Este documento describe un curso de anatomía patológica que incluye clases teóricas, trabajos prácticos, sesiones clínico-patológicas y autopsias. También cubre la evolución histórica del concepto de enfermedad y anatomía patológica desde la patología macroscópica hasta la patología molecular, así como los diferentes métodos de estudio en anatomía patológica como biopsias, autopsias y citología.

1. Curso de Anatomía Patológica
 Clases teóricas
 Trabajos prácticos
 Sesiones clínico-patológicas
 Autopsias

2. Enseñanza de la Medicina
 Ciencias básicas
 Anatomía patológica
 Ciencias clínicas

3.  Propedéutica: Enseñanza preparatoria
de una disciplina (DRAL)

4. MEDICINA
 PREVENIR
 CURAR LA ENFERMEDAD
 ALIVIAR
 CONSOLAR AL ENFERMO
 PRESERVAR LA VIDA EN LAS
MEJORES CONDICIONES
POSIBLES

5. MEDICINA
 CIENCIA: Conocimiento metódico (científico) de
fenómenos de la naturaleza (Enfermedad).
 ARTE: Busca la perfección (belleza) en la
relación médico paciente.

6. Enfermedad
 Lo que el ser humano piensa
determina lo que hace.
 El concepto que el hombre tiene de la
enfermedad determina su actitud
frente a ella.

7. CONCEPTO ENFERMEDAD
 Fase primitiva
 Humores
 Patología Macroscópica
 Antonio Benivieni
 Morgagni
 Patología Tisular
 Xavier Bichat
 Patología Celular
 R. Virchow
 Patología Molecular

8. Fase primitiva
 Magia y hechicería
 Quebrantamiento de los tabúes
 Invasión del cuerpo por objetos
 Posesión del cuerpo por espíritus
 Pérdida del alma

9. Teoría del equilibrio de los humores
India, Egipto y Grecia
Bilis amarilla
Fuego
Caliente Seco
Sangre-aire Tierra-bilis negra
Húmedo Frío
Agua
Flema

10. PERIODO MACROSCOPICO
Antonio Benivieni
1443-1502
 Cirujano que vivió en
Florencia.
 Padre de la Anatomía
Patológica
 Practicó autopsias a varios
de sus pacientes fallecidos
 De Abditis Nonnullis ac
Mirandis Morborum et
Sanatonium Causis

11. Período macroscópico
Jean Fernel
1497-1558
 Filósofo, matemático,
filólogo y médico
 Profesor de medicina
en París
 Publicó en 1554 su
libro Universa Medicina
 Consta de 3 partes:
Fisiología, Patología
(120 capítulos en 7
libros) y Terapéutica

12. Período macroscópico
Andrés Vesalio
1514-1564
 Anatomista flamenco
 A los 18 a. era Profesor de Anatomía en Bolonia
 Trabajó en la Universidad de Padua en donde publicó su
libro: De Corporis Humani Fabrica
 Atacó las opiniones de Galeno y de los antiguos
 Fue condenado a muerte por la Inquisición, pero obtuvo
la gracia de Felipe II
 Murió durante un naufragio

13. Theophilus Bonettus
1620-1689

14. Patología orgánica
Giovanni Battista Morgagni
1682-1771
 Trabajó en la
Universidad de
Padua
 Padre de la
Patología orgánica
 En su libro publicó
los protocolos de
700 autopsias

15. Patología tisular
Xavier Bichat
1771-1802
 Profesor de Cirugía
en la Univ. de París
 Escribió “Traité des
membranes”
 Realizó más de 600
autopsias en un año
 Creador del concepto
de Patología Tisular

16. Patología Celular
Rudolph Virchow
1821-1902
 Profesor de Anatomía Patológica en Berlín
 A los 37 años sustentó una serie de
conferencias que aparecieron en forma de libro
en el 8 de agosto de 1858

17. Rudolph Virchow
1821-1902

18. Patología
 Estudio científico de la naturaleza de
la enfermedad con referencia especial
a su:
 Etiología
 Patogenia
 Alteraciones morfológicas y
funcionales
 Manifestaciones clínicas

19. CONCEPTO ENFERMEDAD
 Fase primitiva
 Humores
 Patología Macroscópica
 Antonio Benivieni
 Morgagni
 Patología Tisular
 Xavier Bichat
 Patología Celular
 R. Virchow
 Patología Molecular

20. Enfermedad
 Es la vida en condiciones
ANORMALES
Dr.Ruy Pérez Tamayo

21. Patología
Ramas

22. Anatomía Patológica
 Diagnóstico
 Estudio
 Investigación
de la ENFERMEDAD mediante
métodos fundamentalmente
MORFOLOGICOS

23. Anatomía Patológica
Métodos de Estudio: SECCIONES:
 Biopsia Patología Quirúrgica
 Autopsia Patología post-mortem
 Citología Citopatología
 Otros
 Inmunohistoquímica
 Histoquímica
 Microscopía Electrónica
 Biología Molecular
 Análisis de imagen
 etc.

