para el manejo correcto del estudio de rutina en el laboratorio de análisis clinicos

2.  Las reacciones febriles son un conjunto de pruebas de
aglutinación que buscan apoyar o descartar el diagnóstico
de infecciones causadas por Salmonella typhi, Salmonella
paratyphi y Brucella abortus, agentes etiológicos de
infecciones comúnmente conocidas como Fiebre Tifoidea o
Fiebre Ondulante, Paratifoidea y, Fiebre de Malta o
Brucelosis respectivamente. Para esto se utilizan antígenos,
que constan de suspensiones bacterianas de cepas
patógenas específicas que han sido muertas por procesos
especiales que dejan íntegros los antígenos contra los que
reaccionan los anticuerpos producidos por el sujeto
infectado.

3.  Estos antígenos febriles son:
 Antígeno “O” (somático) de
Salmonella typhi
 Antígeno “H” (flagelar) de
Salmonella paratyphi
 Antígeno flagelar de S. Paratyphi “A”
 Antígeno flagelar de S. Paratyphi “B”
(b, 1 y 2)
 Antígeno completo de Brucella
abortus (Br)
 Antígeno Proteus Ox-19

4.  La reacción de Widal (Antígeno Paratífico A, Antígeno
Paratífico B, Antígeno Tífico H, Antígeno Tífico O), es
un método serológico que se utiliza frecuentemente
en el diagnóstico de la fiebre tifoidea y de otras fiebres
intestinales asociadas al género Salmonella.
 La reacción de Huddleson (Antígeno Brucella
abortus)es un método serológico auxiliar en el
diagnóstico de la brucelosis.
 La reacción de Weil-Felix (Antígeno Proteus vulgaris
Ox-19) es un método serológico en el cual se emplea
un antígeno común compartido entre cepas de
Proteus vulgaris Ox-19 con las Rickettsias causantes
de tifo exantemático y tifo murino o fiebre manchada.

5. En las reacciones febriles se incluye:
 Fiebre tifoidea (Salmonella). La reacción de Widal en un
método serológico usado comúnmente en el diagnóstico de las
fiebres tifoideas, entérica y ondulante, la reacción mide el título
del suero contra una suspensión de microorganismo conocidos
 La reacción de Widal es un test basado en el principio de
aglutinación antígeno-anticuerpo, donde se determina la
presencia de anticuerpos contra el antígeno O y H de la
Salmonella typhi para el serodiagnóstico de fiebre tifoidea.

6.  La fiebre tifoidea es una
enfermedad infectocontagiosa de
alta prevalencia a nivel mundial, es
causada por la bacteria Salmonella
typhi.
 Cuadro clínico: La fiebre tifoidea
está caracterizada por fiebre alta
constante (40º), sudoración
profusa, gastroenteritis y diarrea.
Menos comúnmente puede
aparecer un sarpullido de manchas
aplanadas de color rosáceo
(roséola).Tradicionalmente se
divide en cuatro fases, durando cada
una de ellas una semana
aproximadamente.

7.  Primera semana: Durante esta fase sube lentamente la temperatura con una
bradicardia relativa, malestar general, dolor de cabeza y tos. Se ha observado
Epistaxis en una cuarta parte de los casos. Hay leucopenia con eosinopenia .
 Segunda semana: Durante esta fase se produce la postración. Llegando la
fiebre a los 40º C. El delirio es frecuente .En un tercio de los pacientes se han
observado puntos rojos en la parte inferior del pecho y abdomen. Hay
respiración agitada. La diarrea puede también ocurrir en esta fase, de
apariencia verde y olor característico con apariencia de puré de guisantes. No
obstante el estreñimiento también es frecuente. El Bazo e hígado están
inflamados con un aumento del nivel de transaminasas.
 Tercera semana: En esta semana si la fiebre tifoidea no se trata, las
complicaciones son frecuentes: Hemorragias Intestinales debidas a la
congestión de las Placas de Peyer.
 Finales de Tercera semana/Principios de la cuarta: La temperatura
corporal se va restableciendo, pero el debilitamiento aun persiste
 El diagnóstico definitivo de Fiebre tifoidea se establece mediante el
aislamiento de Salmonella en cultivo (hemocultivo, mielocultivo) de un
paciente con cuadro clínico compatible

8. Brucelosis (Brucella abortus).
 La Brucelosis (conocida también como fiebre de Malta, fiebre ondulante,
enfermedad de Bang o fiebre del Mediterráneo) es una Zoonosis es decir
una enfermedad que es transmitida de los animales al humano causada
por bacterias del genero Brucella. La enfermedad se adquiere por ingerir
alimentos contaminados o mantener un estrecho contacto con el ganado.
La brucelosis en el hombre se transmite por la ingesta de leche, sus
productos y derivados contaminados, no pasteurizados, por contacto con
productos, subproductos y desechos como tejidos o excreciones de
animales enfermos,.
 Cuadro clínico:
 Es una enfermedad que se autolimita o se vuelve crónica. Muchos
pacientes padecen infecciones asintomáticas.
 • La forma aguda de la brucelosis se caracteriza por fiebre que en la
mayoría de los casos es alta e intermitente (ondulante), acompañada de
cefalea intensa frontal y occipital, y diaforesis.
 • En la forma crónica, las manifestaciones más comunes son:
 Síndrome febril: habitualmente de poca intensidad en la mayoría de los
casos
 Digestivas: esplenopahetomegalía, hepatitis.

 Diagnóstico:
 Existen varios metodos serologicos para el diagnóstico de Brucelosis como
el Rosa de Bengala, 2-mercapto-etanol, y la reacción de Huddleson, esta
ultima es la utilizada en la prueba de reacciones febriles.

