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Ver: 1.0 27 Abril 2011 Dpto. de Ingeniería Medica
Lic. TM Javier Quiroz Castillo
Aplicaciones / Marketing
ANALISIS E INTERPRETACIÓN DE LAS ALARMAS,
DISPERSOGRAMAS E HISTOGRAMAS
Analizador Hematológico BC-5800

Familia de
Productos Mindray
2
 Oficinas
Shenzhen,
P.R.China
 Ingresos:
547.5 Mill.
USD (2008)
 Empleados:
5580
 Posicionamiento
de Mercado:
Mayor compañía
China en Desarrollo

Familia de Analizadores
Hematológicos

Imagen del BC-5800
5 diferenciales, 29 parametros
Hasta 90 muestras por hora
Laser scatter + Chemical dye +
Flow cytometry technology
Canal independiente y método optico
para la medición de Basófilos
Powerful capability to flag abnormal cells
Optional autoloader, barcode scanner
Large TFT touch screen
Large storage capacity: up to 40,000 samples
Recommended or customizable decision rules
for re-exam abnormal samples
Support uni- or bi-directional LIS

PLT
Eos
Lymph
Mono
Neutro
Baso
RBC
Estudio de Células Sanguíneas

Secuencia normal de
Tamaño
Después de los Lisantes
Tecnología 3 diff?

Cinco grupos Leucocitarios
Lymphocyte 25 ~ 30%
Monocyte 3 ～8 %
Neutrophil 50 ~70%
Basophil 0 ～1 %
Eosinophil 0.5 ～3%
Tecnología 5 diff?

Estructura simple y diferente tamaño Estructura compleja y tamaño medio
Gran núcleo que ocupa
casi toda la célula
Más citoplasma que el linfocito
Gránulos pequeños,
núcleo multilobular
Gránulos grandes y
oscuros; núcleo
lobulado
Gránulos grandes
rojo/naranja; núcleo
púrpura bilobulado
Similitudes y diferencias

Existen 5 diferentes tipos de Leucocitos ( WBC)
Lymphocyte Monocyte Neutrophil Eosinophil Basophil
Tamaño pequeño, gran
núcleo con relación a
citoplasma, el mayor
constituyente del
sistema inmune.
Grande, citoplasma sin
gránulos, interviene en la
ingestión de partículas
extrañas, como bacterias o
parásitos.
Gránulos en citoplasma
de color rosado, marcador
de etapa aguda de la
inflamación.
Gránulos de color
naranja, gruesos ,
relacionados con
infecciones parasitarias.
Menos común de todos,
gránulos de color azul
oscuro, relacionados con
infecciones micóticas.
Granulocitos
LYM MON NEU EOS BAS
Diferenciación de Leucocitos
5 Diff.

E
D
B
C
A
Tamaño
Complejidad, gránularidad (vacuolas, artefactos)
WBC: White Blood Cell
Combinación de Tamaño y Complejidad

¿Cómo Diferenciar los Diferentes
Tipos de Leucocitos?
Utilizando sus diferentes características, TAMAÑO Y
COMPLEJIDAD CELULAR
Para eso utilizaremos cuatro tecnologías combinadas:
Citometría de Flujo
Dispersión de Laser
Tinción Citoquímica
Impedancia Eléctrica

Tecnología Avanzada
WBC 5-diff technology

Celulas inyectadas en una
cámara de flujo que esta
localizado en el paso óptico de
una fuente de luz, usualmente un
laser.
La cámara de flujo contiene un
líquido que fluye rapidamente : el
fluido envolvente que lleva la
muestra a alta velocidad por el
paso de luz.
Las células mantienen su
orientación y posición en el fluido
debido a que obedecen las
característricas del flujo laminar y
atraviesan en fila de uno el paso
óptico.
WBC Tecnología
Citometría de Flujo

La dispersión de Luz ocurre
cuando la partícula reflacta la
luz que incide sobre ella, esto
depende de las características
físicas de la partícula.
-Forward scatter (FS): Tamaño
-Side scatter (SS): Complejidad
1 - 5°
6 - 20°
WBC Tecnología
Dispersión de Luz Laser

1
3
2
1 Muestra
2 Laser
3 Lentes
5
4
Dispersión de Laser de Ángulo Múltiple
Dispersión de ángulo
mayor (MAS)8~20
Granularidad (Complex)
Dispersión de ángulo
Menor (LAS)2~5
Volumen

