2. Las sustancias de grupo sanguíneo
están ampliamente distribuidas a
través de los tejidos, células
sanguíneas y líquidos corporales.
Ciertos antígenos son componentes
integrales estructurales de la
membrana eritrocitaria.
3. • Cuando se introduce cualquier material
extraño en el organismo puede producir
graves reacciones entre el tejido del
donante y las defensas del receptor
• La comprensión de la constitución
genética de un individuo es importante
para comprender el reconocimiento de los
antígenos extraños y la producción de
anticuerpos contra ellos.
4. ANTÍGENO
Sustancia capaz de inducir una
respuesta inmune específica.
Los antígenos están definidos por los
anticuerpos que reaccionan a ellos.
Pueden ser proteínas, carbohidratos o
lípidos, con un peso molecular mayor a
5000 daltones.
5.
6. Entre más extraño es el
determinante antigénico o mientras
mayor es el grado por el cual es
reconocido como no propio x un
individuo, más antigénico es.
La inmunogenicidad de una
molécula depende de su grado de
diversidad.
7. DEGRADABILIDAD
Para un antígeno que es reconocido
como extraño por el sistema
inmunológico de un individuo, debe ser
presentada una suficiente cantidad de
antígeno para estimular la respuesta
inmune.
Las moléculas extrañas, que son
rápidamente destruidas, deben ser
presentadas por tiempo suficiente para
proveer la exposición antigénica
necesaria.
8. PESO MOLECULAR
Entre mayor es el peso
molecular, mejor funciona la
molécula como antígeno.
El número de determinantes
antigénicos en una molécula, está
directamente relacionado con su
tamaño.
9. ESTABILIDAD ESTRUCTURAL
Si una molécula funciona como
un antígeno efectivo, la
estabilidad estructural es una
característica esencial.
10. COMPLEJIDAD
Entre más complejo es un antígeno,
es más efectivo.
El complejo de proteínas son
mejores antígenos que los
polímeros tales como lípidos,
carbohidratos y ácidos nucleicos.
11.
12. Químicamente clasificados como
globulinas, pueden encontrarse en
plasma, lágrimas, saliva y leche.
Estas glicoproteínas se llaman
inmunoglobulinas y hay 5 clases:
IgG, IgM, IgA, IgD, IgE.
13. INMUNOGLOBULINA G
IgG.- 75% del total de las inmunoglobulinas del plasma normal.
Cuatro subclases: IgG1, IgG2, IgG3, IgG4.
Subclase Ig CARACTERISTICAS
IgG1 Segundo lugar como Ig Activadora de complemento y en la
reacción entre el Receptor Fc de los macrófagos y la IgG.
IgG2 Inmunoglobulina ineficiente, no activa complemento, ni
actúa en los macrófagos.
IgG3 Ig más eficiente como activador de la fracción C1q del
complemento.
Tiene una mayor eficiencia en la reacción entre el receptor
Fc de los macrófagos y la IgG.
IgG4 Inmunoglobulina ineficiente, no activa complemento, ni
actúa en los macrófagos.
14.
15. INMUNOGLOBULINA M
• Constituye el 5 al 10% de las Ig del
plasma normal.
• Moléculas que se presentan como
pentámeros.
• 5 unidades monomèricas están unidas
por enlaces disulfìdicos, formando un
pentámero de peso molecular cercano
a un millón de daltones.
• Contiene una región variable y 4
constantes.
16.
17. RESPUESTA ANTIGÉNICA
La producción de anticuerpos es
inducida cuando el sistema inmune
del huésped entra en contacto con
una sustancia antigénica extraña y
reacciona a éste estímulo antigénico.
18. RESPUESTA ANTIGÉNICA
• Una reacción inmune puede
llevarse a cabo por inmunidad
mediada por células (células T
o macrófagos) ó involucrar la
producción de anticuerpos
dirigidos contra el antígeno.
19. RESPUESTA INMUNOLÒGICA PRIMARIA
• Exposición de un organismo por
primera vez a un antìgeno extraño.
• Producción de anticuerpos
específicos, que aparecen después de
pocos días (7 a 10); los cuales se
incrementan lentamente hasta alcanzar
un nivel en 2 semanas.
