El documento trata sobre la inmunohematología, enfocándose en la estructura y función de los antígenos y anticuerpos en el sistema inmunológico, así como en la tipificación sanguínea y las reacciones transfusionales. Se describen los diferentes grupos sanguíneos, la biosíntesis de antígenos y la importancia de conocer el tipo de sangre para transfusiones y embarazos. Además, se analizan las reacciones antígeno-anticuerpo, como la aglutinación y hemólisis, y su relevancia clínica.

1. INMUNOHEMATOLOGÍA
Salvador Camacho Garrido

2. REACCIONES Ag-Ac
Tanto la respuesta humoral como la celular
suponen el reconocimiento de determinadas
estructuras químicas en la superficie de
macromoléculas extrañas, los antígenos
Las zonas del antígeno que se unen
específicamente con el anticuerpo o con el
receptor de un linfocito, se denominan
determinantes antigénicos
Cada antígeno puede presentar varios
determinantes antigénicos diferentes que
estimulan la producción de anticuerpos y la
repuesta de los linfocitos T
Estas estructuras químicas, los determinantes
antigénicos, son los responsables de la
especificidad de la respuesta inmunitaria

3. CONTACTO
Cuando se ponen en contacto un
antígeno con el anticuerpo específico,
reaccionan uniéndose mediante un
enlace no covalente y se
desencadenan una serie de procesos
capaces de neutralizarlo y eliminarlo
La combinación del anticuerpo con el
antígeno desencadena una serie de
procesos capaces de neutralizar y
eliminar a una sustancia extraña

4. ANTÍGENOS
Toda sustancia que, introducida en un organismo que no
la poseía, provoca en él la formación de un anticuerpo
específico con el cual puede combinarse de forma
electiva
Pueden ser cuerpos figurados vivos o muertos (células
de los tejidos, elementos de una célula, microbios) o sus
productos de elaboración (secreciones celulares,
toxinas), o compuestos orgánicos (albúminas, nucleínas)
Antígeno eritrocitario. Antígeno presente en los
glóbulos rojos y también en los leucocitos (ver leucocito)
y en diferentes tejidos del organismo
Existen más de 130 antígenos eritrocitarios pero en la
práctica sólo dos son importantes: el antígeno
eritrocitario A y el antígeno eritrocitario B, cuya
presencia o ausencia caracteriza a los grupos
sanguíneos y regula las incompatibilidades sanguínea e
hística y el denominado factor Rh

6. Antígenos eritrocitarios

7. ANTÍGENOS ABH
GEN
A
B
H
ENZIMA
AZÚCAR
1,3N-acetilgalactosaminiltransferasa N-acetilgalactosamina
1,3 Galactosiltransferasa
Galactosa
1,2 Fucosiltransferasa
Fucosa

8. Fenotipo Bombay
Productos codificados por los genes ABO y H

9. 5
6
1
D-Galactosa
4
3
1
6
2
N-acetil-glucosamina
enlace alfa 1-3
4
2
3
NHCOH3
D-Galactosa
CADENA PRECURSORA
TIPO 1
Glucosa
1

10. 5
4
6
1
D-Galactosa
3
6
5
2
N-acetil-glucosamina
enlace 1-4
4
2
3
NHCOH3
D-Galactosa
CADENA PRECURSORA
TIPO 2
Glucosa
1

11. Fuc
1,2 Fucosiltransferasa
6
Gal
SUSTANCIA H
TIPO 1
enlace alfa 1-3
1
11
6
NAcGlc
4
1
2
3
NHCOH3
Gal
Glu

12. 1,3 N-acetilgalactosaminiltransferasa
NAcGal
Fuc
6
Gal
ANTÍGENO A
(H 1)
enlace alfa 1-3
1
11
6
NAcGlc
4
1
2
3
NHCOH3
Gal
Glu

