SlideShare una empresa de Scribd logo
1 de 40
Descargar para leer sin conexión
Centro de Bachillerato Tecnológico 
Industrial y de Servicios N°24 
Profesora: Ma. De Jesús Treviño 
Gutiérrez 
Integrantes: 
 Becerra Walle Guadalupe 
 Bernal Jaramillo Jesús 
 Cantú Sánchez Karen 
 Castillo García Vanesa 
 Heim Pacheco Angélica 
 Puga García Rosa 
 Rodríguez Hernández Briana 
 Torres Eskildsen Dina 
Grupo: 5°C Téc. Lab. Clínico Turno Matutino
El presente trabajo tiene por objetivo guiar a los estudiantes y/o maestros que 
están estudiando laboratorio clínico, con el fin de difundir los conocimientos 
previos aprendidos en todo el semestre. Este trabajo esta realizado, basado en 
una guía que se nos fue dada y, cuando realizamos las prácticas aquí descritas, 
se tomaron fotos con el fin de ilustrar a los lectores sobre como fue hecha dicha 
práctica, así como los valores normales de la prueba descrita y los valores que a 
nosotros nos resultó. 
En cada una de las prácticas, están descritas con el objetivo, el material, los 
procedimientos y los resultados de ésta prueba. 
Todo lo descrito aquí es verídico y no fueron inventados los resultados del 
examen, ya que nosotros mismos lo realizamos. 
Los invitamos a leer este manual y a adentrarse un poco más en el maravilloso 
mundo de los “Laboratorios Clínicos” 
¡¡BIENVENIDOS!!
 Introducción 
 Práctica 1: preparación de anticoagulantes 
 Práctica 2: obtención de muestras 
 Práctica 3: diferencial leucocitario 
 Práctica 4: tinción citoquímica de peroxidasa en M. Ósea 
 Práctica 5: recuento de plaquetas; método directo 
 Práctica 6: recuento de plaquetas; método indirecto 
 Práctica 7: tiempo de sangrado; método de Duke 
 Práctica 8: tiempo de coagulación; método de Lee y White 
 Práctica 9: tiempo de coagulación; método tubo apilar 
 Práctica 10: determinación del tiempo de coagulación en el 
plasma recalcificado 
 Práctica 11: retracción de coagulo 
 Práctica 12: prueba de lazo o torniquete 
 Práctica 13: tiempo de protrombina; método de Quick 
 Práctica 14: tiempo de tromboplastina parcial
FUNDAMENTO: 
Un anticoagulante es una sustancia endógena o exógena que interfiere o 
inhibe la coagulación de la sangre, creando un estado prehemorrágico, se 
pueden dividir en: 
 Anticoagulantes de acción directa: Son aquellos que por sí solos son 
capaces de inhibir la cascada de coagulación. 
 Anticoagulantes de acción indirecta: Son aquellos que mediante su 
interacción con otras proteínas o actuando en otras vías 
metabólicas, alteran el funcionamiento de la cascada de 
coagulación. 
Otra forma de dividirlos son los anticoagulantes Naturales (Heparina) 
y Sintéticos (Citrato de sodio, etc.) 
Los anticoagulantes de mayor uso dentro de los laboratorios de análisis 
clínicos son tres y estos pueden ser líquidos o liofilizados. 
OBJETIVO: 
Que el alumno sea capaz de diferenciar lo diferentes tipos de 
anticoagulantes, así como su uso en el laboratorio clínico y su clasificación.
ANTICOAGULANTES 
Se consideran como anticoagulantes: 
o Mezcla de oxalatos. 
o Citrato de sodio. 
o Oxalato de sodio. 
o EDTA. 
o Heparina. 
o ACD. 
o CPD. 
 Mezcla de Oxalatos. También llamada anticoagulante de Wintrobe. 
Contiene oxalato de amonio, oxalato de potasio, formol y agua. Para 
5ml de sangre se utilizan 0.5ml de la mezcla de anticoagulante 
(desecado en estufa a 37ºC o a temperatura ambiente antes de 
utilizarlo); esta solución anticoagulante actúa como tal para fijación 
de calcio y debe usarse siempre desecado para no diluir la sangre. 
 Mezcla de oxalatos de sodio y potasio. Es otro anticoagulante 
conocido como "Mezcla de Paul – Heller". 
 Citrato de sodio al 3.8% y oxalato de sodio al 1.4%. 
Se usa en relación de una parte de anticoagulante por cada nueve 
partes de sangre, habitualmente se usan 0.25ml de la solución para 
completar a 2.5ml de volumen total con la muestra de sangre. Actúan 
en la misma forma que la solución anticoagulante de Wintrobe, es 
decir, por fijación de calcio. Son los anticoagulantes de elección para 
tiempo de protrombina (TP) y tiempo de tromboplastina parcial (TTP).
 EDTA (ácido etilen-diamino-tetra-acético). Las 
sales de sodio y potasio en este ácido se comportan como 
poderosos anticoagulantes y son anticoagulantes de elección para el 
trabajo de rutina y Hematología (se utiliza al 10%). 
o No afecta la morfología de las células hemáticas. 
o No modifica la velocidad de sedimentación globular. 
o Sus sinónimos son versenato y secuestreno. 
Se le llama secuestreno ya que secuestra al calcio y lo separa de la 
cascada de la coagulación, impidiendo que la sangre coagule. Se 
utilizan 0.05ml por cada 3ml de muestra de sangre. Dada la pequeña 
cantidad de solución, no es necesario desecarla, ya que prácticamente 
no diluye la sangre a analizar; en exceso afecta adversamente tanto a 
los eritrocitos como a los leucocitos, causando su encogimiento y 
provocando cambios en su forma; por ello debe cuidarse de agregar la 
cantidad correcta de sangre al anticoagulante. Se prefiere la sal 
tripotásica a la disódica, ya que es más soluble (10 veces más) y ello 
hace efectiva la mezcla del anticoagulante con la sangre. 
 Heparina (heparina sódica de 1,000 unidades). La fina capa de 
solución de heparina de 1,000 unidades: 
o Se utiliza para las gasomerías. 
o La heparina es un excelente anticoagulante. 
o No altera el tamaño de los eritrocitos. 
o Actúa inhibiendo la actividad de la trombina sobre el 
fibrinógeno y es este mecanismo, el que la hace diferente a 
los demás anticoagulantes mencionados.
 ACD y CPD. Son los principales anticoagulantes utilizados en los 
bancos de sangre (en las bolsas para la recolección de ésta). 
El ACD contiene ácido cítrico, citratos y dextrosa. En este anticoagulante 
la sangre se mantiene hasta 21 días. 
El CPD contiene citratos, fosfatos y dextrosa. El radical es un 
amortiguados que favorece el pH de la sangre normal (7.4) permanezca 
así durante más tiempo, por lo que este anticoagulante hace que las 
bolsas duran 21 días + 7, siempre y cuando el plasma no presente una 
coloración rojiza (hemólisis) ni tome un color verdusco debido a la 
panaglutinibilidad o contaminación bacteriana.
FUNDAMENTO: 
Los distintos análisis de laboratorio nos dan información muy valiosa 
acerca del estado de los pacientes gravemente enfermos, ayudándonos en 
el diagnóstico y a la hora de administrar tratamientos. 
En la sangre venosa se pueden hacer diversos y diferentes estudios 
analíticos, ya sean desde el punto de vista bioquímico, hematológico y/o 
microbiológico. 
El sitio de punción en el paciente varía dependiendo de la edad y 
tamaño, así como de la accesibilidad de la vena. En niños mayores puede 
utilizarse cualquier vena accesible, de forma similar al paciente adulto, 
mientras que en recién nacidos y lactantes las venas superficiales del cuero 
cabelludo y de las extremidades distales pueden servir para la extracción 
de sangre. En el laboratorio clínico contamos con diferentes técnicas para 
obtener muestras sanguíneas: 
 Punciones Venosas 
 Punciones Capilares 
OBJETIVOS: 
 1. Justificar la indicación de los métodos de obtención de muestras. 
 2. obtener correctamente muestras capilares y venosas de calidad 
analítica.
PUNCIÓN CAPILAR 
Material: 
 Algodón. 
 Lancetas desechables y estériles 
 Tubos capilares 
Procedimiento: 
1. Una vez seleccionada la zona, se desinfecta la zona con alcohol al 
70%, secar con algodón estéril. 
2. Punzar la piel con una lanceta estéril desechable (2 mm de 
profundidad). 
3. La primera gota de sangre se deja perder, limpiándola con la gasa sin 
tocar la zona pinchada
4- Se espera a que caigan más gotas, sin exprimir el área pinchada 
porque eso diluiría la sangre con líquido extracelular. Se recogen las 
gotas de sangre necesarias sobre alguno de estos objetos: 
 La tira reactiva. 
