Este documento describe el rol del laboratorio en el diagnóstico etiológico de las infecciones respiratorias altas y bajas. Explica los métodos para diagnosticar infecciones como la influenza, faringitis estreptocócica, sinusitis, otitis media y tuberculosis, incluyendo la toma de muestras, pruebas rápidas, cultivos, tinción de Ziehl-Neelsen y resistencia a medicamentos. El diagnóstico microbiológico preciso es fundamental para el tratamiento adecuado de estas infecciones.
AVISO: Los documentos no me pertenecen, son propiedad de los docentes de la carrera de Medicina de la Fundación Barceló. Las faltas de ortografía y/o errores gramaticales también pertenecen a los respectivos autores.
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Presentació de Elena Cossin i Maria Rodriguez, infermeres de Badalona Serveis Assistencials, a la Jornada de celebració del Dia Internacional de les Infermeres, celebrada a Badalona el 14 de maig de 2024.
IA, la clave de la genomica (May 2024).pdfPaul Agapow
A.k.a. AI, the key to genomics. Presented at 1er Congreso Español de Medicina Genómica. Spanish language.
On the failure of applied genomics. On the complexity of genomics, biology, medicine. The need for AI. Barriers.
Presentació de Isaac Sánchez Figueras, Yolanda Gómez Otero, Mª Carmen Domingo González, Jessica Carles Sanz i Mireia Macho Segura, infermers i infermeres de Badalona Serveis Assistencials, a la Jornada de celebració del Dia Internacional de les Infermeres, celebrada a Badalona el 14 de maig de 2024.
Presentación utilizada en la conferencia impartida en el X Congreso Nacional de Médicos y Médicas Jubiladas, bajo el título: "Edadismo: afectos y efectos. Por un pacto intergeneracional".
DIFERENCIAS ENTRE POSESIÓN DEMONÍACA Y ENFERMEDAD PSIQUIÁTRICA.pdfsantoevangeliodehoyp
Libro del Padre César Augusto Calderón Caicedo sacerdote Exorcista colombiano. Donde explica y comparte sus experiencias como especialista en posesiones y demologia.
2. ROL DEL LABORATORIO EN EL
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO -
ETIOLÓGICO DE LAS
INFECCIONES RESPIRATORIAS
ALTAS Y BAJAS
2
3. INFECCIONES RESPIRATORIAS ALTAS
• Origen viral
• Sobreinfección bacteriana
• Toma de muestra antes del inicio del
tratamiento cuando se sospecha de
infección bacteriana.
• Cuando hay falla del tratamiento empírico
o del tratamiento de elección, o en
pacientes con ciertos factores de riesgo.
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6. Influenza A,B,C ...Dx
Muestra de nasofaringe (hisopado)
Test rápidos: detecta antígeno del
virus influencia A,B. NO INDICA LA
CEPA.
Cultivo celulares
RT-PCR
A,B Inmunofluorescencia / Inhibición de
hemaglutinación (AH1-3 ..antisueros
específicos) >4 veces = Infección aguda
Pruebas de fijación del complemento
Test rápidos por inmunocromatografía
– Sensibilidad: 10-70%
– Especificidad: 90-95%
Inmunofluorescencia
S: 80%
E: 95-100%
Inh hemaglutinación
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7. FARINGOAMIGDALITIS
• Datos clínicos
• Muestra biológica: exudado faríngeo
• Detección rápida del Ag de
estreptococo
– S: 85 % / E: 95 %
• Patrón “oro”: cultivo
• Determinación de anticuerpos
(ASLO)
– Diagnóstico retrospectivo
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8. Streptococcus pyogenes EBHGA:
características microbiológicas
Portación faríngea (5-25%)
Mas de 80 serotipos, transmisión aérea,
contacto directo, piel
Microscopía: Gram CGPc
Cultivo: Colonias B-hemolíticas en AS
Susceptibilidad a Bacitracina , Test de Voges
Proskauer (VP), test de pirrolidonil
aminopeptidasa (PYR), test de CAMP.
Factores de Virulencia: Hemolisinas (ASO),
DNAsas; Estreptokinasas, Hialuronidasas
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11. Sistema de Clasificación de Lancefield
AG específico de grupo (HC) en la pared celular:
– Grupo A ------- Ramnosa-N-acetil glucosamina
– Grupo B-------- Ramnosa-glucosamina
– Grupo C ------- Ramnosa-N-acetil galactosamina
– Grupo D ------- D-alanina y glucosa
– Grupo F -- Glucopiranosil-N-acetil galactosamina
ESTREPTOCOCOS
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12. SINUSITIS
• Causada principalmente
pneumoniae, H. influenzae, M.
por bacterias (S.
catarrhalis, S.
pyogenes, bacterias anaerobias).
