diagnostico de laboratorio

2. LABORATORIO CLINICO “LABEMED srl” CODIGO
PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTANDARIZADO
POE-HC-002
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REDACTADO POR: Dr. Davis Cristhian Adriazola Lafuente REVISADO POR: Dr. Grover N. Paredez Centellas
VISTO BUENO Dr. Grover N. Paredez Centellas APROBADO POR: Dra. Zulma Herbas Justiniano
AÑO DE REDACCION: Año 2024 TIEMPO DE VIGENCIA Año 2024 - 2025
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2da.
Edición
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COLESTEROL
HUMAN
AREA: QUIMICACLINICA
E l a b or a d o : Cargo:
Firma: Fecha:
R e v i s o : Cargo:
Firma: Fecha:
Ap r o b ó : . Cargo:
Alidad
Firma: Fecha:
LABORATORIO DE ANALISIS CLINICO “LABEMED”
CALLE 12 DE OCTUBRE Esquina Illampu N° 50
Telf.: 52-60981
Oruro - Bolivia

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COLESTEROL
1. CONTROL DE PÁGINAS EFECTIVAS
Apartado Título
Pá
g
Re
v
Control de cambios
T ST P L
1 CONTROL DE PAGINAS EFECTIVAS
2 CONTROL DE CAMBIOS
3 LISTA DE DISTRIBUCIÓN
4 ANTECEDENTES
5 OBJETIVO
6 ALCANCE
7 DEFINICIONES
8 ABREVIACIONES
9 RESPONSABILIDADES
10 CONDICIONES AMBIENTALES
11 METODO
12 FUNDAMENTOS DEL MÉTODO
13 CONTENIDO DEL PROCEDIMIENTO
13.1 Muestra requerida
13.2 Reactivos
13.3 Materiales
13.4 Equipos
13.5 Especificaciones
13.6 Desarrollo
13.6.1 Condición de Repetibilidad (CCI)
13.6.2 Condición de Reproducibilidad
13.6.3 Rango
13.6.4 Linealidad
13.6.5 Especificidad
13.6.6 Exactitud
13.6.7 Precisión
13.6.8 Sensibilidad
13.6.9 Incertidumbre
13.6.10 Veracidad
13.6.11 Limite de detección
13.6.12 Limite de cuantificación
13.6.13 Robustez
13.7 Resultados
13 REFERENCIAS
14 ANEXOS

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2. CONTROL DE CAMBIOS
REGISTRO DE CAMBIOS
Cambio N° Fechas de Cambio Fecha de Registro Registrado por:
3. LISTA DE DISTRIBUCION
Copia Destino Revisión Fecha Recibió

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4. ANTECEDENTES
El colesterol es un esterol (lípido) que se encuentra en los tejidos corporales y en el plasma sanguíneo de
los vertebrados. Pese a que las cifras elevadas de colesterol en la sangre tienen consecuencias
perjudiciales para la salud, es una sustancia esencial para crear la membrana plasmática que regula la
entrada y salida de sustancias en la célula. Abundan en las grasas de origen animal.
5. OBJETIVO
 Obtener cuantitativamente la concentración de colesterol en sangre venosa para realizar pruebas
de química sanguínea.
 Aplicar el manejo adecuado de la técnica, para la determinación de colesterol en una muestra
biológica
 Establecer los valores de referencia de triglicéridos (dato de inserto en uso) y comparar con el
valor de nuestra muestra problema a analizar.
 Es un método colorimétrico enzimático que tiene por objeto la determinación de colesterol dos
en suero o plasma.
 Definir cuáles son las diferentes patologías que se presentan si tenemos valores altos o bajos de
colesterol en una muestra biológica.
6. ALCANCE
 Determinación cuantitativa de colesterol en sangre venosa
 Detección de hipercolesterolemia y enfermedades por hiperlipidemias y ateroesclerosis
7. DEFINICIONES
 Hipercolesterolemia.- Aumento de la cantidad normal de colesterol en la sangre
 Hiperlipidemias.- son causa de diversas alteraciones orgánicas como la arterioesclerosis
y el infarto del miocardio a causa de una alteración de la vascularización coronaria. El
tratamiento depende de la causa, pero en general, o bien es dietético o farmacológico.
 Ateroesclerosis.- variedad de arterioesclerosis que se caracteriza por la acumulación de
grasas en el interior de las arterias.
8. ABREVIACIONES
 ATP.- adenosin trifosfato
 ADP.- adenosin difosfato
 GPO.- glicerol fosfato oxidasa
 POD.- peroxidasa
 4-A-F.- cuatro amino fenasona
 H2O2.- peróxido de hidrogeno
9. REFERENCIAS
Cholesterol liquicolor HUMAN
RANDOX COLESTEROL
(En caso de cambiar de reactivo se debe poner en el REGISTRO DE CAMBIOS y adjuntar en anexos
los cambios efectuados.
10. RESPONSABILIDADES
AUTORIDADES INSTITUCIONALES
Alta dirección técnica y administrativa
RESPONBLE DE LABORATORIO
 Jefe de laboratorio
RESPONSABLE DE CALIDAD
 Responsable de control de calidad y de área