 Tubo capilar, mientras se tapa su otro extremo con el dedo. Después 
de la recogida se pincha el tubo capilar en plastilina para que un 
pequeño fragmento de ésta obstruya su extremo o se sella con calor. 
PUNCIÓN VENOSA 
MATERIAL 
 Algodón 
 Ligadura o torniquete de 25-30 cm 
 Tubos con anticoagulante EDTA 
 Equipo Vacutainer 
PROCEDIMIENTO 
1- Verificar que los elementos por usar estén listos y que el paciente se 
sienta cómodo 
2. Aplicar el torniquete aproximadamente cuatro dedos por encima de la 
flexión del codo o a 10 cm del codo y sujetar con un medio nudo.
3- Limpiar la zona con una torunda de algodón embebida en alcohol 
en un área de 2 pulgadas 
4- . Se destapa la aguja por el lado de la guarda que no tiene color y 
se enrosca en la base. 
5- Una vez armada la base, se accede a la vena con la aguja, en forma 
horizontal, y se introduce con el bisel hacia arriba formando un 
ángulo de 15° 
6- . Cuando la sangre fluya por la aguja, se debe de realizar la 
aspiración, colocando el tubo dentro de la base y haciéndolo que se 
perfore el tapón con la otra parte de la aguja, para que el vacío que 
contiene el tubo aspire la sangre necesaria.
7- Al llenarse el tubo, se retira de la base, procurando no mover la 
aguja de su posición. 
8- Colocar la torunda sobre el lugar de punción, retirar el torniquete 
y extraer la aguja. 
9- Agitar el tubo de 4 veces, suavemente, para homogeneizar la 
muestra con el anticoagulante.
FUNDAMENTO: 
Las características de las distintas células sanguíneas pueden ponerse en 
evidencia mediante la coloración diferencial de una delgada capa o 
extendido de sangre, lo que permitirá estudiar los elementos sanguíneos 
tanto cualitativamente como cuantitativamente. 
OBJETIVO: 
Determinar e identificar el número total de leucocitos contenidos en un 
frotis teñido, para la determinación de posibles leucemias o para el 
complemento de una biometría hemática
PROCEDIMIENTO: 
1. Extracción de sangre con anticoagulante (EDTA) 
2. Hacer un extendido o frotis sanguíneo y dejar secar. 
3. Teñir con colorante: 
Wright por 5 minutos Giemsa por 8 minutos
4- Lavar con agua destilada y dejar secar 
5- Observaciones y resultados a 100x
FUNDAMENTO: 
Algunas tinciones citoquímicas definen más específicamente las 
características de las diferentes líneas celulares que los colorantes de 
Romanovsky. Estas tinciones son especialmente útiles en el diagnóstico de 
malignidades hematológicas. 
Los gránulos primarios de las series de neutrófilos y eosinófilos contienen 
la enzima mieloperoxidasa. Los monolitos son débilmente positivos, los 
linfocitos y eritroblastos son negativos. La reacción consiste en la oxidación 
de la bencidina por la peroxidasa en presencia de peróxido de hidrógeno 
(H2O2), el cual es reducido a agua (H2O). Usando 3,3, diaminobencidina, 
los gránulos se tiñen de un color café-marrón 
OBJETIVO: 
La mieloperoxidasa es una de las tinciones esenciales para el diagnostico 
correcto de las leucemias agudas, por ejemplo, nos permite distinguir una 
leucemia linfoblástica de una leucemia mieloblástica
1- Hacer frotis de medula ósea sin teñirlo. 
2- Cubrirlo con solución de formalina por 30 segundos y lavarlo con 
agua destilada 
3- Agregar una mezcla de: 
 10 ml de buffer de fosfato de pH 7.4 
 7.5 mg de 3.3 diaminobencidina 
 0.1 ml de peróxido de hidrogeno al 3 % 
 Incubar por 15 minutos y lavar
4- Contra teñir con hematoxilina de Mayer, lavar y dejar secar 
5- Observaciones y resultados. 100x
Objetivo: 
El alumno debe realizar por método directo, la técnica para determinar el número de 
plaquetas por mm3 de sangre. 
Fundamento: 
En una pipeta de toma para eritrocito, se mezcla sangre capilar o venosa con 
anticoagulante, con un líquido diluyente (oxalato de amonio al 1%) que destruye a los 
glóbulos rojos facilitando el recuento de las plaquetas de un hemocitómetro. 
TEORIA: 
Las plaquetas o trombocitos son fragmentos de células que se originan en la médula 
ósea y provienen de los megacariocitos, son de forma irregular miden de 2 a 4 micras 
(m) de diámetro y desempeñan 3 funciones principales en la HEMOSTASIA. 
-1. Auto agregación y formación de un tapón hemostático. 
-2. La actividad tromboplastinica. 
-3. La retracción del coagulo.
Material y equipo: 
-microscopio 
-agitador mecánico para pipetas de thoma 
-hemocitómetro, papel filtro 
-pipeta de toma para eritrocitos 
-boquilla y tubo de goma 
-cámara húmeda 
PROCEDIMIENTO 
1. Se extrae muestra biológica Con tubo EDTA 
2. El mezclado de la sangre con anticoagulante debe realizarse 
suavemente y durante unos 5 minutos 
3. Con la pipeta de Thoma, aspirar sangre hasta la marca 1.0 y se diluye 
hasta la marca de 101 con el oxalato de amonio
4- Colocar las pipetas en el agitador de 10-15 minutos 
5- Llenar la cámara de Neubauer con el contenido de las pipetas 
debidamente mezclado, desechando las primeras 4-6 gotas 
6- Empleando el microscopio, contar las plaquetas en la cuadrícula 
central destinada a la cuenta de glóbulos rojos (25 cuadros 
centrales) 
VALORES NORMALES: 
DE 150 000 A 450 000 PLAQ/MM3
OBJETIVO: 
Obtención por el método indirecto, el número de plaquetas por mm3 de 
sangre 
FUNDAMENTO: Se tiñe con Wright un frotis de sangre reciente y se 
observa en el microscopio diferenciando las plaquetas por su morfología. 
MATERIAL Y EQUIPO: 
-microscopio 
-portaobjetos 
Material biológico: sangre venosa o capilar con anticoagulante. 
Reactivos: 
-Colorante de Wright ó Giemsa 
-Aceite de inmersión
PROCEDIMIENTO 
1- Preparar un frotis sanguíneo inmediatamente después de haber 
obtenido la muestra biológica y dejar secar a temperatura ambiente. 
2- Teñir con colorante Wright 
3- Contar el número de plaquetas por 1000 eritrocitos 
4- Determinar el número de glóbulos rojos (recuento de eritrocitos) 
 CALCULOS: NUMERO DE 
PLAQUETAS/1000 ERITROCITOS=X 
 CALCULO Xx: N° DE ERITROCITOS 
7MM3=PLAQUETAS /MM3 1000 
 VALORES NORMALES: 
DE 200 000 A 400 000/MM3
FUNDAMENTO: 
La lesión de una pared vascular debido a la liberación de la serotonina por 
las plaquetas con la liberación de tromboplastina por los tejidos. 
Desencadenado el proceso de coagulación. 
OBJETIVO: 
Obtención del tiempo que dura la hemorragia procedente de una punción 
cutánea habitual. 
MATERIAL: 
 Lanceta desechable estéril 
 Tiras de papel filtro 
 Cronometro de mano 
 Torundas con alcohol
PROCEDIMIENTO: 
1. Se limpia perfectamente, con una torunda de algodón con alcohol, el 
lóbulo de la oreja esperando que se evapore el exceso de alcohol (se 
puede hacer también la punción del dedo anular izquierdo. 
2. Puncione con a lanceta estéril el sitio elegido, inmediatamente 
ponga en marcha el cronometro. 
3. Seque la sangre sin tocar la piel con el papel filtro cada 15 segundos. 
Hasta que cese la hemorragia, se detiene el cronometro anotado el 
tiempo transcurrido 
NOTA: Una forma práctica de contar 
con exactitud el tiempo de sangrado 
es contando las marcas de sangre 
sobre el papel filtro que se tomo cada 
15 segundos. 
VALORES NORMALES: De 1 a 6 minutos 
OBSERVACIONES: Se obtuvo buena punción cutánea. 
RESULTADO: Dos minutos duro el sangrado
OBJETIVO: La obtención del tiempo requerido para la formación de un 
coagulo solido 
FUNDAMENTO: La sangre total formara un coagulo firme cuando se extrae 
del sistema vascular y se pone a una superficie extraña 
TEORIA: La coagulación sanguínea es aquella fase de la hemostasia en la 
que se forma el tapón de fibrina.los materiales son demasiados sencillos 
de realizar pero requieren una atención extrema en cuanto su técnica si se 
requiere conseguir resultados verdaderos. 
MATERIAL: 
 3 tubos de ensaye 
 Una pipeta 
 Baño maría 
 Equipo de extracción 
PROCEDIMIENTO: 
1. Se obtiene sangre venosa y en el momento que aparece la sangre 
ponga en marcha el cronometro.
2- Pasar 1 ml de sangre a los tubos de ensaye (mínimo 3 tubos). 