24. Anatomía Patológica
 Patología Quirúrgica
 Especímenes de seres humanos VIVOS.
 Patología postmortem
 Estudio de un cadáver, sus cavidades y
órganos (necropsias)
 Citopatología
 Estudio de células desprendidas de un tejido
 Estudios especiales
 IHQ, M.E., Análisis de ácidos nucléicos,etc.

25. La anatomía patológica actual
Avances
 Técnicos
 Científicos
 Conceptuales
 Patología quirúrgica
 Patología postmortem
 Citopatología
 Otros

26. Niveles de Organización biológica
 MOLECULAS
 MACROMOLECULAS
 ORGANELOS SUBCELULARES
 CELULAS
 TEJIDOS
 ORGANOS
 APARATOS Y SISTEMAS
INDIVIDUO

27. Procesamiento histológico
 Fijación formaldehído
 Deshidratación alcoholes
 Aclaramiento xileno
 Inclusión en parafina
 “ en bloques de parafina
 Cortes en microtomo a 4 micras
 Extensión en baño de flotación
 Desparafinación
 Tinción (H/E, t. especiales)

28. Anatomía Patológica
Métodos de Estudio
 Biopsia
 Autopsia
 Citología
 Otros
 Inmunohistoquímica
 Histoquímica
 Microscopía Electrónica
 Biología Molecular
 Análsis de imagen
 etc.

29. BIOPSIA
 Procedimento de extracción de un
fragmento de tejido con el propósito
de estudiarlo microscópicamente en
un sujeto vivo.

30. BIOPSIA
Objetivos
 Diagnóstico de una lesión
 Presencia o ausencia de una lesión ya
diagnósticada como resultado del
tratamiento o de la historia natural de la
enfermedad
 Evaluación de características macro y
microscópicas con significado pronóstico
 Control de calidad

31. Tipos de biopsia
 Incisional
 Excisional
 Por endoscopía
 Legrado
 Por trucut
 Por sacabocado
 Transoperatoria

32. Solicitud de estudio patológico
o Nombre del paciente
 Edad y sexo
 Médico solicitante
 Servicio y cama
 Datos clínicos
 Diagnóstico clínico
 Espécimen remitido
 Fecha

35. Interpretación
Informe
anatomopatológico

36. Diagnóstico histopatológico
 La aplicación e interpretación de
criterios morfológicos es subjetiva
 Opiniones divergentes de expertos
 Diagnóstico “final” por consenso o en
deferencia al más prestigiado de los
patólogos consultados (en ocasiones al
más vehemente)

37. Caso
 Niña de 10 años de edad sin
antecedentes de importancia.
Inició 15 días antes de su ingreso
con dolor epigástrico. Una TAC
mostró tumor renal derecho.

41. Inmunohistoquímica
 Vimentina +
 CD99 +
 Sinaptofisina +
 NSE +
 WT1 -
 CK A1/AE3 -
 CD45 -

43. Diagnóstico
Tumor neuroectodérmico primitivo/
Sarcoma de Ewing primario de riñón

44. Coeficiente de credibilidad
Num. cortes
examinados
Número de años
Immunomicroscopy: A Diagnostic Tool for the
Surgical Pathologist. Taylor&Cote,1994

45. Problema diagnóstico
a. Consulta del caso con un colega más
experimentado
b. Buscar bibliografía que describa la
célula en cuestión (idealmente
c/fotomicrogafías)
a+b

46. Diagnóstico histopatológico
• Experiencia en el área
 Tiempo (años)
 Numero de casos diagnosticados
• Lectura de libros y revistas
• Habilidad individual
• Técnicas especiales disponibles (tinciones
especiales,IHQ, ME, biol.molecular,
análisis.de imágenes,etc.)
• HONESTIDAD

47. Carcinoma epidermoide
laringe
supraglótico Bien diferenciado
glótico transglótico Poco diferenciado

48. Carcinoma epidermoide
de pulmón temprano
(broncogénico)
Plano Polipoide

49. Carcinoma de células pequeñas
pulmón

50. Carcinoma basocelular

51. Carcinoma Basocelular

52. Carcinoma espinocelular

53. Patología quirúrgica

54. AUTOPSIA
• Médico clínica
• Médico legal

55. AUTOPSIA
 Médico legal
 Médico
clínica

56. Autopsia médico legal
Está indicada en todas las muertes con
violencia o en aquellas que ocurran de manera
sospechosa y es realizada por médicos
designados por el Ministerio Público del fuero
común
objetivos
 determinar la causa de la muerte
 ayudar a establecer la forma de la
muerte
 colaborar en la determinación de la hora
de la muerte
 ayudar a establecer la identidad del
fallecido.

58. La autopsia
“, en las últimas décadas el número de autopsias
médicas que se realizan en muchos países del hemisferio
occidental ha disminuído considerablemente. Este
fenómeno llama la atención, sobre todo porque ha
ocurrido en ausencia de otros métodos capaces de
proporcionar igual o mayor información que las
autopsias, y porque tal información constituye una de las
bases más sólidas para diseñar políticas generales
racionales de salud.”
Dr. Ruy Pérez Tamayo
La autopsia. Pérez Tamayo R, Aguirre García J: El Colegio Nacional,
México, 2000.