13. Gal
l
1,3 Galactosiltransferasa
ANTÍGENO B
(H 1)
Fuc
6
Gal
enlace alfa 1-3
1
11
6
NAcGlc
4
1
2
3
NHCOH3
Gal
Glu

14. 1,2 Fucosiltransferasa
Fuc
5
6
Gal
4
3
enlace alfa 1-4
SUSTANCIA H
TIPO 2
1
6
5
2
NAcGlc
4
1
2
3
NHCOH3
Gal
Glu

15. 1,3 N-acetilgalactosaminiltransferasa
NAcGal
Fuc
5
6
Gal
4
3
enlace alfa 1-4
ANTÍGENO A
(H 2)
1
6
5
2
NAcGlc
4
1
2
3
NHCOH3
Gal
Glu

16. Gal
l
Fuc
5
1,3 Galactosiltransferasa
6
Gal
4
3
enlace alfa 1-4
ANTÍGENO B
(H 2)
1
6
5
2
NAcGlc
4
1
2
3
NHCOH3
Gal
Glu

17. FENOTIPO
FRECUENCIA
A1
80%
SUST PRECURSORA
H1
(tipo II)
H2
H3
H4
SITIOS ANTIGÉNICOS 850,000
ANTICUERPOS (SUERO) ANTI-B
A2
20%
H1
H2
240,000
ANTI-B
ANTI-A1(3 %)

18. GRUPO O POR MUTACIÓN
Se han aislado los ADN de las enzimas responsables de
la biosíntesis de los antígenos sanguíneos.
Dos aminoácidos (leucina 266 y glicina 268) hacen a la
enzima A capaz de reconocer la N-acetilgalactosamina.
Dos aminoácidos (metionina 266 y alanina 268) hacen a
la enzima capaz de reconocer la galactosa.
Los ADN de las células O por mutaciones carecen de la
síntesis de una enzima.
Los grupos O pudieron tener esa pérdida por mutación
de los grupos A y/o B.

19. Productos codificados por los genes ABO y H

20. LEWIS
Los grupos sanguíneos Lewis a, b, c, d y x, y
derivan respectivamente de las cadenas 1 y 2, por
adición de una fucosa, o de un ácido siálico en los
derivados sialilados
Su presencia depende de la naturaleza de la cadena
oligosacárida básica, de las enzimas presentes en
una célula dada y de otros parámetros genéticos del
sujeto
La cadena tipo 1 está presente en mayor parte en los
epitelios secretores
La cadena tipo 2 está presente en los glóbulos rojos
y en otras células sanguíneas y epiteliales

21. SISTEMA ABO
Y LEWIS
Le(b)
Le(a)
enzima HE
antígeno B
enzima Le
Gen Se
enzima B
tipo 1
enzima H1
Le(c)
antígeno H
Le(d)
antígeno A
enzima Le
SLe(a)

22. SISTEMA ABO
Y LEWIS
Le(y)
antígeno B
antígeno A
enzima X
enzima X
enzima Hll
enzima B
enzima A
tipo 2
antígeno A2
enzima A1
enzima ST
enzima X
SLe(x)
antígeno A1

23. GENES SE Y se
75% Excretan antígenos A, B y H en leche, saliva, jugo
gástrico, esperma, etc.. Se les dice Secretores
La secreción está relacionada con la presencia de un Se,
en secretores y se, en los no secretores
El gen Se dirige la producción de una fucosiltransferasa
específica de la cadena tipo 1. Mientras que otro gen H
proporciona la enzima específica de la cadena de tipo 2
El estado de secreción y no secreción influye en la
distribución de los grupos Lewis
Por ejemplo, los antígenos Le(a) o Le(c) están en los no
secretores (25 al 30%). Los antígenos Le(b) o Le(d) están
en los secretores (70 al 75%)