• Muestra biológica: secreción (aspiración de
secreciones nasales, aspiración de meato medio
bajo visión endoscópica, punción).
• Cultivo: inmunocomprometidos, infecciones
nosocomiales, mala respuesta antimicrobiana,
complicaciones (meningitis, osteomielitis, celulitis
peri orbitaria).
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14. EPIGLOTITIS
área
• Inflamación del
supraglótica, causada por
Haemophilus influenzae
tipo B (serotipo b) – 90%
• Provoca obstrucción severa
de la via aérea superior
(muerte).
el H.
• Edad: 2 – 6 años
• Clínica: Tóxico.
• Vacuna
influenzae
contra
tipo B (HiB), há
disminuido su incidencia
(niños menores de 5 años).
Epiglotis edematosa – “Rojo cereza”
15. EPIGLOTITIS
• Haemophilus influenzae serotipo b
• Muestra biológica: sangre
• Hemocultivos seriados.
• Toma de muestras faríngeas o
nasofaríngeas contraindicadas.
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16. OTITIS MEDIA
• Bacterias más comunes: S. pneumoniae, H. Influenzae
no tipificables y Moraxella catarrhails.
• Virus: VSR, adenovirus, influenza, rinovirus,
parainfluenza, coronavirus
Otoscopía:
Color, contorno y movilidad.
Tímpano abombado, amarillo o rojo, inmóvil, en que
la marca de los huesecillos y el reflejo luminoso
están distorsionados
• Timpanocentesis o miringotomía: secreción ótica,
Gram , cultivo.
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20. Infecciones oculares
• 1ª causa de ceguera en el mundo:
– Tracoma:
– VHS:
6,5 millones
20 casos/100.000/año
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21. Conjuntivitis Aguda
• Infecciosas:
– Bacteriana aguda (S. Aureus, S. Epidermidis, S.
Pneumoniae, H. influenzae)
– Bacteriana hiperaguda (Neiserias)
– Infección por Chlamydias
– Viral: Adenovirus, enterovirus y coxsackie, HSV I
• No infecciosas: Alérgicas, Tóxica, por enf sistémicas,
otras….
• Cultivo Muestra: colección de exudado conjuntival.
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25. Lentes de contacto
Queratititis: diagnóstico microbiológico
Raspado
corneal
Inoculación directa
Medios de cultivo
Cultivo
bacteriológico
Examen directo
Tinción de Gram
Medio de tranporte
Cultivo de parásitos
(Biopsia corneal)
Cultivo de
parásitos
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26. Uveítis/Coriorretinitis
• Etiología
– ANTERIOR
• VHS, sífilis, TB, B. burgdorferi
– POSTERIOR
• Toxoplasma, CMV, sífilis, Toxocara
• Diagnóstico microbiológico
– NO cultivo
– Serología: T. pallidum, T. canis
– PCR VHS, VZV, CMV, TB
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27. Infección de los anexos oculares
Infecciones palpebrales
Flora cutánea S. aureus
S. aureus
A. israelii, anaerobios
Sistema lagrimal
Dacrioadenitis
Canaliculitis
Tinción de Gram
Cultivo
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29. CASO CLÍNICO
• Mujer de 26 años, llega a la Emergencia con
hemoptisis y fatiga.
• Pérdida de peso 10 kg en 12 meses.
• Tos por más de 3 meses con esputo hemoptoico.
• Fiebre y sudoración nocturna.
• Niega disnea y dolor torácico.
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33. PRE TRATAMIENTO DE LA MUESTRA
• Estéril
– Centrifugar – sedimento
• No estéril
– Licuefacción (N-acetil-L-cisteína).
– Decontaminación (NaOH).
– Neutralización (buffer o H2O).
– Centrifugación.
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34. TINCIÓN ZIEHL NEELSEN
• Tinción utilizada para identificar
micobacterias
– Carbolfucsina ó fucsina fenicada
– Alcohol ácido
– Azul de metileno
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35.
36.
37. FUNDAMENTO DE LA TINCIÓN (1)
• La ácido-alcohol resistencia de
los bacilos
propiedad
micobacterias de captar en
(BAAR), es la
que tienen las
su
pared fucsina fenicada (de color
fucsia) o auramina (amarillo
fluorescente) y retenerla aun con
la acción de decolorantes, como
la mezcla de ácido y alcohol.
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40. TINCIÓN KINYOUN
• Coloración en frío
• Agente tensoactivo
• Fenol en alta concentración en la
carbolfucsina (Aumenta la
permeabilidad del colorante).
• Alcohol ácido.
• Azul de metileno.