59. La autopsia
 Introducción. Concepto
 Aspectos históricos
 La autopsia en México y S.L.P
 ¿por qué han disminuído las autopsias?
 ¿Es útil la autopsia en la medicina actual?
 ¿Es posible aumentar el número de
autopsias?

60. Autopsia
concepto
 Es un procedimiento médico
 emplea la disección
 con el fin de obtener información anatómica sobre
 causa
 naturaleza
 extensión
 complicaciones
 de la enfermedad que sufrió en vida el sujeto
autopsiado
Pardo Mindán J. Anatomía patológica. Barcelona: Doyma, 1991:
vol 1: 11

61. La autopsia
Historia
 Los médicos
alejandrinos Herófilo
(335-280 a. de C.) y su
alumno Erasístrato (310-
250 a.de C.) realizaron
disecciones en humanos
(Plinio)
 En Italia, en la Eldestein L: The history of anatomy in
Universidad de Bolonia, antiquity, en Ancient Medicine,
durante la Baja Edad Baltimore & London, The Johns
Media (Siglo XIII), Tadeo Hopkins University Press, 1987, pp
de Alderoto (1266-1275) 247-301
efectuó disecciones Long ER. A history of pathology.
como parte de la New York: Dover Pub, 1965
enseñanza médica.

62. La autopsia
Historia
 La primera mención de una autopsia fue en 1286.
 Citada en Chronica de Salimbene de Parma
 Se describen abscesos cardíacos en gallinas y
hombres en una epidemia y epizootia ocurrida en Italia.
 Existe un protocolo de autopsia en 1302 .Se
autopsió en Bolonia al noble Azzolino por
sospecha de envenenamiento
Singer Ch: A short history of anatomy & physiology from the
greeks to Harvey. New York, Dover Publications Inc.,1957, pp.71-74
Greco E: Fra Salimbene de Palerma. The first post mortem
examination of the morbid anatomy, performed in 1286.
Panminerva Med 4:235-237,1962.

63. Lezioni di medicina con autopsia, tratto da Giovanni Gregorio
de' Gregorii, fasciculus medicinae, Venezia 1493

64. Antonio Benivieni
1443-1502
Periodo macroscópico
 Cirujano que nació y vivió en
Florencia.
 Padre de la Anatomía
Patológica
 Practicó autopsias a varios de
sus pacientes fallecidos
 En 1507 se publicó “De
abditis nounullis ac mirandis
et sanatonium causis” (“De
las causas ocultas y
maravillosas de las
curaciones”)
 Es el primer libro que
describe varios casos
clínicos y sus respectivas
autopsias para conocer la
causa de la muerte y la Pérez Tamayo R: en Historia de diez
naturaleza de la enfermedad.gigantes, México, El Colegio Nacional,

65. Andrés Vesalio
1514-1564
 Anatomista flamenco
 A los 18 a. era Profesor de
Anatomía en Bolonia
 Trabajó en la Universidad
de Padua. En 1543 publicó
su libro: “De corporis
humani fabrica”
 Atacó las opiniones de
Galeno y de los antiguos
 Fue condenado a muerte por
la Inquisición, pero obtuvo la
gracia de Felipe II

66. La autopsia en la Nueva España
 En 1533 el cirujano Juan Camacho ante los doctores
Sepúlveda y Navarro realizó la autopsia a 2 niñas
unidas en el abdómen.
 En 1576 Alonso López de Hinojosa hizo algunas
autopsias para conocer la causa de una epidemia de
cocoliztle, sin éxito.
 En el siglo XVII en la autopsia del Arzobispo y Virrey
Fray García Guerra se halló un absceso hepático
roto y abierto al tórax.
 Al morir en 1700 Don Carlos de Sigüenza y Góngora
se confirmó el diagnóstico escrito en su testamento,
donde se leía que al examinar los riñones, uréter y
vejiga "se encontraría una piedra grandísima que es
la que me ha de quitar la vida"

67. Teófilo Boneto
1620-1689
 En 1679:
 Sepulchretum sive anatomia practica
ex cadaveribus morbo denatis
 Consigna más de 3000 casos clínicos
con sus respectivas autopsias
recopilados de toda la literatura

68. Patología orgánica
Giovanni Battista Morgagni
1682-1771
 Profesor de medicina, filósofo,
historiador de la medicina y patólogo.
 Trabajó en la Universidad de Padua en
Bolonia, Italia.
 Padre de la Patología orgánica
 En su libro “Sitios y causas de
enfermedad investigados por
anatomía” publicó los protocolos de
700 autopsias

69. Patología tisular
Xavier Bichat
1771-1802
 Profesor de Cirugía en
la Univ. de París
 Escribió “Traité des
membranes”
 Realizó más de 600
autopsias en un año
 Creador del concepto
de Patología Tisular

70. Xavier Bichat
 ...” ´Puedes tomar notas por 25 años, de la
mañana a la tarde, de enfermos de pulmón,
corazón y estómago y como resultado
tendrás una larga lista de síntomas confusos
que llevan a conclusiones incoherentes.
 Abre unos cuantos cuerpos, y tú verás que la
obscuridad inmediatamente desaparece.”

