La seroprevalencia de Trypanosoma cruzi en mujeres embarazadas en el estado de Guanajuato, México se estudió usando PCR y microhematocrito. Se encontró una prevalencia del 0.8% en 520 mujeres embarazadas examinadas. Los factores de riesgo identificados incluyeron materiales de construcción deficientes y la presencia de animales domésticos. Se concluyó que es importante controlar a las mujeres embarazadas con factores de riesgo para T. cruzi a través de identificación temprana y seguimiento con

1. By: Maria Isabel Mejia Ramirez
David Muñoz Lopera
1

2. 2
Introduction
Protzoan
hemoflagellate
Trypanosoma
cruzi
Two different
genomes
Genome (100 to
200 millons of
bases)
Has 4 different
morphological
forms
Completes it´s
cycle into human

3. Chagas disease
•Is caused by trypanosoma cruzi
•Is located must common in America
•Is transmitted by blood feeding triatomines and can also be purchased by
blood transfusion, congenital transmission or organ transplatation.
•Has two clearly differentiated phases (Acute, chronicle )
•Can be treated in the acute phase by benznidazole
•Does not have vaccine
3

4. Symptom depends of the phase
4

5. • Seroprevalence: It is the total population that has a blood-borne disease
•Polimerase Chain Reaction (PRC): it’s a laboratory method that helps us to
amplify the amount of DNA in the sample
•Hematocrit: is a blood test that measures how much of a person's blood is
made up of red blood cells.
5
Hematocrit + PCR: LET US TO IDENTIFY THE
PEOPLE WHO HAS TRYPANOSOMA CRUZI.
SEROPREVALENCE: LET US HOW MANY PEOPLE
IS INFECTED

6. General AIM
6
The seroprevalence of
Trypanosoma cruzi in
pregnant women in the
state of Guanajato,
Mexico using PCR and
microhematocrit

7. Materiales y métodos
Estudio realizado en Guanajuato (norte-centro de México)
Pruebas Febrero 2014 Marzo 2015 en el departamento de obstetricia y
ginecología del (HRGL).
1,6% población
de México
Mujeres en edad
de procrear
777,217
520
Embarazadas Prevalencia
0,8%
7

8. 8

9. Edad
Transfusiones
de sangre u
otros
Edad
gestacional
Lugar de
nacimiento
Tiempo
residencia
# partos
Perfil epidemiológico de
las viviendas relacionado
con la transmisión
vectorial y otros factores
de riesgo (individuales)
asociados con potencial
no vectorial
9

10. 10

11. Criterios de inclusión
● Aceptación para la
investigación.
● Ser residente del área
de estudio.
● Edad gestacional 6-9
meses.
Método de Capurro
y ultimo PM
Menores de edad
permiso de padres
Exclusión
● No aceptación.
● una de las dos
pruebas serológicas
daba positivo o ambas
negativo.
11

12. Examen serológico madres
Se tomaron muestras de sangre en tubos al vacío de la vena
periférica, hubo separación del suero y se guardaron las muestras
a las cuales se aplicó ELISA.
La absorbancia se midió a 450/620 nm
Todas las pruebas se realizaron por duplicado
12

13. • los sueros negativos de individuos sanos se usaron como
controles para cada prueba.
• Se realizó ensayo de hemaglutinación (IHA).
• Las pruebas reactivas en disolución menor-igual 1:32 fueron
consideradas positivas
13

14. • Es un metodo analitico que epene e la reacción antígeno-
anticuerpo, es tanto cualitativo como cuantitativo.
• se pueden emplear antígenos, haptenos o anticuerpos
marcados con una enzima para revelar: antígenos, anticuerpos,
hormonas o fármacos presentes en el organismo.
ELISA
14

15. Funcionamiento
En la solución problema se encontrara (ejemplo)
un antígeno, se le adiciona un anticuerpo
marcado con una enzima esta modifica el
sustrato en presencia de un cromógeno dando
una señal luminosa.
15

16. PCR y parasitológicos
• Se realizó prueba de microhematocrito con 6 capilares de
sangre uno para cada momento del parto y se analizó la capa
leucocitaria.
• la PCR se realizó con una muestra de sangre del cordón
umbilical mezclada inmediatamente con EDTA.
16

