Este documento describe los métodos para el diagnóstico viral de infecciones, incluyendo la detección del agente viral, antígenos o ácidos nucleicos a través de métodos directos o la detección de anticuerpos a través de métodos indirectos. Se enfoca específicamente en el diagnóstico del dengue explicando la epidemiología, clasificación clínica, respuesta inmune y métodos como ELISA, aislamiento viral e PCR para detectar el virus o anticuerpos IgM y diferenciar los serotipos.

1. DIAGNOSTICO VIRAL
FABIOLA ANDREA VARGAS
07172017

2. DIAGNOSTICO VIRAL
El diagnóstico virológico comprende la
detección e identificación del agente etiológico
de una infección viral, clínica o inaparente, y /o de
la respuesta inmune específica del huésped.
El diagnóstico clínico orientará hacia la prueba
apropiada a realizar

3. TOMA DE MUESTRA
“El buen diagnóstico empieza con una buena
muestra”
• La forma de recolección, transporte y
conservación de la muestra son esenciales
para un buen resultado.
• Las mejores muestras de las primeras 72hs

4. Muestras
Suero
Secreciones respiratorias
Deposiciones
Sangre
Liquido cefalorraquídeo
Órganos
Orina

5. MEDIO DE TRASNPORTE
proteínas como
puede ser la albúmina
de bovino o la
gelatina
Transportarse a 4ºC
Antibióticos y
antifúngicos
Recipientes estériles
adecuados y con tapa
hermética.
Provea estabilidad

6. METODOS
Los métodos utilizados para reconocer las
infecciones por virus humanos pueden
clasificarse en
Directos
Indirectos

7. METODOS DIRECTOS
1. El virus como agente infeccioso (aislamiento
viral).
2. La presencia de antígenos virales (técnicas
inmunológicas): Inmunofluorescencia
(IF), Enzimoinmunoanálisis (EIA), Test de
Aglutinación.

8. METODOS DIRECTOS
3. La presencia de ácidos nucleicos virales (PCR,
etc.).
4. El virus como partícula viral (microscopía
electrónica)

9. METODOS INDIRECTOS
Son aquellos que reconocen la respuesta
inmune (humoral o celular) por parte del
huésped:
1. Detección de anticuerpos específicos
antivirales por técnicas inmunológicas (EIA,
IFI,WB, etc.).
2. Producción de anticuerpos in vitro.

10. DIAGNOSTICO VIRAL DE DENGUE

11. INTRODUCCION
El dengue en una enfermedad endémica en
muchos países, y su presencia aumenta por la
urbanización de zonas rurales lo que crea las
condiciones ideales para la replicación del
principal mosquito trasmisor Aedes aegypti

12. CARACTERISTICAS
•
•
•
•
•
Arbovirus (tranasmitido por vectores)
Pertenece al género Flavivirus
Familia Flaviviridae
Vector: Aedes aegypti
Especie: Dengue

14. SEREOTIPOS

15. EPIDEMIOLOGIA
1. El mosquito vector generalmente
2. El virus
3. Un gran número de personas susceptibles.

17. CLASIFICACIÓN CLINICA DEL
DENGUE
Diagnóstico presuntivo
Fiebre y dos síntomas:
Anorexia y nauseas
Exantema
Dolores corporales
Signos de alarma
Prueba de torniquete +
Antecedente de viaje o
vive en zona endémica
Signos de alarma*
Dolor abdominal
Vómito
Acumulación de
líquidos
Sangrado de
mucosas
Letargia, intranquilid
ad
* Requiere estricta observación e intervención médica
1. Extravasación severa de plasma conduce a:
Choque
Acúmulo de líquidos con dificultad respiratoria
2. Sagrado severo
3. Afectación severa de órganos
Hígado
SNC
Corazón u otros órganos

19. Respuesta inmune a la infección
2010 Nature Publishing Group Guzman, M. G. et al. Dengue: A continuing global threat. Nature Reviews Microbiology 8, S7–S16 (2010).
doi:10.1038/nrmicro2460 All rights reserved.

20. GENERALIDADES
• Respuesta inmune conlleva a manifestaciones
severas de la enfermedad.
• La infección con un serotipo del virus del
dengue brinda inmunidad de por vida
• Clasificación del dengue:
o Fiebre del dengue (FD)
o Fiebre hemorrágica por dengue (FHD) con o
sin síndrome de shock por dengue (SCD).

21. DIAGNOSTICO VIRAL DE DENGUE
Estado de la
persona
Fallecido
Vivo

22. NS1
Suero pc
Elisa competitiva de
captura
Inicio
de
síntom
as
Negativas
1-5
10 días
Positivas
Aislamiento
Viral
Fecha
toma
MX
IFI
MONOCLONALES
Serotipo
Fiebre amarilla
EMEM
D1
D2
D3
D4
FA
Antibiótico, Antifúngico
Cel. Proboscis del mosquito
Liquido ascitico

23. AISLAMIENTO VIRAL

24. IFI

25. Inicio
de
síntom
as
IgM
Suero pc
6
Fecha
toma
MX
Elisa
competitivo

26. RT-PCR
Órganos, Suero, ST
Cortan y lisan
Extracción RT- PCR
Epidemol y
Anested
Electroforesis
POSITIVO
SEROTIFICACION

27. Corte de Tejidos y Lisis
Hígado
Bazo
Riñón
Pulmón
Miocardio
Cerebro
Tráquea
Baño maría 12
horas

28. Extracción

29. ELECTROFORESIS

30. BIBLIOGRAFIA
• http://www.msal.gov.ar/images/stories/epide
miologia/pdf/guia-dengue.pdf
• http://ecaths1.s3.amazonaws.com/catmicrom
ed/Diagnostico%20virologico.pdf
• http://www.bioline.org.br/pdf?rc00024
• http://www.biologia.edu.ar/viruslocal/diagnos
tico%20viral.htm
• http://www.youtube.com/watch?v=y6sAkdq9
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