Posteriormente, introducir los tubos en baño de agua 37°c 
3- Se vierten los tubos a intervalos de medio minuto hasta que cada 
uno puede invertirse formando un Angulo de 90° sin que se vierta el 
contenido. 
4- Registre el tiempo transcurrido en cada uno de los tubos por 
separado y calcule la media aritmética, sumando los tiempos de los 
3 tubos y dividiendo el resultado entre 3. 
VALORES NORMALES: De 5 a 8 minutos 
RESULTADO: la media aritmética nos dio 6:30 minutos
OBJETIVO: 
la obtención del tiempo requerido para la formación de un coagulo sólido. 
FUNDAMENTO: 
en sangre capilar se observa la formación de coagulación tomando 
correctamente el tiempo desde que se hace la punción hasta la formación 
del mismo. 
MATERIAL: 
a) tubos capilares. 
b) algodón. 
c) alcohol. 
d) lancetas o agujas estériles. 
PROCEDIMIENTO: 
1. se limpia el lóbulo de la oreja o la yema del dedo con una torunda 
de algodón con alcohol. 
2. con una lanceta desechable, se hace la punción y se desechan las 
dos primeras gotas.
3- inmediatamente después se llenan dos tubos capilares sin 
anticoagulante y se pone en marcha el cronometro. 
4- se coloca en una superficie plana a 37ºC después de 3 minutos se 
fracturan los tubos separando uno de otro, observándose el coagulo 
se detiene el reloj, anotando en tiempo transcurrido. 
 VALORES NORMALES: 
de 4 a 8 minutos 
 RESULTADO: 
6 minutos con 23 segundos
OBJETIVO: 
obtención del tiempo de coagulación del plasma recalcificado. 
FUNDAMENTO: 
al plasma oxalato o citrato se le agrega CaCl2 para obtener el tiempo que 
tarda la formación del coagulo. 
MATERIAL Y EQUIPO: 
1- baño maría. 
2- tubo de ensaye. 
3- cronometro. 
MATERIAL BIOLOGICO: 
1- sangre con anticoagulante 
2- citrato de sodio 3.8%. 
3- CaCl 0.02M 
PROCEDIMIENTO 
1- Colocar 0.1ml. De plasma en un tubo de ensaye de 10x7.5mm. 
Manteniendo el baño maría a 37ºC dejándolo reposar 1 minuto.
2- agregar 0.2 M de CaCl2, inmediatamente que se coloca el CaCl2 se 
pone en marcha el cronometro. 
3- Agitar suavemente la mezcla y dejarla reposar a 37ºC durante 70seg. 
A partir de este tiempo inclinamos el tubo ligeramente cada 5 seg. 
hasta que se observa la formación del coagulo se detiene el 
cronometro anotando el tiempo. 
VALORES NORMALES: 
de 80 a 160 segundos. 
RESULTADO: 
145 segundos
OBJETIVO: 
Obtención de la cantidad de fibrina formada y su retracción además se 
mide el número y la función de las plaquetas. 
FUNDAMENTO: 
La retracción del coagulo es directamente proporcional al número de 
plaquetas e inversamente al hematocrito. 
MATERIAL Y EQUIPO: 
 Equipo para extracción de sangre venosa 
 Gradillas para tubos 
 Tubos de ensaye con silicón o vacutainer 
PROCEDIMIENTO 
1- Se extraen 5 ml de sangre en un tubo vacutainer y se coloca en la 
gradilla durante 1 hr para observar el coagulo.
2- Después se despega y se retira el coagulo (en ocasiones es 
conveniente dejar un aplicador dentro del tubo y una vez formado el 
coagulo este se saca). 
3- Se lee el volumen del líquido que quedo en el tubo (también existen 
algunos glóbulos pero no es necesario hacer corrección). Este 
volumen se anota como porcentaje del volumen inicial de sangre 
completa en el tubo. 
VALORES NORMALES: 48-64% 
OBSERVACIONES: 
Se retrae de las paredes de su recipiente con lo que se separa el suero 
transparente y el coagulo.
OBJETIVO: 
Medir la resistencia de las paredes capilares al aumento de presión y a la 
anoxia. 
FUNDAMENTO: 
Ésta prueba tiene como objeto estudiar el estado de las paredes de los 
vasos capilares y al mismo tiempo las funciones plaquetarias de 
adhesividad y agregación, aumentando la presión interna capilar por 
obstrucción del flujo venoso. El número de petequias, producido en un 
área seleccionada informa de la normalidad y anormalidad de la prueba. La 
prueba se hace directa al paciente. 
MATERIAL Y EQUIPO: 
 Equipo completo para medir presión arterial. 
 Paciente. 
PROCEDIMIENTO 
1- Inspeccione la piel de la mitad superior del antebrazo del paciente 
en busca de petequias, si las hay márquelas con un punto de tinta, si 
se encuentra petequias solamente en un antebrazo, escoja el que no 
tenga que hacer las pruebas.
2- Tome la presión arterial. 
3- Infle el brazo del baumanometro hasta que alcance la presión igual a 
la mitad de la suma de las presiones. 
4- Transcurridos los 3 o 5 minutos, desinfle el brazal, quítelo y espere a 
que el brazo se descongestione. Cuente el número de petequias que 
haya apreciado en el área marcada. 
VALORES NORMALES: 
De 0 a 10 petequias. 
NOTA: 
No debe haber más de 5 petequias en un área circular de 2.5 cm con un 
una presión de 5 minutos, no más de 10 petequias. 
OBSERVACIONES: 
Petequias (manchas redondas y rojas sin relieve).
OBJETIVO: 
Obtención del tiempo en segundos que tarda la protrombina en 
transformarse en trombina. 
FUNDAMENTO: 
En presencia de un exceso de tromboplastina y una cantidad óptima de 
calcio el plasma coagula rápidamente (entre 11 y 12 segundos). 
PROCEDIMIENTO 
1- Se colocan 4.5 ml de sangre que se obtiene por punción venosa con 
jeringa estéril desechable en un tubo de 13 × 1OO mm que contenga 
O.5 ml de anticoagulante para protrombina mezclar suavemente. 
2- Colocar en Baño María un tubo de solución de CaCI2 al O.O2 molar 
(1 o 2 ml según el numero determinaciones) tener dispuesta una 
pipeta graduada en decimos para servir el CaCI2.
3- Centrifugar el tubo con sangre y anticoagulante a 1500 r.p.m. 
durante5 min. Separar el plasma en el otro tubo limpio y colocar un 
recipiente que tenga hielo. 
4- En un tubo de 1O × 75 mm colocar O.1 ml de suspensión de 
tromboplastina agregar O.1 ml de plasma, agitar y colocar en Baño 
María a 37° durante un minuto. 
5- Agregar O.1 ml de solución CaCI2 al soplar estas ponen en marcha el 
cronometro, agitar dentro del agua suavemente la mezcla de los tres 
constituyentes dejar reposar hasta el segundo 1O a partir de el se 
examina el tubo hasta el momento en que se detiene el cronometro 
6- La prueba se repite dos veces con plasma problema los resultados no 
pueden variar más de 1 segundo 
 VALORES NORMALES: 
De 11 a 14 segundos.
OBJETIVO: 
Obtención del tiempo parcial para diferenciarla de la tromboplastina 
completa. 
FUNDAMENTO: 
El extracto de cefalina no coagula el plasma hemofílico tan rápido como el 
normal. Esta prueba es sensible a la deficiencia de todos los factores 
plasmáticos de la coagulación excepto el factor VIII y el factor plaquetario. 
MATERIAL Y EQUIPO: 
 Equipo para determinación de la tromboplastina parcial. 
 Tubos de ensayo 13 × 1OO mm 
 Baño María a 37°C 
 Sangre citratada para tiempo de protrombina, según la técnica 
descrita. 
PROCEDIMIENTO 
1- Precalentar un baño de agua a 37° durante 3 minutos, los tubos de 
13 × 1OO mm y el volumen suficiente de plasma para el numero de 
pruebas que se van a efectuar, O.1 ml por prueba.
2- Ponga O.1 ml de la tromboplastina reconstituida en uno de los 
tubos e incubados a 37° C durante 3 minutos, midiendo 
exactamente el tiempo con un cronometro. 
3- Añada a O.1 ml de la solución de a solución CaCI2 O.O2 M 
precalentado, expulsando rápidamente con una pipeta o jeringa, 
simultáneamente empiece a medir el tiempo con el cronometro 
mezclando con el contenido del tubo mediante un giro rápido. 
4- Retire el tubo del baño de agua a los 3º segundos 
aproximadamente inclinando con suavidad de un lado con una 
velocidad no mayor de una vez por segundo. 
5- Vigile la aparición de un gel detenga e cronometro en el momento 
visual de su formación. 
VALORES NORMALES: 
 De 30-60 segundos
Gracias por haber leído este 
pequeño manual 
Este trabajo fue hecho con mucha 
dedicación por parte de mis 
compañeros de equipo y por mí, 
esperamos y haiga sido de su 
agrado, pero sobre todo, que les 
haya servido para resolver sus 
dudas. 
¡¡Hasta Pronto!!

