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ANALISIS CLINICO II
Dr. Luiggi O. Solano Maza, Mg, Sc.
losolano_est@utmachala.edu.ec
UNIDAD III: Análisis de semen
Categorizar métodos y técnicas de análisis clínico a fluidos de semen,
mediante la determinación físico-químico y microscópico, para
proporcionar un resultado clínico fidedigno y por tanto de calidad.
UNIDAD III: Análisis de semen
TEMA 2
• Análisis microscópico de semen: Motilidad, viabilidad, morfología y
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ANÁLISIS
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• Cabeza:
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Cola o axonema, de 11 microtúbulos
Membrana o vaina que los recubre
EL ESPERMATOZOIDE
EL ESPERMATOZOIDE
Correcta formación anatómica del aparato reproductor masculino
Correcto funcionamiento fisiológico de cada parte anatómica
Correcto funcionamiento hormonal
 AMPLIAS PROBABILIDADES DE PODER PROCREAR
Significado de una muestra
normal:
Defecto hormonal, anatómico, fisiológico, infecciones… etc
 NO PODRA PROCREAR HIJOS.
Significado de una muestra anormal:
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Microscopio Olimpus CX31
Contraste de Fase y Campo Oscuro
Sist. Computarizado Imagen y Video
CAPACITACION ESPERMÁTICA
Elementos agregados:
Vitalidad
Movilidad
Cantidad o
concentración
¿QUE SE DETERMINA EN UN ANÁLISIS MICROSCÓPICO DE
SEMEN?
- Consideraciones generales del análisis microscópico
de semen.
Se debe hacer un análisis microscópico inicial de la muestra sin
diluir para estimar el número de espermatozoides por campo y
decidir sobre la dilución a utilizar para la determinación de los
parámetros microscópicos.
La temperatura para evaluar la motilidad y progresión de los
espermatozoides idealmente debe ser de 37°C; sin embargo, se puede
hacer entre 20°C y 24°C siempre y cuando sea constante, ya que la
temperatura afecta la motilidad de los espermatozoides. Todos los
parámetros microscópicos se deben procesar por duplicado.
(Para su realización es imprescindible un microscopio. Se aconseja
además que esté dotado de contraste de fases y que cuente con la
platina termostatizada a 37ºC.)
La movilidad es uno de los parámetros más importantes en la evaluación
de una muestra de semen. Un espermatozoide inmóvil es incapaz de
atravesar el moco cervical femenino y mucho menos las envolturas del
ovocito.
1. Motilidad o movilidad
MOVILIDAD DE LOS
ESPERMATOZOIDES
Movilidad normal
hacia adelante y
progresivo, es
fundamental para
la fecundación
Se debe hacer
muestra de semen
licuado dentro de
1H de recolección
Colocar una gota
(10ul) de semen en
el porta objeto y
taparla con cubre
objeto
Se evalúan 20 campos
en 40X, por la
movilidad y dirección
Se considera
normal una
movilidad mínima
del 50%
NORMAL
A  Desplazamiento rápido en
trayectoria rectilínea
Progresivos
rápidos
C  Movimientos pero sin
desplazamiento
Pendulares
ASTENOZOOSPERMIA
D  Inmóviles Ausencia de movimiento
A : > 25%
A+B: > del 50%
B  Progresivos lentos Desplazamientorecto pero
lento
El manual de la OMS sugiere que el test de vitalidad debe hacerse de
forma rutinaria en todas las muestras y considera que es obligatorio
cuando la movilidad progresiva es menor del 40%.
2. Viabilidad o vitalidad
V I T A L I D A D :
NORMAL VIVOS: ≥ 60 %
NECROZOOSPERMIA: < 60 %
Valoración de los resultados
La vitalidad puede servirnos como evaluación de los resultados de movilidad. Esto
es así porque el tanto por ciento de espermatozoides viables siempre debe ser
igual o superior al de espermatozoides móviles. Por ejemplo:
Si el resultado de la vitalidad es del
40%, no podemos admitir como
válida una movilidad del 50%,
porque para ello habría que asumir
que el 10% de los espermatozoides
muertos se mueven.
