad, revelando la estructura de tejidos,
células biológicas y proteínas. También en el campo de la Odontología encontramos múltiples
aplicaciones del microscopio electrónico de barrido.

14. MANTENIMIENTO
●
● Asegurarse que el ambiente o área en
que se instale el microscopio esté
protegido o protegida del polvo y la
humedad. El ambiente ideal debe
disponer de un sistema de aire
acondicionado que garantice aire libre
de polvo o partículas, control de
humedad y control de temperatura de
manera permanente.