SS

1. PRÁCTICA 10
DR. PERCY GENARO SALAS PONCE
DR. CARLOS ANTONIO CALDERÓN DE LA CRUZ

2. ROL DEL LABORATORIO EN EL
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO -
ETIOLÓGICO DE LOS SÍNDROMES
FEBRILES ÍCTERO
HEMORRÁGICOS
06/07/2020 2

3. 06/07/2020
• 1.-DENGUE
• 2.-LEPTOSPIRA
• 3.-FIEBRE AMARILLA
• 4.-HEPATITIS VIRAL
• 5.-MALARIA (FALCIPARUM)
• 6.-BARTONELLA
• Para la presente practica se enfatizara en las tres primeras
Enfermedades que pueden presentar
síndrome febril Íctero hemorrágico

4. 06/07/2020
LEPTOSPIROSIS
• Zoonosis
• Bacterias leptospiras
• Transmisión directa por
contacto de piel con orina,
sangre o tejidos animales
contaminados, o
• Transmisión indirecta por
contacto con agua o suelo
húmedo previamente
contaminados con orina de
animales (roedores)
reservorio.

5. 06/07/2020
LEPTOSPIROSIS

6. 06/07/2020
LEPTOSPIROSIS

7. 06/07/2020
FIEBRE AMARILLA
• Transmitida por mosquitos Aedes
aegypti, Haemagogus
• Falla hepática, renal, miocárdica y
hemorragias generalizadas con
una alta tasa de letalidad.
• Producida por el virus de la Fiebre
Amarilla (Arbovirus),
perteneciente a la familia
Flavivirus

8. 06/07/2020
Virus Fiebre Amarilla

9. 06/07/2020
Virus Dengue
• Familia de los Flavivirus (arbovirus).
• Transmitido por mosquitos
• Virus compuesto de RNA único y
trenzado
• Existe 4 serotipos (DEN-1, 2, 3, 4)
• 3 proteínas estructurales(Prot. C de la
capside, membrana M, envoltura E.
• 7 proteínas no estructurales
(Ns1,Ns2a;Ns2b,Ns3,Ns4a,Ns4b,Ns5).

10. 06/07/2020
Virus Dengue

11. 06/07/2020
Las formas graves de Dengue Hemorrágico, Fiebre amarilla o
Leptospira presentan :
• Disfunción renal
• Fenómenos hemorrágicos
• Alteraciones hemodinámicas, cardiacas, pulmonares y del estado de conciencia.
• Tasas de letalidad de 5 a 20%
• En esta forma los signos y síntomas son mas intensos y de > duración
• 70% hepatomegalia dolorosa a palpacion
• Deshidratación y IRA ( form. Oligurica – frec. Poliúrica)
• Alteraciones hemodinámicas ( deshidratación intensa e hipotensión) complican
el cuadro de IRA → necrosis tubular

12. 06/07/2020
Ficha Epidemiológica →
enfermedades de notificación
obligatoria (Salud Pública).
Tener en cuenta:
- tiempo de enfermedad y
- proceso evolutivo de la
enfermedad
para la decisión correcta del
examen.
Etapa Pre analítica

13. 06/07/2020
Para leptospira, Fiebre amarilla, Hepatitis
Viral y Dengue la muestra es sangre
(suero).
En casos de fallecimiento del paciente sin
Diagnostico se enviara tejido hepático y
renal para la confirmación.
En Leptospira también se puede realizar
exámenes directos con orina en los
primeros días .
En Malaria falciparum :Se solicitara
sangre con anticoagulante para prueba
rápida o sangre periférica para Gota
Gruesa.
Etapa Pre analítica

14. 06/07/2020
ETAPA ANALÍTICA
• Según el tiempo de enfermedad se
debe solicitar el examen:
• -PCR
• -Serológicos por ELISA para IgM e IgG
• En este Síndrome También se utilizara
otros exámenes que apoyen al Medico
tratante a compensar sus funciones
como: Hemoglobina, hematocrito,
bilirrubinas, electrolitos ,proteínas,
etc.

