Este documento presenta una guía de procedimientos estándar para el análisis de líquido cefalorraquídeo. Describe los métodos para la recolección y manejo adecuado de las muestras, así como los análisis macroscópicos, microscópicos y cuantitativos requeridos. El objetivo es establecer un protocolo normalizado que mejore la calidad del diagnóstico de enfermedades neurológicas a través del análisis preciso de este fluido corporal.
1. I. Título
Guía de procedimiento operacional estándar del sistema de gestión de calidad para describir los
métodos de análisis clínico del líquido cefalorraquídeo (LCR).
II. Finalidad
Mejorar la calidad del proceso analítico del servicio de patología clínica de cada institución o
centro médico.
III. Objetivos
Determinar el procedimiento a seguir por el personal del área para la realización del
análisis del líquido cefalorraquídeo.
Establecer pautas y pasos detallados para la elaboración de diferentes procedimientos que se
desarrolla en el laboratorio.
Se pretende orientar sobre el manejo de estos líquidos y establecer una norma estándar para su
evaluación en base a los conocimientos sobre la materia.
IV. Responsabilidades:
• Tecnólogo médico.
• Técnicos de laboratorio.
V. Ámbito de aplicación
La presente guía puede ser aplicado en los laboratorios de establecimientos de salud que
cuenten con personal calificado, va dirigido al personal en formación y a profesionales del
ámbito sanitario, principalmente del laboratorio (técnicos y analistas) pero también a los clínicos
prescriptores.
VI. Bibliografía
Ronco R. & Ferres M... Meningitis bacteriana. 2016, de PUC
Adams RD, Victor M, Romper AH. Principios de Neurología Sexta edición en castellano. Mc
Graw- Hill- Interamerican, 1999:11-16
De Myer W. Técnica del Examen Neurológico. Texto Programado. Tercera Edición. Editorial
Médica Panamericana S.A. 1982: 497.
Lindsay KW.; Bone I; Callander R. Neurología y Neurocirugía Ilustrada. Versión Española
Angeles Peiro. 1993: 467-496.
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2. VII. Consideraciones Generales
a. LIQUIDO CEFALORAQUIDEO
1. Definición
El líquido cefalorraquídeo, que normalmente es transparente, actúa como amortiguador,
protegiendo el cerebro y la columna de una lesión. El examen también se utiliza para medir la
presión en dicho líquido.
El LCR, es un fluido metabólicamente activo y dinámico que tiene muchas e importantes
funciones. Su análisis es decisivo para el diagnóstico y el tratamiento de enfermedades
neurológicas o infecciosas que afectan al cerebro, la medula espinal y las meninges, así como en la
evaluación de la hemorragia subaracnoidea y en la metástasis leptomeingeas.
2. Toma de muestra
A) Punción lumbar: El paciente se acuesta de rodillas encogidas hacia el abdomen y la barbilla
pegada al tórax (posición fetal).
Algunas veces, este procedimiento se realiza con la persona sentada, pero doblada hacia delante.
Después de limpiar la espalda, el medico inyectara analgésico local en la región lumbar.
Se introduce una aguja espinal, generalmente, se mide la presión del LCR y se recoge la
muestra.
Luego se retira la aguja, se limpia el área y se aplica un vendaje sobre el sitio.
Con frecuencia se le pide a la persona permanecer acostada por un corto periodo de
tiempo después del examen.
Habitualmente también se puede recoger de tres a cuatro tubos con objeto de realizar el
análisis biológico, microbiológico y celular del mismo.
Los tubos han de marcarse con arreglo a su secuencia de recolección y se aconseja que le
primer tubo se dedique a análisis bioquímico y serológico.
No se debe extraer más de 10 – 20 ml en adultos y de 5 u 8 ml en niños.
La segunda parte corresponde a las secreciones de vesículas seminales.
B) Punción cisternal o suboccipital.
Implica colocar una aguja debajo del hueso occipital (parte posterior del cráneo). Esto puede ser
peligroso porque está muy cerca del tronco encefálico. Siempre se realiza con fluoroscopio.
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3. C) Punción ventricular.
Es aún menos común, pero se debe recomendar en personas con posible hernia cerebral. Este
examen se realiza generalmente en el quirófano. Se perfora un orificio en el cráneo y se introduce
una aguja directamente en uno de los ventrículos del cerebro.
D) Manipulación y transporte.
Los especímenes de LCR deben enviarse al laboratorio tan pronto como finalice la extracción, ya
que la degeneración celular puede empezar en menos de una hora por lo que el recuento debe
realizarse de forma inmediata.
Los tubos deben transportarse a temperatura ambiente, las muestras para microbiología no deben
refrigerarse nunca antes de ser procesadas, ya que algunos de los microorganismos que se van a
estudiar son sensibles al frio y este podría inhibir su crecimiento en el cultivo. Se recomienda su
transporte y entrega en mano.
