Este documento presenta las prácticas de laboratorio de microbiología que se realizarán. Contiene información sobre normas de bioseguridad, preparación de medios de cultivo, microorganismos en el ambiente, y siembra de microorganismos. El objetivo general es conocer y estudiar microorganismos que pueden afectar a los seres vivos.

1. PREINFORMES DE MICROBIOLOGIA
PRACTICAS POR REALIZAR
PRESNTADO POR
JAIRO ANDRES MENDOZA JIMENEZ
CODIGO: 1122237604
GRUPO: 58
PRESENTADO A:
NIRA ESTHER DIAZ RODRIGUEZ
TUTOR(A)
UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA “UNAD”
ECAPMA
CCAV SAN JOSE DEL GUAVIARE
PROGRAMA: ZOOTECNIA
14-10-2016

2. INTRODUCCION
Uno de los principales puntos a tener en cuenta dentro del trabajo por realizar dentro del
laboratorio de microbiología es poder recocer y aplicar las normas generales de seguridad y
bioseguridad que se deben respetar en dicho laboratorio. Dicho esto, para el caso de este
curso de microbiología su fuente de estudio es el estudio de los seres vivos que no podemos
observar a simple vista, pero esto no quiere decir que todos los microorganismos son
microscópicos, pues existen algunos que se pueden observar a simple vista, pero en sí, se
requiere tener en cuenta que en su gran mayoría de estos microorganismo son los causantes
de muchas enfermedades, tal como lo comprenderemos con el estudio de los siguientes casos
expuestos en las siguientes prácticas que realizaremos a continuación.

3. OBJETIVOS
GENERAL.
 Conocer y profundizar en el estudio de los microorganismos que pueden actuar en
pro o en contra de los seres vivos según nuestro enfoque de nuestras carreras de
estudio.
ESPESIFICOS.
 Reconocer y aplicar las reglas básicas de seguridad y bioseguridad dentro y fuera de
los laboratorios.
 Analizar la importancia que posee cada una de estas reglas dentro de las actividades
que se desarrollan en el ámbito académico, como el del ámbito profesional.
 Adoptar los conceptos relacionados con la microbiología.
 Comprender la importancia de la microbiología que se nos presenta a nuestro
alrededor.
 Manejar las técnicas básicas del microorganismo que se encuentren dentro de un
laboratorio.
 Aplicar todos los fundamentos teóricos adquiridos durante el desarrollo del curso.

4. JUSTIFICACION
El conocimiento de la microbiología dentro del enfoque de la zootecnia, es muy importante
conocer cuáles son los muchos procesos naturales, que nos permiten desarrollar un camino
de continuidad de estudio de la vida en los animales de interés zootécnicos. Teniendo en
cuenta que sin la presencia de los microorganismos, todas las formas de vida como la de los
animales zootécnicos no sería la misma, ya que todos los microrganismo cumplen una muy
importante función de degradación de compuestos complejos a otros más simples.
Así como todos los microorganismos presentan una característica morfoficiologica y
estructural, estos mimos tienen la capacidad de descomponer de manera positiva todos los
desechos de materia orgánica que involucra la producción animal dentro de un ambiente
controlado, favoreciendo la interacción entre el microorganismo, los animales y el hombre.

5. MARCO TEORICO
Teniendo en cuanta que la perdida de la buena calidad de un producto, esta relacionado con
la presencia de microorganismos patógenos que bien pueden influir en la alteración de un
producto final, por lo tanto dicho producto puede quedar inservible para el consumo. Por lo
anterior, surge la necesidad del estudio de la microbiología para poder comprender las
funciones que realizan los microorganismos en los diferentes procesos ya sea de degradación
o transformación de algún producto.
Los microorganismos se caracterizan por poseer características como la sensibilidad al calor,
al frio, necesidades de agua, PH, radiación entre otras más.

6. I. PRACTICA 1
NORMAS GENERALES DE BIOSEGURIDAD
¿Qué es bioseguridad?
Hace referencia a una serie de conjuntos de protocolos y medidas de carácter preventivo, las
cuales están destinadas a realizar un control sobre cualquier factor de riesgo, el cual sea
considerado de riesgo, ya sea de origen biológico, químico, o físico, el hecho es que reduzca
cualquier impacto que sea contraproducente o nocivo.
¿Cuáles son las normas básicas de bioseguridad en el laboratorio de microbiología?
 Después de quitarse los guantes, se realizara un previo lavado de manos.
 Utilizar gafas de protección
 Tener especial cuidado de no quedar auto inoculado con los elementos o compuestos
a trabajar.

