El documento describe los conceptos básicos de antígenos y anticuerpos, incluyendo las características y propiedades de los antígenos, los tipos de antígenos (independientes del T y dependientes del T), la naturaleza de las reacciones antígeno-anticuerpo, y varias pruebas inmunológicas comunes para detectar dichas reacciones, como aglutinación, precipitación, ensayos enzimáticos e inmunofluorescencia.

1. Antígenos reacción Ag-Ab Pruebas inmunológicas

2. ANTIGENOS

3. Conceptos Un antígeno es cualquier sustancia (molécula) que reacciona con productos de la respuesta inmune. Epitopo o determinante antigénico. Es la porción de un Ag que se combina con los productos de una respuesta inmune especifica.

4. Características de los Ag Inmunogenicidad: capacidad de inducir respuesta (celular o humoral). Cel B + Ag Cel plasmaticas + Cel B de memoria Anticuerpos Antigenicidad: capacidad de combinarse de forma especifica a los productos de la respuesta inmune Mol. Inmunogenicas = antigenicas Mol. antigenicas ≠inmunogenicas (ej. haptenos)

5. Que es un Hapteno Son moléculas pequeñas que no son inmunogénicas pero que pueden reaccionar con los productos de una respuesta inmune. No inducen respuesta inmune por si solas, pero si cuando son transportadas por otras moléculas.

6. Propiedades de los Antígenos ALTERIDAD : entre mas extraña es la molécula es mejor la respuesta inmune. Depende de la distancia filogenética. Albumina bovina ≠ albumina de ratón Excepciones moléculas conservadas como el citocromo C COMPLEJIDAD QQ : entre mas compleja es la molécula será mas inmunogenica ( estructura 1 ª ,2 ª ,3 ª ,4 ª. heteropolimeros>>homopolimeros ). prots>polisacaridos>lipidos>acidos nucleicos Ag particulados>>solubles Ag desnaturalizados>>forma nativa

7. Propiedades de los Antígenos TAMAÑO MOLECULAR : entre mas grande es una molécula es mas inmunogenica. 100,000 Da >> inmunogenicidad DEGRADABILIDAD : capacidad de procesarse y presentarse junto a MHC. Ag fagocitados >> inmunogenicos

8. Tipos de antígenos T independientes Son los que pueden estimular directamente a las células B para producir ab. No requieren de la ayuda de los linfocitos T Generalmente polisacáridos

9. Ag T independientes Propiedades Estructura polimérica. Repetición del mismo determinante antigénico Activación policlonal de células B . Tipo 1: activadores policlonales Tipo 2: no Resistencia a la degradación . Persisten por mas tiempo estimulando el SI.

10. Tipos de antígenos T dependientes Son aquellos que no estimulan directamente la producción de ab, sin la ayuda de las células T. Estructuralmente se caracterizan por pocas copias de un mismo epitopo. Las Proteínas son un buen ejemplo

11. Superantígenos Son antígenos capaces de activar una gran población de linfocitos T (25 %) Monoclonal/Oligoclonal T cell response 1:10 4 - 1:10 5 Ag convencional Superantigeno Polyclonal T cell response 1:4 - 1:10

12. REACCION Ag-Ab

13. Reconocimiento Ag-Ac Depende de los receptores de T y B B: Igs T: TCR T y B reconocen los ags de diferente manera Ambos tiene regiones variables y constantes, El proceso de recombinación en genes permite la variabilidad

14. Reconocimiento Ag-Ac

15. Reconocimiento Ag-Ac Los ab reconocen los ag en solución o en la superficie de células, en su forma nativa.

16. Reconocimiento Ag-Ac El TCR sólo reconoce ags asociado con el MHC en la superficie de células, este antígeno ha sido degradado en fragmentos

17. Reconocimiento Ag-Ac

18. Naturaleza de las Rx Ag-Ab Afinidad es la fuerza de la Rx entre un determinante Ag y un sitio de union de un Ab . Es la suma de las fuerzas de atracción y repulsión Ab Ag High Affinity Ab Ag Low Affinity

19. Naturaleza de las Rx Ag-Ab Avidez Es la medida de la fuerza de unión de un Ag con muchos determinantes Ag y Ab multivalentes. Esta influenciada por las valencias del Ag y del Ab.

20. Fuerzas que intervienen Puentes de hidrogeno Enlaces hidrofobicos Enlaces electrostaticos Fuerzas de Van der Wals No son enlaces covalentes por lo tanto la unión es REVERSIBLE

22. Especificidad y Rx cruzada Especificidad: se refiere a la habilidad de un Ab individual de reaccionar con solo un determinante Ag. Un Ab puede distinguir entre: La estructura 1 ª de un ag. Formas isomericas Estructura 2 ª y 3 ª

23. Especificidad y Rx cruzada Rx cruzada: se refiere a la habilidad de uno o varios Ab de reaccionar con mas de un determinante Ag. Estas Rx se dan porque los Ag comparten epitopos en común o epitopos con estructuras similares

25. Pruebas para la detección de la reacción Ag-Ab

26. Factores que afectan la medición de la Rx Ag-Ab Afinidad Avidez Radio Ag/Ab Forma física del Ag. Ab excess Ag excess Equivalence – Lattice formation

27. Pruebas de aglutinación Son pruebas que tienen como punto de visualización la aglutinación de un Ag particulado. La prueba puede ser cualitativa o cuantitativa. Y Y Y + 

28. Hemaglutinación Usos: tipeaje sanguíneo, infecciones es fácil de realizar y es semicuantitativa 1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 1/512 1/1024 Pos. Neg. Titer 64 8 512 <2 32 128 32 4 Patient 1 2 3 4 5 6 7 8

29. Aglutinación pasiva Prueba de aglutinación donde una partícula (latex) se recubre con el Ag. Aplicación: medida de Ab para Ag solubles Y Y Y + 

30. Inhibición de la aglutinación/hemaglutinación Y Y Y +  Prior to Test Y +  Y Y + Test Patient’s sample

31. Pruebas de precipitación Inmunodifusión radial inmunoelectroforesis Ag Ab - +

32. Ensayos inmunoenzimaticos (ELISA) radioinmunoensayos (RIA) Utiliza un contador de radiación La determinación puede ser visual o por un lector de ELISA

33. ELISA y RIA competitiva para Ag Y Y +  Prior to Test Labeled Ag Y Y +  Test + Patient’s sample Labeled Ag + Y Y +  Test + Patient’s sample Labeled Ag +

34. ELISA y RIA no competitiva para Ag y Ab Solid Phase Y Ag Immobilized Y Ab in Patient’s sample Labeled Anti-Ig Solid Phase Y Ag Immobilized Y Ag in Patient’s sample Labeled Ab

35. Inmunofluorescencia Utiliza un microscopio de fluorescencia Directa: detecta Ag en tejidos, usando Ab marcados con fluorocromo Indirecta: detecta Ab. El Ab para el Ag no esta marcado. Luego se usa un Ab marcado con fluorocromo Ag Y Fluorochrome Labeled Ab Tissue Section Ag Y Y Fluorochrome Labeled Anti-Ig Tissue Section Unlabeled Ab

37. Inmunocromatografía

39. Western blot