• Aparecen en respuesta la
IgM, eventualmente aparecen IgG y
declina IgM.
20. RESPUESTA PRIMARIA
Producción de IgM en 4 fases:
1. Fase lag, en que no hay anticuerpos
detectables.
2. Fase log, en que hay aumento logarítmico
del anticuerpo.
3. Fase plateau, durante la cual el anticuerpo
se estabiliza.
4. Fase de declinación, en que el anticuerpo es
catabolizado.
21. RESPUESTA SECUNDARIA
La respuesta secundaria difiere
de la respuesta primaria en
varios aspectos importantes:
1. Tiempo.- una respuesta
secundaria tiene una fase lag
más corta, fase plateau más
prolongada y una declinación
mas gradual.
22. RESPUESTA SECUNDARIA
2. Tipo de anticuerpo.- aunque en la
respuesta secundaria se forman algunas
IgM, predominan las IgG entre los
anticuerpos formados.
3. Título de anticuerpo.- en una respuesta
secundaria, los niveles de anticuerpo
tienen un título mayor.
4. Los niveles plateau en una respuesta
secundaria son 10 veces mayores que en
la respuesta primaria.
23. ESTRUCTURA DE LOS ANTICUERPOS
Existe diversidad entre las diferentes
clases de anticuerpos, en base a la
función primaria de unión al antígeno.
Una región de la molécula se concentra
en la unión al antígeno, mientras que la
otra establece la unión de
inmunoglobulina a los tejidos del
huesped, incluyendo células del
sistema inmune y complemento.
24.
25.
26. 1. SENSIBILIZACIÓN
Ocurre cuando los
anticuerpos reaccionan
con los antígenos en las
células y las cubre.
27. 2. AGLUTINACIÓN
Ocurre cuando los
anticuerpos de las células
cubiertas forman uniones
cruzadas entre las células,
ocasionando visible
agrupación celular.
28. FACTORES QUE AFECTAN LA
SENSIBILIZACIÓN
La especificidad depende del espacio y
compatibilidad química entre antígeno y
anticuerpo.
Inmunoglobulinas y membrana
eritrocitaria tienen carga eléctrica, con
un optimo pH.
Diferencias en pH causa diferencias en
la estructura química de antígenos y
anticuerpos, afectando la
compatibilidad.
29. TEMPERATURA
La temperatura optima depende
del tipo de anticuerpo
involucrado.
Los acs IgG reaccionan mejor a
37°C; IgM, reacciona mejora a
4°C
30. TIEMPO DE INCUBACIÓN
La incubación debe de ser lo
suficientemente amplia para
alcanzar el equilibrio, pero no
incubar demasiado tiempo.
31. ACCESIBILIDAD
Los anticuerpos deben ser capaces
de alcanzar a los antígenos.
Hay antígenos en la superficie del
eritrocito, otros pueden estar
escondidos en las criptas de la
membrana celular.
32.
33. RASTREO ANTICUERPOS IRREGULARES (RAI)
El suero del paciente se combina
con los eritrocitos en fase
salina, albúmina rápida, a
37°C, coombs y control de coombs.
Si se observa aglutinación, la
temperatura y modo de reactividad
sugieren cuál sistema de grupo
sanguíneo está involucrado.
34. Si el patrón de reactividad
determina un antígeno o varios en
los eritrocitos de las células del
panel, puede establecerse
tentativamente la identidad del
anticuerpo.
Los alo o autoanticuerpos pueden
encontrarse en varias situaciones:
35. 1. Discrepancias ABO.- Anticuerpos o
antígenos faltantes ó adicionales.
2. En presencia de antiglobulina directa
positiva ó suero con anormalidades en
sus proteínas.
3. Rastreo de aloanticuerpos positivo.
4. Prueba cruzada incompatible.
5. Reacciones Transfusionales.
6. Ictericia en el recién nacido.
36.
37. 1. HISTORIA CLÍNICA
• Primer paso en el estudio del
paciente:
Edad, sexo y raza.
Datos que pueden ofrecer pistas que
orienten a la especificidad del
anticuerpo involucrado por frecuencia en
población de raza blanca, raza negra y
raza mestiza.
38. 1.1 REGISTROS DEL BANCO DE
SANGRE
Para confirmar grupo ABO y
Rh del paciente en
ocasiones anteriores, que
pueden alertar de algún
problema.