Más contenido relacionado

La actualidad más candente

Pruebas pre transfusionales
Pruebas pre transfusionalesPruebas pre transfusionales
Pruebas pre transfusionales
xlucyx Apellidos
 
Conservacion De Hemocomponentes
Conservacion De HemocomponentesConservacion De Hemocomponentes
Conservacion De Hemocomponentes
lucasmerel
 
Frotis o extensión de sangre
Frotis o extensión de sangreFrotis o extensión de sangre
Frotis o extensión de sangre
pajitacoxito
 
VELOCIDAD DE SEDIMENTACION GLOBULAR (VSG)
VELOCIDAD DE SEDIMENTACION GLOBULAR (VSG)VELOCIDAD DE SEDIMENTACION GLOBULAR (VSG)
VELOCIDAD DE SEDIMENTACION GLOBULAR (VSG)
Gio Saenz Mayanchi
 
Frotis o extensión de sangre
Frotis o extensión de sangreFrotis o extensión de sangre
Frotis o extensión de sangre
pajitacoxito
 
G. componentes de la sangre
G. componentes de la sangreG. componentes de la sangre
G. componentes de la sangre
monicasoliz
 
Determinación de glucosa
Determinación de glucosaDeterminación de glucosa
Determinación de glucosa
Aida Aguilar
 

La actualidad más candente (20)

Pruebas pre transfusionales
Pruebas pre transfusionalesPruebas pre transfusionales
Pruebas pre transfusionales
 
2 Pruebas de coagulacion
2 Pruebas de coagulacion2 Pruebas de coagulacion
2 Pruebas de coagulacion
 
Reticulocitos
ReticulocitosReticulocitos
Reticulocitos
 
Recuento diferencial de leucocitos
Recuento diferencial de leucocitosRecuento diferencial de leucocitos
Recuento diferencial de leucocitos
 
6 Investigacion de anticuerpos irregulares
6 Investigacion de anticuerpos irregulares6 Investigacion de anticuerpos irregulares
6 Investigacion de anticuerpos irregulares
 
Extendido sanguineo
Extendido sanguineoExtendido sanguineo
Extendido sanguineo
 
Conservacion De Hemocomponentes
Conservacion De HemocomponentesConservacion De Hemocomponentes
Conservacion De Hemocomponentes
 
Hemocomponentes
HemocomponentesHemocomponentes
Hemocomponentes
 
Frotis o extensión de sangre
Frotis o extensión de sangreFrotis o extensión de sangre
Frotis o extensión de sangre
 
VELOCIDAD DE SEDIMENTACION GLOBULAR (VSG)
VELOCIDAD DE SEDIMENTACION GLOBULAR (VSG)VELOCIDAD DE SEDIMENTACION GLOBULAR (VSG)
VELOCIDAD DE SEDIMENTACION GLOBULAR (VSG)
 
1.5. Hemograma Automatizado
1.5.  Hemograma Automatizado1.5.  Hemograma Automatizado
1.5. Hemograma Automatizado
 
Frotis o extensión de sangre
Frotis o extensión de sangreFrotis o extensión de sangre
Frotis o extensión de sangre
 
Recuento diferencial de leucocitos.
Recuento diferencial de leucocitos.Recuento diferencial de leucocitos.
Recuento diferencial de leucocitos.
 
G. componentes de la sangre
G. componentes de la sangreG. componentes de la sangre
G. componentes de la sangre
 
Tubos de laboratorio y Anticoagulantes.pdf
Tubos de laboratorio y Anticoagulantes.pdfTubos de laboratorio y Anticoagulantes.pdf
Tubos de laboratorio y Anticoagulantes.pdf
 
Tipos de anticoagulante
Tipos de anticoagulanteTipos de anticoagulante
Tipos de anticoagulante
 
Protocolos de realización de las tinciones hematológicas.
Protocolos de realización de las tinciones hematológicas.Protocolos de realización de las tinciones hematológicas.
Protocolos de realización de las tinciones hematológicas.
 
Sedimento urinario
Sedimento urinarioSedimento urinario
Sedimento urinario
 
Determinacion de hemoglobina
Determinacion de hemoglobinaDeterminacion de hemoglobina
Determinacion de hemoglobina
 
Determinación de glucosa
Determinación de glucosaDeterminación de glucosa
Determinación de glucosa
 

Similar a Manual de Prácticas de Laboratorio

TIPOS DE MUESTRAS DE LABORATORIO.pptx
TIPOS DE MUESTRAS DE LABORATORIO.pptxTIPOS DE MUESTRAS DE LABORATORIO.pptx
TIPOS DE MUESTRAS DE LABORATORIO.pptx
EhimyJimenez
 
432192401.tp 1 y 2
432192401.tp 1 y 2432192401.tp 1 y 2
432192401.tp 1 y 2
Ariel Aranda
 
recuentodereticulocitosyeritrosedimentacion-230118010741-86641827.pptx
recuentodereticulocitosyeritrosedimentacion-230118010741-86641827.pptxrecuentodereticulocitosyeritrosedimentacion-230118010741-86641827.pptx
recuentodereticulocitosyeritrosedimentacion-230118010741-86641827.pptx
DeysiBenavides3
 

Similar a Manual de Prácticas de Laboratorio (20)

Sangre
SangreSangre
Sangre
 
Fisiologia práctico
Fisiologia prácticoFisiologia práctico
Fisiologia práctico
 
Toma de muestras (1) de sangre 1
Toma de muestras (1)  de sangre 1Toma de muestras (1)  de sangre 1
Toma de muestras (1) de sangre 1
 
Toma de muestras (1) de sangre 1
Toma de muestras (1)  de sangre 1Toma de muestras (1)  de sangre 1
Toma de muestras (1) de sangre 1
 
GRUPO 15-HEMATOCRITO.
GRUPO 15-HEMATOCRITO.GRUPO 15-HEMATOCRITO.
GRUPO 15-HEMATOCRITO.
 
Transfusión de sangre
Transfusión de sangreTransfusión de sangre
Transfusión de sangre
 
Trabajo practico
Trabajo practicoTrabajo practico
Trabajo practico
 
Taller n 2
Taller n 2Taller n 2
Taller n 2
 
Libreta de prácticas
Libreta de prácticasLibreta de prácticas
Libreta de prácticas
 
UD5.muestra sangre composición, extracción y manipulación en el laboratorio.pptx
UD5.muestra sangre composición, extracción y manipulación en el laboratorio.pptxUD5.muestra sangre composición, extracción y manipulación en el laboratorio.pptx
UD5.muestra sangre composición, extracción y manipulación en el laboratorio.pptx
 
P5.docx
P5.docxP5.docx
P5.docx
 
sesion 02.pdf
sesion 02.pdfsesion 02.pdf
sesion 02.pdf
 
TIPOS DE MUESTRAS DE LABORATORIO.pptx
TIPOS DE MUESTRAS DE LABORATORIO.pptxTIPOS DE MUESTRAS DE LABORATORIO.pptx
TIPOS DE MUESTRAS DE LABORATORIO.pptx
 
banco de sangre
 banco de sangre banco de sangre
banco de sangre
 
Hemograma
HemogramaHemograma
Hemograma
 
432192401.tp 1 y 2
432192401.tp 1 y 2432192401.tp 1 y 2
432192401.tp 1 y 2
 
recuentodereticulocitosyeritrosedimentacion-230118010741-86641827.pptx
recuentodereticulocitosyeritrosedimentacion-230118010741-86641827.pptxrecuentodereticulocitosyeritrosedimentacion-230118010741-86641827.pptx
recuentodereticulocitosyeritrosedimentacion-230118010741-86641827.pptx
 
Extraccion Sanguinea
Extraccion SanguineaExtraccion Sanguinea
Extraccion Sanguinea
 
Transfusión
TransfusiónTransfusión
Transfusión
 
Transfusion sanguinea en animales
Transfusion  sanguinea en animalesTransfusion  sanguinea en animales
Transfusion sanguinea en animales
 

Más de Rosa Puga

Reglas para una investigación científica.
Reglas para una investigación científica.Reglas para una investigación científica.
Reglas para una investigación científica.
Rosa Puga
 
Regla de la cadena para la anti-derivada.
Regla de la cadena para la anti-derivada.Regla de la cadena para la anti-derivada.
Regla de la cadena para la anti-derivada.
Rosa Puga
 
Guía de estudio de preparar soluciones del laboratorio
Guía de estudio de preparar soluciones del laboratorioGuía de estudio de preparar soluciones del laboratorio
Guía de estudio de preparar soluciones del laboratorio
Rosa Puga
 
¿Cómo se cálcula el radio atómico?
¿Cómo se cálcula el radio atómico?¿Cómo se cálcula el radio atómico?
¿Cómo se cálcula el radio atómico?
Rosa Puga
 
Verbos en inglés: regulares e irregulares con significado
Verbos en inglés: regulares e irregulares con significadoVerbos en inglés: regulares e irregulares con significado
Verbos en inglés: regulares e irregulares con significado
Rosa Puga
 
Técnicas de Investigación para una tésis
Técnicas de Investigación para una tésisTécnicas de Investigación para una tésis
Técnicas de Investigación para una tésis
Rosa Puga
 
El reino de los hongos
El reino de los hongosEl reino de los hongos
El reino de los hongos
Rosa Puga
 

Más de Rosa Puga (20)

Gota gruesa.
Gota gruesa.Gota gruesa.
Gota gruesa.
 