71. Patología Celular
Rudolph Virchow
1821-1902
 Profesor de Anatomía
Patológica en Berlín
 A los 37 años sustentó una
serie de conferencias que
aparecieron en forma de
libro en el 8 de agosto de
1858
 Logró hacer de la patología
una ciencia e insistió en
estudiar todos los órganos
en forma ordenada ,
minuciosa y realizar estudio
microscópico en forma
sistemática

72. Rudolph Virchow
1821-1902

73. La autopsia contemporánea
En los primeros 70 años del siglo XX la autopsia:
 Se constituyó como uno de los métodos más sólidos y
fructíferos para el estudio de las enfermedades y
consecuentemente del avance de la medicina.
 Un instrumento muy valioso en la educación médica.
 La certificación de excelencia de los hospitales requería de un
porciento elevado de autopsias del total de pacientes
fallecidos.
 Las autoridades sanitarias usaban los resultados de autopsias
para planear sus programas.
 Permitió construir la medicina científica moderna sobre bases
sólidas y objetivas.
Pérez Tamayo R:¿Qué es y en donde está la enfermedad?. En El concepto de
enfermedad. Su evolución a través de la historia. México, UNAM, conacyt,
Fondo de Cultura Económica 1988, pp57-139.

74. La autopsia
últimas décadas
 Ha disminuido ostensiblemente en todo
el mundo

75. Porcentaje de autopsias en Hospitales de México, DF y
SLP
Hospitales 1973 1984 1995
Hospital General 33% 39.3% 30%
de México
Instituto 45% 27.5% 18%
Nacional de la
Nutrición
IMSS 47% 18% 4%
ISSSTE 30% 28% 10%
Hospital Central 18% 13.17% 7.3%
SLP
(aprox)

76. Autopsias HC
Mortalidad Autopsias porcentaje
 1973: 74
 1984: 645  1984: 85  1984:
 1995: 588  1995: 43 13.175
 2000: 509  2000:28  1995: 7.3%
 2001: 510  2001:16  2000: 5.55
 2002: 504  2002: 16  2001:
 2003: 262  2003:8
3.13%
 2002:
3.17%
 2003: 3 %

77. Autopsias
HC”Dr.IMP”
90
80
70
60
50
40 No. autopsias
30
20
10
0
1973 1990 2000 2002

78. La autopsia
Causas del decremento
 Del médico clínico:
 Desinterés
 Desconocimiento del método y su utilidad
 Creer en tener el Dx por los estudios de lab. y gabinete
 Deficiente relación con los familiares del paciente
 Temor a exponerse en una sesión académica
 Temor a ser demandado
 Del patólogo:
 Falta de interés
 Desconocimiento del método y su utilidad
 Ausencia o deficiencia de presentación sesiones de autopsia
 Exceso de actividad en patología quirúrgica, citopatología, IHQ, ME, BM,
investigción, administración, etc.
 Negación de la autorización de los familiares (falta de información,
ignorancia, religión, desconocimiento de la utilidad, etc.)
 De las autoridades
 Falta de presupuesto
 Desconocimiento
 Desinterés

79. ¿Es útil la práctica de las autopsias en la
medicina actual?
 Conocimiento de la
enfermedad
 Atención médica
 Salud Pública
 Contribución social
Ridaura Sanz C: ¿para qué sirve la autopsia?, en La autopsia.
Pérez Tamayo R, Aguirre García J: El Colegio Nacional, México,
2000 pp. 25-43

80. Autopsia y su utilidad
Conocimiento de la enfermedad
 Descubre nuevas enfermedades
 Define y precisa la enfrermedad básica, sus
complicaciones y la causa de muerte
 Explica la expresión clínica
 Diagnostica patologías asociadas
 Detecta la enfermedad subclínica
 Genera preguntas para la investigación biomédica
Ridaura Sanz C: ¿para qué sirve la autopsia?, en La autopsia.
Pérez Tamayo R, Aguirre García J: El Colegio Nacional, México,
2000 pp. 25-43

81. Utilidad de la autopsia
Atención médica
 Confirma o corrige los diagnósticos
clínicos
 Evalúa la terapeútica empleada (médica
o quirúrgica)
 “Estándar de oro” para nuevos métodos
diagnósticos
Ridaura Sanz C: ¿para qué sirve la autopsia?, en La autopsia.
Pérez Tamayo R, Aguirre García J: El Colegio Nacional, México,
2000 pp. 25-43

82. Utilidad de la autopsia
Salud Pública
 Aporta información verídica sobre estadísticas de
mortalidad
 Detecta patología relacionada con agentes nocivos
ambientales
 Alerta para la prevención de enfermedades infecto-
contagiosas
 Contribuye a la investigación epidemiológica
Ridaura Sanz C: ¿para qué sirve la autopsia?, en La autopsia.
Pérez Tamayo R, Aguirre García J: El Colegio Nacional, México,
2000 pp. 25-43