Teoría de Mie
• En células diferentes de diferente tamaño (Monoc. y Linf.)
• El ángulo bajo las diferencia por tamaño
LAS
Laser

Teoría de Mie
• En células diferentes pero del mismo tamaño (granulocitos)
• Ángulo mayor refleja la complejidad celular
MAS
Laser

RBC
Otros
WBC
EOS
Cámara de diferencial
WBC Tecnología
Tinción Química

BASO
other
WBC
RBC
WBC technology
Chemical dye
BASO Channel

WBC BAS%
BASO scattergram
WBC/Baso
BAS# can be calculated according to BAS%
WBC total result is counted in BASO channel

BAS% WBC BAS#
NEU% LYM% MON% EOS%
* =
*
NEU# LYM# MON# EOS#
5 part result
Finally…

DISPERSOGRAMA / SCATTERGRAMA
DEFINICIÓN
Gráfico estadístico que
representa la distribución de
dos variables en una
muestra. Una variable se
representa gráficamente en
el eje vertical; la otra en el
horizontal. Un
dispersograma demuestra
el grado o tendencia de
presentación de las
variables en relación mutua.

INTERPRETACIÓN DEL
DISPERSOGRAMA
Lymph
Mon
Ghost
Neu
FS : Frontal Scatter / Dispersión Frontal / Información
sobre el Tamaño celular
SS : Side Scatter / Dispersión Lateral / Información sobre
Complejidad Celular

Entendiendo el Dispersograma Normal

Dispersograma de una muestra NORMAL

Dispersograma de una muestra normal
Dispersograma BASO
1. The 4 parts except BASO should be close to the lower left corner.
2. The profile of lower part should be smooth, not cut by a straight line.
RBC Ghost
Mono
Lymph
Neu
Eos
Baso
4 Parts

Estructura compleja
Estructura simple
Pequeño
Estructura interna del
Linfo es mas simple que la
del EOS.
Neutro es complejo y
grande
Mono es más grande que
el Linfo
DIFF
Grande

Estructura compleja
Estructura simple
Grande
Pequeño
Lymph
Neutro
Eos
Mono
Disminuyen
grandemente
Baso mantiene su
mismo tamaño
BASO

Dispersograma Anormal y Su Significado

Lym
Mon
LIC
NRbc
ALY
Ghost
Left Shift
ALY
Muestras Anormales:
Banderas

Lymphocytosis Neutrophilia
Leucopoenia
Monocytosis
Eosinophilia
Dispersograma de una muestra ANORMAL

Dispersograma de una muestra ANORMAL
ATL LIC
Lyse resistant
Left shift

Dispersograma Anormal
Mov Izq.
LIC

Dispersograma Anormal
ALY

Ganancia inadecuada
Ganancia baja Ganancia alta

Celda de flujo sucia o con coágulos

ALARMA
Señal por medio
de la cual se
informa sobre la
presencia real o
inminente de
una amenaza,
aviso de la
probabilidad de
que ocurra un
suceso.
DEFINICIÓN

SISTEMA DE ALARMAS
1.
Límite
Excedido
3.
Se Requiere
Confirmación
Microscópica
2.
Banderas

¿Por qué se requiere
confirmación microscópica?
En estado patológico las
células alteran sus
características celulares
normales
Tamaño : células
activadas son mas grandes
Complejidad : Células
activadas desarrollan
estructuras que
RUO
Atypical
Lymphocytes (#,%)
Large Immature
Cell (#,%)

Superposición de poblaciones
Como
consecuencia de
esto las células no
se encontraran en
las zonas donde
normalmente se
ubicaban. Y es
posible que las
poblaciones se
superpongan no
permitiendo asi una
identificación
definitiva.
35
65

ocasiones, mi
lámina no
concuerda con
el resultado
del
analizador?
• Diferencia de método,
recordar que el analizador
cuenta miles de células y
el observador 100.
• Extensión de la muestra,
de la aguja, o del tubo?
• Fragilidad de los
eosinófilos
• Técnica de lectura (incluyo
los extremos?)
• Alteraciones debido a la
preparación del colorante.
• Densidad de la muestra.
Recordar que en
raras ocasiones la
lectura microscópica
hecha por dos
operadores
diferentes coincide
completamente

HISTOGRAMAS, EL
PRINCIPIO DE
COULTER
Luego de producida la acción del
lisante las células son medidas y
contadas por el método de
impedancia (recordar que por el
principio de Coulter el número de
pulsos producidos por el paso de una
partícula con carga de una solución a
otra conectas y unidas mediante un
registrador de voltaje equivale al
número de partículas que se
desplazan de una solución a otra, y la
duración del pulso es directamente
proporcional al volumen de la
partícula.)

