El semen es un líquido viscoso y blanquecino que empieza a producirse durante la pubertad de los hombres entre los diez y quince años de edad. Miguel Ruíz Jorro, co-director de Crea Medicina Reproductiva y director de la Unidad de Andrología Reproductiva de Crea, explica que “el semen es una substancia líquida compuesta por el conjunto de secreciones producidas por diferentes glándulas del aparato genital masculino que se juntan en el momento de la eyaculación, instante en el que este líquido es expulsado a través de la uretra”. Añade además que “dentro de este líquido eyaculado se diferencia una fase líquida, conocida como plasma seminal y una fase celular, compuesta mayoritariamente por los espermatozoides y otras células que junto a estos, están suspendidas en el plasma seminal”. El semen se produce en los testículos. El epidídimo (conducto que conecta los testículos con los vasos deferentes por los que circula el semen) recibe espermatozoides inmaduros de los testículos y los almacena durante varios días.

1. Universidad de Carabobo
Escuela de Bioanálisis
Facultad de Ciencias de la Salud
Bioquímica Clínica

2.  40 % de las causas de esterilidad se deben al factor
masculino
 La OMS recomienda analizar 2 muestras de semen
No menor de 7 días
Ni mayor a 3 meses
 En el hombre la producción de espermatozoides es
un proceso continuo que se inicia en pubertad en
forma de ciclos de 70 días

3. 200 m de Túbulos Seminíferos
Células de Sertoli
Células germinales
Diferentes funciones

5. Vesículas seminales (60%)
Próstata (20%)
Epidídimo, Glándulas de Cowper
(10%)
- Fructosa
- Prostaglandinas
- Bicarbonato
(Producción de ATP, Motilidad y viabilidad,
Coagulación)
(Licuefacción, Movilidad Espermática)
(Maduración de los espermatozoides, Limpia la uretra
preparándola para la eyaculación, lubrica la mucosa uretral)
Origen de los Componentes del Eyaculado
- Zinc
- Acido Cítrico
- Fosfatasa Acida
- Enzimas proteolíticas
- Alfa glucosidasa
- Proteínas para
fertilización
Testículos (5%)
(Contribuyen con los espermatozoides)

6. Pre-eyaculatoria Glándulas de Cowper y Littre
1ra. Fracción : Fracción preliminar Enzimas prostáticas
2da. Fracción : Fracción principal
3ra. Fracción : Fracción terminal Secreciones de la
vesícula seminal
Secreciones prostáticas,
vesículas seminales,
epidídimo y testículo

7. COAGULACIÓN Y LICUEFACCIÓN DEL
EYACULADO
1.- Formación de un coágulo de fibrina por acción de enzima
coagulante de PRÓSTATA sobre precursor formado en
VESÍCULAS.
2.- Licuefacción por enzimas PROSTÁTICAS
3.- Degradación de fragmentos de fibrina por enzimas
PROSTÁTICAS, generando aminoácidos y amoníaco

8. Importancia del Estudio
 Estudios de Fertilidad.
 Investigación de la eficacia de una varicocelectomía
y vasectomía.
Metodología
 Simple Tecnología Manual
 Sistemas Computarizados (CASA)
 Pruebas Especiales de Fertilidad

9. Manejo de
la muestra

10. RECOLECCIÓN Y ENVIO DE LAS MUESTRAS
 Instrucciones escrita con claridad sobre la
manera de recoger el semen y trasladarlo.
“MASTURBACIÓN”
utilizando recolector de orina
Nombre , fecha
hora recol. y
duración de la
abstinencia.
 No debe transcurrir mas de media hora desde la recolección
hasta su llegada al laboratorio.
 Proteger de temperaturas extremas.
 La OMS recomienda una abstinencia entre dos y siete días.

11. Precauciones y Recomendaciones
Factores que afectan a la calidad de la muestra
 Recogida de la muestra completa.
 Abstinencia sexual.
 Variabilidad biológica.
Es imposible caracterizar a un individuo con un solo análisis de semen y que
es necesario realizar 2-3 análisis para estudiar el estado basal de un individuo.
 Fármacos: Antipsicóticos (fenotiazidas), Antidepresivos, Antihipertensivos
(alfametildopa), Antihistamínicos.
 Tóxicos: Marihuana: inhibe GnRH y la espermatogénesis.

12. ANÁLISIS
MACROSCÓPICO

13. COLOR
Marrón-pardo, Rojizo
Contiene Glóbulos Rojos
Gris opalescente
Normal
Amarillento Ictericia, Presencia de ciertas
vitaminas, Abstinencia sexual
prolongada, leucospermia.