83. Utilidad de la autopsia
Contribución social
 Apoya a la familia en el manejo del duelo
 Identifica padecimientos hereditarios
 Facilita retribución de las compañías de seguros
 Ayuda a la impartición de justicia (casos de
litigio)
Ridaura Sanz C: ¿para qué sirve la autopsia?, en La autopsia.
Pérez Tamayo R, Aguirre García J: El Colegio Nacional, México,
2000 pp. 25-43

84. Autopsias “obligatorias”
Comisión de Acreditación de Organizaciones para el cuidado de la
Salud de los EUA
 todas las muertes en las que no se pudo establecer
con certeza la enfermedad principal o la causa de la
muerte
 muertes en las que la autopsia pueda explicar
complicaciones desconocidas o imprevisibles
 muertes inexplicables que ocurran durante un
procedimiento médico o quirúrgico
 muertes de pacientes que participaron en un
proyecto de investigación
 todas las muertes obstétricas
 todas las muertes pediátricas y perinatales
 muertes secundarias a enfermedades infecciosas de
alto riesgo

86. Esclerosis hipocampal
IRM

87. Esclerosis hipocampal

88. V.I
•C.I.V.
Porcion
membranosa C.I.V.
del septum
A-03-01 HC

89. AUTOPSIA MEDICO CLINICA
Objetivos
 Estudio de la Enfermedad
 Evaluación de la correlación con el diagnóstico
clínico
 Establecer correlaciones clínico-patológicas
 Evaluación de la correlación con estudios de
laboratorio y gabinete
 Evaluación del efecto de tratamientos
 Estudio de las enfermedades que terminan con la
vida de los enfermos en nuestro medio
 Control de calidad

90. ¿Es posible aumentar el número actual
de autopsias?
¡Sí!
 En la medida de revertir las causas del bajo número
de autopsias
 Estimular el interés del clínico
 Estimular el interés del patólogo
 Informar al público en general
 Tratar de mantener una relación estrecha con los
familiares de los pacientes
 Poner en conocimiento a las autoridades
hospitalarias y de
salud

91. CITOPATOLOGIA
 Ginecológica
 Cérvico-vaginal (Papanicolaou)
 Aspirado endometrial
 No ginecológica
 Líquidos orgánicos
 Secreciones
 Punción aspiración con aguja fina
 Improntas
 Etc.

92. Citología cérvico-vaginal
Utilidad
•Detección de CaCu y
precursores
•Infecciones
•Alteraciones reactivas
•Estado hormonal

93. Citología Cérvico-vaginal
Sistema Bethesda
 Facilita la comunicación efectiva entre
citopatólogos y clínicos
 Permite una correlación citohistológica
 Facilita la investigación de la
epidemiología, biología y patología de la
enfermedad cervical
 Proporciona un mismo lenguaje para
estudios estadísticos

94. Citopatología

95. El resultado final de una lámina de
Papanicolaou. en la cual con suerte se pueden
observar de 4000 a 10.000 células. O sea que
de 500.000 células llegaron al microscopio no
más de 10. 000 células.

96. Materiales Requeridos para la Recolección
del Espécimen del Cuello Uterino para
Monocapa
 Frasco con Preservante CytoRich
 Cepillo Especial – Limpio o Estéril

97. CERVEX-BRUSH®:
Vista Transversal
Nota: Esta brocha puede ser usada en pacientes hasta 10
semanas de gestación.

98. Metodo de colección
Rover’s
Cervex-Brush®

99. Toma de Muestra para
Monocapa
 El cepillo se introduce hacia el endocervix y se gira de 5 a 9 veces
 100% de las células recolectadas serán conservadas para el
análisis
 La Cabeza del Cepillo se desprende dentro del líquido
 El espécimen preservado es estable a temperatura ambiente por 60
días
 No hay posibilidad para artificios. La preservación es instantánea

100. SIMPLIFICACIÓN DE LA TOMA DE MUESTRA CON EL
ROVER CERVEX-BRUSH®
 Colección de células
Aprobada por el FDA para el
uso con SUREPATH™
(Monocapa®)
 Excelente instrumento para
las células endocervicales.
 La cabeza con el 100% de
las células es depositada en
el frasco con el preservante.
 Es el primer paso a la
excelencia ya que
estandariza la colección de
muestras.

101. Método de transferencia de células
Muestra
Homogénea
Representativa
Transferencia del 100% de células colectadas

103. Proceso del sistema de Monocapa®

105. Resultados del Papanicolaou
Convencional vs Monocapa
El material del extendido
convencional se esparce
sobre una gran zona parecido
a pintar con los dedos. Este
resultado no es parejo y tiene
un gran número de áreas
opacas.
La preparación por
Monocapa muestra una
distribución pareja de las
células en una fina capa
confinada a un área de la
lámina.