24. ANTICUERPOS
Los anticuerpos son glucoproteínas secretadas
por las células plasmáticas, que reciben
colectivamente el nombre de
inmunoglobulinas (abreviadamente Ig)
La especificidad de estas proteínas ante los
diferentes antígenos es semejante a la de la
enzima con respecto a su sustrato
Los anticuerpos circulan por la sangre y
penetran en los fluidos corporales donde se
unen específicamente al antígeno que provocó
su formación

25. ESTRUCTURA
Las inmunoglobulinas son moléculas que tienen forma
de “Y” constituida por cuatro cadenas polipeptídicas
iguales dos a dos. Dos cadenas pesadas o cadenas H
(del inglés heavy) y dos cadenas ligeras o cadenas L
(light) de menor peso molecular. Las uniones entre las
cadenas se hacen mediante puentes disulfuros (-S-S-)
Las zonas amino terminales de las cadenas H y L
constituyen las regiones variables cuya secuencia de
aminoácidos es específica de cada anticuerpo (por ellas
se unen a los antígenos)
La porción carboxilo terminales corresponden a las
regiones constantes, que varían muy poco dentro de
cada tipo de inmunoglobulina

28. Alotipos de las inmunoglobulinas (Grupos GM)

29. ANTICUERPOS
TIPOS
% EN
SUERO
FUNCIÓN
LOCALIZACIÓN
Ig G
80
Pueden atravesar la placenta y pasar al
embrión. Facilita la fagocitosis.
Sangre y leche
materna
5 - 10
Son los primeros que se producen ante
la presencia de antígenos.
Facilita la fagocitosis y la lisis celular.
Suero y membrana
de los linfocitos B
10 - 15
Protege las cavidades externas del
cuerpo.
Saliva, lágrimas,
mucus respiratorio,
leche, etc.
Su función es poco conocida. Se cree
que estimula a los linfocitos B a
producir anticuerpo.
Membranas de los
linfocitos B
Interviene en las infecciones
parasitarias y en fenómenos alérgicos.
Piel
Ig M
Ig A
Ig D
Ig E
< 1

30. Reacciones antígeno-anticuerpo
Tanto la respuesta humoral como la celular suponen el
reconocimiento de determinadas estructuras químicas en la
superficie de macromoléculas extrañas, los antígenos. Las
zonas del antígeno que se unen específicamente con el
anticuerpo o con el receptor de un linfocito, se denominan
determinantes antigénicos
Cada antígeno puede presentar varios determinantes
antigénicos diferentes que estimulan la producción de
anticuerpos y la repuesta de los linfocitos T. Estas estructuras
químicas, los determinantes antigénicos, son los
responsables de la especificidad de la respuesta inmunitaria
Cuando se ponen en contacto un antígeno con el anticuerpo
específico, reaccionan uniéndose mediante un enlace no
covalente y se desencadenan una serie de procesos capaces
de neutralizarlo y eliminarlo
La combinación del anticuerpo con el antígeno desencadena
una serie de procesos capaces de neutralizar y eliminar a una
sustancia extraña

31. Reacciones más importantes
Precipitación
Aglutinación
Neutralización
Opsonización

32. Precipitación
Al unirse antígenos y anticuerpos solubles forman
agregados insolubles que precipitan, lo que inactiva a
los antígenos.

33. Aglutinación
El anticuerpo se une a antígenos situados en la superficie de
una célula. Como los anticuerpos tienen dos puntos de unión,
los microorganismos forman agregados y ya no pueden
infectar otras las células
La hemoaglutinación se produce entre los anticuerpos del
plasma sanguíneo y los antígenos de los glóbulos rojos de la
sangre de diferente grupo sanguíneo. Esta prueba es
fundamental en la determinación de los grupos sanguíneos
ABO

34. Neutralización
La unión del anticuerpo bloquea la acción de los
antígenos contra la célula. Así, los antígenos no se
pueden unir a las células y matarlas