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RESPONSABLE DEL ANALISIS
 Personal que realiza el análisis
11. CONDICIONES AMBIENTALES
Temperatura ambiente ideal 22 ºC +/- 2ºC
Humedad relativa 45% +/- 5% (según Norma ISA)
Presión varometrica1013,1 HpA 29,92 inchHg (según Norma ISA)
12. METODO
MÉTODO ENZIMÁTICO COLORIMÉTRICO
El método está basado en la hidrolisis enzimática de los triglicéridos séricos a glicerol y acidos grasos
libres por acción de la lipoprotein lipasa el glicerol es fosforilado por el adenosin tri fosfato en presencia
de glicerol quinasa para formar glicerol-3-fosfato (G-3-F)-, y adenosin di fosfato. El G-3-F es oxidado
por el glicerol fosfato oxidasa en dihidroxiacetona fosfato y peróxido de hidrogeno. En presencia de
peroxidasa el fenol y la 4-aminotripsina se condensa por acción del peróxido de hidrogeno formando un
cromógeno rojo proporcional en concentración de triglicéridos presentes en la muestra.
13. FUNDAMENTOS DEL METODO
El colesterol se determina después de la hidrolisis enzimática y la oxidación. El indicador es la
quinoneimina formada por el peróxido de hidrogeno y 4-amino-antipirina en presencia de fenol y
peroxidasa.
14. CONTENIDO DEL PROCEDIMIENTO
14.1. Muestra requerida
Sangre venosa para la obtención de suero o plasma
Cantidad total: 1 ml
Condiciones: Almacenaje- 20ºC +/- 4 ºC
Ensayo 37.0 ºC
Suero o plasma
a) Recolección: previo ayuno de 12 a 14 horas, obtener suero o plasma. Separar de
los glóbulos rojos dentro de las 2 horas de extracción.
b) Aditivos: en caso de emplear plasma, se recomienda el uso de Anticoagulante
W o heparina para su obtención.
c) Sustancias interferentes conocidas: los sueros con hemólisis intensa o
marcadamente ictéricos producen resultados erróneos, por lo que no deben ser
usados.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: los triglicéridos en suero son
estables 3 días en refrigerador (2-10oC). No congelar.
14.2. Reactivos
 Reactivo 1: buffer fosfato.
 S. Standard: colesterol hasta 200 mg/dl
 Cantidad total: 1mL
14.3. Materiales
 Tubos de borosilicato diámetro 12mm H 75mm
 Tips de 1ml= 100 uL
14.4. Equipos
 Cronometro: AM 10min VM 5min RM 1seg

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 Pipetas de vidrio: AM 10 ml VM 7+/-0.1 ml RM 0.1 ml
 Micropipeta: AM 100uL VM 100 ul+/- 1 uL
 Micrpipeta: AM 1000uL VM 100 uL +/- 10 ml
 Vortex: 4S +/- 1S
 Stat fax: 1935 plus
MODO DE OPERACION
 Longitud de onda (505nm)
 LOW SPEED CENTRIFUGE 80 – 2c 2500 RPM 5 min
 BAÑO MARIA INTERNO SEPARACION 37 ªC +/. 0,5 ªC TLV 0ºC A 50 ºC
RM 0,1 ºC
14.5. Especificaciones
1. Valores de referencia
El panel de expertos del National Cholesterol Education Program (NCEP) provee los
siguientes valores de coleterol:
Menor o igual a 190 mg/dl
14.6. Desarrollo
BLANCO CALIBRACION PRUEBA
REACTIVO 1 1000ul 1000ul 1000ul
ESTANDAR 10ul
MUESTRA 10ul
Mezclar, incubar 5 minutos a 37°C y leer en espectrofotómetro a 505 nm o en
fotocolorímetro con filtro verde (490-530 nm)
Estabilidad de la mezcla de reacción final
El color de reacción final es estable 60 minutos, por lo que la absorbancia debe ser leída dentro
de este lapso.
 Condición de respetabilidad
 Condición de reproducibilidad
 Rango
 Linealidad
La reacción es lineal hasta 700 mg/dl de colesterol.
 Especificidad
 Exactitud
 Precisión
 Sensibilidad
 Incertidumbre
 Veracidad
 Límite de detección
 Límite de cuantificación
14.7. Resultados
15. REFERENCIAS
16. ANEXOS
Inserto del reactive Human COD: QC-004

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