106. BAAF de glándula mamaria
 Parte del triple abordaje de las pacientes
con tumores en la mama
 Examen físico
 Mamografía
 BAAF
 Indicaciones:
 Lesiones palpables
 Lesiones no palpables detectadas por
mamografía
 Dx de recurrencia local

107. BAAF de glándula mamaria:
Ventajas
 Bajo costo, Dx rápido, ambulatorio
 Mínimas complicaciones
 Interacción con el paciente
 Distingue lesiones quísticas de sólidas
 Terapéutico en quistes
 Alternativa de biopsia en recurrencias locales
 Material para estudios especiales: IHQ, Análisis
de DNA, índices de proliferación, estudios de biología
molecular

108. Técnica
 Lesiones no palpables: guía por
estudios de imagen
 Aguja 22 – 23 gauge
 Jeringa 10 – 20 ml
 Quistes con lesión residual: reaspirar
 Fijación inmediata

112. 4 5

113. Valoracion del material
Coloración Rápida:
 Diff-Quik (seco al aire)
Pap
 Papanicolaou
(alcohol/citospray)
 HyE (alcohol)
Material adecuado:
3 – 6 grupos de
células ductales en
2 o más laminillas Diff-Quick
HyE

114. Valoración del material
Material inadecuado: 9 – 32%
5,688 casos valorados  227 sin valoración:
0.98% inadecuados 46% inadecuados
Diagn Cytopathol 2002;27:1  167 con valoración:
24% inadecuados
Acta Cytol 1996;40:1227

115. Complicaciones
Mínimas o ausentes
 Dolor local
 Hematoma
 Neumotórax: 0.18%
 Cambios en la
histología: hemorragia,
inflamación, infarto,
movilización de
calcificaciones o epitelio
benigno por el trayecto
de la aguja.

116. Categorías diagnósticas
 Maligno
 Sospechoso de malignidad
 Benigno
 Inadecuado

117. Dificultades diagnósticas
“Zona Gris”
 Lesiones proliferativas
 Carcinoma in situ
 Neoplasias papilares
 Carcinomas de grado bajo
Ozkara et al. The gray zone in breast fine needle aspiration
cytology. How to report on it? Acta Cythol 2002;46:513

118. CITOLOGÍA
Seguimiento y/o
Mamografía y Benigno tratamiento
clínica de
lesión benigna Sospechoso
Maligno Biopsia
Maligno Tratamiento
Mamografía
y clínica de Sospechoso
lesión Biopsia
maligna Benigno
Manejo de las lesiones mamarias evaluadas por BAAF

119. Elementos de la citología de la
glándula mamaria
 Células ductales
 Células mioepiteliales
(núcleos desnudos, células bipolares)
 Tejido adiposo y estroma
fibroconectivo
 Macrófagos, linfocitos, plasmocitos
 Células con cambios de lactancia

122. La mayoría de los FAs con atipia son lesiones benignas.
Conducta conservadora al interpretar una BAAF con
patrón fibroadenomatoso
88% benignos
25 casos
8% CA (subdiagnóstico, error de muestreo)
4% tumor filodes benigno (sin frag.estromales)
Simsir et al. Fibroadenomas with atypia: causes of under and overdiagnosis
by aspiration biopsy. Diagn Cytopathol 2001;25(5):278
A favor de FA: proyecciones digitiformes y núcleos
desnudos en el fondo.
Dx. de CA – múltiples criterios de malignidad están
presentes.
Stanley et al. Fine-needle aspiration of fibroadenomas of the breast with
atypia: A spectrum including cases that cytologically mimic carcinoma.
Diagn Cytopathol 1990; 6:375

123. Diagnóstico de atípico o
sospechoso
 Algunos pero no todos los criterios
de malignidad están presentes
 Biopsia para dx definitivo de
malignidad
 Causa más común de error: FA
 Sobreposición de criterios entre FA,
CFQ y CA bien diferenciado

124. Dx. de atípico o sospechoso
 46% fibroadenoma y cambios fibroquísticos
 Celularidad incrementada
 Células epiteliales aisladas
 Atipia nuclear reactiva
 Atipia en extendido inflamatorio
 Datos a favor de benigno: monocapas,
membrana nuclear lisa, núcleos desnudos
 Datos a favor de maligno:
pérdida de la cohesividad, nucleolos
memb. nuclear irregular
Mulford et al. Acta Cytol 1994;38:9
Peterse et al. Semin Diagn Pathol 1989;6:126

125. Hiperplasia atípica
 Celularidad alta
 Grupos cohesivos con sobreposición,
 Mezcla de células benignas y atípicas
 Variabilidad en forma y tamaño,
hipercromasia, nucleolo
 Células atípicas aisladas ocasionales
 Células mioepiteliales presentes
Indistinguible de CAID no comedo
Silverman et al. Diagn Cytopathol 1993;9:713-728
Thomas et al. Hum Pathol 1995;11:130-136
Abendroth et al. Am J Clin Pathol 1992;96:654-659

126. Datos citológicos generales
Benigno vs Maligno
Benigno Maligno
Celularidad Baja Moderada/alta
Grupos Panal de abeja Tridimensionales
epiteliales Sobreposición
Células aisladas Raras Numerosas
Atipia nuclear Mínima Mínima a
marcada
Diátesis Ausente -/+

127. CA intraductal (CAID)
 Comedo y No Comedo  Grupos poco
cohesivos, sábanas,
 Citomorfología células sueltas
depende de subtipo
 Células grandes
histológico
pleomórficas de
 CAID No Comedo: bordes precisos
indistinguible de
 Citoplasma abundante
Hiperplasia Ductal
y granular
Atípica
 CAID Comedo: difícil  Núcleos irregulares,
macronucleolos,
distinción con CA
mitosis
invasor
 Fondo con necrosis