Reglas para una investigación científica.
Reglas para una investigación científica.Reglas para una investigación científica.
Reglas para una investigación científica.
 
Toma de muestra sanguínea
Toma de muestra sanguínea Toma de muestra sanguínea
Toma de muestra sanguínea
 
Reglamento de laboratorio.
Reglamento de laboratorio.Reglamento de laboratorio.
Reglamento de laboratorio.
 
Regla de la cadena para la anti-derivada.
Regla de la cadena para la anti-derivada.Regla de la cadena para la anti-derivada.
Regla de la cadena para la anti-derivada.
 
Reactivos y colorantes.
Reactivos y colorantes.Reactivos y colorantes.
Reactivos y colorantes.
 
¿Qué son la bacterias?
¿Qué son la bacterias?¿Qué son la bacterias?
¿Qué son la bacterias?
 
Guía de estudio de preparar soluciones del laboratorio
Guía de estudio de preparar soluciones del laboratorioGuía de estudio de preparar soluciones del laboratorio
Guía de estudio de preparar soluciones del laboratorio
 
Funciones
Funciones Funciones
Funciones
 
Examen general de orina.
Examen general de orina.Examen general de orina.
Examen general de orina.
 
¿Cómo se cálcula el radio atómico?
¿Cómo se cálcula el radio atómico?¿Cómo se cálcula el radio atómico?
¿Cómo se cálcula el radio atómico?
 
Inmunodeficiencia Secundaria
Inmunodeficiencia SecundariaInmunodeficiencia Secundaria
Inmunodeficiencia Secundaria
 
Ejercicios de equilibrio-física
Ejercicios de equilibrio-físicaEjercicios de equilibrio-física
Ejercicios de equilibrio-física
 
Ejercicios de energía cinética y potencia
Ejercicios de energía cinética y potenciaEjercicios de energía cinética y potencia
Ejercicios de energía cinética y potencia
 
Ahorrar energía eléctrica.
Ahorrar energía eléctrica.Ahorrar energía eléctrica.
Ahorrar energía eléctrica.
 
Verbos en inglés: regulares e irregulares con significado
Verbos en inglés: regulares e irregulares con significadoVerbos en inglés: regulares e irregulares con significado
Verbos en inglés: regulares e irregulares con significado
 
Conceptive pill- ingles
Conceptive pill- inglesConceptive pill- ingles
Conceptive pill- ingles
 
Historia del maquillaje.
Historia del maquillaje.Historia del maquillaje.
Historia del maquillaje.
 
Técnicas de Investigación para una tésis
Técnicas de Investigación para una tésisTécnicas de Investigación para una tésis
Técnicas de Investigación para una tésis
 
El reino de los hongos
El reino de los hongosEl reino de los hongos
El reino de los hongos
 

Último

Clase 16 Artrologia mmii 2 de 3 (Rodilla y Tobillo) 2024.pdf
Clase 16 Artrologia mmii 2 de 3 (Rodilla y Tobillo) 2024.pdfClase 16 Artrologia mmii 2 de 3 (Rodilla y Tobillo) 2024.pdf
Clase 16 Artrologia mmii 2 de 3 (Rodilla y Tobillo) 2024.pdf
garrotamara01
 
(2024-05-06)Sesion Anticoncepción desde atencion primaria (DOC)
(2024-05-06)Sesion Anticoncepción desde atencion primaria (DOC)(2024-05-06)Sesion Anticoncepción desde atencion primaria (DOC)
(2024-05-06)Sesion Anticoncepción desde atencion primaria (DOC)
UDMAFyC SECTOR ZARAGOZA II
 
plan de gestion DE LA UNIDAD DE CUIDADOS INTENSIVOS
plan de gestion DE LA UNIDAD DE CUIDADOS INTENSIVOSplan de gestion DE LA UNIDAD DE CUIDADOS INTENSIVOS
plan de gestion DE LA UNIDAD DE CUIDADOS INTENSIVOS
sharmelysullcahuaman
 
LIBRO LA MEJOR PSICOTERAPIA, PROLOGO - copia.pdf
LIBRO LA MEJOR PSICOTERAPIA, PROLOGO - copia.pdfLIBRO LA MEJOR PSICOTERAPIA, PROLOGO - copia.pdf
LIBRO LA MEJOR PSICOTERAPIA, PROLOGO - copia.pdf
Franc.J. Vasquez.M
 

Último (20)

Infarto agudo al miocardio magisterio completa.pptx
Infarto agudo al miocardio magisterio completa.pptxInfarto agudo al miocardio magisterio completa.pptx
Infarto agudo al miocardio magisterio completa.pptx
 
Anatomia y fisiologia del pancreas medicina
Anatomia y fisiologia del pancreas medicinaAnatomia y fisiologia del pancreas medicina
Anatomia y fisiologia del pancreas medicina
 
Distensibilidad Vascular y funciones de los sist arterial.pptx
Distensibilidad Vascular y funciones de los sist arterial.pptxDistensibilidad Vascular y funciones de los sist arterial.pptx
Distensibilidad Vascular y funciones de los sist arterial.pptx
 
Clase 16 Artrologia mmii 2 de 3 (Rodilla y Tobillo) 2024.pdf
Clase 16 Artrologia mmii 2 de 3 (Rodilla y Tobillo) 2024.pdfClase 16 Artrologia mmii 2 de 3 (Rodilla y Tobillo) 2024.pdf
Clase 16 Artrologia mmii 2 de 3 (Rodilla y Tobillo) 2024.pdf
 
666105651-Farmacologia-Rios-2-Editorial-Sketch-Med-2024.pdf
666105651-Farmacologia-Rios-2-Editorial-Sketch-Med-2024.pdf666105651-Farmacologia-Rios-2-Editorial-Sketch-Med-2024.pdf
666105651-Farmacologia-Rios-2-Editorial-Sketch-Med-2024.pdf
 
HIPOCALCEMIA NEONATAL EN PEDIATRIA .pptx
HIPOCALCEMIA NEONATAL EN PEDIATRIA .pptxHIPOCALCEMIA NEONATAL EN PEDIATRIA .pptx
HIPOCALCEMIA NEONATAL EN PEDIATRIA .pptx
 
Conceptos De pago Tarjeton digital del imss
Conceptos De pago Tarjeton digital del imssConceptos De pago Tarjeton digital del imss
Conceptos De pago Tarjeton digital del imss
 
indicadores para el proceso de esterilización de ceye .pdf
indicadores para el proceso de esterilización de ceye .pdfindicadores para el proceso de esterilización de ceye .pdf
indicadores para el proceso de esterilización de ceye .pdf
 
Generalidades de fisiología del equilibrio-Medicina.pptx
Generalidades de fisiología del equilibrio-Medicina.pptxGeneralidades de fisiología del equilibrio-Medicina.pptx
Generalidades de fisiología del equilibrio-Medicina.pptx
 
Presentación ojo anatomía Quiroz en pdf
Presentación ojo anatomía Quiroz en pdfPresentación ojo anatomía Quiroz en pdf
Presentación ojo anatomía Quiroz en pdf
 
ANTECEDENTES HISTORICOS DE LA MEDICINA FORENSE.pptx
ANTECEDENTES HISTORICOS DE LA MEDICINA FORENSE.pptxANTECEDENTES HISTORICOS DE LA MEDICINA FORENSE.pptx
ANTECEDENTES HISTORICOS DE LA MEDICINA FORENSE.pptx
 
FARMCOCINÉTICA Y FARMACODINAMIA DE LOS MEDICAMENTOS TÓPICOS
FARMCOCINÉTICA Y FARMACODINAMIA DE LOS MEDICAMENTOS TÓPICOSFARMCOCINÉTICA Y FARMACODINAMIA DE LOS MEDICAMENTOS TÓPICOS
FARMCOCINÉTICA Y FARMACODINAMIA DE LOS MEDICAMENTOS TÓPICOS
 
LA MEDICINA GRECORROMANA HIPOCRATES, HEROFILO Y GALENO
LA MEDICINA GRECORROMANA HIPOCRATES, HEROFILO Y GALENOLA MEDICINA GRECORROMANA HIPOCRATES, HEROFILO Y GALENO
LA MEDICINA GRECORROMANA HIPOCRATES, HEROFILO Y GALENO
 
asma bronquial- nuevo enfoque GINA y GEMA
asma bronquial- nuevo enfoque  GINA y GEMAasma bronquial- nuevo enfoque  GINA y GEMA
asma bronquial- nuevo enfoque GINA y GEMA
 
