1. UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA PLATA
FACULTAD DE CIENCIAS VETERINARIAS
CURSO: MICROBIOLOGÍA I
ACTIVIDAD PRESENCIAL OBLIGATORIA 4
PRUEBAS FISIOLÓGICAS Y BIOQUÍMICAS
Méd.Vet. Fabiana Moredo

2. MARCHA BACTERIOLOGICA
• Toma de muestra
• Observación
• Cultivo
• Pruebas fisiológicas y bioquímicas
• Pruebas serológicas
• Pruebas complementarias

3. PRUEBAS BIOQUIMICAS Y
FISIOLOGICAS
Objetivo
Identificación de microorganismos,
morfológica y tintorialmente semejantes, a
través de sus características fisiológicas y
bioquímicas.

4. FERMENTACIÓN DE HIDRATOS DE
CARBONO
• Determinar la capacidad de un microorganismo de
fermentar un H de C específico, incorporado a un
medio básico, produciendo ácido o ácido con gas
visible.
• Medios empleados: Caldo Rojo de Fenol (pH 7,4)
• Sustrato: glucosa, lactosa, sacarosa, manitol,
dulcitol, etc.
• Indicador de pH: Rojo de Fenol

5. INDOL
• Determinar la capacidad de un microorganismo
de desdoblar el indol de la molécula de
triptofano
• Medios empleados: Caldo triptofano o peptona
SIM, BAM, MIO
• Sustrato: triptofano o peptona
• Reactivo: Ehrlich (alcohol etílico,
dimetilaminobenzaldehído, ác. clorhídrico)

6. ROJO DE METILO
• Comprobar la capacidad de un microorganismo de
producir y mantener estables los productos terminales
ácidos de la fermentación de la glucosa y vencer la
capacidad amortiguadora del sistema.
• Medios empleados: Caldo RM-VP (Clark y Lubs)
• Sustrato: glucosa
• Indicador de pH: Rojo de Metilo

7. VOGES-PROSKAUER
• Determinar la capacidad de algunos microorganismos
de producir acetilmetilcarbinol, producto final
neutro, a partir de la fermentación de la glucosa.
• Medios empleados: Caldo RM-VP (Clark y Lubs)
• Sustrato: glucosa
• Reactivo: BARRIT solución A: alfa-naftol
solución B: HOK 40 %

8. CITRATO
• Determinar si un microorganismo es capaz de utilizar
citrato de sodio como única fuente de carbono
• Medios empleados: Agar Citrato de Simmons
• Sustrato: citrato de sodio
• Indicador de pH: azul de bromotimol

9. CATALASA
• Comprobar la presencia de la enzima catalasa
• Medios empleados: cultivo puro
• Reactivo: peróxido de hidrógeno 30%

10. OXIDASA
• Determinar la presencia de las enzimas oxidasas.
• Medios empleados: cultivo puro
• Reactivo:
Reactivo de Kovacs:
• papel embebido con dimetil-p-fenilendiamina y alfa-
naftol
• Diclorhidrato de tetrametil-p-fenilendiamina 1%.

11. UREASA
• Determinar la capacidad de un microorganismos de
desdoblar la urea, formando dos moléculas de
amoníaco por acción de la enzima ureasa.
• Medios empleados: Medio base de Christensen
• Sustrato: Urea 40%
• Indicador de pH: Rojo de Fenol

12. ACIDO SULFIDRICO (SH2)
• Determinar si se ha liberado SH2 por acción enzimática
de los aminoácidos azufrados produciendo una reacción
visible de color negro.
• Medios empleados: KLIGER, TSI, SIM, LIA, Papel
embebido con acetato de plomo
• Sustrato: aminoácidos azufrados o tiosulfato de sodio
• Reactivos: acetato de plomo o citrato férrico de amonio

13. MEDIOS COMBINADOS
• Agar hierro tres azúcares
(TSI)
• SIM

14. TSI
• Fermentacion de H de C:
sustratos: glucosa, lactosa, sacarosa
indicador de pH: Rojo de Fenol
• Producción de SH2:
sustrato: tiosulfato de sodio
reactivo: citrato férrico de amonio

15. SIM
• Producción de Indol
sustrato: peptonas
• Movilidad
•Producción de SH2
sustrato: tiosulfato de sodio
reactivo: citrato férrico de amonio