VIII. Consideraciones Específicas
a. Examen macroscópico
Color: la alteración usual en el color es secundaria a un sangrado patológico en el SNC o a una
punción lumbar traumática. El examen del sobrenadante es fundamental en la diferenciación
entre punción traumática y sangrado patológico ya que el sobrenadante.
Turbidez: El LCR normal es claro. El por tanto la turbidez se puede deber tanto a un aumento en el
recuento de eritrocitos como la de leucocitos y en raras ocasiones se deberá por bacterias.
Este examen incluye observaciones como la claridad, el color del líquido antes de
centrifugar, el color del sobrenadante y la formación del coagulo.
El líquido biológico es claro y transparente.
El aumento del recuento celular (pleicitosis) causa turbidez, que se aprecia cuando el
recuento de células nucleadas está próximo a 200/uL.
El color a de informarse como incoloro amarillento anaranjado rosado o marrón, que
corresponderían a la bilirrubina la oxihemoglobina y la metahemoglobina
respectivamente.
Viscosidad: el LCR normal tiene la misma consistencia que el agua. La viscosidad puede
estar aumentada en ciertos tipos de cáncer o en meningitis.
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4. b. Examen microscópico.
Generalmente se cuenta tanto células nucleadas como hematíes utilizando la cámara
hemocitometrica, para el recuento de células. Los constituyentes celulares del LCR normal
incluyen linfocitos, monocitos y ocasionalmente, células neuroectodérmicas. Los linfocitos son
principalmente células T. si el líquido es patológico podemos encontrar más células.
Si el aspecto del LCR es claro, se examina una gota de LCR sin diluir en el microscopio y se cuentan
las células de forma manual. Si el número de células es muy bajo (igual o menor a 5) puede o no
realizarse el recuento diferencial.
Si el número de células es elevado (superior a 5) probablemente se realizará el recuento
diferencial. Para realizar dicho recuento, se suele utilizar una centrifuga especial (citocentrífuga),
Posteriormente, se coloca una muestra de las células concentradas en un portaobjetos y se realiza
una tinción especial que permite observar los distintos tipos de células.
e. Otros valores que se miden en el LCR.
Color: la alteración usual en el color es secundaria a un sangrado patológico en el SNC o a una
punción lumbar traumática. El examen del sobrenadante es fundamental en la diferenciación
entre punción traumática y sangrado patológico ya que el sobrenadante.
Turbidez: El LCR normal es claro. El por tanto la turbidez se puede deber tanto a un aumento en el
recuento de eritrocitos como la de leucocitos y en raras ocasiones se deberá por bacterias.
Recuento de eritrocitos: El recuento de hematíes en el LCR reflejan bien hemorragia en el SNC o
punción traumática.
Recuentro de células nucleadas: En adultos es sospechoso de enfermedad en el recuento de
células en el rango de 6-10 células/ul. El recuento de células nucleadas es elevado tanto en
meningitis víricas como bacterianas.
Recuento diferencial de leucocitos en LCR. Se considera normal la presencia de pequeñas
cantidades de linfocitos, monocitos (y, en neonatos, algunos neutrófilos).
Citología de LCR: se realiza una tinción específica sobre una muestra previamente citocentrifugada
y se examina al microscopio para evaluar si existen células anómalas. Generalmente se realiza
cuando se sospecha de un tumor del sistema nervioso central o un cáncer metastásico. La
presencia de cierto tipo de células anómalas o de células sanguíneas inmaduras puede indicar el
tipo de cáncer de qué se trata.
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5. ANALISIS CUANTITATIVO CONCENTRACION QUIMICA.
VALORES NORMALES
Apariencia: transparente, sin color.
Proteína total en LCR: 15 A 60 mg/100 mL.
Gamma globulina: 3 a 12% de proteína total.
Glucosa en LCR: 50 a 80 mg/100 Ml (o mayor a 2/3 del nivel de azúcar en sangre).
Cloruro: 110 a 125 mEq/litro.
Potasio: 2,9 mEq/litro.
Sodio: 124 mEq/litro.
Bicarbonato: 24 mEq/litro.
Ph: 7.32
RESULTADOS ANORMALES
Si el LCR luce turbio, eso podría significar que hay una infección o una acumulación de glóbulos
blancos o proteína.
Si el LCR luce sanguinolento o rojo, puede ser un signo de sangrado u obstrucción de la medula
espinal.
Si es marrón naranja o amarillo, puede ser un signo de aumento dela proteína en el LCR o un
sangrado previo (hace más de 23 días). Ocasionalmente, puede haber sangre en la muestra
proveniente de la punción raquídea en sí, lo cual hace más difícil la interpretación de los
resultados del examen.
PROTEINA EN EL LCR:
El aumento de la proteína en el LCR puede deberse a sangre en dicho líquido, diabetes,
polineuritis, tumores, lesión o cualquier afección inflamatoria o infecciosa.
