Este documento presenta información sobre el análisis clínico de muestras de semen, incluyendo métodos de análisis físico-químico y microscópico. Describe parámetros como motilidad, viabilidad, morfología y recuento de espermatozoides, así como cómo interpretar los resultados clínicamente. También proporciona detalles sobre la realización del análisis microscópico, incluyendo el equipo requerido y cómo evaluar cada uno de los parámetros.
2. UNIDAD III: Análisis de semen
Categorizar métodos y técnicas de análisis clínico a fluidos de semen,
mediante la determinación físico-químico y microscópico, para
proporcionar un resultado clínico fidedigno y por tanto de calidad.
3. UNIDAD III: Análisis de semen
TEMA 2
• Análisis microscópico de semen: Motilidad, viabilidad, morfología y
recuento de espermatozoides. Interpretación clínica
• Practica Taller virtual: Análisis físico-químico y microscópico de líquido
seminal
5. • Cabeza:
– Acrosoma; capa enzimatica a base de hialuronidasa y
Acrosina para degradar zona pelúcida
Nucleo; contiene los cromosomas (n)
–
• Flagelo
–
–
–
Segmento intermedio con mitocondrias
Cola o axonema, de 11 microtúbulos
Membrana o vaina que los recubre
EL ESPERMATOZOIDE
7. Correcta formación anatómica del aparato reproductor masculino
Correcto funcionamiento fisiológico de cada parte anatómica
Correcto funcionamiento hormonal
AMPLIAS PROBABILIDADES DE PODER PROCREAR
Significado de una muestra
normal:
8. Defecto hormonal, anatómico, fisiológico, infecciones… etc
NO PODRA PROCREAR HIJOS.
Significado de una muestra anormal:
9. Examen microscópico
Microscopio Olimpus CX31
Contraste de Fase y Campo Oscuro
Sist. Computarizado Imagen y Video
CAPACITACION ESPERMÁTICA
Elementos agregados:
Vitalidad
Movilidad
Cantidad o
concentración
11. - Consideraciones generales del análisis microscópico
de semen.
Se debe hacer un análisis microscópico inicial de la muestra sin
diluir para estimar el número de espermatozoides por campo y
decidir sobre la dilución a utilizar para la determinación de los
parámetros microscópicos.
La temperatura para evaluar la motilidad y progresión de los
espermatozoides idealmente debe ser de 37°C; sin embargo, se puede
hacer entre 20°C y 24°C siempre y cuando sea constante, ya que la
temperatura afecta la motilidad de los espermatozoides. Todos los
parámetros microscópicos se deben procesar por duplicado.
(Para su realización es imprescindible un microscopio. Se aconseja
además que esté dotado de contraste de fases y que cuente con la
platina termostatizada a 37ºC.)
12. La movilidad es uno de los parámetros más importantes en la evaluación
de una muestra de semen. Un espermatozoide inmóvil es incapaz de
atravesar el moco cervical femenino y mucho menos las envolturas del
ovocito.
1. Motilidad o movilidad
13. MOVILIDAD DE LOS
ESPERMATOZOIDES
Movilidad normal
hacia adelante y
progresivo, es
fundamental para
la fecundación
Se debe hacer
muestra de semen
licuado dentro de
1H de recolección
Colocar una gota
(10ul) de semen en
el porta objeto y
taparla con cubre
objeto
Se evalúan 20 campos
en 40X, por la
movilidad y dirección
Se considera
normal una
movilidad mínima
del 50%
14. NORMAL
A Desplazamiento rápido en
trayectoria rectilínea
Progresivos
rápidos
C Movimientos pero sin
desplazamiento
Pendulares
ASTENOZOOSPERMIA
D Inmóviles Ausencia de movimiento
A : > 25%
A+B: > del 50%
B Progresivos lentos Desplazamientorecto pero
lento
15.
16.
17. El manual de la OMS sugiere que el test de vitalidad debe hacerse de
forma rutinaria en todas las muestras y considera que es obligatorio
cuando la movilidad progresiva es menor del 40%.
2. Viabilidad o vitalidad
18. V I T A L I D A D :
NORMAL VIVOS: ≥ 60 %
NECROZOOSPERMIA: < 60 %
19. Valoración de los resultados
La vitalidad puede servirnos como evaluación de los resultados de movilidad. Esto
es así porque el tanto por ciento de espermatozoides viables siempre debe ser
igual o superior al de espermatozoides móviles. Por ejemplo:
Si el resultado de la vitalidad es del
40%, no podemos admitir como
válida una movilidad del 50%,
porque para ello habría que asumir
que el 10% de los espermatozoides
muertos se mueven.
En cambio si por ejemplo el test de
vitalidad es del 40% y el de
movilidad del 35% será correcto, ya
que esto supone que un 5% de
espermatozoides vivos no se mueven,
algo absolutamente coherente.
20.
21. 3. Morfologia
La evaluación de la morfología de los espermatozoides consiste en el
examen detallado de 200 espermatozoides en una placa coloreada con
coloración de Papanicolaou (idealmente) o con coloración de Gram, por
duplicado
23. Según la Organización Mundial de la Salud, es normal encontrar sólo
el 30% de los espermatozoides normales en los individuos fértiles,
pero se han informado estudios de individuos fértiles con un
promedio de espermatozoides con morfología normal de sólo 20%
(rango entre 15% y 35%)
- Interpretación
24.