39. 1.2 HISTORIA TRANSFUSIONAL
Documentar transfusiones
previas.
No. De unidades, fechas y
patología de fondo.
Derivados del plasma,
concentrados de factor VIII,
gammaglobulina, plaquetas ó
crioprecipitados no isogrupo.
41. 1.4 MEDICAMENTOS
Tratamientos prolongados con
algún medicamento.
Medicamentos actuales y en el
año previo.
Efectos por medicamentos.
Anemia hemolítica autoinmune
secundaria.
42. 1.5 DIAGNÓSTICO
Historia
clínica, incluyendo
condiciones que pueden
estar asociadas a
hallazgos serológicos
anormales.
43. 2. ESTUDIO SEROLÓGICO
PRELIMINAR
2.1 Muestra de sangre
reciente en tubo seco y con
EDTA.
2.2 Centrifugar y estudiar el
suero de la muestra en tubo
seco, descartar hemólisis e
ictericia.
44. 2.3 Lavar los eritrocitos de la
muestra con anticoagulante
y repetir grupo ABO.
2.4 Prueba de Coombs
directo.
2.5 Si la prueba anterior es
positiva, realizar control de
coombs.
45. 2.6 Repetir el rastreo en dos sets de
screening:
• uno debe incubarse a temperatura
ambiente, a 15°C y 4°C.
• El otro debe incubarse a 37°C con y
sin albúmina y ambos llevarlos a
fase de Coombs.
• Si se obtiene un resultado positivo,
observar grado de hemólisis.
46. 3. EVALUACIÓN E IDENTIFICACIÓN DEL
ANTICUERPO
Los anticuerpos pueden
clasificarse en calientes y fríos,
indicando la temperatura a la
cual reacciona el anticuerpo.
Otra clasificación es IgM, IgG.
47. INVESTIGACIÓN DE ANTICUERPOS QUE
REACCIONAN MEJOR A TEMPERATURA
AMBIENTE
ANTI-A, ANTI-B, ANTI-AB, ANTI-A1,
LEA Y ANTI-LEB, ANTI-P1, ANTI-M Y
ANTI-N:
Discrepancia ABO.
Presencia de aloanticuerpos.
Autocontrol: negativo, positivo o
variable.
Presencia de un anticuerpo débil
o antígeno de baja incidencia.
48. ALOANTICUERPO POSITIVO CON AUTOCONTROL
NEGATIVO
Si el aloanticuerpo reacciona fuertemente a
temperaturas frías y el autocontrol
permanece negativo, el patrón de
reactividad indica:
1. Un anticuerpo que puede reaccionar mejor
con células homocigotas para el antígeno.
2. Anticuerpo dirigido contra un antígeno de
fuerza variable entre donadores
(P1, Lewis, Sd)
3. Múltiples anticuerpos.
49. SEGUIMIENTO
Si un paciente tiene un anticuerpo
que reacciona a temperatura
ambiente y el grupo ABO no otorga
los resultados esperados, realizar
grupo inverso con células que
carecen del antígeno al que
corresponde el anticuerpo.
50. ALOANTICUERPO POSITIVO CON
AUTOCONTROL POSITIVO
Aglutininas frías.
Los autoanticuerpos no
específicos, así como anticuerpos
fríos específicos pueden aglutinar
los eritrocitos del paciente,
pudiendo enmascarar los
aloanticuerpos.
51. ALOANTICUERPO POSITIVO CON
AUTOCONTROL POSITIVO
Cuando tenemos una prueba de
Coombs directo + y el
autoanticuerpo tiene título alto
y amplio rango térmico, el
paciente puede tener anemia
hemolítica.
52. ESTUDIOS BÁSICOS
1. Determinación del rango
térmico del anticuerpo,
estudiando el suero del
paciente a 4 y 37°C.
2. Coombs directo con reactivo
poliespecífico, IgG - y C3 +.
3. Titular el suero (opcional).
53. INVESTIGACIÓN DE ANTICUERPOS QUE
REACCIONAN MEJOR A 37°C Ó EN FASE
DE COOMBS
A N T I - F y, A N T I - S , A N T I - s , A N T I -
JK, ANTI-K, ANTI-k Y TODOS
LOS ANTICUERPOS RH.