En cambio si por ejemplo el test de
vitalidad es del 40% y el de
movilidad del 35% será correcto, ya
que esto supone que un 5% de
espermatozoides vivos no se mueven,
algo absolutamente coherente.
3. Morfologia
La evaluación de la morfología de los espermatozoides consiste en el
examen detallado de 200 espermatozoides en una placa coloreada con
coloración de Papanicolaou (idealmente) o con coloración de Gram, por
duplicado
Teratozoospermia
Según la Organización Mundial de la Salud, es normal encontrar sólo
el 30% de los espermatozoides normales en los individuos fértiles,
pero se han informado estudios de individuos fértiles con un
promedio de espermatozoides con morfología normal de sólo 20%
(rango entre 15% y 35%)
- Interpretación
4. Recuento Espermático
 Valor normal: > 15 o 20 millones de espermatozoides / mL de semen
 40 millones de espermatozoides / eyaculado
Evaluar la muestra dentro de los 10-15 min (para evitar la
evaporación)
CONCENTRACIÓN Y
RECUENTO DE
ESPERMATOZOIDES
Valores normales
mayores de 15 o 20
millones/mL
Valores limites 10-15
millones/mL
Se cuentan en cámara
de Neubauer, dilución
1:20 bicarbonato de
sodio y formol o
también suero
fisiológico y agua dest
(inmoviliza
espermatozoides)
Se deben contar los
espermatozoides
totalmente
desarrollados.
Sin embargo la presencia
≥ 1 millón de Leuc
(Inflamación).
CÁLCULO
CONTEO ABSOLUTO EN CAMARA:
CALCULO PARA SABER EL NUMERO DE ESPERMATOZIDES POR ML DE SEMEN
# 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝑒𝑠𝑝𝑒𝑟𝑚𝑎𝑡𝑜𝑧𝑜𝑖𝑑𝑒𝑠
# 𝑑𝑒 𝑐𝑢𝑎𝑑𝑟𝑎𝑑𝑜𝑠 𝑙𝑒𝑖𝑑𝑜𝑠
= # 𝑒𝑠𝑝𝑒𝑟𝑚𝑎𝑡𝑜𝑧𝑜𝑖𝑑𝑒𝑠/𝑐𝑢𝑎𝑑𝑟𝑎𝑑𝑜
#
𝑒𝑠𝑝𝑒𝑟𝑚𝑎𝑡𝑜𝑧𝑜𝑖𝑑𝑒𝑠
𝑐𝑢𝑎𝑑𝑟𝑎𝑑𝑜
𝑥
1 𝑐𝑢𝑎𝑑𝑟𝑎𝑑𝑜
0.1 𝑚𝑚3
𝑥
1000 𝑚𝑚3
1 𝑚𝑙
𝑥 𝐹𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑙𝑢𝑠𝑖𝑜𝑛 = #
𝑒𝑝𝑧
𝑚𝑙
CALCULO PARA SABER EL NUMERO DE ESPERMATOZIDES POR EYACULADO
#
𝑒𝑠𝑝𝑒𝑟𝑚𝑎𝑡𝑜𝑧𝑜𝑖𝑑𝑒𝑠
𝑚𝑙
𝑥 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑒𝑦𝑎𝑐𝑢𝑙𝑎𝑑𝑜 = #
𝑒𝑝𝑧
𝑒𝑦𝑎𝑐𝑢𝑙𝑎𝑑𝑜
5. Elementos agregados
Células epiteliales
Escasas normalmente
Eritrocitos
Patológico Proceso
maligno Congestión de la
uretra o próstato-
vesicular Traumatismos



•
•
•
Aumentadas: Procesos
Manipulación excesiva
congestivos
Aglutinación
 Aglutinación (vivos) ; Anticuerpos anti esperma, deficit de hialuronidasas
 Aglutinación (Muertos): deficiencias de espermatogénesis, deficiencias
de glándulas accesorias.