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41. TINCIÓN AURAMINA RODAMINA
• Los ácidos micólicos de las
paredes celulares de las
micobacterias poseen afinidad
por los fluorocromos auramina y
rodamina (naranja rojo)
• Alcohol ácido.
• Permanganato de potasio (Evita
la fluorescencia inespecífica)
• Microscopio de fluorescencia.
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42. PRUEBA DE TUBERCULINA - PPD
• Derivado proteico purificado de
tuberculina
• Hipersensibilidad retardada (tipo IV).
• Intradérmica 0.01 ml(prueba cutánea
de
Mantoux).
• Lectura: 48-72 horas
– Induración y eritema
– > de 5 mm.
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43. SEROLOGÍA
• QUANTIFERON-TB Gold assay.
• Mide la respuesta inmune celular a Ag
M. tuberculosis en sangre.
– Péptidos secretados por
micobacterias.
• Early secreted antigenic target 6 (ESAT-6)
• Culture filtrate protein 10 (CFP-10):
Antogebo que contribuye a la virulencia.
• TB 7.7
– IFN γ.
• Detecta infección latente.
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45. CULTIVO
• Agar Lowenstein Jensen • Agar Middlebrook 7H11
• Caldo Middlebrook 7H9
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Aislamiento y cultivo de micobacterias.
El medio de agar profundo en tubo se
utiliza para la prueba semicuantitativa de
catalasa para facilitar la clasificación de
micobacteria
47. PRUEBAS BIOQUÍMICAS PARA LA IDENTIFICACIÓN
OTRAS PRUEBAS:
-Hidrólisis Tween 80
- Reducción de telurito de potasio
- Arilsulfatasa
Inhibición de crecimiento por TCH
((hidracida del ácido
tiofeno-2-carboxílico).
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49. DETECCIÓN DE MULTIDROGORRESISTENCIA
• METODO MODS
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- cultivo directo de
muestras de esputo en
medio líquido, que
detecta Mycobacterium
tuberculosis y evalúa
la susceptibilidad
frente a isoniacida y
rifampicina
directamente de dichas
muestra
El sistema respiratorio se divide arbitrariamente en vías altas o superiores, que comprenden las áreas anatómicas anteriores a la laringe (incluyendo la nasofaringe, orofaringe, laringe, epiglotis, oído externo y medio, y los senos paranasales), y vías bajas o inferiores que incluyen todas las estructuras posteriores a la laringe. En ocasiones es difícil separar la etiología y la clínica en muchos de estos procesos que finalmente acaban involucrando a ambas áreas, y comportándose en la práctica como un único cuadro microbiológico y clínico.
La microbiota orofaríngea normal está formada principalmente por cocos
grampositivos. La colonización de la orofaringe por bacilos gramnegativos se observa en menos del 10% de los individuos sanos, aumenta con hospitalizaciones prolongadas y alcanza el 60-75% en enfermos críticos
ingresados en unidades especiales.
Los virus influenza pertenecen a la familia Orthomyxoviridae. Se conocen 3 serotipos: Influenza A, Influenza B e Influenza C, siendo el primero el más importante como causa de enfermedad3. Son virus envueltos, con un genoma de ARN segmentado de polaridad negativa.
- PROMO MIX 1
- SALADO 4
Motivo de consulta ambulatoria, es u proceso inflamatorio de la mucosa y extructuras del área faringoamigdalina, caracterizada x dolor de garganta, fiebvre, exudado, ulceras.
Un cultivo de exudado faríngeo, o prueba estreptocócica, se hace frotando la garganta con un hisopo para detectar la presencia de bacterias de Streptococcus del grupo A, la causa más frecuente de la faringitis estreptocócica.
La antiestreptolisina O es un examen de sangre para medir los anticuerpos contra estreptolisina O (ASO, por sus siglas en inglés), una sustancia producida por la bacteria estreptococo del grupo A.
¿Qué es el EbhGA?
EbhGA: estreptococo beta hemolítico del grupo A; FAA: faringoamigdalitis aguda. Son sugestivos de origen estreptocócico el dolor de garganta de comienzo brusco, la fiebre, el malestar general y la cefalea; también lo son el dolor abdominal, las náuseas y los vómitos, especialmente en los niños más pequeños.
La clasificación de los estreptococos de Lancefield se basa en las reacciones serológicas de los carbohidratos de la pared celular de la bacteria, es decir, en la distinta naturaleza antigénica de los polisacáridos de la pared. Es un método muy útil para clasificar a muchos de los estreptococos patógenos, pero no tanto para el resto. Los antígenos de Lancefield son llamados con letras desde la A hasta la W, con la excepción de la I y la J. Estos antígenos de grupo se pueden demostrar mediante sencillos métodos como la precipitación, aglutinación o anticuerpos marcados
Muestra biológica:
Sangre : Hemocultivos seriados
(HiB), PCR.