HISTOGRAMAS
En estadística, es la
representación gráfica de
una variable, en forma de
barras, donde la altura de
cada barra es proporcional
a la frecuencia de los
valores representados.
En el eje vertical se
presentan las frecuencias.
En el eje horizontal se
presentan los valores de las
variables

HISTOGRAMAS
El histograma es un grafico
construido mediante la
representación de dos variables:
a.- Volumen de la partícula, en el eje
X (Horizontal), en femtolitros
b.- Número de partículas, eje Y
(Vertical)
El analizador presenta 3 histogramas
WBC, Baso
Glóbulos Rojos
Plaquetas
El analizador separa los pulsos en
umbrales y canales.

HISTOGRAMAS
Traducción de los pulsos en un Histograma

HISTOGRAMAS
Curva de datos primarios

HISTOGRAMA DE
PLAQUETAS
Observe que la distribución de la
población no es simétrica, esto es
normal debido a que las plaquetas
son restos celulares de forma y
tamaño variable, una plaqueta joven
es de mayor tamaño que una
senescente, si bien el límite
aceptado para una plaqueta normal
son 12 fl. Eso quiere decir que el
promedio de la población (el pico)
debería encontrarse siempre al lado
izquierdo de la flecha, como se
observa en el gráfico.

PDW
MPV
PLT
PCT =
* MPV
10000
PLT series
Histogram

HISTOGRAMA DE PLAQUETAS
Un gráfico que siga la línea roja debe
interpretarse como posible
agregación plaquetaria (el origen
intra o extravascular de la misma no
puede determinarse) o con un
aumento en el número de plaquetas
grandes, fragmentos celulares
(membranas de glóbulos rojos)
Un gráfico que siga la línea verde
debe interpretarse como interferencia
producida por microcitosis marcada,
glóbulos rojos de menos de 30
fl.(recordar que tanto plaquetas como
glóbulos rojos se miden por
impedancia en una misma cámara y
de manera simultánea.)

HISTOGRAMA DE
PLAQUETAS
Una agregación plaquetaria lleva
consigo una disminución en el
número de plaquetas (2 o más
plaquetas agregadas son contadas
como una de mayor tamaño).
Por lo tanto cada vez que se
encuentre una alteración en la
forma del histograma de
plaquetas, debe investigarse
microscópicamente la muestra en
busca de agregación plaquetaria.

PLT series
P-LCC/P-LCR
S2 representa el número de plaquetas grandes, y S1+S2 representa el recuento total
de plaquetas
PLT
P-LCC = * P-LCR

P-LCC y P-LCR estan relacionados.
P-LCC Platelets-Large Cells Count
P-LCR Platelets-Large Cells Ratio
PLT
P-LCC = * P-LCR

PLT: Platelet
Clinical application
PLT P-LCR Clinical Cases
Normal (100-300*109/L) Normal (11-45%) ~
Increased platelet destruction
Reactive thrombocytosis
~ Thalassanemia
~ Platelet dysplasia

HISTOGRAMA DE
GLOBULOS ROJOS
El Histograma de Glóbulos Rojos se aprecia
como una distribución cercana a la normal.
Observe la distribución casi simétrica de la
población con el pico de la población
cercana a los 87 fl. Observe además que
existen hematíes debajo de los 50 fl. Y
encima de los 100 fl.
El ancho de base de la campana representa
el nivel de variabilidad de la población,
(Anisocitosis/poiquilocitosis)
La posición de la campana sobre el eje
horizontal representa la tendencia Micro,
Normo o Macrocítica de la población.

Case Presentation
Normal people, the RBC
histogram shape is in perfect
Gaussian distribution.
Dimorphologic RBC histogram,
indicating anisocytosis. From a
rectal cancer patient
Microcytosis, the RBC
dominant peak moves to left.
From a 34-year old
outpatient.
Dimorphologic RBC histogram.
From a recovery of Iron-
deficiency anemia treatment
patient.

Sample
Rotatory
Valve
DIFF Channel
Flow
Cytometry
Laser
Scatter
Scattergram
RBC
PLT
HGB
Colorimetry
Impedance
LH Lyse
Aperture
BASO Channel
4 channels for BC-5800
5 reagents in 4 channel
HGB Channel
LYM
MON
NEU
EOS
BAS
WBC
HGB
RBC
PLT
RBC Channel

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