Leucocitos o piocitos
•
•
Procesos infecciosos
Exposición a altas
temperaturas
Tóxicos y fármacos
Trichomonas..??
•
•
Patógenos Asociados:
Micoplasma y Ureaplasma
PARÁMETRO VALOR REFERENCIAL ALTERACIÓN
Aspecto Color blanco grisáceo
Licuefacción Completa en 20 min
Viscosidad Filancia < 2 cm
pH > 7.2
Volumen 1.5 – 5.5 ml Aspermia
Hipospermia
Hiperespermia > ml
Cantidad > 39 millones de
espermatozoides
Movilidad Movilidad progresiva Astenozoospermia
(A+B) > 50% o A > 20%
PARÁMETRO VALOR REFERENCIAL ALTERACIÓN
Concentración > 15 millones/ml Azoospermia
Oligozoospermia
Criptozoospermia
Vitalidad > 75 % de las formas no Necrozoospermia
teñidas con eosina
Morfología > 30% normal Teratozoospermia
Oligoastenoteratozoospermia
1. En el laboratorio se recibe una muestra de semen color
amarillo. El análisis es normal salvo la disminución de la
movilidad de los espermatozoides. Explique la posible
relación entre los dos resultados anormales.
La muestra contiene orina, que es
tóxica para los espermatozoides y,
por lo tanto, disminuye la
viabilidad.
Los resultados anormales de un análisis de semen son el
volumen = 1 mL y concentración de espermatozoides = 1
millón por mililitro. Establezca una causa no patológica de
estos resultados anormales.
La muestra se recolectó de modo
inadecuado y se perdió la
primera parte de la eyaculación.
1. Se entrega al laboratorio una muestra en la que se solicita determinar
la calidad de semen.
a) ¿Qué dos pruebas químicas podrían realizarse en la muestra?
b) ¿Qué otro análisis espermatico requiere la muestra?
Las pruebas de fosfatasa
ácida y alfa glucosidasa
neutra
El examen microscópico para la
presencia de espermatozoides.

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  • 2. UNIDAD III: Análisis de semen Categorizar métodos y técnicas de análisis clínico a fluidos de semen, mediante la determinación físico-químico y microscópico, para proporcionar un resultado clínico fidedigno y por tanto de calidad.
  • 3. UNIDAD III: Análisis de semen TEMA 2 • Análisis microscópico de semen: Motilidad, viabilidad, morfología y recuento de espermatozoides. Interpretación clínica • Practica Taller virtual: Análisis físico-químico y microscópico de líquido seminal
  • 5. • Cabeza: – Acrosoma; capa enzimatica a base de hialuronidasa y Acrosina para degradar zona pelúcida Nucleo; contiene los cromosomas (n) – • Flagelo – – – Segmento intermedio con mitocondrias Cola o axonema, de 11 microtúbulos Membrana o vaina que los recubre EL ESPERMATOZOIDE
  • 7. Correcta formación anatómica del aparato reproductor masculino Correcto funcionamiento fisiológico de cada parte anatómica Correcto funcionamiento hormonal  AMPLIAS PROBABILIDADES DE PODER PROCREAR Significado de una muestra normal:
  • 8. Defecto hormonal, anatómico, fisiológico, infecciones… etc  NO PODRA PROCREAR HIJOS. Significado de una muestra anormal:
  • 9. Examen microscópico Microscopio Olimpus CX31 Contraste de Fase y Campo Oscuro Sist. Computarizado Imagen y Video CAPACITACION ESPERMÁTICA Elementos agregados: Vitalidad Movilidad Cantidad o concentración
  • 10. ¿QUE SE DETERMINA EN UN ANÁLISIS MICROSCÓPICO DE SEMEN?