9. Rickettsiosis (Proteus 0X-19):
 Las Rickettsias son bacterias cocobacilares, muchas de ellas son
transmitidas por vectores como pulgas, garrapatas y piojos. En general
la Rickettsiosis se considera una zoonosis, siendo el humano un
huesped accidental excepto por el tifo epidémico (transmitido por
piojos)
 Son parásitos intracelulares estrictos. Son muy sensibles y raramente
sobreviven fuera del huésped (reservorio o vector
 La Rickettsiosis se puede dividir en 3 grandes grupos
 1. Grupo Tifus: tifo epidémico, por Rickettsia prowazekii, transmitido
por piojos (Poulex ivitans) y tifo clásico endémico, por Rickettsia typha
por la pulga.
 2. Grupo de Fiebre manchada: Rickettsia rickettsii, que implica más de
30 especies, transmitido principalmente por ácaros y pulgas (Fiebre
manchada de las montañas rocallosas).
 3. Tifus Scrub: Orientia tsutsugamushi, también llamado tifo de los
matorrales, transmitido por ácaros
 Cuadro clínico: El periodo de incubación es de aproximadamente 7
días y varia de 2 a 14 días. Los síntomas en general, se caracterizan por
fiebre, cefalea (dolor de cabeza), rash (erupciones cutáneas), dolor
abdominal, hepatomegalia, esplenomegalia y síntomas respiratorios
como tos, entre otros síntomas, acompañados de anormalidades en las
muestras de laboratorios como: anemia, neutrofilia, elevación de las
enzimas hepáticas, .

10. Técnica
 FUNDAMENTO
 La prueba se basa en una reacción inmunológica entre los
anticuerpos séricos y el antígeno correspondiente
produciendo una reacción de aglutinación macroscópica.

11. VOLUMEN DEL SUERO TITULO
 0.08 mL 1 : 20
 0.04 mL 1 : 40
 0.02 mL 1 : 80
 0.01 mL 1 : 160
 0.005 mL 1 : 320

12. MÉTODO DE TITULACIÓN EN TUBO:
 Mezcle bien la suspensión de antígeno mediante agitación suave; prepare una dilución 1:20 del antígeno a utilizar
en solución salina.
 1. Colocar 7 tubos de 13 x 100 mm en una gradilla para cada antígeno a probar, marcándolos del 1 al 6 y el tubo 7
como control.
 2. Añadir al tubo 1, 0.9 mL de solución salina y 0.5 mL a los 6 tubos restantes.
 3. Añadir 0.1 mL del suero a probar al tubo número 1, mezcle bien y transfiera 0.5 mL al tubo número 2.
 4. Continúe esta operación hasta el tubo número 6, eliminar 0.5 mL de esta dilución. El tubo 7 (Control negativo)
tendrá únicamente solución salina.
 5. Añadir 0.5 mL del antígeno diluido 1:20 a cada uno de los 7 tubos.
 6. Agitar bien la gradilla para mezclar el antígeno y el suero e incubar en baño de agua. El tiempo y temperatura
recomendado es el siguiente.
 Antígeno Temperatura Tiempo de incubación
 Tífico “O” 48-50ºC 18-24 Horas
 Tífico “H” 37ºC 2 Horas
 S. paratyphi “A” y “B” 48-50ºC 2 Horas
 Brucella abortus 37°C 48 Horas
 Proteus OX-19 37ºC 18-24 Horas
 7. Después de la incubación, saque la gradilla que contiene los tubos del baño y observe la aglutinación. La
utilización de una fuente de luz directa contra un fondo negro dará mejores condiciones para la lectura.
 8. Registrar los resultados como sigue :
 4+ Todos los organismos 100% aparecen sedimentados en el fondo del tubo y el sobrenadante es totalmente claro.
 3+ Aproximadamente el 75% de los organismos se encuentran sedimentados y el sobrenadante es ligeramente
turbio.
 2+ Aproximadamente el 50% de los organismos se encuentran sedimentados y el sobrenadante es moderadamente
turbio.
 1+ Aproximadamente el 25% de los organismos se encuentran sedimentados y el sobrenadante es turbio.
 Negativo No se observa aglutinación y la suspensión es turbia.

13. MÉTODO DE PRUEBA RÁPIDA EN PLACA
 Marcar en una placa de vidrio correctamente indicando
el antígeno que se este usando.
 NOTA:
 El reactivo así como los sueros, deben alcanzar la
temperatura ambiente para comenzar la prueba.
 1. Depositar en sitios diferentes de la placa las siguientes
cantidades del suero a analizar: 0.08 mL, 0.04 mL, 0.02
mL, 0.01 mL y 0.005 mL (EL SUERO DEBE ESTAR
TOTALMENTE CLARO).
 2. Agitar el antígeno a utilizar para tener una suspensión
uniforme.
 3. Añadir 30 μL de la suspensión de antígeno a cada una
de las diferentes cantidades de suero. Se recomienda
utilizar pipetas automáticas (el gotero incluido
proporciona una gota de 30-40 μL).
 4. Mezclar el antígeno y el suero utilizando un aplicador
diferente para cada una de las cantidades de suero.
 5. Girar la placa manualmente o utilizando un agitador
mecánico (120 rpm) durante 2 minutos.
 6. Realizar la lectura utilizando una fuente de luz directa
y observar la aglutinación macroscópica.
 7. Se recomienda incluir controles Positivo y Negativo

15. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
 1. Algunos sueros normales pueden dar un titulo de 1:20 a
1:40 y hasta 1:80 pero esto puede ser debido a vacunaciones
o alguna infección anterior. No siempre se presenta
producción de aglutininas en infecciones bacterianas