35. Opsonización
Producida por unos anticuerpos especiales (opsoninas),
que se fijan sobre la superficie del antígeno facilitando la
acción de células fagocitarías y células asesinas
naturales (NK)

37. DETERMINACIONES
TRANSFUSIONALES
Los médicos necesitan conocer el tipo de sangre de una
persona cuando se van a someter a una transfusión de
sangre o a un trasplante, debido a que no todos los tipos
de sangre son compatibles entre sí.
Por ejemplo:
· Si una persona tiene sangre tipo A, únicamente puede
recibir sangre tipo A y tipo O.
· Si una persona tiene sangre tipo B, únicamente puede
recibir sangre tipo B y tipo O.
· Si una persona tiene sangre tipo AB, únicamente
puede recibir sangre tipo A, B, AB y O.
· Si una persona tiene sangre tipo O, únicamente puede
recibir sangre tipo O.
La sangre tipo O se le puede dar a alguien con cualquier
tipo de sangre, razón por la cual este tipo de personas
son llamadas donantes universales.

38. GRUPO SANGUÍNEO AB0
La sangre a menudo se clasifica de acuerdo con
el sistema ABO
Este método separa los tipos de sangre en
cuatro categorías:
· Tipo A
· Tipo B
· Tipo AB
· Tipo O
El tipo de sangre (o grupo sanguíneo) de una
persona también depende de lo que ha
heredado de sus padres.

41. Donantes: 6 346
Grupo
sanguíneo
%
3 096
O
48,79
2 231
A
35,15
774
B
12,20
227
AB
3,58
14
A2B
0,22
2
A2BHw
0,03
1
Ael
0,01
1
Aint
0,01

43. DETERMINACIÓN DIRECTA
La sangre se extrae de una vena
El sitio de punción se limpia con un antiséptico
Se coloca una banda elástica
Se introduce una aguja en la vena y se recoge la sangre
Se retira la banda para restablecer la circulación
La sangre se puede recoger en una pipeta (tubo
pequeño de vidrio), en una lámina portaobjetos, en una
tirilla de examen o en un recipiente pequeño
La sangre de la persona se mezcla con anticuerpos
contra sangre tipo A y tipo B, y la muestra se revisa para
ver si los glóbulos sanguíneos se pegan o aglutinan.
Si dichos glóbulos se aglutinan, eso significa que la
sangre reaccionó con uno de los anticuerpos

44. Valores normales
Si los glóbulos sanguíneos se pegan o aglutinan
al mezclarse con:
· Suero anti-A, la persona posee sangre tipo A.
· Suero anti-B, la persona posee sangre tipo B.
· Sueros anti-A y anti-B, entonces la persona
posee sangre tipo AB.
Si los glóbulos sanguíneos no se pegan o
aglutinan cuando se agrega suero anti-A y antiB, la persona tiene sangre tipo O.

47. DETERMINACIÓN INVERSA
· Si la sangre se aglutina cuando se agregan
células B a la muestra, la persona tiene sangre
tipo A.
· Si la sangre se aglutina cuando se agregan
células A a la muestra, la persona tiene sangre
tipo B.
· Si la sangre se aglutina cuando se agregan
ambos tipos de células a la muestra, la persona
tiene sangre tipo O.
La falta de aglutinación de los glóbulos
sanguíneos cuando la muestra se mezcla con
ambos tipos de sangre indica que la sangre es
tipo AB.