  • 11. - Consideraciones generales del análisis microscópico de semen. Se debe hacer un análisis microscópico inicial de la muestra sin diluir para estimar el número de espermatozoides por campo y decidir sobre la dilución a utilizar para la determinación de los parámetros microscópicos. La temperatura para evaluar la motilidad y progresión de los espermatozoides idealmente debe ser de 37°C; sin embargo, se puede hacer entre 20°C y 24°C siempre y cuando sea constante, ya que la temperatura afecta la motilidad de los espermatozoides. Todos los parámetros microscópicos se deben procesar por duplicado. (Para su realización es imprescindible un microscopio. Se aconseja además que esté dotado de contraste de fases y que cuente con la platina termostatizada a 37ºC.)
  • 12. La movilidad es uno de los parámetros más importantes en la evaluación de una muestra de semen. Un espermatozoide inmóvil es incapaz de atravesar el moco cervical femenino y mucho menos las envolturas del ovocito. 1. Motilidad o movilidad
  • 13. MOVILIDAD DE LOS ESPERMATOZOIDES Movilidad normal hacia adelante y progresivo, es fundamental para la fecundación Se debe hacer muestra de semen licuado dentro de 1H de recolección Colocar una gota (10ul) de semen en el porta objeto y taparla con cubre objeto Se evalúan 20 campos en 40X, por la movilidad y dirección Se considera normal una movilidad mínima del 50%
  • 14. NORMAL A  Desplazamiento rápido en trayectoria rectilínea Progresivos rápidos C  Movimientos pero sin desplazamiento Pendulares ASTENOZOOSPERMIA D  Inmóviles Ausencia de movimiento A : > 25% A+B: > del 50% B  Progresivos lentos Desplazamientorecto pero lento
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  • 17. El manual de la OMS sugiere que el test de vitalidad debe hacerse de forma rutinaria en todas las muestras y considera que es obligatorio cuando la movilidad progresiva es menor del 40%. 2. Viabilidad o vitalidad
  • 18. V I T A L I D A D : NORMAL VIVOS: ≥ 60 % NECROZOOSPERMIA: < 60 %
  • 19. Valoración de los resultados La vitalidad puede servirnos como evaluación de los resultados de movilidad. Esto es así porque el tanto por ciento de espermatozoides viables siempre debe ser igual o superior al de espermatozoides móviles. Por ejemplo: Si el resultado de la vitalidad es del 40%, no podemos admitir como válida una movilidad del 50%, porque para ello habría que asumir que el 10% de los espermatozoides muertos se mueven. En cambio si por ejemplo el test de vitalidad es del 40% y el de movilidad del 35% será correcto, ya que esto supone que un 5% de espermatozoides vivos no se mueven, algo absolutamente coherente.
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  • 21. 3. Morfologia La evaluación de la morfología de los espermatozoides consiste en el examen detallado de 200 espermatozoides en una placa coloreada con coloración de Papanicolaou (idealmente) o con coloración de Gram, por duplicado
  • 23. Según la Organización Mundial de la Salud, es normal encontrar sólo el 30% de los espermatozoides normales en los individuos fértiles, pero se han informado estudios de individuos fértiles con un promedio de espermatozoides con morfología normal de sólo 20% (rango entre 15% y 35%) - Interpretación
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  • 25. 4. Recuento Espermático  Valor normal: > 15 o 20 millones de espermatozoides / mL de semen  40 millones de espermatozoides / eyaculado Evaluar la muestra dentro de los 10-15 min (para evitar la evaporación)
  • 26. CONCENTRACIÓN Y RECUENTO DE ESPERMATOZOIDES Valores normales mayores de 15 o 20 millones/mL Valores limites 10-15 millones/mL Se cuentan en cámara de Neubauer, dilución 1:20 bicarbonato de sodio y formol o también suero fisiológico y agua dest (inmoviliza espermatozoides) Se deben contar los espermatozoides totalmente desarrollados. Sin embargo la presencia ≥ 1 millón de Leuc (Inflamación).