129. Carcinoma Ductal Invasor
 75 – 85%  Celularidad mod/alta
 Grupos
 50% CSE, 15% CSI,
tridimensionales con
15% CI
sobreposición
 17% central
 Cél. epiteliales aisladas
 3% difuso (masivo o
 Atipia nuclear:
multifocal)
crecimiento,
 Masa mal definida, macronucleolo,
firme, textura arenosa cromatina grumosa
en la aspiración
 Vacuolas citoplásmicas

131. Grado nuclear
1. Núcleos pequeños, redondos,
uniformes. MN lisa, cromatina fina.
Nucleolo ausente o pequeño.
2. Núcleo crecido 2 veces, MN lisa,
cromatina uniforme, nucleolo.
3. Marcada anisonucleosis, crecimiento
nuclear 3 veces o más, MN irregular.
Macronucleolo o hipercromatismo y
cromatina grumosa.

132. Grado 2
DQ
Grado 2

133. Grado 3

134. BAAF de Glándula Mamaria
Conclusiones
 Estudio indispensable en el triple
abordaje de las lesiones mamarias
 Excelentes resultados y mínimas
complicaciones
 Ambulatorio y de bajo costo
 Excelente para valorar recurrencia
 Provee material suficiente para
estudios especiales

135. Inmunohistoquímica
 Emplea principios y técnicas
inmunológicas e histoquímicas
 Demostración, localización in situ o
cuantificación de antígenos en
células y tejidos
 Posibilidad en material en parafina.

136. Inmunohistoquímica
Ventajas
 Posibilidad de detectar numerosos Ag.
 Realización en material en parafina
 Conservación de la morfología y marcaje de
Ag.
 Microscopía óptica convencional
 Aplicación en patología diagnóstica
 Posibilidad de marcaje ultraestructural

137. Ag. demostrables en parafina
 Filamentos intermedios
 Marcadores tumorales
 Hormonas
 Receptores de hormonas
 Marcadores linfoides y otros Ag.
leucocitarios
 Oncoproteínas y Oncosupresores
 Otros componentes celulares
 Marcadores asociados al ciclo celular
 Agentes infecciosos

138. Inmunohistoquímica
 1974-1975: 6 publicaciones de IHQ
 1992: 15,000 publicaciones
 En sept. 2001: 265,501 artículos
En neoplasias anaplásicas:
 Alrededor de 50% de los Dx. con H&E son
cambiados al reevaluarse con IHQ
 IHQ provee el Dx. definitivo en 70% de los
tumores de cel. redondas
 92% de los tumores fusocelulares
 55% de casos donde se solicitaron tinciones
especiales la IHQ resultó esencial p/Dx.
 10-25% de los tumores requieren estudio
 No solicitar IHQ en caso necesario debe
considerarse negligencia profesional

140. Laboratorio de Inmunohistoquímica
Departamento de Anatomía Patológica
Facultad de Medicina, UASLP y Hospital Central
QFB Susana Chávez Porras
QFB Erika Chi Ahumada
Dr. Claudio Montero

141. Inmunohistoquímica
 Técnica que más ha impactado a la
anatomía patológica y a otras disciplinas
 Contribución muy relevante en el
entendimiento de la enfermedad
 Identificación de antígenos virales,
proteínas, etc.

142. Inmunohistoquímica
 No es una tinción más
 (¡No es una tinción!)
 Técnica compleja
 Participación de numerosas variables
 Requiere conocimientos de laboratorio
 Correcta planificación
 Infraestructura de laboratorio
 Controles estrictos de calidad
 Interpretación adecuada

143. Inmunología Histoquímica
Inmunohistoquímica

144. Antígeno
 Sustancia capaz de inducir una respuesta inmune
específica (generalmente proteínas de alto peso
molecular, algunos polisacáridos)
 Interacciona específicamente con los productos
de esta respuesta inmune (Ac. o linfocitos sensibilizados)
 Inmunogenicidad: Capacidad de inducir la
formación de Ac.
 Especificidad: Capacidad de reaccionar con el
Ac. cuya producción él ha inducido

145. Immunoglobulinas
 Glucoproteínas
4 cadenas polipeptídicas
 2 cadenas ligeras (k y l)
 2 cadenas pesadas (g,e,m,d,a)
 Unidas por puentes disulfuro
 Ig A, IgD, Ig E, IgG, IgM
 Región hipervariable es la
Fracción Fc
zona combinante (que
contacta con Ag)

146. Inmunohistoquímica
Ac. policlonales

148. Anticuerpos monoclonales

150. Inmunohistoquímica
 Inmunofluorescencia
 Inmunohistoquímica enzimática

151. Conjugación de Ac.
 Tiocianato de fluoresceína
 Enzimas
Biotina
 Etc.

152. Albert Coons
Inmunofluorescencia

153. Inmunohistoquímica
Ventajas
 Posibilidad de detectar numerosos Ag.
 Realización en material en parafina
 Conservación de la morfología y marcaje
de Ag.
 Microscopía óptica convencional
 Aplicación en patología diagnóstica
 Posibilidad de marcaje ultraestructural