17. • Se realizó una prueba PCR para la región minicircle de kDNA
utilizando iniciadores S35 y S36 para amplificar una secuencia
repetitiva de 330 pares.
• El ADN extraído del control negativo de los recién nacidos
sanos a partir de T. cruzi madres -seronegativas, y el control
positivo contenían epimastigotes de T. cruzi de ADN a partir de
un cultivo en medio LIT.
• Los Productos de la PCR se sometieron a electroforesis.
17

18. PCR
• La reacción en cadena de la polimerasa es una reacción
enzimática in vitro que amplifica millones de veces una
secuencia específica de ADN durante varios ciclos repetidos en
los que la secuencia blanco es copiada fielmente.
• Cada ciclo de la PCR se lleva a cabo en tres etapas principales:
desnaturalización, hibridación y extensión.
18

19. 19

20. Aspectos morfológicos del T. cruzi
Trypomastigote: forma flagelada que circula por la sangre de los
mamíferos y en el intestino posterior del triatomino.
Amastigote: forma aflagelada en los tejidos de los mamíferos y
allí se reproduce.
Epimastigote: forma de multiplicación en el vector y es eliminado
en las deyecciones del triatomino.
20

21. 21

22. Resultados
22

23. 23

24. 24

25. Author Comments YES- NO
Rassi et al., 2010 However, it can also be spread via non-vectorial
routes, such as blood transfusion, congenital
transmission, organ transplantation, food
contamination with bug feces or laboratory accidents
Ramsey et al.,2000 According to our epidemiological surveys, 88 mothers reported
the presence of intra domiciliary triatomines (16.9%), but only
three seropositives were confirmed to have been bitten by bugs.
Although this finding was not significant, we thought that it could
have an effect on the prevalence of infection associated with the
rural setting of domiciles, where triatomines have domestic and
peridomestic habitats
25

26. Author Comments YES- NO
Kjos et al., 2013,
Enríquez et al., 2014 y
Odagiu y Mayer, 2015
The presence of domestic animals associated with transmission of T.
cruzi was significant, and domestic dogs and cats have previously
been identified as the main sources of transmission parasites at the
national level in Mexico, Texas and Argentina.
Bustamante et al., 2009 y
Sandoval-Ruiz et al., 2014 Other significant risk factors identified in this study include home
building materials, stories such as unremoved walls and the
roof, because surfaces are easily used as a proper hideout by
triatomines.
26

27. Conclusions
The health services institutions must
carry out training programs for
pregnant women so that a timely
diagnosis can be made and an
adequate and timely treatment can
be provided in case of presenting T.
cruzi parasite.
The government agencies directly
responsible for health in the
countries must advance prevention
programs for pregnant women,
especially those aged between 14
and 24 years, in order to reduce the
rate of transmission and infection of
the disease.
27

28. Conclusions
Programs that benefit public health,
housing and public services should
be put in place so that they have
adequate conditions so that the
main factors of propagation do not
occur.
Advance fumigation campaigns or
other methods to eradicate or
diminish the presence of vinchucas,
taking into account that this is the
transmission vector of T. cruzi.
28

29. Conclusions
29
Because chagas disease is transmitted
by a protozoan and can also infect the
fetus is important that if you are planning
having a baby put attention of all the
factors than can cause the disease.
It´s important to prevent and educate the
people who lives in endemic zones so
that before the first contact with the
triatomine or it eggs the patience can
start the correct treatment and don't let
the diseases begins.

30. Conclusions
30
To prevent chagas disease It is
important to ensure maternal control
with risk factors for trypanosoma
cruzi through early identification and
follow-up by pcr

31. 31

32. 32

33. Bibliografía
• Francielli Caceril, J. P. (5 de Noviembre de 2013). Slideshare. Obtenido de Slideshare:
http://es.slideshare.net/francasaril/enfermedad-de-chagas-27925974
• Fernandez, D. N. (2007). higiene.edu. Obtenido de higiene.edu: http://www.higiene.edu.uy/parasito/trabajos/elisa.pdf
• Tamay de Dios L, *. I. (Mayo-Agosto de 2013). Medigraphic.org.mx. Obtenido de Medigraphic.org.mx:
http://www.medigraphic.com/pdfs/invdis/ir-2013/ir132d.pdf
• OMS (Marzo de 2016) obtenido de la página de la Organización Mundial de la Salud:
http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs340/es/
• Dr Tango ( 12 de Julio de 2014) obtenido de: https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/001372.htm
• Ceballos Ana María y Hernández Roberto. obtenido de: http://www.biblioweb.tic.unam.mx/libros/microbios/Cap15/
33