Presentación cuarto de cultivo

1. Bio 225
Técnicas de cultivo de tejidos
Cuarto de cultivo

2. Equipos y materiales

3. Equipo Básico de un laboratorio de
Cultivo Celular
1. Campana de flujo laminar
2. Baño termostatizado
3. Incubador CO2
4. Autoclave
5. Nevera y Congelador
6. Microscopio Invertido
7. Microcentrifuga
8. Depósito de Nitrógeno líquido

4. Autoclave
Cualquier recipiente, herramienta... Debe ser
esterilizada

5. Autoclave
 El método más utilizado para esterilizar
materiales es el autoclave (aproximadamente
121ºC, 1.0 bar, 15min).

6. Cabina de flujo laminar

7.  Flujo laminar vertical, unidireccional
 Área segura para trabajar con partículas y
aerosoles submicrón
 Aire pasa por filtro HEPA (High Efficiency
ParticulateAir)
 Class II, Type A/B3
 Class100 Federal Standard No. 209 partículas
de 0.5 micron no exceda un conteo de 100
metros cúbico

8. Cabina vertical

9. Flujo de aire

10. Cabina y flujo de aire

11. BBF

12. Tipos de Cabinas
 Proteger al operario de agentes patógenos o
contaminantes del interior de la cabina
 Proteger el cultivo de patógenos o
contaminantes externos o internos de la cabina
 Proteger el medioambiente de patógenos o
contaminantes del interior de la cabina

13. Cabinas
Según importancia de la protección de estos tres
elementos se distinguen cabinas de clase I, II y III
 Clase I: Protege al operario y al medioambiente
(campanas de gases)
 Clase II: Protegen al operario, el cultivo y el
medioambiente
 Clase III: Cabina de seguridad estanca para
trabajo con agentes biológicos de alto riesgo

14. Incubadora CO2

15. Incubadora de CO2
Esto son equipos
 que mantienen la temperatura, además poseen
un sistema de inyección de CO2 generalmente
entre 4-7%, y finalmente controlan la humedad
ambiente.
 El nivel de CO2 se ajusta para mantener
equilibrio carbonato-bicarbonato del medio de
cultivo.

16. Incubador CO2
Atmósfera controlada con elevada humedad y tensión
de CO2

17. Incubadora CO2

18. Incubadora -roller

19. Roller - incubadora

20. Microscopio Invertido

21. Microscopio Invertido
 Fuente de luz y condensador están sobre la
platina . Apuntando hacia abajo
 Los objetivos están debajo de la platina hacia
arriba
 Permite observar organismos o tejidos sin
preparación previa
 Las observaciones se hacen a través de
diferentes recipientes con espesores y
características ópticas variables
 Los objetivos son adaptados para trabajar a
largas distancias pero con magnificación limitada

22. Microscopio invertido

23. Microscopio invertido de fase

24. Seguimiento del cultivo:
viabilidad, multiplicación,
contaminación.
Control sobre cambios
morfológicos (efectos de
hormonas, de tratamientos
con medicamentos, de
iones, interacciones, etc.

25. Tanque de nitrógeno líquido

26. Tanques de criogenia

27. Tanque de Nitrógeno líquido
Congelación de líneas estables

28. Contador de células

29. Contador de células

30. Micro Centrifuga
Suspensiones celulares (lavados, concentrados,
subcultivos)

31. Centrifuga

32. Metro de pH

33. Pipeteador automático

34. Filtro sellado

35. Filtro para jeringuillas

36. Botellas y Placas de Cultivo

37. Botella de cultivo

38. Laminilla de cultivo

39. Puntos Importantes
Esterilidad
Asepsia
Hábito de trabajo