La disminución de la proteína es un signo de producción rápida de LCR; no se considera
significativa.
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6. GLUCOSA EN EL LCR:
El aumento de la glucosa es un signo de azúcar elevado en la sangre.
La disminución de la glucosa pude deberse a la hipoglucemia, infección bacteriana o micótica,
tuberculosis o ciertos tipos de meninges.
CELULAS SANGUINEAS EN EL LCR:
El aumento de los glóbulos blancos en el LCR puede ser un signo de sangrado en dicho liquido o el
resultado de una punción lumbar traumática.
PRUEBAS PARA DETECTAR INFECCIONES
Cuando existe una sospecha de meningitis o encefalitis
Tinción de Gram del LCR: para la observación directa de microorganismos al microscopio. La
muestra de LCR se centrifuga, se coge una porción concentrada, se coloca en un portaobjetos y se
tiñe para poder observar al microscopio. En el LCR no se deberían encontrar microorganismos. La
presencia de bacterias u hongos es indicativa de meningitis o encefalitis bacteriana o fúngica.
Cultivo de LCR: para detectar microorganismos, ya que crecerán si el medio de cultivo es
el adecuado. La ausencia de microorganismos no excluye el diagnóstico de infección; es
posible que los microorganismos no puedan crecer en ese medio de cultivo o que se
encuentren en tan baja cantidad que no puedan detectarse.
Pruebas moleculares en LCR: mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR), se
pueden utilizar para detección de material genético de patógenos que pueden estar
presentes en la muestra. Este método detecta material genético bacteriano, viral, fúngico
o parasitario (ADN, ARN) y es particularmente útil si el microbio no crece en el cultivo de
rutina o si el paciente ha estado tomando antibióticos.
Pruebas de detección de anticuerpos: si se detectan anticuerpos producido por el sistema
inmunológico contra microbios específicos que causan enfermedades puede ser útil en
infecciones donde los cultivos y las pruebas moleculares son insensibles (por ejemplo, en
el virus del Nilo Occidental, en la enfermedad de Lyme).
Antígeno criptocócico en LCR: para detectar infecciones fúngicas causadas
por Cryptococcus neoformans.
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7. Otras pruebas que pueden solicitarse con menor frecuencia son:
Prueba de amplificación de ácidos nucleicos en LCR: se utiliza para detectar infecciones
por micobacterias, como Mycobacterium tuberculosis; Se pueden realizar pruebas
moleculares específicas para M. tuberculosis cuando se sospecha tuberculosis.
Pruebas de detección de parásitos: los parásitos se pueden detectar en el LCR con
pruebas de laboratorio, como pruebas moleculares, cultivo o examen microscópico. Las
infecciones del sistema nervioso central por parásitos son raras y con frecuencia son
rápidamente letales. Un ejemplo es una infección causada por la ameba de vida
libre, Naegleria fowleri
Prueba de sífilis en LCR (VDRL): puede ser positiva en personas con neurosífilis, que
ocurre cuando la bacteria de la sífilis infecta el cerebro. Un resultado negativo no descarta
necesariamente una infección del cerebro.
CONTRAINDICACIONES DEL EXAMEN
Sospecha de hipertensión endocraneana.
Trombocitopenia o diátesis hemorrágica (incluido el uso de terapia anticoagulante).
Sospecha de absceso espinal epidural.
Infección del sitio de punción.
RIESGOS
Sangrado en el conducto raquídeo (espinal).
Malestar durante la realización de la técnica.
Reacción de hipersensibilidad (reacción alérgica) al anestésico.
Dolor de cabeza después de la técnica que suele desaparecer con el reposo y la toma
abundante de líquidos.
Lesión de la médula espinal (porque el paciente se mueve durante la realización de la
técnica).
Las punciones cisternal y ventricular entrañan un mayor riesgo de lesión del tejido
cerebral o del tronco del encéfalo y de hemorragia cerebral que podrían causar una
incapacidad o incluso la muerte.
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8. VIII. Anexos
1. Anexo N° 01: Como se realiza la técnica de punción raquídea
2. Anexo N° 02: infecciones del LCR.
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9. 3. Anexo N° 03: Factores predisponentes a patógenos bacterianos
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10. 2. Anexo N° 01: analítica del LCR
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11. X. Autores, fecha y lugar
Mª José López García
Medico Patologo
Facultativa especialista en Análisis Clínicos
Aurora Urbano Felices
Técnico Especialista de Laboratorio
Javier Mª Gutiérrez Romero
Licenciado en Farmacia.
Facultativo especialista en Análisis Clínicos.
Responsable de reproducción asistida de la UGC Laboratorios Clínicos.
Nombre del Ejecutor responsable: Instituto Nacional de Salud
Jefatura de Diagnóstico. Patología Clínica.
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Fecha y Lugar del procedimiento: Fecha de elaboración
______ diciembre, 2022 ______ diciembre, 2022.
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