25. 4. Recuento Espermático
Valor normal: > 15 o 20 millones de espermatozoides / mL de semen
40 millones de espermatozoides / eyaculado
Evaluar la muestra dentro de los 10-15 min (para evitar la
evaporación)
26. CONCENTRACIÓN Y
RECUENTO DE
ESPERMATOZOIDES
Valores normales
mayores de 15 o 20
millones/mL
Valores limites 10-15
millones/mL
Se cuentan en cámara
de Neubauer, dilución
1:20 bicarbonato de
sodio y formol o
también suero
fisiológico y agua dest
(inmoviliza
espermatozoides)
Se deben contar los
espermatozoides
totalmente
desarrollados.
Sin embargo la presencia
≥ 1 millón de Leuc
(Inflamación).
28. CONTEO ABSOLUTO EN CAMARA:
CALCULO PARA SABER EL NUMERO DE ESPERMATOZIDES POR ML DE SEMEN
# 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝑒𝑠𝑝𝑒𝑟𝑚𝑎𝑡𝑜𝑧𝑜𝑖𝑑𝑒𝑠
# 𝑑𝑒 𝑐𝑢𝑎𝑑𝑟𝑎𝑑𝑜𝑠 𝑙𝑒𝑖𝑑𝑜𝑠
= # 𝑒𝑠𝑝𝑒𝑟𝑚𝑎𝑡𝑜𝑧𝑜𝑖𝑑𝑒𝑠/𝑐𝑢𝑎𝑑𝑟𝑎𝑑𝑜
#
𝑒𝑠𝑝𝑒𝑟𝑚𝑎𝑡𝑜𝑧𝑜𝑖𝑑𝑒𝑠
𝑐𝑢𝑎𝑑𝑟𝑎𝑑𝑜
𝑥
1 𝑐𝑢𝑎𝑑𝑟𝑎𝑑𝑜
0.1 𝑚𝑚3
𝑥
1000 𝑚𝑚3
1 𝑚𝑙
𝑥 𝐹𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑙𝑢𝑠𝑖𝑜𝑛 = #
𝑒𝑝𝑧
𝑚𝑙
CALCULO PARA SABER EL NUMERO DE ESPERMATOZIDES POR EYACULADO
#
𝑒𝑠𝑝𝑒𝑟𝑚𝑎𝑡𝑜𝑧𝑜𝑖𝑑𝑒𝑠
𝑚𝑙
𝑥 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑒𝑦𝑎𝑐𝑢𝑙𝑎𝑑𝑜 = #
𝑒𝑝𝑧
𝑒𝑦𝑎𝑐𝑢𝑙𝑎𝑑𝑜
29.
30.
31.
32. 5. Elementos agregados
Células epiteliales
Escasas normalmente
Eritrocitos
Patológico Proceso
maligno Congestión de la
uretra o próstato-
vesicular Traumatismos
•
•
•
Aumentadas: Procesos
Manipulación excesiva
congestivos
Aglutinación
Aglutinación (vivos) ; Anticuerpos anti esperma, deficit de hialuronidasas
Aglutinación (Muertos): deficiencias de espermatogénesis, deficiencias
de glándulas accesorias.
33. Leucocitos o piocitos
•
•
Procesos infecciosos
Exposición a altas
temperaturas
Tóxicos y fármacos
Trichomonas..??
•
•
Patógenos Asociados:
Micoplasma y Ureaplasma
34. PARÁMETRO VALOR REFERENCIAL ALTERACIÓN
Aspecto Color blanco grisáceo
Licuefacción Completa en 20 min
Viscosidad Filancia < 2 cm
pH > 7.2
Volumen 1.5 – 5.5 ml Aspermia
Hipospermia
Hiperespermia > ml
Cantidad > 39 millones de
espermatozoides
Movilidad Movilidad progresiva Astenozoospermia
(A+B) > 50% o A > 20%
35. PARÁMETRO VALOR REFERENCIAL ALTERACIÓN
Concentración > 15 millones/ml Azoospermia
Oligozoospermia
Criptozoospermia
Vitalidad > 75 % de las formas no Necrozoospermia
teñidas con eosina
Morfología > 30% normal Teratozoospermia
Oligoastenoteratozoospermia
36.
37.
38.
39. 1. En el laboratorio se recibe una muestra de semen color
amarillo. El análisis es normal salvo la disminución de la
movilidad de los espermatozoides. Explique la posible
relación entre los dos resultados anormales.
La muestra contiene orina, que es
tóxica para los espermatozoides y,
por lo tanto, disminuye la
viabilidad.
40. Los resultados anormales de un análisis de semen son el
volumen = 1 mL y concentración de espermatozoides = 1
millón por mililitro. Establezca una causa no patológica de
estos resultados anormales.
La muestra se recolectó de modo
inadecuado y se perdió la
primera parte de la eyaculación.
41. 1. Se entrega al laboratorio una muestra en la que se solicita determinar
la calidad de semen.
a) ¿Qué dos pruebas químicas podrían realizarse en la muestra?
b) ¿Qué otro análisis espermatico requiere la muestra?
Las pruebas de fosfatasa
ácida y alfa glucosidasa
neutra
El examen microscópico para la
presencia de espermatozoides.