(2024-05-06)Sesion Anticoncepción desde atencion primaria (DOC)
(2024-05-06)Sesion Anticoncepción desde atencion primaria (DOC)(2024-05-06)Sesion Anticoncepción desde atencion primaria (DOC)
(2024-05-06)Sesion Anticoncepción desde atencion primaria (DOC)
 
317543696-CUMARINA-EXPOSICION-ORGANICA4.pptx
317543696-CUMARINA-EXPOSICION-ORGANICA4.pptx317543696-CUMARINA-EXPOSICION-ORGANICA4.pptx
317543696-CUMARINA-EXPOSICION-ORGANICA4.pptx
 
plan de gestion DE LA UNIDAD DE CUIDADOS INTENSIVOS
plan de gestion DE LA UNIDAD DE CUIDADOS INTENSIVOSplan de gestion DE LA UNIDAD DE CUIDADOS INTENSIVOS
plan de gestion DE LA UNIDAD DE CUIDADOS INTENSIVOS
 
Contaminación del agua en la ciudad de Arequipa.pdf
Contaminación del agua en la ciudad de Arequipa.pdfContaminación del agua en la ciudad de Arequipa.pdf
Contaminación del agua en la ciudad de Arequipa.pdf
 
LIBRO LA MEJOR PSICOTERAPIA, PROLOGO - copia.pdf
LIBRO LA MEJOR PSICOTERAPIA, PROLOGO - copia.pdfLIBRO LA MEJOR PSICOTERAPIA, PROLOGO - copia.pdf
LIBRO LA MEJOR PSICOTERAPIA, PROLOGO - copia.pdf
 
Resolucion Ministerial 242-2024-MINSA.pdf
Resolucion Ministerial 242-2024-MINSA.pdfResolucion Ministerial 242-2024-MINSA.pdf
Resolucion Ministerial 242-2024-MINSA.pdf
 