  • 28. CONTEO ABSOLUTO EN CAMARA: CALCULO PARA SABER EL NUMERO DE ESPERMATOZIDES POR ML DE SEMEN # 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝑒𝑠𝑝𝑒𝑟𝑚𝑎𝑡𝑜𝑧𝑜𝑖𝑑𝑒𝑠 # 𝑑𝑒 𝑐𝑢𝑎𝑑𝑟𝑎𝑑𝑜𝑠 𝑙𝑒𝑖𝑑𝑜𝑠 = # 𝑒𝑠𝑝𝑒𝑟𝑚𝑎𝑡𝑜𝑧𝑜𝑖𝑑𝑒𝑠/𝑐𝑢𝑎𝑑𝑟𝑎𝑑𝑜 # 𝑒𝑠𝑝𝑒𝑟𝑚𝑎𝑡𝑜𝑧𝑜𝑖𝑑𝑒𝑠 𝑐𝑢𝑎𝑑𝑟𝑎𝑑𝑜 𝑥 1 𝑐𝑢𝑎𝑑𝑟𝑎𝑑𝑜 0.1 𝑚𝑚3 𝑥 1000 𝑚𝑚3 1 𝑚𝑙 𝑥 𝐹𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑙𝑢𝑠𝑖𝑜𝑛 = # 𝑒𝑝𝑧 𝑚𝑙 CALCULO PARA SABER EL NUMERO DE ESPERMATOZIDES POR EYACULADO # 𝑒𝑠𝑝𝑒𝑟𝑚𝑎𝑡𝑜𝑧𝑜𝑖𝑑𝑒𝑠 𝑚𝑙 𝑥 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑒𝑦𝑎𝑐𝑢𝑙𝑎𝑑𝑜 = # 𝑒𝑝𝑧 𝑒𝑦𝑎𝑐𝑢𝑙𝑎𝑑𝑜
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  • 32. 5. Elementos agregados Células epiteliales Escasas normalmente Eritrocitos Patológico Proceso maligno Congestión de la uretra o próstato- vesicular Traumatismos    • • • Aumentadas: Procesos Manipulación excesiva congestivos Aglutinación  Aglutinación (vivos) ; Anticuerpos anti esperma, deficit de hialuronidasas  Aglutinación (Muertos): deficiencias de espermatogénesis, deficiencias de glándulas accesorias.
  • 33. Leucocitos o piocitos • • Procesos infecciosos Exposición a altas temperaturas Tóxicos y fármacos Trichomonas..?? • • Patógenos Asociados: Micoplasma y Ureaplasma
  • 34. PARÁMETRO VALOR REFERENCIAL ALTERACIÓN Aspecto Color blanco grisáceo Licuefacción Completa en 20 min Viscosidad Filancia < 2 cm pH > 7.2 Volumen 1.5 – 5.5 ml Aspermia Hipospermia Hiperespermia > ml Cantidad > 39 millones de espermatozoides Movilidad Movilidad progresiva Astenozoospermia (A+B) > 50% o A > 20%
  • 35. PARÁMETRO VALOR REFERENCIAL ALTERACIÓN Concentración > 15 millones/ml Azoospermia Oligozoospermia Criptozoospermia Vitalidad > 75 % de las formas no Necrozoospermia teñidas con eosina Morfología > 30% normal Teratozoospermia Oligoastenoteratozoospermia
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  • 39. 1. En el laboratorio se recibe una muestra de semen color amarillo. El análisis es normal salvo la disminución de la movilidad de los espermatozoides. Explique la posible relación entre los dos resultados anormales. La muestra contiene orina, que es tóxica para los espermatozoides y, por lo tanto, disminuye la viabilidad.
  • 40. Los resultados anormales de un análisis de semen son el volumen = 1 mL y concentración de espermatozoides = 1 millón por mililitro. Establezca una causa no patológica de estos resultados anormales. La muestra se recolectó de modo inadecuado y se perdió la primera parte de la eyaculación.
  • 41. 1. Se entrega al laboratorio una muestra en la que se solicita determinar la calidad de semen. a) ¿Qué dos pruebas químicas podrían realizarse en la muestra? b) ¿Qué otro análisis espermatico requiere la muestra? Las pruebas de fosfatasa ácida y alfa glucosidasa neutra El examen microscópico para la presencia de espermatozoides.