PROCESO HISTOLOGICO

2.  OBTENCIÓN DE MUESTRAS
 FIJACIÓN
 DESHIDRATACIÓN Y ACLARAMIENTO
 INCLUSIÓN
 CORTE
 MONTAJE
TINCIÓN DE LOS CORTES
PASOS DE LA TÉCNICA HISTOLÓGICAPASOS DE LA TÉCNICA HISTOLÓGICA

3.  OBTENCIÓN DE MUESTRASOBTENCIÓN DE MUESTRAS
Todas las muestras de tejido, ya seaTodas las muestras de tejido, ya sea
obtenidas de materiales quirúrgicos,obtenidas de materiales quirúrgicos,
necropsias, biopsias deben ser procesadasnecropsias, biopsias deben ser procesadas
adecuadamente para obtener buenosadecuadamente para obtener buenos
cortes histológicos.cortes histológicos.

4. Se debe obtener toda laSe debe obtener toda la
información posible delinformación posible del
material a procesar.material a procesar.
 OBTENCIÓNOBTENCIÓN DE MUESTRASDE MUESTRAS

5. En caso de ser necesario se debe realizarEn caso de ser necesario se debe realizar
un examen y descripción preliminar de losun examen y descripción preliminar de los
materiales y su adecuación para unmateriales y su adecuación para un
correcto procesamiento.correcto procesamiento.
 OBTENCIÓNOBTENCIÓN DE MUESTRASDE MUESTRAS

6.  OBTENCIÓNOBTENCIÓN DE MUESTRASDE MUESTRAS

7.  FIJACIÓNFIJACIÓN
Tratamiento del tejido con sustancias
químicas que no solo retardan las alteraciones
hísticas posteriores a la muerte, sino que
conservan la configuración normal del tejido.

8. Fijador:Fijador:
Sustancia que detiene en forma rápida los
procesos de autólisis y que, al mismo tiempo,
conserva los tejidos, en lo posible, en el estado
en que se encontraban en la vida.
 FIJACIÓNFIJACIÓN

9.  Desecación:Desecación: Extendidos, líquidos de punciones.Extendidos, líquidos de punciones.
 Calor seco:Calor seco: Bacteriología.Bacteriología.
 Calor húmedo:Calor húmedo: Microquímica, Zoología.Microquímica, Zoología.
 Frío:Frío: No es una verdadera fijación. Detiene losNo es una verdadera fijación. Detiene los
procesos de autólisis y necrosis, pero cuando dejaprocesos de autólisis y necrosis, pero cuando deja
de actuar los mismos se reanudan.de actuar los mismos se reanudan.
TIPOS DE FIJADORESTIPOS DE FIJADORES
Físicos:
 FIJACIÓNFIJACIÓN

10.  Aldehídos (no precipitan proteínas y no contrae estructuras) .(no precipitan proteínas y no contrae estructuras) .
 MercurialesMercuriales (precipitan proteínas y tóxico por sus vapores).(precipitan proteínas y tóxico por sus vapores).
 AlcoholesAlcoholes (precipitan proteínas)(precipitan proteínas)..
 Agentes oxidantesAgentes oxidantes (precipitan proteínas(precipitan proteínas y tóxico por sus vapores).y tóxico por sus vapores).
 PicratosPicratos (precipitan proteínas).(precipitan proteínas).
Químicos:
TIPOS DE FIJADORESTIPOS DE FIJADORES
 FIJACIÓNFIJACIÓN

11.  AldehídosAldehídos (formaldehido/glutaraldehido): Son los más(formaldehido/glutaraldehido): Son los más
utilizados. Los tejidos son fijados por unionesutilizados. Los tejidos son fijados por uniones
cruzadas en las proteínas, al reaccionar con loscruzadas en las proteínas, al reaccionar con los
grupos amino.grupos amino.
La Formalina (formaldehido al 40%), se utilizaLa Formalina (formaldehido al 40%), se utiliza
normalmente al 10%, en una solución bufferada.normalmente al 10%, en una solución bufferada.
TIPOS DE FIJADORESTIPOS DE FIJADORES
Químicos:
 FIJACIÓNFIJACIÓN

