La degradación del suelo en los ecosistemas agrícolas. Seminario Seminario "E...
Laboratorio citoesqueleto 1
1. Biología Celular
Laboratorio Citoesqueleto
Prof. Diana Cárdenas Caro
MARCO CONCEPTUAL
Las células eucariotas también poseen un “sistema esqueletico”, un citoesqueleto, que tiene
funciones análogas al esqueleto de los animales (Karp, 2009). El citoesqueleto o esqueleto
del citoplasma, es un armazón formado por una densa red de fibras de proteínas que
proporciona a las células resistencia mecánica y soporte importante para mantener la
forma, capacidad para moverse, transportar materiales dentro de la célula y el movimiento
de organelos (Angulo et al., 2012).
Hasta hace poco se supuso que el citoesqueleto era una innovación exclusiva de los
eucariotas y por tanto inexistente en las células procariotas. Ahora se sabe que ciertos
procariotas contienen proteínas similares a la tubulina y la actina que se polimerizan en
filamentos citoplásmicos que realizan actividades semejantes a las del citoesqueleto (Karp,
2009).
El citoesqueleto es muy dinámico y está en continuo cambio porque las proteínas que lo
constituyen pueden acoplarse y desacoplarse según sea conveniente (Mader, 2007). El
citoesqueleto se compone de tres estructuras filamentosas bien definidas: microtúbulos,
microfilamentos y filamentos intermedios, que en conjunto constituyen una red
interactiva. Cada uno de los tres tipos de filamentos citoesqueléticos es un polímero de
subunidades proteicas unidas mediante enlaces débiles no covalentes (Karp, 2009).
Los microtúbulos son tubos largos, huecos y sin ramificaciones compuestos por
subunidades de la proteína tubulina. Se les conoce como organelos microtubulares a los
cilios, flagelos y centríolos debido a que están constituidos de microtúbulos, uno (de los
tres) constituyentes del citoesqueleto. Los cilios y los flagelos son apéndices locomotores
que salen de ciertas células. Los flagelos y los cilios de las células eucariotas son delgadas
prolongaciones móviles que poseen una estructura y un mecanismo de movimiento común;
la diferencia entre ellos es que los cilios son en gran cantidad y mucho más cortos, mientras
que los flagelos son pocos y más largos. Los cilios y flagelos se mueven constantemente,
por lo que requieren de una gran cantidad de energía liberada por las mitocondrias que se
localizan cerca de los cuerpos basales (Angulo et al., 2012).
Los microfilamentos son estructuras sólidas más delgadas, a menudo organizadas en una
red ramificada y formados por la proteína actina (Karp, 2009). La presencia de los
filamentos de actina en la membrana plasmática favorece la formación de pseudópodos o
falsos pies, que permiten el movimiento ameboide (de arrastre) del protista Amoeba
(amiba), de nuestros glóbulos blancos y de células cancerosas. Los filamentos de actina
empujan la membrana plasmática hacia afuera, formando protuberancias llenas de
citoplasma: los pseudópodos. Las contracciones de los microfilamentos en el extremo
opuesto de la célula empujan al citoplasma hacia adelante en la dirección del movimiento
(Angulo et al., 2012).
2. Biología Celular
Laboratorio Citoesqueleto
Prof. Diana Cárdenas Caro
Muchos tipos de células tienen microvellosidades, que son proyecciones de la membrana
plasmática que aumentan el área superficial de la célula para el transporte de materiales a
través de dicha membrana. Las microvellosidades están constituidas de haces de
microfilamentos que se extienden y retraen como resultado del ensamblaje y desensamblaje
de estos microfilamentos (Angulo et al., 2012).
Los filamentos intermedios son fibras resistentes, similares a cuerdas, formadas por
diversas proteínas relacionadas (Karp, 2009). Los filamentos intermedios funcionan
principalmente como bastones de refuerzo para resistir la tensión, pero también ayudan a
fijar ciertos organelos. Por ejemplo, el núcleo suele conservar su posición gracias a una
jaula entretejida de estos filamentos. Algunos filamentos intermedios soportan la envoltura
nuclear, otros sostienen la membrana plasmática y forman parte de las uniones entre célula
y célula. En la piel, los filamentos intermedios, hechos de la proteína queratina, otorgan
gran resistencia mecánica a las células cutáneas.