7.  En caso de existir cualquier accidente o derrame de alguna sustancia se debe informar
al supervisor y de ello dejar una constancia por escrito.
 En caso de maneja alguna prueba como de tuberculosis, no se debe abandonar el área
hasta que no la deje dentro del laboratorio.
 No realizar pipetación con la boca, para eso existe otras métodos de pipeteo.
 Dentro de la zona de trabajo no se debe dejar elementos de oficina ni libros ya que el
papel que es contaminado es muy difícil de esterilizar.
 No usar lentes de contacto.
 Las personas de cabello largo lo deben tener recogido
 No introducir o consumir alimentos dentro del área de trabajo de esta práctica.
 Lavarse las manos antes y después de cada prueba realizada. También antes de salir
de la sala del laboratorio.
 Presentase a dicha práctica de laboratorio con pantalón largo, zapatos cerrados y
cómodos.
 Utilizar siempre la bata blanca, gorro para el cabello, guantes y los tapabocas
 No desechar ninguna sustancia peligrosa por medio del desagüe.
II. PRACTICA 2
PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO

8. ¿Qué es un medio de cultivo; de que están compuestos principalmente; como se
clasifican según su proporción de Agar y según su suministro de nutrientes?
Un medio de cultivo consiste en una mezcla de diferentes nutrientes, las cuales al estar en
proporciones que sean adecuadas, permitirá el crecimiento de microorganismos, los cuales
deberán contar con ciertas condiciones fisicoquímicas. La composición química de los
cultivos siempre es variada, aunque de cierta forma todos poseen una fuente de energía
(compuesto orgánico o inorgánico), una fuente que sea carbonatada, sales minerales,
vitaminas y agua.
Tipos de medios de cultivos
Medio sintético: Es un medio que posee cierta composición química definida de manera
cualitativa y también cuantitativa.
Medio mínimo: Es un cultivo que tiene un medio, con una cantidad pequeña de nutrientes de
composición química el cual permite el desarrollo de los microorganismos los cuales no son
tan altamente exigentes, desde el punto de vista nutricional.
Medio complejo: Corresponde a un medio de cultivo que posee nutrientes de composición
química el cual permite fácilmente el crecimiento de algunos microorganismos.
Medio enriquecido: es un medio que contiene, además, de los nutrientes básicos de un
medio de cultivo sustancias altamente nutritivas, como son, suero, sangre, etc. (Agar
sangre, etc.)
Medio selectivo: es un medio que sólo permite el crecimiento de un grupo de
microorganismos e inhibe el crecimiento de otros tipos de microorganismos (Agar eosina
azul de metileno o EMB), etc.)
Medio diferencial: es un medio que permite revelar características fisiológicas de los
microorganismos.
Un elemento solidificaste como el Agar es constantemente empleado en la preparación de
diferentes cultivos. En los diferentes cultivos se emplean diversos materiales como los
sueros, sangre, bilis, e hidratos de carbono.

9. ¿Cuál es la utilidad de los medios de cultivo y que diferencia un caldo de un medio
solido?
Una de las formas más sencillas de aislar, identificar y conservar los microorganismos es por
medio de la implementación de los cultivos los cuales fueron ideados por Pasteur, el cual fue
considerado como el fundador de la microbiología. Pasteur se dio cuenta que los
microorganismos podían prosperar en medios de cultivo que tenían azúcar y una fuente de
nitrógeno.
La forma más sencilla de clasificar un cultivo es por medio de su consistencia, y es entonces
que aparecen los medios de cultivos sólidos y después los llamados caldos. En cualquier
medio de cultivo se requiere una buena cantidad de nutrientes que aporten al crecimiento de
las bacterias, pero la principal diferencia es la presencia de una sustancia llamada Agar, pues
esta es la responsable de darle solidez y consistencia a nuestro cultivo. El Agar es un azúcar
que está formado por la unión de otros azucares más pequeños.
¿En qué momento se esteriliza un medio de cultivo y porque?
La esterilización es la acción de destrucción total o parcial de microrganismo viables que
están en determinado compuesto o elemento. Esta acción es muy importante en la industria
farmacéutica, que es la base de su producción el hecho de manejar elementos que deben estar
esterilizados.
Un ejemplo de esterilización son los equipos requeridos en una sala de cirugía para disminuir
los riesgos de infección.
Los materiales que se emplean en los laboratorios como lo son las pipetas, tubos de ensayo,
placas, pinzas, etc.

10. III. PRACTICA 3
MICROORGANISMOS EN EL AMBIENTE.
¿Qué es un medio de cultivo selectivo y un medio de cultivo no selectivo?
Cultivo selectivo: Son los medios requeridos para favorecer el crecimiento de bacterias que
están contenidas dentro de una población considerada poli microbiana, el cual se basa en el
crecimiento de una población microbiana. Por ejemplo está el caldo selenito el cual se utiliza
para fomentar el crecimiento de la salmonella y para el resto de entero bacterias.