48. Tipificación del Rh
· Si los glóbulos sanguíneos se pegan o
aglutinan al mezclarlos con suero antiRh (anti-D), el tipo de sangre es Rh
positivo
· Si la sangre no se coagula al mezclarse
con suero anti-Rh, el tipo de sangre es
Rh negativo

49. IMPORTANCIA
Si una persona es Rh(+), puede recibir sangre
Rh(+) o Rh(-), pero si es Rh(-), únicamente
puede recibir sangre Rh(-)
La determinación del grupo sanguíneo es
especialmente importante durante el embarazo.
Si la madre posee sangre Rh negativa, entonces
el padre también debe ser evaluado
Si el padre tiene sangre Rh positiva, entonces la
madre necesita recibir un tratamiento para
ayudar a prevenir el desarrollo de sustancias
que le pueden hacer daño al feto

50. D
R
AB+
ABA+
AB+
BO+
O-
O-
O+
B-
B+
A-
A+
AB-
AB+
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X

53. CONSIDERACIONES
Muchos antígenos menores no se detectan
rutinariamente durante la determinación del
grupo sanguíneo
Si no se detectan, la persona puede
experimentar una reacción al recibir ciertos tipos
de sangre
Un proceso llamado pruebas cruzadas, seguido
de una prueba de Coombs, puede ayudar a
detectar estos antígenos menores
Además se puede estudiar el factor DU o Rh(+)
débil.

63. Hemólisis
La hemólisis (eritrocateresis) es el fenómeno de
la desintegración de los eritrocitos (glóbulos
rojos o hematíes)
En determinadas situaciones patológicas hay un
aumento de la destrucción de los eritrocitos intra
o extravascular, como consecuencia de:
unión antígeno-anticuerpo (reacción
transfusional,), de lesiones mecánicas (como en
el fallo de las prótesis valvular cardiaca)
trastornos osmóticos
trastornos enzimáticos
trastornos tóxicos
alteraciones congénitas de los eritrocitos (en
anomalías de la hemoglobina o en infecciones)

65. Hemoaglutinación directa
Mientras que el entrecruzamiento de los antígenos
proteicos multivalentes con el anticuerpo produce una
precipitación, la interrelación entre células o partículas
de gran tamaño con los anticuerpos dirigidos contra los
antígenos de superficie conducen a una aglutinación
Dado que la mayoría de las células poseen cargas
eléctricas, se requiere una cantidad razonable de
anticuerpos entre dos células antes de que se supere la
repulsión mutua con un reactivo antiglobulina
La presencia de antígenos en la superficie de los
glóbulos rojos se puede detectar por la
hemoaglutinación producida cuando se añade un
antisuero con anticuerpos frente a dichos antígenos

67. Test directo de aglutinación

68. Eritrocitos aglutinados

69. Test indirecto de Coombs
Anticuerpos
Eritrocitos
Antiglobulina

70. Test de
Commbs
2 GOTAS HR
5 % EN SS
2 GOTAS HR
5 % EN SS
2-3 GOTAS SR
ALBÚMINA
2 GOTAS
2 GOTAS anti D
ALBÚMINA
2 GOTAS
37 ºC 15 minutos
Hemantígenos
I, II y III
1 GOTA
Determinación
de Du
centrifugar
resuspender
INCOMPATIBLE
centrifugar
resuspender
INCOMPATIBLE
lavado
Tamb. 30 minutos
37 ºC 15 minutos
Determinación
de anticuerpos
irregulares.
Test de
Coombs
Indirecto
centrifugar
resuspender
INCOMPATIBLE
lavado
2 GOTAS anti IgG-C3d
COMPATIBLE
1 GOTA Control Coombs
centrifugar
resuspender
INCOMPATIBLE
centrifugar
resuspender
COMPATIBLE
inconcluyente

75. 2 GOTAS SR
1 GOTA HD
centrifugar
resuspender
INCOMPATIBLE
salino inmediato
2 GOTAS albúmina
PRUEBA CRUZADA
MAYOR EN TUBO
centrifugar
resuspender
albúmina inmediata
37 ºC
albúmina incubada
INCOMPATIBLE
30 minutos
centrifugar
resuspender
INCOMPATIBLE
lavado
2 GOTAS anti IgG-C3d
COMPATIBLE
1 GOTA Control Coombs
centrifugar
resuspender
INCOMPATIBLE
centrifugar
resuspender
COMPATIBLE
inconcluyente