15. 06/07/2020
Metodos para Diagnostico Leptospirosis
• La MICROAGLUTINACION o MAT es la prueba de referencia, pero se
necesita personal entrenado, mantener el cepario y un chequeo del
antígeno .Utiliza las cepas patógenas de leptospiras
• Los estudios bacteriológicos identifican al microorganismo por
métodos directos, mediante la observación en microscopio de campo
oscuro utilizando orina del paciente infectado.
• Método Elisa para la detección de anticuerpos IgM e IgG. Es el
método mas usado.
• PCR
• Cultivo

16. 06/07/2020

17. 06/07/2020
Métodos de Laboratorio para el Diagnóstico Dengue
• Aislamiento del Virus para determinar el serotipo del virus infectante o PCR
solo en los primeros 5 días.
• En los primeros días también se puede realizar el Método ELISA en búsqueda
del NS1 que es un antígeno No estructural del Dengue.
• A partir del 6ºdia se realizara el Diagnóstico serológico por la prueba de
ELISA IgM y a partir del 10º día se tomara la segunda muestra de sangre para
realizara la Prueba de IgG confirmando el Diagnostico.
• Tambien existen pruebas rápidas para búsqueda de anticuerpos IgM e IgG y
otras que detectan antígeno.

18. 06/07/2020

19. 06/07/2020
PRUEBAS RAPIDAS IgM, IgG Y ANTIGENO.

20. 06/07/2020
Prueba ELISA para el diagnóstico serológico

21. 06/07/2020
ANTICUERPOS ANTI DENGUE IgM ELISA DE CAPTURA
SUBSTRATE
ENZIMA MARCADA
ANTICUERPO
MONOCLONAL ANTI
FLAVIVIRUS
ANTIGENO VIRAL
SUERO DEL
PACIENTE (MUESTRA)
ANTI-HUMANO IgM
(CABRA)
COLOR

22. 06/07/2020
Inmunofluorescencia

23. 06/07/2020
P
C
R

24. 06/07/2020
Métodos de Laboratorio para Fiebre Amarilla
• Diagnóstico indirecto – Serología:
– ELISA IgG e IgM
– Fijación del complemento
– Inhibición de la hemaglutinación
– Anticuerpos neutralizantes
• Diagnóstico directo:
– Aislamiento del Virus
– PCR

25. 06/07/2020

26. ROL DEL LABORATORIO EN EL
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO -
ETIOLÓGICO DE LAS
INFECCIONES DEL SISTEMA
NERVIOSO CENTRAL
06/07/2020 26

27. Causas de infecciones SNC
• Bacterias
• Virus
• Hongos
06/07/2020

28. EXAMEN DE LCR
• FASE ANALÍTICA
• Aislamiento e
identificación.
• Sensibilidad y
resistencia a los
antimicrobianos.
06/07/2020

29. EXAMEN DE LCR
• Volumen
• Aspecto
• Turbidez
• Presión de
salida
• Centrifugar
06/07/2020

30. 06/07/2020

31. EXAMEN DE LCR
• Coloraciones:
– Gram
– Wayson
– Naranja de acridina
– Tinta china
– Ziehl Neelsen
06/07/2020

32. EXAMEN FISICOQUÍMICO DEL LCR
06/07/2020

33. FASE ANALÍTICA
CULTIVO DE LCR
06/07/2020

34. 06/07/2020

35. 06/07/2020

36. 06/07/2020
BGN

37. 06/07/2020

38. ROL DEL LABORATORIO EN EL
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO -
ETIOLÓGICO DE LAS
INFECCIONES SISTÉMICAS
06/07/2020 38

39. 06/07/2020
Infecciones Sistémicas
– Cualquier infección localizada puede complicarse de
modo que los agentes causales ingresen al torrente
sanguíneo y e infecten a todos los Sistemas
– La extensión de la infección siempre es un signo de
mal pronóstico en la evolución de la enfermedad
infecciosa.

40. 06/07/2020
• Es la infección de la sangre causada por la multiplicación
incontrolable de bacterias, es muy grave y puede provocar la muerte,
si no se controla oportunamente
• Las bacterias y sus toxinas causan daño en el huésped
• Síntomas y signos:
-Fiebre o hipotermia
-Escalofríos
-Hiperventilación con alcalosis respiratoria
-Lesiones cutáneas
-Alteraciones del estado mental
SEPTICEMIA O SEPSIS

41. 06/07/2020
Solicitud
de
examen
Toma de
muestra
Transporte
de
muestra
Análisis de
laboratorio
Entrega de
resultado
Fase pre-analítica
ETAPAS DEL ESTUDIO MICROBIOLÓGICO