14. ASPECTO
Normal Heterogéneo Homogéneo
Traslucido Conc. de Espermatozoides
Turbio Piospermia y Hemospermia

15. VOLUMEN: Normal 1,5 a 6 mL
Tubos de centrifuga graduados
Se realiza una vez que la muestra
haya iniciado el proceso de
Licuefacción

16. VISCOSIDAD
Viscosidad Aumentada:
 Interfiere : movilidad, concentración, anticuerpos
antiespermatozoide, bioquímica.
 Escasa invasión del moco cervical.
Filamento menor de
2 cm
 Prostatitis.
 Vesiculitis seminal.

17. 7,2 y 7,8
Mayor: Infección
Menor: unido a oligo o azoospermia y a un
volumen bajo disgenesia del
conducto deferente, vesículas
seminales o del epididimo
pH:
Licuefacción: Se inicia a los 10 min. después del
eyaculado y se completa a los 60 min.
Ausente: enzima proteolítica (concentración espermática).
Dificulta la Motilidad Astenozoospermia

18. ANÁLISIS
MICROSCÓPICO

19. .- Espermatozoidez con Movilidad progresiva (PR)
.- Espermatozoidez con Movilidad No progresiva (NP)
.- Espermatozoidez Inmóviles (IM)
MOVILIDAD 10-15 ul lámina portaobjeto + cubreobjeto
40 x
200 Espermatozoides
Límite inferior de referencia:
Movilidad progresiva (PR) es el 32%

20. VITALIDAD
10-15 ul lámina portaobjeto + cubreobjeto
Tinción Supravital con Eosina Y al 0.5 %
40 x
(200 células)
Esp Vivos cabeza blanca
Esp. Muertos cabeza roja
El límite inferior de referencia que marca el
nuevo manual de la OMS es del 58%.

21. VITALIDAD
 La vitalidad puede servirnos como evaluación de los resultados
de movilidad.
.- Diferenciar Células inmóviles vivas de las muertas:
Los inmóviles vivos sugieren defectos en flagelo
 Comprobar exactitud de motilidad:
.- El tanto por ciento de espermatozoides viables siempre
debe ser igual o superior al de espermatozoides móviles.
Ejemplo:
1.- Si la vitalidad es del 40% y el de movilidad del 35% será correcto?
Sí, ya que esto supone que un 5% de espermatozoides vivos no se mueven.
2.- Si el resultado de la vitalidad es del 40%, no podemos admitir como válida una movilidad
del 50%, porque para ello habría que asumir que el 10% de los espermatozoides muertos se
mueven.

22. Dilución: Solución inmovilizadora (bicarbonato de sodio y formalina)
Contaje en cuadrado central de la cámara de Neubauer
Límite inferior de referencia:
• Concentración: 15 millones de espermatozoides / mL
• Número total: 39 millones de espermatozoides / eyaculado.
CONCENTRACIÓN

23. Cálculos:
N: numero de esp. contados
10: volumen contado 1/0,1mm3 (superficie x profundidad)
20: Dilución 1/20
1000: factor de conversión de mm3 a cm3
CONCENTRACIÓN
Conc del Esp/ml: N X 10 X 20 X 1000

24. MORFOLOGIA Extendido en lámina portaobjeto
 Coloración de Giemsa 100 X
Morfología Normal: Cabeza oval,
media pieza cilíndrica, cola con un
estrecho segmento terminal
Defectos
Morfológicos
Límite inferior de referencia para la
morfología espermática del 4%
microcéfalos Mégalos
Cabeza piriforme Bicéfalos
Anomalía
de cola

25. 1.- Leucocitos.
2.- Células epiteliales.
3.- Hematíes.
4.- Cristales de espermina.
5.- Conglomerados: .- Adherencia de espermatozoides (inmóviles o móviles) a células
no espermáticas o detritos. Espermatozoides muertos pegados a la mucina.
.- No son específicas, no tienen ninguna significación clínica.
6.- Aglutinaciones: .- Espermatozoides vivos pegados por cola o cabeza.
.- No son evidencia suficiente para deducir la presencia de anticuerpos
antiespermatozoides, pero sugieren investigar su presencia.
OTRAS CONSIDERACIONES MICROSCÓPICAS

26. VALORES DE REFERENCIA DE LOS PARÁMETROS MACROSCÓPICOS
DEL SEMEN
PARÁMETRO VALOR
Licuefacción < 60 min
Viscosidad ≤ 2 cm
Apariencia Homogéneo, gris opalescente
pH ≥ 7,2
LÍMITES INFERIORES DE REFERENCIA DEL ESPERMIOCITOGRAMA
PARÁMETRO VALOR
Volumen 1,5 mL
Concentración 15.000.000 (esp/ml)
Movilidad total (PR+NP) 40 %
Movilidad progresiva 32 %
Vitalidad 58 %
Morfología normal 4 %
5ª edición del manual teórico-práctico de la OMS