TA L E S A N T I C U E R P O S S E
ENCUENTRAN EN 0.3 A 2% DE
LA POBLACIÓN, DEPENDIENDO
DE LA INCIDENCIA DE
TRANSFUSIONES PREVIAS Ó
EMBARAZOS.
54. Los anticuerpos Rh ocasionalmente
reaccionan en salina rápida ó a
37°C, generalmente en fase AGH.
Cuando determinamos la especificidad del
anticuerpo del paciente, debemos elegir
unidades que carecen del antígeno
correspondiente.
Si el paciente recibió recientemente
transfusiones, existe aglutinación de campo
mixto.
55. PROBLEMAS EN EL RASTREO DE ACS
1. ANTICUERPOS DE BAJO TITULO.
2. ALTO TITULO DE ANTICUERPOS DE BAJA AVIDEZ.
3. ANTICUERPOS DE ANTIGENOS DE BAJA
INCIDENCIA.
4. ANTICUERPOS ABO PASIVAMENTE ADQUIRIDOS.
5. POLIAGLUTINACIÒN.
6. PANAGLUTINACIÒN.
7. FENÓMENO DE ALGUTINACIÒN CON ALBÙMINA.
8. ANTICUERPOS A LA SOLUCIÒN PRESERVADORA DE
ERITROCITOS.
9. AUTOALGUTININAS LISS.
10. FORMACIÒN ROULEAUX.
56. 1. ANTICUERPOS DE BAJO TITULO
Son difìciles de detectar in
vitro.
Algunos acs IgG, como anti-
Kidd, Duffy y anti-Dombrock
raramente tienen tìtulos
mayores a 1:4.
Se sospechan si se observan
algutinaciones dèbiles.
57. 2. ALTO TITULO DE ANTICUERPOS DE
BAJA AVIDEZ
• Anticuerpos con características
serológicas similares que tienen baja
capacidad de unión al antígeno y alto
título.
• Anti-Chido, Anti-Rodgers, Anti-Yk,
anti-Cs, anti-Kn, anti-McC y anti-SD.
• Se observan reacciones débiles con la
mayoría de los eritrocitos en fase
AGH.
• Para establecer su presencia se
58. 3. ANTICUERPOS DE ANTÍGENOS DE BAJA
INCIDENCIA
• Pueden no ser detectados dentro del
panel de anticuerpos.
• Pueden ser aparentes por
incompatibilidad en prueba cruzada.
• La especificidad del anticuerpo es
únicamernte por interés académico.
• Determinar la naturaleza del problema
inmunohematológico.
59. 4. ANTICUERPOS ABO
ADQUIRIDOS PASIVAMENTE
• Pueden ser detectados después de una
transfusión masiva con productos no
isogrupo ABO.
• Se puede manifestar por reacción de
campo mixto ó discrepancia ABO.
• Reacciones generalmente importantes a
temperatura ambiente.
• Autocontrol positivo, dependiendo de la
cantidad de unidades transfundidas y
vol. Sanguíneo del paciente.
60. 5. POLIAGLUTINACION
• Los eritrocitos son aglutinados
por todos o casi todos los
sueros humanos.
• El autocontrol generalmente es
negativo.
61. 6. PANAGLUTINACIÓN
• Es causada por un anticuerpo
capaz de algutinar todos los
eritrocitos estudiados,
incluyendo las propias células
del paciente.
• El patrón de reactividad es
inespecífico.
62. 7. FENÓMENO DE AGLUTINACIÓN POR
ALBÚMINA
• Causado por un anticuerpo en el suero
del paciente que es reactivo con sodio
caprilato, un estabilizador utilizado en
casi todas las preparaciones de
albúmina.
• El suero puede parecer que contiene el
anticuerpo, pero posteriormente se
revela que éstas reacciones sólo
ocurren cuando se utiliza la albúmina.
63. • Generalmente se observa después
de incubación a 37°C, aunque en
algunas muestras pueden
detectarse sólo después de la fase
de AGH.
• En estos casos, el autocontrol en
albúmina es positivo y en Coombs
es negativo.