11. Cultivo no selectivo: Son los que permite que el cultivo crezca exponencialmente. Por
ejemplo el caldo nutritivo, Agar nutritivo, Agar soya tripticasa (TSA, Agar marino 2216 o
Zobell.
En ciertos procesos se requiere de áreas blancas. ¿Qué significa este término?
Significa que el color blanco hace contraste de color en las diferentes superficies donde se
pueda dar un hongo, lo que permite visualizarlo, para que posteriormente se realice las
acciones concernientes al caso (Limpiar o esterilizar).
IV. PRACTICA 4
SIEMBRA DE MICROORGANISMOS.

12. ¿Qué es una unidad formado de colonia?
Es la indicación de contaminación según una clasificación por grados dependiendo del
ambiente donde se esté. Expresa el numero relativo de microrganismo de un taxón
determinado en un volumen de un metro cubico de agua. UFC Corresponde al número
mínimo de células que son separables sobre una superficie, o medio donde contenga Agar
que sea semi-sólido el cual dará lugar crecimiento de una colonia, la cual será visible en
formas de cadenas de millones de células descendientes. Las UFC pueden ser pares
(diplococos), cadena (estreptococos) o racimos (estafilococos), así como células individuales
Unidad formadora de colonias.
¿Qué técnicas existen para hacer una cuantificación del crecimiento de los
microorganismos?
Recuento en placa o de colonias: Es el método más usado para medir poblaciones
bacterianas, ya a diferencia de otros, este permite contabilizar el crecimiento de las células
viables, pero su desventaja es que necesitan de 24 horas para obtener los resultados.
Método de extensión en placa: Se coloca un volumen de inóculo no superior a 0.1 ml (100
µl) sobre la superficie de un medio de cultivo y se extiende uniformemente por toda la placa
con un asa o varilla de vidrio estéril hasta que el medio lo absorba por completo,
posteriormente se incuba a una temperatura determinada hasta que aparezcan las colonias y
así realizar el recuento.
Método de diluciones seriadas: Cuando una muestra contenga muchos microorganismos
que superen las 300 UFC se recomienda realizar diluciones seriadas que faciliten el conteo y
permita obtener resultados confiables; luego de las diluciones se siembran las placas y se
procede a hacer el conteo del número de colonias.
Filtración: Es un método muy usado en microbiología de aguas cuando la concentración de
bacterias presentes en la muestra es muy baja
¿Los microorganismos pueden vivir de forma indefinida en un medio de cultivo?
Sustente su respuesta.

13. Existen algunos de los microorganismos que no son cultivables o se reproducen en un caldo
nutritivo pues algunos necesitan energía solar para sobrevivir. Aunque también existen otros
medios que les permite multiplicarse en grandes cantidades gracias a poseer las condiciones
ambientales adecuadas.
V. PRACTICA 5
TECNICAS DE TINCION
Establezca las diferencias entre una coloración simple y una coloración de Gram.
Coloración simple: Se utiliza para estudiar compuestos de levaduras, para el cual se utiliza
el azul de metileno, para identificar que las levaduras tienen cocos. Estas células bacterianas
difieren desde el punto de vista químico de su medio exterior y por eso se tiñen contrastando
con su alrededor.
Coloración de Gram: es la coloración que más se utiliza en la bacteriología, ya que esta
permite individualizar a las bacterias en 2 grupos como las Gram-positivas y las Gram-
negativas.

14. En todo caso la coloración Gram requiere de un colorante, solución mordiente, agente
colorante y color que haga un contraste.
Investigue que coloración se debe utilizar para observar las Endoesporas o esporas
bacterianas, y para observar la cápsula
Coloración de esporas: Se emplea el color verde de malaquita para que haga contraste con
la safranina.
Endoesporas: Son cuerpos resistentes que se reproducen en el interior de las células los
cuales poseen las sustancias necesarias para seguir vivas, pero estas esporas por lo que se
ubican en el centro de la células o extremos de la misma, dependiendo de su ubicación logran
adaptarse para sobrevivir.
VI. PRACTICA 6
FACTORES QUE AFECTAN EL CRESIMIENTO DE LOS ORGANISMOS