27. 1999 4ºed
Valor de referencia
VR
2010 5ºed
Límite inferior de
referencia LRL
U.A cevalfes
licuefacción 60 min 60min 60min
pH 7,2-7,8 ≥7,2 7,2-8
Volumen 2.0 ml 1.5 (1.4-1.7) ml ≥1.5ml
[ ] espermática ≥20x106/ml ≥15 (12-15)x106/ml ≥20x106/ml
Motilidad total (P+NP) No detallada 40%(38-42) ≥50%
Motilidad progresiva 50% 32%(31-34) ≥50%
vitalidad 75% 58%(55-63) ≥65%
Formas normales 15% 4%(3-4) ≥30%
leucocitos <1x106 /ml <1x106 /ml <20xc
Autora: Dairy farfán .(2016)
Cuadro comparativo de los valores de referencia, de la 4ª y 5ª edición del
manual teórico-práctico de la OMS de 1999 y 2010 con los valores de
referencia de la unidad de andrología de CEVALFES

28. Nomenclatura de la calidad del esperma
PARÁMETRO RESULTADO INFORME
VOLUMEN
NORMAL Normospermia
ALTO Hiperespermia
BAJO Hipoespermia
AUSENCIA Aspermia
RECUENTO
NORMAL Normozoospermia
ALTO Polizoospermia
BAJO Oligozoospermia
AUSENCIA Azoospermia
AUSENCIA en fresco y
PRESENCIA en el
sedimento
Criptozoospermia
MOVILIDAD BAJO Astenozoospermia
MORFOLOGÍA BAJO Teratozoospermia
VITALIDAD BAJO Necrozoospermia

29. BIOQUÍMICA SEMINAL

30. Capacidad Secretora de las Vesículas seminales
Fructosa (200 – 400 mg/dl) Método: Roe adaptado
Capacidad Secretora de la Próstata
 Ácido cítrico.
 Zinc.
 Fosfatasa ácida.
• Es la fuente de energía de los espermatozoides.
• Su secreción es andrógeno-dependiente.

31. Capacidad Secretora del Epidídimo
 L- Carnitina.
Desempeña un papel en la adquisición de la movilidad progresiva,
es un transportador de ácidos grasos.
 Alfa-glucosidasa neutra.
Desempeña un papel en la maduración de los espermatozoides.
 Glicerofosforilcolina.

32. El software:
1. Discrimina a los espermatozoides de otras partículas que puedan
aparecer en la imagen por su tamaño.
2. Analiza la trayectoria recorrida por cada espermatozoide
individual, la velocidad de las células, el movimiento rectilíneo,
circular o lateral.
 Un microscopio de contraste de fases
 Una cámara de video
 Un monitor de TV.
 Ordenador – analizador digital de
imagen – fotografías seriadas
Sistema CASA (ANÁLISIS DE SEMEN ASISTIDO POR
COMPUTADORA)

33. PRUEBAS FUNCIONALES ESPERMÁTICAS
Previo a la fertilización del ovocito el
espermatozoide pasa por eventos fisiológicos:
 Capacitación.
 Reacción del acrosoma.
 Unión a la zona pelúcida.
 Penetración.
 Fusión.

34. CAPACITACIÓN DEL ESPERMATOZOIDE
 Los espermatozoides adquieren la capacidad de fecundar
el ovocito después de haber permanecido durante un
tiempo en el tracto genital femenino.
 Serie de cambios bioquímicos y fisiológicos requeridos por
el espermatozoide para liberar el contenido acrosomal.
 Involucra cambios metabólicos y de superficie celular.
 Cambios en la motilidad, aumenta la fluidez de membrana
 (↓ col/fosfolípidos).
 Fosforilación de proteínas → cambios en la motilidad
hiperactivación.

35. REACCIÓN DEL ACROSOMA
Depende de:
 Proteínas y receptores.
 AMPç.
 Canales iónicos, calcio, ↑pH
 Activación de adenilciclasa, proteinquinasa,
fosfolipasas.
Es la unión de la memb. acrosómica externa con la
memb. plasmática, con formación de vesiculas híbridas.
exposición de memb. acrosómica interna y liberación
del contenido del acrosoma.

37. PENETRACIÓN DEL OOCITO DE HAMSTER
1.- Se induce superovulación con HCG.
2.- Se remueve capa celular del foliculo y zona pelúcida.
3.- Se incuba oocito con espermatozoides capacitados.
4.- Se cuenta el número de oocitos penetrados.

38. ANÁLISIS INMUNOLÓGICOS
Semen en contacto con Ig y un anticuerpo anti Ig pegada a
partículas de latex o poliacrilamida.
Observar al microscopio espermatozoides con partículas pegadas.
Consiste en detectar anticuerpos espermáticos que se
unen a los antígenos de cabeza o cola. IgA, Ig G, Ig M