64. 8. ANTICUERPOS A LA SOLUCIÒN
PRESERVADORA DE ERITROCITOS
• Ocasionalmente, el paciente puede
contener anticuerpos dirigidos
contra un específico químico o
antibiótico contenido en la solución
preservadora.
• Se produce aglutinación sólo a las
células del panel, sin embargo, la
prueba cruzada resulta compatible
con todas las unidades.
65. • El suero reacciona a
temperatura ambiente ó
después de la suspensión del
suero con las células.
• Se puede resolver lavando las
células del panel.
66. 9. AUTOALGUTININAS LISS
• El suero del paciente contiene
panaglutininas cuando se incluye
solución LISS (low ionic strenght salt
solution)
• La fase de reactividad puede variar, pero
la aglutinación puede observarse a
temperatura ambiente ó en fase de AGH.
• Se deben realizar las pruebas con otras
soluciones para favorecer la reacción
ag-ac.
67. 10. FORMACION ROULEAUX
• Representa un tipo de pseudo-
aglutinación en la que los
eritrocitos son agregados por
las propiedades del suero en el
que se estudian.
• La apariencia de los eritrocitos
es en pila de moneda, es mas
traslúcida y refractil que en una
aglutinación verdadera.
68. • Produce un cambio en la carga de
la superficie del eritrocito por una
alteración en el suero o plasma.
• Cuando se utilizan células lavadas,
no debe haber ninguna
discrepancia en ABO y Rh.
69. • Generalmente 2 gotas de salina y 2
gotas de albúmina corrigen el
problema
• La albúmina corrige la reacción
anormal globulina/albúmina y la
salina dispersa la formación
Rouleaux.
70.
71. EMBARAZO CON RIESGO PARA
DESARROLLO DE EHRN
• La inmensa mayoría de los
antígenos de grupo sanguíneo
pueden ser el origen de una
incompatibilidad feto-materna
(IFM), responsable de la
enfermedad hemolítica del recién
nacido.
• Los anticuerpos desarrollados por
la madre más frecuentemente
encontrados, son los dirigidos
72. OTROS CASOS….
• Desde el punto de vista
experimental, podría caber la
posibilidad de determinarlos en
otro tipo de escenarios, tales como
en el caso de los pacientes con
trasplante de células
hematopoyéticas o de órganos
sólidos ante la sospecha de una
hemólisis por transferencia pasiva
de anticuerpos.
73. • La reglamentación impone 4 RAI
(determinaciones de aglutininas
irregulares) en mujeres Rh
negativas (anti-Rh1 son los
anticuerpos más frecuentes) o con
antecedentes de transfusión, en el
3º, 6º, 8º y 9º mes de embarazo y
una única, en el 3º mes, en la mujer
Rh positiva.
74. • En todos los casos, ante una
hallazgo positivo, se deben
identificar y dosificar los
aloanticuerpos.
• La realización del fenotipo en el
sistema implicado es indispensable
para definir el carácter auto o alo
del anticuerpo (los autoanticuerpos
no están implicados en IFM).
75. • En estos casos, el control
mensual del título de
anticuerpos se debe realizar
cada mes hasta el término del
embarazo.
• En caso de aumento del título
de anticuerpos, se aumentará el
control biopatológico y
ecográfico de la madre.
76. • Es importante hacer el grupo
sanguíneo al padre en el sistema
incriminado, si éste no posee el
antígeno (al igual que la madre), el
riesgo de IFM es nulo. Atención: sin
embargo, estas mujeres deben ser
controladas porque se debe
sospechar siempre una pareja Rh
positiva.
77. • Como la validez de un RAI es de 72
horas, es imperativa una última
búsqueda de aglutininas irregulares
en las 24-48 horas que preceden al
nacimiento, con el fin de que el
dossier transfusional esté
correctamente actualizado: por
ello, obstetras o anestesiólogos la
prescriben al momento de la admisión
de la madre en Maternidad.
78. • La prevención de aloinmunización
versus Rh1 se hace con una inyección
de antiglobulinas anti-D en las 72 horas
que siguen al parto o cuando hay un
riesgo de paso de hematíes fetales
(aborto, hemorragias) en madre Rh
negativa.
• Algunos médicos administran a todas
las mujeres Rh
negativas, antiglobulinas anti-D entre
las semanas 28 y 30 de amenorrea.