Estudios serológicos: detección
Ag capsular de Hib (orina)
Toma de muestras faríngeas o
nasofaríngeas contraindicadas.
Presencia de liquido (mucoso, exudado o mixto) en la cavidad media del oído asociado a síntomas y signos agudos.
Se produce x la obstrucción de la tropa de eustaqui, facilitando entrada de M.O
DIPLOCOCO GRAM POSITIVO LACEOLADO ( DCGP L)
Estas enzimas producen cambios visibles en las placas de agar sangre:
– Hemólisis alfa: Zona de hemólisis incompleta de los eritrocitos con formación de un halo verdoso alrededor de la colonia.
– Hemólisis beta: Zona de hemólisis completa de los eritrocitos y reducción de la hemoglobina con formación de un halo transparente o claro alrededor de la colonia.
– Ausencia de hemólisis o hemólisis gamma: Ausencia de daño de los eritrocitos
El tracoma es una enfermedad ocular que resulta de la infección por Chlamydia trachomatis, una bacteria.
La conjuntivitis por virus herpes simple (VHS)
la inmunofluorescencia directa (IFD) para el diagnóstico de C. trachomatis en relación con el cultivo celular.
Debido al fenómeno fisiológico de la ventilación, el pulmón y las vías aéreas están continuamente expuestos a microorganismos ambientales que, en ocasiones, alteran o superan las barreras anatómicas naturales con las que cuenta el sistema respiratorio.
El estudio microbiológico del esputo es un tema controversial ya que muchos autores lo consideran de valor nulo o muy escaso, mientras que otros sostienen que puede que puede brindar información muy útil si se toman medidas adecuadas para su recolección.
– El correcto estudio del esputo puede ayudar al diagnóstico de infecciones tales como la neumonía, la bronquitis crónica y la tuberculosis pulmonar. Excepto Mycobacterium tuberculosis, prácticamente todos los patógenos pulmonares pueden aislarse del tracto respiratorio superior de individuos sanos, por lo que su presencia en escasa cantidad en el esputo no es, pues, evidencia de que estén causando una infección.
a coloración clásica de Ziehl-Neelsen se basa en el calentamiento inicial que permite aumentar tanto la energía cinética de las moléculas del colorante (fuscina de Ziehl Nielsen), como alcanzar rompimiento de las estructuras cristalinas de las ceras, favoreciendo así el ingreso del colorante a la pared bacteriana y al interior de la célula. Al suspender el calentamiento y enfriar con agua, se provoca una nueva solidificación de los ácidos grasos (ceras) de modo que el colorante queda atrapado dentro de dichas estructuras cristalinas y ya no puede salir de las bacterias 39,45.
Todas las bacterias se tiñen con el colorante fucsina en presencia de calor. Sin embargo, la mayoría de las bacterias se decoloran después del tratamiento con etanol/HCl, excepto las micobacterias y géneros relacionados que resisten al tratamiento decolorante y retienen al colorante. Esta ácido alcohol resistencia se debe al alto contenido de sustancias hidrofóbicas (ácidos micólicos) en la pared celular.
Es una tinción diferencial utilizada para la identificación de bacterias que cuentan con la propiedad fisicoquímica de ser ácidos alcoholes resistentes (BAAR); y por lo tanto, no son reactivas con la fuscina básica. Un ejemplo lo constituye el género Mycobacterium.
La pared de estas bacterias está constituida por péptidoglicano unido mediante enlaces covalentes a un polímero de ácidos micólicos que a su vez se asocian a unidades de azúcar como galactosa-arabinosa. A este tipo de macromoléculas se les ha asignado el nombre general de “arabinogalactano”, el cual debido al tamaño y al efecto estérico le confiere carácter hidrofóbico a la bacteria.
La tinción de Kinyoun es una variante de la tinción clásica de Ziehl-Neelsen que utiliza como colorante primario Fucsina básica con fenol a concentraciones altas, lo que permite la coloración en frío, mientras que la tinción clásica de Ziehl-Neelsen precisa la utilización de calor en la etapa de la coloración primaria
Rodamina-auramina
Los ácidos micólicos de las paredes celulares de las micobacterias poseen afinidad por los fluorocromos auramina y rodamina. Estos colorantes se fijan a las bacterias, que aparecen de color amarillo o naranja brillante contra un fondo verdoso. El permanganato de potasio (KMnO4), empleado como contraste, evita la fluorescencia inespecífica.
se hace inyectando 0.1 ml de un derivado proteico purificado de tuberculina (PPD, por sus siglas en inglés) en la cara anterior del antebrazo