Manual de Prácticas de Laboratorio

  • 1. Centro de Bachillerato Tecnológico Industrial y de Servicios N°24 Profesora: Ma. De Jesús Treviño Gutiérrez Integrantes:  Becerra Walle Guadalupe  Bernal Jaramillo Jesús  Cantú Sánchez Karen  Castillo García Vanesa  Heim Pacheco Angélica  Puga García Rosa  Rodríguez Hernández Briana  Torres Eskildsen Dina Grupo: 5°C Téc. Lab. Clínico Turno Matutino
  • 2. El presente trabajo tiene por objetivo guiar a los estudiantes y/o maestros que están estudiando laboratorio clínico, con el fin de difundir los conocimientos previos aprendidos en todo el semestre. Este trabajo esta realizado, basado en una guía que se nos fue dada y, cuando realizamos las prácticas aquí descritas, se tomaron fotos con el fin de ilustrar a los lectores sobre como fue hecha dicha práctica, así como los valores normales de la prueba descrita y los valores que a nosotros nos resultó. En cada una de las prácticas, están descritas con el objetivo, el material, los procedimientos y los resultados de ésta prueba. Todo lo descrito aquí es verídico y no fueron inventados los resultados del examen, ya que nosotros mismos lo realizamos. Los invitamos a leer este manual y a adentrarse un poco más en el maravilloso mundo de los “Laboratorios Clínicos” ¡¡BIENVENIDOS!!
  • 3.  Introducción  Práctica 1: preparación de anticoagulantes  Práctica 2: obtención de muestras  Práctica 3: diferencial leucocitario  Práctica 4: tinción citoquímica de peroxidasa en M. Ósea  Práctica 5: recuento de plaquetas; método directo  Práctica 6: recuento de plaquetas; método indirecto  Práctica 7: tiempo de sangrado; método de Duke  Práctica 8: tiempo de coagulación; método de Lee y White  Práctica 9: tiempo de coagulación; método tubo apilar  Práctica 10: determinación del tiempo de coagulación en el plasma recalcificado  Práctica 11: retracción de coagulo  Práctica 12: prueba de lazo o torniquete  Práctica 13: tiempo de protrombina; método de Quick  Práctica 14: tiempo de tromboplastina parcial
  • 4. FUNDAMENTO: Un anticoagulante es una sustancia endógena o exógena que interfiere o inhibe la coagulación de la sangre, creando un estado prehemorrágico, se pueden dividir en:  Anticoagulantes de acción directa: Son aquellos que por sí solos son capaces de inhibir la cascada de coagulación.  Anticoagulantes de acción indirecta: Son aquellos que mediante su interacción con otras proteínas o actuando en otras vías metabólicas, alteran el funcionamiento de la cascada de coagulación. Otra forma de dividirlos son los anticoagulantes Naturales (Heparina) y Sintéticos (Citrato de sodio, etc.) Los anticoagulantes de mayor uso dentro de los laboratorios de análisis clínicos son tres y estos pueden ser líquidos o liofilizados. OBJETIVO: Que el alumno sea capaz de diferenciar lo diferentes tipos de anticoagulantes, así como su uso en el laboratorio clínico y su clasificación.
  • 5. ANTICOAGULANTES Se consideran como anticoagulantes: o Mezcla de oxalatos. o Citrato de sodio. o Oxalato de sodio. o EDTA. o Heparina. o ACD. o CPD.  Mezcla de Oxalatos. También llamada anticoagulante de Wintrobe. Contiene oxalato de amonio, oxalato de potasio, formol y agua. Para 5ml de sangre se utilizan 0.5ml de la mezcla de anticoagulante (desecado en estufa a 37ºC o a temperatura ambiente antes de utilizarlo); esta solución anticoagulante actúa como tal para fijación de calcio y debe usarse siempre desecado para no diluir la sangre.  Mezcla de oxalatos de sodio y potasio. Es otro anticoagulante conocido como "Mezcla de Paul – Heller".  Citrato de sodio al 3.8% y oxalato de sodio al 1.4%. Se usa en relación de una parte de anticoagulante por cada nueve partes de sangre, habitualmente se usan 0.25ml de la solución para completar a 2.5ml de volumen total con la muestra de sangre. Actúan en la misma forma que la solución anticoagulante de Wintrobe, es decir, por fijación de calcio. Son los anticoagulantes de elección para tiempo de protrombina (TP) y tiempo de tromboplastina parcial (TTP).
  • 6.  EDTA (ácido etilen-diamino-tetra-acético). Las sales de sodio y potasio en este ácido se comportan como poderosos anticoagulantes y son anticoagulantes de elección para el trabajo de rutina y Hematología (se utiliza al 10%). o No afecta la morfología de las células hemáticas. o No modifica la velocidad de sedimentación globular. o Sus sinónimos son versenato y secuestreno. Se le llama secuestreno ya que secuestra al calcio y lo separa de la cascada de la coagulación, impidiendo que la sangre coagule. Se utilizan 0.05ml por cada 3ml de muestra de sangre. Dada la pequeña cantidad de solución, no es necesario desecarla, ya que prácticamente no diluye la sangre a analizar; en exceso afecta adversamente tanto a los eritrocitos como a los leucocitos, causando su encogimiento y provocando cambios en su forma; por ello debe cuidarse de agregar la cantidad correcta de sangre al anticoagulante. Se prefiere la sal tripotásica a la disódica, ya que es más soluble (10 veces más) y ello hace efectiva la mezcla del anticoagulante con la sangre.  Heparina (heparina sódica de 1,000 unidades). La fina capa de solución de heparina de 1,000 unidades: o Se utiliza para las gasomerías. o La heparina es un excelente anticoagulante. o No altera el tamaño de los eritrocitos. o Actúa inhibiendo la actividad de la trombina sobre el fibrinógeno y es este mecanismo, el que la hace diferente a los demás anticoagulantes mencionados.
  • 7.  ACD y CPD. Son los principales anticoagulantes utilizados en los bancos de sangre (en las bolsas para la recolección de ésta). El ACD contiene ácido cítrico, citratos y dextrosa. En este anticoagulante la sangre se mantiene hasta 21 días. El CPD contiene citratos, fosfatos y dextrosa. El radical es un amortiguados que favorece el pH de la sangre normal (7.4) permanezca así durante más tiempo, por lo que este anticoagulante hace que las bolsas duran 21 días + 7, siempre y cuando el plasma no presente una coloración rojiza (hemólisis) ni tome un color verdusco debido a la panaglutinibilidad o contaminación bacteriana.
  • 8. FUNDAMENTO: Los distintos análisis de laboratorio nos dan información muy valiosa acerca del estado de los pacientes gravemente enfermos, ayudándonos en el diagnóstico y a la hora de administrar tratamientos. En la sangre venosa se pueden hacer diversos y diferentes estudios analíticos, ya sean desde el punto de vista bioquímico, hematológico y/o microbiológico. El sitio de punción en el paciente varía dependiendo de la edad y tamaño, así como de la accesibilidad de la vena. En niños mayores puede utilizarse cualquier vena accesible, de forma similar al paciente adulto, mientras que en recién nacidos y lactantes las venas superficiales del cuero cabelludo y de las extremidades distales pueden servir para la extracción de sangre. En el laboratorio clínico contamos con diferentes técnicas para obtener muestras sanguíneas:  Punciones Venosas  Punciones Capilares OBJETIVOS:  1. Justificar la indicación de los métodos de obtención de muestras.  2. obtener correctamente muestras capilares y venosas de calidad analítica.
  • 9. PUNCIÓN CAPILAR Material:  Algodón.  Lancetas desechables y estériles  Tubos capilares Procedimiento: 1. Una vez seleccionada la zona, se desinfecta la zona con alcohol al 70%, secar con algodón estéril. 2. Punzar la piel con una lanceta estéril desechable (2 mm de profundidad). 3. La primera gota de sangre se deja perder, limpiándola con la gasa sin tocar la zona pinchada
  • 10. 4- Se espera a que caigan más gotas, sin exprimir el área pinchada porque eso diluiría la sangre con líquido extracelular. Se recogen las gotas de sangre necesarias sobre alguno de estos objetos:  La tira reactiva.  Tubo capilar, mientras se tapa su otro extremo con el dedo. Después de la recogida se pincha el tubo capilar en plastilina para que un pequeño fragmento de ésta obstruya su extremo o se sella con calor. PUNCIÓN VENOSA MATERIAL  Algodón  Ligadura o torniquete de 25-30 cm  Tubos con anticoagulante EDTA  Equipo Vacutainer PROCEDIMIENTO 1- Verificar que los elementos por usar estén listos y que el paciente se sienta cómodo 2. Aplicar el torniquete aproximadamente cuatro dedos por encima de la flexión del codo o a 10 cm del codo y sujetar con un medio nudo.
  • 11. 3- Limpiar la zona con una torunda de algodón embebida en alcohol en un área de 2 pulgadas 4- . Se destapa la aguja por el lado de la guarda que no tiene color y se enrosca en la base. 5- Una vez armada la base, se accede a la vena con la aguja, en forma horizontal, y se introduce con el bisel hacia arriba formando un ángulo de 15° 6- . Cuando la sangre fluya por la aguja, se debe de realizar la aspiración, colocando el tubo dentro de la base y haciéndolo que se perfore el tapón con la otra parte de la aguja, para que el vacío que contiene el tubo aspire la sangre necesaria.
  • 12. 7- Al llenarse el tubo, se retira de la base, procurando no mover la aguja de su posición. 8- Colocar la torunda sobre el lugar de punción, retirar el torniquete y extraer la aguja. 9- Agitar el tubo de 4 veces, suavemente, para homogeneizar la muestra con el anticoagulante.
  • 13. FUNDAMENTO: Las características de las distintas células sanguíneas pueden ponerse en evidencia mediante la coloración diferencial de una delgada capa o extendido de sangre, lo que permitirá estudiar los elementos sanguíneos tanto cualitativamente como cuantitativamente. OBJETIVO: Determinar e identificar el número total de leucocitos contenidos en un frotis teñido, para la determinación de posibles leucemias o para el complemento de una biometría hemática
  • 14. PROCEDIMIENTO: 1. Extracción de sangre con anticoagulante (EDTA) 2. Hacer un extendido o frotis sanguíneo y dejar secar. 3. Teñir con colorante: Wright por 5 minutos Giemsa por 8 minutos
  • 15. 4- Lavar con agua destilada y dejar secar 5- Observaciones y resultados a 100x
  • 16. FUNDAMENTO: Algunas tinciones citoquímicas definen más específicamente las características de las diferentes líneas celulares que los colorantes de Romanovsky. Estas tinciones son especialmente útiles en el diagnóstico de malignidades hematológicas. Los gránulos primarios de las series de neutrófilos y eosinófilos contienen la enzima mieloperoxidasa. Los monolitos son débilmente positivos, los linfocitos y eritroblastos son negativos. La reacción consiste en la oxidación de la bencidina por la peroxidasa en presencia de peróxido de hidrógeno (H2O2), el cual es reducido a agua (H2O). Usando 3,3, diaminobencidina, los gránulos se tiñen de un color café-marrón OBJETIVO: La mieloperoxidasa es una de las tinciones esenciales para el diagnostico correcto de las leucemias agudas, por ejemplo, nos permite distinguir una leucemia linfoblástica de una leucemia mieloblástica
  • 17. 1- Hacer frotis de medula ósea sin teñirlo. 2- Cubrirlo con solución de formalina por 30 segundos y lavarlo con agua destilada 3- Agregar una mezcla de:  10 ml de buffer de fosfato de pH 7.4  7.5 mg de 3.3 diaminobencidina  0.1 ml de peróxido de hidrogeno al 3 %  Incubar por 15 minutos y lavar
  • 18. 4- Contra teñir con hematoxilina de Mayer, lavar y dejar secar 5- Observaciones y resultados. 100x
  • 19. Objetivo: El alumno debe realizar por método directo, la técnica para determinar el número de plaquetas por mm3 de sangre. Fundamento: En una pipeta de toma para eritrocito, se mezcla sangre capilar o venosa con anticoagulante, con un líquido diluyente (oxalato de amonio al 1%) que destruye a los glóbulos rojos facilitando el recuento de las plaquetas de un hemocitómetro. TEORIA: Las plaquetas o trombocitos son fragmentos de células que se originan en la médula ósea y provienen de los megacariocitos, son de forma irregular miden de 2 a 4 micras (m) de diámetro y desempeñan 3 funciones principales en la HEMOSTASIA. -1. Auto agregación y formación de un tapón hemostático. -2. La actividad tromboplastinica. -3. La retracción del coagulo.