15. Dentro de los factores que afectan al crecimiento bacteriano, define:
El efecto de la temperatura en bacterias Psicrófilas, Mesófilas, termófilas.
Psicrófilas: La temperatura adecuada para que surja un buen desarrollo oscila entre los 12 a
15 ºC.
Mesófilas: La temperatura adecuada para los Mesófilas oscila entre los 24 a 40 ºC. La gran
mayoría de los microorganismos en lugares con ambientes templados y tropicales como los
simbiontes y parásitos pertenecen a esta categoría.
Termófilos: Estas son las únicas formas de vida con la capacidad de sobrevivir en
temperaturas superiores a los 65 ºC, las cuales son las procariotas. Estos presentan una
optimación de entre los 50 a 75 ºC y un máximo entre 80 a 113 ºC. Dentro de esta categoría
se suele distinguir las termófilas extremas hipertermófilas, que pueden llegar a presentar
óptimos cercanos a los 100ºC, y que taxonómicamente pertenecen al dominio de las Archaea.
Efecto del PH: Cuando las reacciones enzimáticas son realizadas, estas presentan una gráfica
de efectividad a diferentes particularidades del PH (bifásica). La actividad enzimática se mide
por distintos colores y valores del PH.
Disponibilidad de agua: Se debe utilizar la mejor calidad de agua en los procesos de misión
crítica y de los análisis para que de esta forma se logren los mejores resultados confiables y
precisos.
Halófilos: Esto es un adjetivo que se emplea para los microorganismos que subsisten en
medios con la presencia de grandes cantidades de sales.
Oxigeno: Este es un elemento gaseoso de inodoro que se encentra en el ambiente libre, como
aire, agua, en seres vivos y en otros compuestos tanto orgánicos como inorgánicos.

16. VII. PRACTICA 7
PRUEBAS BIOQUIMICAS A ALGUNAS BACTERIAS.
¿Cuáles son las bacterias autótrofas, heterótrofas, quimio autótrofas, organótrofos,
litótropos, organótrofos, fotótrofos?
Heterótrofos: Son los seres vivos que requieren conseguir alimentos de otro medio para
obtener su energía.
Litótropos: Son dos combinaciones entre los quimiotrofos y los autótrofos. Estos se
encuentran en la biomasa litótrofa que se encuentra dentro de los micro hábitats que nos
rodean, pero alejados de la luz solar y el oxígeno como el rumen del ganado, termitas.
Organótrofos: Es un término empleado dentro de la microbióloga para clasificar y describir
los organismos según como estos obtienen los electrones en sus procesos de respiración, pero
estos pueden ser aeróbicos o anaeróbicos.
Fotótrofos: Estos son los que poseen la capacidad de tomar fotones de la luz del sol como si
fuese fuente de energía. Dichos fotones pueden ser utilizados como agentes fijadores de
carbono inorgánico en forma de carbono orgánicos, los cuales se les llaman foto autótrofos.

17. VIII. PRACTICA 8
CONTROL DE MICROORGANISMOS POR MEDIO DE FACTORES FISICOS Y
QUIMICOS.
¿Qué es bioseguridad? Es el conjunto de acciones de control de un medio ambiente
controlado mediante la adecuación de estructuras físicas que permite brindar una seguridad
desde adentro hacia afuera y viceversa.

18. ¿Cuáles son las normas básicas de bioseguridad de un laboratorio?
Son normas, las cuales son adoptadas de forma responsable para todo el personal que asista
a un laboratorio, como lo son las siguientes.
 Después de quitarse los guantes, se realizara un previo lavado de manos.
 Utilizar gafas de protección
 Tener especial cuidado de no quedar auto inoculado con los elementos o compuestos
a trabajar.
 En caso de existir cualquier accidente o derrame de alguna sustancia se debe informar
al supervisor y de ello dejar una constancia por escrito.
 En caso de maneja alguna prueba como de tuberculosis, no se debe abandonar el área
hasta que no la deje dentro del laboratorio.
 No realizar pipetación con la boca, para eso existe otras métodos de pipeteo.
 Dentro de la zona de trabajo no se debe dejar elementos de oficina ni libros ya que el
papel que es contaminado es muy difícil de esterilizar.
 No usar lentes de contacto.
 Las personas de cabello largo lo deben tener recogido
 No introducir o consumir alimentos dentro del área de trabajo de esta práctica.
 Lavarse las manos antes y después de cada prueba realizada. También antes de salir
de la sala del laboratorio.
 Presentase a dicha práctica de laboratorio con pantalón largo, zapatos cerrados y
cómodos.
 Utilizar siempre la bata blanca, gorro para el cabello, guantes y los tapabocas
 No desechar ninguna sustancia peligrosa por medio del desagüe.

19. BIBLIOGRAFIA.
 Organización mundial de la salud. Manual de bioseguridad en el laboratorio 3era
edición. Consultado 12-10-2016. Aquí
 Subcomité de bioseguridad del instituto nacional de salud. Seguridad para los
laboratorios. Segunda edición del 2002. Consultado 12-10-2016. Aquí
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Generales (2da edición). Facultad de Farmacia. Universidad Central de Venezuela.
Consultado 12-10-2016. Aquí
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10-2016. Aquí
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Microbiología Alimentaria. Organización Panamericana de la Salud. Harla S.A.
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