154. Fijación
 Dirigida a estabilización de proteinas
 Características de un buen fijador:
 Adecuada conservación histológica
 Evitar pérdida de constituyentes celulares o
tisulares
 Capaz de mantener capacidad antigénica
 No existe fijador ideal para IHQ

155. Sistema estreptavidina-biotina peroxidasa

156. Sistema streptavidina-peroxidasa
LSAB

157. Inmunohistoquímica
Sistema de polímero c/Ac polivalentes-peroxidasa
“Envision system”
peroxidasa
Ac. secundarios
Ac. primario
polímero

158. Métodos para la recuperación
antigénica
Tratamiento enzimático Calor
 Pronasa  Microondas
 Pepsina  Autoclave
 Calentamiento de los
 Papaína
cortes
 Tripsina
 Olla a presión (olla de
acero inoxidable,
citrato sódico 0.01 M,
pH 6.0)

159. Variables
VARIABLES PREVIAS AL METODO
 Estado del tejido
 Tiempo antes de introducir el material en
fijador
 Tipo y tiempo de fijación
 Procesado histológico hasta inclusión y corte
 Secado de los cortes (37º o 60ºc)

160. Variables
VARIABLES PROPIAS DEL METODO
 Concentración del Ac primario
 Método usado(Estreptavidina-biotina o PAP)
 Concentración del Ac 2º y complejo PAP o
Estreptavidina-Peroxidasa.
 Tiempo de incubación con el Ac 1º, 2º y
complejos.
 Temperaturas de incubación con el Ac 1º, Ac
2º y PAP (4-8ºc o Tº ambiente)

161. Variables
VARIABLES TISULARES INTRINSECAS
 Contenido celular variable del antígeno
 Posible heterogeneidad del antígeno en
poblaciones celulares heterogéneas
 Incidencia del corte sobre la célula

165. Inmunohistoquímica
Automatización
 Disminuye costos
 Menor trabajo/hs./personal
 Menor gasto de reactivos
 Estandariza el método
 En nuestro medio el material es
muy heterogéneo en cuanto a
condiciones de fijación, autólisis,
procesado, etc.

166. Falsos negativos
 Causas relacionadas con el antígeno:
 Por falta de fijación (autólisis)
 Bloqueo por exceso de tiempo en el fijador
 Cantidades muy pequeñas de Ag.:
 Causas relacionadas con el anticuerpo
 Pérdida o disminución de su actividad
 Dilución inaporopiada
 Defecto en la técnica

167. Falsos positivos
 Reacción cruzada de Ac. con otros Ag.
 Unión inespecífica del Ac. al tejido
 Presencia de peroxidasa endógeno (sin
bloquear)
 Presencia de biotina endógena (sin
bloquear)
 Unión a material fagocitado
 Difusión del antígeno

168. Tinción inespecífica de fondo
Próstata
PSA

169. Inmunohistoquímica
 Conocimiento del método
 Fijación
 Planteamiento del problema
diagnóstico
 Planificación de los Ac. a utilizar
 Técnica inmunohistoquímica
 Observación e interpretación de
resultados

170. Inmunohistoquímica. Aplicaciones
 Patología neoplásica
 Estirpe del tumor
 Tumores de origen celular específico
 Micrometástasis
 Microinvasión
 Marcadores pronósticos y de respuesta
terapia
 Agentes infecciosos asociados
 Reconoce productos de oncogenes, GST y
genes relacionados a apoptósis

171. Queratina

172. Mesotelioma maligno
Mesotelioma Calretinina
bifásico

173. Cromogranina
Carcinoma neuroendocrino Feocromocitoma

174. Receptores de estrógenos
Carcinoma de mama

175. Adenoma de hipófisis
somatotropo
H/E GH

176. Linfoma no Hodgkin
CD 45

177. Linfoma de células del manto
 CD5 ++++
 CD10 – (+)
 CICLINA D1 +
 CD43 +
 CD 23

178. Citomegalovirus

179. Mesotelioma maligno

180. Mesotelioma maligno
Mesotelioma Queratina +
bifásico

181. Estómago
CD 45 CD20

182. Biología Molecular
 Análisis de DNA
 “ “ RNA

183. Biología Molecular. Técnicas más
empleadas
 HIS
 PCR
 RT-PCR
 PCR-HIS

184. HIS y PCR. Aplicaciones
 Infecciones virales
VPH, JC, CMV, EBV, HC, HIV
 Estudios de oncogenes
 FISH. Desórdenes cromosómicos
(monosomías, trisomías, deleciones y
translocaciones)

185. PCR
 LLC  T (9;22)
 LLA  T (9;22)
 L. Folicular  T (14;18)
 L. Anaplásico  T (2;5)
 LA Promielocítica M3  T (15-17)
 L Aguda mixta  T (4;11)
 LLA de células Pre-B  T (1,19)
 L. Células del manto  T (11;14)
 L. Burkitt  T ( 8; 14)
 L. MALT  T (11; 14)