  • 20. Material y equipo: -microscopio -agitador mecánico para pipetas de thoma -hemocitómetro, papel filtro -pipeta de toma para eritrocitos -boquilla y tubo de goma -cámara húmeda PROCEDIMIENTO 1. Se extrae muestra biológica Con tubo EDTA 2. El mezclado de la sangre con anticoagulante debe realizarse suavemente y durante unos 5 minutos 3. Con la pipeta de Thoma, aspirar sangre hasta la marca 1.0 y se diluye hasta la marca de 101 con el oxalato de amonio
  • 21. 4- Colocar las pipetas en el agitador de 10-15 minutos 5- Llenar la cámara de Neubauer con el contenido de las pipetas debidamente mezclado, desechando las primeras 4-6 gotas 6- Empleando el microscopio, contar las plaquetas en la cuadrícula central destinada a la cuenta de glóbulos rojos (25 cuadros centrales) VALORES NORMALES: DE 150 000 A 450 000 PLAQ/MM3
  • 22. OBJETIVO: Obtención por el método indirecto, el número de plaquetas por mm3 de sangre FUNDAMENTO: Se tiñe con Wright un frotis de sangre reciente y se observa en el microscopio diferenciando las plaquetas por su morfología. MATERIAL Y EQUIPO: -microscopio -portaobjetos Material biológico: sangre venosa o capilar con anticoagulante. Reactivos: -Colorante de Wright ó Giemsa -Aceite de inmersión
  • 23. PROCEDIMIENTO 1- Preparar un frotis sanguíneo inmediatamente después de haber obtenido la muestra biológica y dejar secar a temperatura ambiente. 2- Teñir con colorante Wright 3- Contar el número de plaquetas por 1000 eritrocitos 4- Determinar el número de glóbulos rojos (recuento de eritrocitos)  CALCULOS: NUMERO DE PLAQUETAS/1000 ERITROCITOS=X  CALCULO Xx: N° DE ERITROCITOS 7MM3=PLAQUETAS /MM3 1000  VALORES NORMALES: DE 200 000 A 400 000/MM3
  • 24. FUNDAMENTO: La lesión de una pared vascular debido a la liberación de la serotonina por las plaquetas con la liberación de tromboplastina por los tejidos. Desencadenado el proceso de coagulación. OBJETIVO: Obtención del tiempo que dura la hemorragia procedente de una punción cutánea habitual. MATERIAL:  Lanceta desechable estéril  Tiras de papel filtro  Cronometro de mano  Torundas con alcohol
  • 25. PROCEDIMIENTO: 1. Se limpia perfectamente, con una torunda de algodón con alcohol, el lóbulo de la oreja esperando que se evapore el exceso de alcohol (se puede hacer también la punción del dedo anular izquierdo. 2. Puncione con a lanceta estéril el sitio elegido, inmediatamente ponga en marcha el cronometro. 3. Seque la sangre sin tocar la piel con el papel filtro cada 15 segundos. Hasta que cese la hemorragia, se detiene el cronometro anotado el tiempo transcurrido NOTA: Una forma práctica de contar con exactitud el tiempo de sangrado es contando las marcas de sangre sobre el papel filtro que se tomo cada 15 segundos. VALORES NORMALES: De 1 a 6 minutos OBSERVACIONES: Se obtuvo buena punción cutánea. RESULTADO: Dos minutos duro el sangrado
  • 26. OBJETIVO: La obtención del tiempo requerido para la formación de un coagulo solido FUNDAMENTO: La sangre total formara un coagulo firme cuando se extrae del sistema vascular y se pone a una superficie extraña TEORIA: La coagulación sanguínea es aquella fase de la hemostasia en la que se forma el tapón de fibrina.los materiales son demasiados sencillos de realizar pero requieren una atención extrema en cuanto su técnica si se requiere conseguir resultados verdaderos. MATERIAL:  3 tubos de ensaye  Una pipeta  Baño maría  Equipo de extracción PROCEDIMIENTO: 1. Se obtiene sangre venosa y en el momento que aparece la sangre ponga en marcha el cronometro.
  • 27. 2- Pasar 1 ml de sangre a los tubos de ensaye (mínimo 3 tubos). Posteriormente, introducir los tubos en baño de agua 37°c 3- Se vierten los tubos a intervalos de medio minuto hasta que cada uno puede invertirse formando un Angulo de 90° sin que se vierta el contenido. 4- Registre el tiempo transcurrido en cada uno de los tubos por separado y calcule la media aritmética, sumando los tiempos de los 3 tubos y dividiendo el resultado entre 3. VALORES NORMALES: De 5 a 8 minutos RESULTADO: la media aritmética nos dio 6:30 minutos
  • 28. OBJETIVO: la obtención del tiempo requerido para la formación de un coagulo sólido. FUNDAMENTO: en sangre capilar se observa la formación de coagulación tomando correctamente el tiempo desde que se hace la punción hasta la formación del mismo. MATERIAL: a) tubos capilares. b) algodón. c) alcohol. d) lancetas o agujas estériles. PROCEDIMIENTO: 1. se limpia el lóbulo de la oreja o la yema del dedo con una torunda de algodón con alcohol. 2. con una lanceta desechable, se hace la punción y se desechan las dos primeras gotas.
  • 29. 3- inmediatamente después se llenan dos tubos capilares sin anticoagulante y se pone en marcha el cronometro. 4- se coloca en una superficie plana a 37ºC después de 3 minutos se fracturan los tubos separando uno de otro, observándose el coagulo se detiene el reloj, anotando en tiempo transcurrido.  VALORES NORMALES: de 4 a 8 minutos  RESULTADO: 6 minutos con 23 segundos
  • 30. OBJETIVO: obtención del tiempo de coagulación del plasma recalcificado. FUNDAMENTO: al plasma oxalato o citrato se le agrega CaCl2 para obtener el tiempo que tarda la formación del coagulo. MATERIAL Y EQUIPO: 1- baño maría. 2- tubo de ensaye. 3- cronometro. MATERIAL BIOLOGICO: 1- sangre con anticoagulante 2- citrato de sodio 3.8%. 3- CaCl 0.02M PROCEDIMIENTO 1- Colocar 0.1ml. De plasma en un tubo de ensaye de 10x7.5mm. Manteniendo el baño maría a 37ºC dejándolo reposar 1 minuto.
  • 31. 2- agregar 0.2 M de CaCl2, inmediatamente que se coloca el CaCl2 se pone en marcha el cronometro. 3- Agitar suavemente la mezcla y dejarla reposar a 37ºC durante 70seg. A partir de este tiempo inclinamos el tubo ligeramente cada 5 seg. hasta que se observa la formación del coagulo se detiene el cronometro anotando el tiempo. VALORES NORMALES: de 80 a 160 segundos. RESULTADO: 145 segundos
  • 32. OBJETIVO: Obtención de la cantidad de fibrina formada y su retracción además se mide el número y la función de las plaquetas. FUNDAMENTO: La retracción del coagulo es directamente proporcional al número de plaquetas e inversamente al hematocrito. MATERIAL Y EQUIPO:  Equipo para extracción de sangre venosa  Gradillas para tubos  Tubos de ensaye con silicón o vacutainer PROCEDIMIENTO 1- Se extraen 5 ml de sangre en un tubo vacutainer y se coloca en la gradilla durante 1 hr para observar el coagulo.
  • 33. 2- Después se despega y se retira el coagulo (en ocasiones es conveniente dejar un aplicador dentro del tubo y una vez formado el coagulo este se saca). 3- Se lee el volumen del líquido que quedo en el tubo (también existen algunos glóbulos pero no es necesario hacer corrección). Este volumen se anota como porcentaje del volumen inicial de sangre completa en el tubo. VALORES NORMALES: 48-64% OBSERVACIONES: Se retrae de las paredes de su recipiente con lo que se separa el suero transparente y el coagulo.
  • 34. OBJETIVO: Medir la resistencia de las paredes capilares al aumento de presión y a la anoxia. FUNDAMENTO: Ésta prueba tiene como objeto estudiar el estado de las paredes de los vasos capilares y al mismo tiempo las funciones plaquetarias de adhesividad y agregación, aumentando la presión interna capilar por obstrucción del flujo venoso. El número de petequias, producido en un área seleccionada informa de la normalidad y anormalidad de la prueba. La prueba se hace directa al paciente. MATERIAL Y EQUIPO:  Equipo completo para medir presión arterial.  Paciente. PROCEDIMIENTO 1- Inspeccione la piel de la mitad superior del antebrazo del paciente en busca de petequias, si las hay márquelas con un punto de tinta, si se encuentra petequias solamente en un antebrazo, escoja el que no tenga que hacer las pruebas.
  • 35. 2- Tome la presión arterial. 3- Infle el brazo del baumanometro hasta que alcance la presión igual a la mitad de la suma de las presiones. 4- Transcurridos los 3 o 5 minutos, desinfle el brazal, quítelo y espere a que el brazo se descongestione. Cuente el número de petequias que haya apreciado en el área marcada. VALORES NORMALES: De 0 a 10 petequias. NOTA: No debe haber más de 5 petequias en un área circular de 2.5 cm con un una presión de 5 minutos, no más de 10 petequias. OBSERVACIONES: Petequias (manchas redondas y rojas sin relieve).
  • 36. OBJETIVO: Obtención del tiempo en segundos que tarda la protrombina en transformarse en trombina. FUNDAMENTO: En presencia de un exceso de tromboplastina y una cantidad óptima de calcio el plasma coagula rápidamente (entre 11 y 12 segundos). PROCEDIMIENTO 1- Se colocan 4.5 ml de sangre que se obtiene por punción venosa con jeringa estéril desechable en un tubo de 13 × 1OO mm que contenga O.5 ml de anticoagulante para protrombina mezclar suavemente. 2- Colocar en Baño María un tubo de solución de CaCI2 al O.O2 molar (1 o 2 ml según el numero determinaciones) tener dispuesta una pipeta graduada en decimos para servir el CaCI2.
  • 37. 3- Centrifugar el tubo con sangre y anticoagulante a 1500 r.p.m. durante5 min. Separar el plasma en el otro tubo limpio y colocar un recipiente que tenga hielo. 4- En un tubo de 1O × 75 mm colocar O.1 ml de suspensión de tromboplastina agregar O.1 ml de plasma, agitar y colocar en Baño María a 37° durante un minuto. 5- Agregar O.1 ml de solución CaCI2 al soplar estas ponen en marcha el cronometro, agitar dentro del agua suavemente la mezcla de los tres constituyentes dejar reposar hasta el segundo 1O a partir de el se examina el tubo hasta el momento en que se detiene el cronometro 6- La prueba se repite dos veces con plasma problema los resultados no pueden variar más de 1 segundo  VALORES NORMALES: De 11 a 14 segundos.
  • 38. OBJETIVO: Obtención del tiempo parcial para diferenciarla de la tromboplastina completa. FUNDAMENTO: El extracto de cefalina no coagula el plasma hemofílico tan rápido como el normal. Esta prueba es sensible a la deficiencia de todos los factores plasmáticos de la coagulación excepto el factor VIII y el factor plaquetario. MATERIAL Y EQUIPO:  Equipo para determinación de la tromboplastina parcial.  Tubos de ensayo 13 × 1OO mm  Baño María a 37°C  Sangre citratada para tiempo de protrombina, según la técnica descrita. PROCEDIMIENTO 1- Precalentar un baño de agua a 37° durante 3 minutos, los tubos de 13 × 1OO mm y el volumen suficiente de plasma para el numero de pruebas que se van a efectuar, O.1 ml por prueba.
  • 39. 2- Ponga O.1 ml de la tromboplastina reconstituida en uno de los tubos e incubados a 37° C durante 3 minutos, midiendo exactamente el tiempo con un cronometro. 3- Añada a O.1 ml de la solución de a solución CaCI2 O.O2 M precalentado, expulsando rápidamente con una pipeta o jeringa, simultáneamente empiece a medir el tiempo con el cronometro mezclando con el contenido del tubo mediante un giro rápido. 4- Retire el tubo del baño de agua a los 3º segundos aproximadamente inclinando con suavidad de un lado con una velocidad no mayor de una vez por segundo. 5- Vigile la aparición de un gel detenga e cronometro en el momento visual de su formación. VALORES NORMALES:  De 30-60 segundos
  • 40. Gracias por haber leído este pequeño manual Este trabajo fue hecho con mucha dedicación por parte de mis compañeros de equipo y por mí, esperamos y haiga sido de su agrado, pero sobre todo, que les haya servido para resolver sus dudas. ¡¡Hasta Pronto!!