OBJETIVOS
• Reconocer las estructuras celulares constituidas por los tres tipos de estructuras
filamentosas del citoesqueleto.
• Identificar organismos del Reino Protista como representantes del movimiento que
otorgan los microtúbulos en apéndices como cilios y flagelos.
• Reconocer el movimiento realizado por el flagelo presente en los espermatozoides.
MATERIALES
Materiales que debe llevar el estudiante Materiales que se encuentran en el
laboratorio
• Bata de laboratorio, guantes desechables,
gorr y tapabocas
• Cuaderno de laboratorio y guía de
laboratorio
• Papel para lentes
• Láminas portaobjetos y cubreobjetos
• Muestra de agua de río, estancada o de
charco y agua procedente de solución con
materia orgánica. Deben traerse en frascos
debidamente rotulados tapados con una tela
lienzo o gasa.
• Una muestra de semen fresco
Microscopio
Solución salina
Pipeta Pasteur
3. Biología Celular
Laboratorio Citoesqueleto
Prof. Diana Cárdenas Caro
METODOLOGÍA
PREPARACIÓN DE CÉLULAS PROTISTAS. Reconocimiento de microbtúbulos y
microfilamentos.
Tome una gota del agua estancada y colóquela sobre el portaobjetos. Puede adicionar un
poco de la materia orgánica presente. Coloque el portaobjetos.
Recuerde los pasos que se siguen para una precisa observación en el microscopio. Se
utilizarán primero los objetivos de menor aumento con el fin de centrar la preparación y
determinar la zona de mejor visualización. Después se cambia a los de mayor aumento
hasta llegar al más conveniente (10x ó 40x).
Ahora sí, observar la muestra. Realice los dibujos de su observación al microscopio con el
aumento más conveniente. Señale los organismos según sean algas, protozoos y también
pueden incluir otros organismos (bacterias y animales). Utilizar el modelo de la Figura 1
para registrar los resultados de sus observaciones.
Nombre de la observación
Aumento: ______________________
Recuerde: (aumento del ocular) 10x * (aumento del objetivo) 4x = 40x
Figura 1. Informe del resultado de la observación macroscópica/microscópica de una
muestra
Descripción:
puede usar párrafos,
flechas para señalar.
Haga uso de colores,
marcadores necesarios
para una precisa
descripción
4. Biología Celular
Laboratorio Citoesqueleto
Prof. Diana Cárdenas Caro
PREPARACIÓN DE LA MUESTRA DE ANIMALES
PREPARACIÓN DE CÉLULAS SEXUALES. Reconocimiento de microbtúbulos en
espermatozoides.
Adicione solución salina a la muestra del semen fresco. Con una pipeta Pasteur adicione
una gota sobre un portaobjetos. Coloque el portaobjetos.
Recuerde los pasos que se siguen para una precisa observación en el microscopio. Se
utilizarán primero los objetivos de menor aumento con el fin de centrar la preparación y
determinar la zona de mejor visualización. Después se cambia a los de mayor aumento
hasta llegar al más conveniente (10x ó 40x).
Ahora sí, observar la muestra. Realice los dibujos de su observación al microscopio con el
aumento más conveniente. Utilizar el modelo de la Figura 1 para registrar los resultados de
sus observaciones.
DISCUSIONES
Reino Protista
Identifique cuáles microorganismos presentaron movimiento. A qué se debe el
movimiento?
Cuáles microorganismos no presentaron movimiento? Cuál era su color?.
Establezca diferencias y similitudes entre los organismos del Reino Protista: Algas y
Protozoos.
Espermatozoides
A qué se debe su movimiento?
Cuál es la función del movimiento de estas células sexuales?
CONCLUSIONES
Redacte mínimo tres conclusiones del trabajo que se hizo en el laboratorio. Deben ser
personales.