42. 06/07/2020
Estudio microbiológico
• Solicitud de examen:
– Datos del paciente: nombre, edad, servicio, diagnóstico
– Datos de la muestra: tipo muestra, método obtención.
– Presunción Diagnostica: Septicemia?
– Condiciones del Paciente: Sin tratamiento antibiótico o con Tto antibióticos , en
UCI, en Shock ,antecedentes patológicos(diabético?, Inmunosuprimido?)
– Nombre de quien solicita el examen

43. 06/07/2020
Estudio microbiológico
• Toma de muestra:
– Exclusivamente frente a la sospecha Clínica
– Es determinante para un diagnóstico adecuado
– Debe asegurar:
• Que fue tomada en el momento adecuado
• Volumen suficiente
• Técnica aséptica
• Medios de cultivo adecuado

44. 06/07/2020
Hemocultivos: ¿qué volumen de sangre?
 Variable crítica: la mayoría de las bacteriemias son de baja magnitud (<1 a
10 ufc por ml)
 2 a 6 % de aumento de la positividad por cada ml adicional.
A > VOLUMEN > POSITIVIDAD DE HEMOCULTIVOS
 Mantener relación 1:5-1:10 ( sangre: medio de cultivo)
⚫ Neutraliza propiedades bactericidas de la sangre
EDAD VOLUMEN
Adulto 10 ml
RN 1-2 ml
1mes a 2 años 2-3 ml
> 2 años 5 ml

45. 06/07/2020
FOCO DE INFECCION
y
SOSPECHA CLINICA
• Extravascular
Diferentes órganos sistémicos:
Pulmón, riñón, medula ósea, etc.
• Intravascular
Endocarditis (20-40% mortalidad)
HEMOCULTIVOS

46. 06/07/2020
ETAPA ANALITICA

47. 06/07/2020
Tinción de Gram
• Permite entregar informe preliminar en las bacteriemias
• Acelerar el inicio de terapia antibiótica
• Escoger o bien cambiar terapia empírica
• Define el tipo de medio de cultivo adecuado para aislamiento

48. 06/07/2020
Gérmenes que suelen aislarse:
▪ Bacterias (bacteriemia)
-Cocos Gram + aerobios y anaerobios
-Bacilos Gram – fermentadores y no fermentadores
-Bacilos Gram + esporulados y no esporulados
-Bacterias anaerobias Gram- y Gram +
-Diplococos Gram- y cocobacilos Gram-
▪ Hongos (fungemia)
-Candida

49. 06/07/2020
Gérmenes frecuentes productores de
bacteriemia y sus posibles focos
Staphylococcus aureus Hosp.: endovasculares.
extraH: otros focos
Staphylococus C negativos Catéteres,válvulas protésicas
Enterococcus Endocarditis, infecciones Qx
Streptococcus del grupo
viridans
Endocaditis, abcesos
profundos
Neumococo Meningitis, neumonia, otitis
media aguda
Bacilos gram negativos no
fermentadores
IntraH:catéteres, sondas,
extraH: drogadictos ev
Haemophilus influenzae tipo B Epiglotitis, meningitis,
celulitis periorbitaria, inf.
óseas

50. BRUCELOSIS
• Diagnóstico bacteriológico:
– Cultivo: sangre, médula ósea
• Diagnóstico serológico:
– Pruebas tamiz
– Pruebas complementarias
06/07/2020

51. BRUCELOSIS – Dx serológico
• Pruebas tamiz: detección de Igs y dif infección de reacción
cruzada
– Rosa de Bengala: IgG1
– Aglutinación en placa: IgG e IgM
• Pruebas complementarias: complemento y seguimiento
– Aglutinación en tubo: IgM e IgG2
– 2 mercapto etanol: IgG, degrada IgM
06/07/2020

52. FIEBRE TIFOIDEA
• Diagnóstico bacteriológico:
– Cultivo: sangre, médula ósea, heces
– PCR
• Diagnóstico serológico:
– Aglutinaciones febriles (Widal)
– Pruebas rápidas
06/07/2020

53. 06/07/2020
POST ANALÍTICA

54. 06/07/2020
Interpretación de Resultados
• Conocimiento situación clínica del paciente
• Factores predisponentes
• Determinar aislamiento de contaminantes
• Falsos positivos y falsos negativos en sistemas automatizados