12.  FIJACIÓNFIJACIÓN

13. Un defecto de fijación noUn defecto de fijación no
puede ser subsanado.puede ser subsanado.
Es inútil hacer un estudioEs inútil hacer un estudio
histológico de un materialhistológico de un material
mal fijado.mal fijado.
No debe olvidarse que:No debe olvidarse que:
 FIJACIÓNFIJACIÓN

14.  DESHIDRATACIÓNDESHIDRATACIÓN
Se obtiene por medio de un reactivo anhidroSe obtiene por medio de un reactivo anhidro
pero ávido de agua:pero ávido de agua:
Alcohol Etílico.Alcohol Etílico.
Alcohol Isopropílico.Alcohol Isopropílico.
Alcohol Butílico.Alcohol Butílico.
AcetonaAcetona

15.  ACLARADOACLARADO
Se debe embeber la pieza con una sustanciaSe debe embeber la pieza con una sustancia
miscible con el alcohol y la parafina:miscible con el alcohol y la parafina:
Xileno.Xileno.
Tolueno.Tolueno.
Benceno.Benceno.

16.  INCLUSIÓNINCLUSIÓN
LaLa parafinaparafina penetra en los vasos, en los espaciospenetra en los vasos, en los espacios
intercelulares y también en el interior de las célulasintercelulares y también en el interior de las células
embebiendo el tejido y haciendo más fácil la obtenciónembebiendo el tejido y haciendo más fácil la obtención
de cortes con el micrótomo.de cortes con el micrótomo.

17. Procesador AutomáticoProcesador Automático

18. Procesador AutomáticoProcesador Automático

19. Obtención del bloque de parafina de formaObtención del bloque de parafina de forma
regular, para ser cortado con el micrótomo.regular, para ser cortado con el micrótomo.
CONFECCIÓN DEL TACO

20.  CONFECCIÓN
DEL TACO

21.  CORTECORTE
Micrótomo Rotativo.Micrótomo Rotativo.
Micrótomo de Deslizamiento.Micrótomo de Deslizamiento.
Micrótomo de Congelación.Micrótomo de Congelación.
Crióstato.Crióstato.

22. Micrótomo Rotativo.Micrótomo Rotativo.

23. Micrótomo Rotativo.Micrótomo Rotativo.

24. Micrótomo Rotativo.Micrótomo Rotativo.

25. CrióstatoCrióstato

26. CrióstatoCrióstato

27. 
EXTENSIÓNEXTENSIÓN
 Utilizar portaobjetos limpios y
preparados con el adhesivo
adecuado.
 Se realiza en agua tibia (38oC).
 Precaución: el preparado debe
quedar bien extendido y sin
pliegues.
 Rotular.

28.  Luego de escurrir el exceso de
agua llevar a estufa (60 °C) no
más de dos horas.

EXTENSIÓNEXTENSIÓN

29.  TINCIÓN DE LOS CORTES
Los colorantes pueden agruparse en tres clases principales:
 Colorantes que diferencian los componentes
básicos y ácidos de la célula (hematoxilina y
eosina).
 Colorantes especializados que distinguen los
componentes fibrosos de la matriz extracelular.
 Sales metálicas que se precipitan en los tejidos y
forman depósitos de metales en ellos.

30. Colorantes empleados con mayor frecuencia en histología:

31.  TINCIÓN DE LOS CORTES
La reacción de los grupos aniónicos con un
colorante básico se denomina BASOFILIA
(que tiene afinidad por lo básico)
La reacción de los grupos catiónicos con un
colorante ácido se denomina EOSINOFILIA
(que tiene afinidad por lo ácido)

32. Coloración con
Hematoxilina
Coloración con
Eosina
Coloración
Hematoxilina-Eosina

33. Basófilo
(azul)
Acidófilo
(rosado)