Este documento describe los sistemas sanguíneos ABO y Rh, incluyendo sus antígenos, genes subyacentes, y anticuerpos asociados. Explica que el sistema ABO depende de los genes ABO, H y Se, mientras que el sistema Rh depende del gen RhD. También describe las pruebas de aglutinación en placa y tubo para tipificar los grupos sanguíneos, así como la importancia médica de estos sistemas, especialmente en relación con la transfusión sanguínea y la enfermedad hemolítica del
Parte 02 del Módulo IV del Diplomado en Hematología y Banco de Sangre.
Ponente: Dr. Carlos Esquerre Aguirre
Fecha: 13 de Setiembre de 2015. Trujillo - Perú.
INTRODUCCIÓN
La velocidad de sedimentación globular (VSG) es una propiedad física de la sangre. Si se dispone de un tubo de sangre con anticoagulante y se deja en reposo se observa que después de un cierto tiempo las células se sedimentan formando 2 fases bien de limitadas que corresponden al plasma y a las células constituidas prácticamente en su totalidad por hematíes. La VSG es equivalente a la longitud del recorrido descendente de la parte superior de la columna de hematíes en un intervalo determinado de tiempo y varios factores contribuyen a este valor.
FUNDAMENTO
El test de velocidad de sedimentación globular (VSG) mide la sedimentación de eritrocitos en su plasma nativo.
VSG es un test no específico que puede ser utilizado para detectar un amplio rango de enfermedades y para monitorear el curso evolutivo de ciertas enfermedades crónicas como los procesos inflamatorios crónicos (artritis reumatoidea, polimialgia reumática y tuberculosis) o la respuesta a la terapia, por ejemplo con citostáticos (enfermedad de Hodgkin, linfomas y mieloma múltiple). Sin embargo en ocasiones cuadros tan graves como neoplasias y la cirrosis pueden presentar una VSG normal. Constituye uno de los tests más utilizados como screening en el laboratorio clínico. Se trata de un método sencillo para realizar y que requiere equipamiento simple.
OBJETIVO
o Que el estudiante realice el procedimiento de cómo se procesa la velocidad de sedimento globular.
o Que el estudiante conozca e investigue por que se realiza este tipo de prueba en el laboratorio clínico.
o Que el estudiante aprenda a realizar la lectura del VSG.
MATERIALES UTILIZADOS EN LA PRÁCTICA
Sangre total (extracción venosa)
Solución anticoagulante
Pipeta de eritrosedimentación (pipeta de Westergreen)
Soporte que inmovilice la pipeta en posición vertical.
Cronómetro
Aguja
Ligadura
Alcohol
Algodón
INDUMENTARIA
Mandilón
Guantes
INSTRUCTIVO PARA LA OBTENCIÓN DE SANGRE PERIFÉRICA POR PUNCIÓN VENOSA
1. Durante la toma de muestra deben guardarse las más estrictas normas de higiene.
2. El material descartable a usar se abrirá sólo al momento de su utilización y, una vez manipulado, no podrá guardarse nuevamente aun cuando se lo considere nuevo.
3. Una vez realizada la toma de muestra, descartar inmediatamente los materiales usados en recipientes para ese fin.
4. Al momento de hacer la extracción colocarse los guantes desechables, los cuales se mantendrán puestos durante todo el procedimiento.
5. Antes de iniciar la toma de muestra, tener TODO el material preparado.
6. Elegir una vena bien visible en el antebrazo, localizándola visualmente y por palpación.
Colocar el lazo y volver a palpar la vena, indicarle al paciente que abra y cierre el puño para facilitar la extracción.
7. Una vez identificada la vena, limpiar el área circundante con algodón empapado en alcohol. Dejar secar.
Parte 01 del Módulo IV del Diplomado en Hematología y Banco de Sangre.
Ponente: Dr. Carlos Esquerre Aguirre
Fecha: 13 de Setiembre de 2015. Trujillo - Perú.
Parte 02 del Módulo IV del Diplomado en Hematología y Banco de Sangre.
Ponente: Dr. Carlos Esquerre Aguirre
Fecha: 13 de Setiembre de 2015. Trujillo - Perú.
INTRODUCCIÓN
La velocidad de sedimentación globular (VSG) es una propiedad física de la sangre. Si se dispone de un tubo de sangre con anticoagulante y se deja en reposo se observa que después de un cierto tiempo las células se sedimentan formando 2 fases bien de limitadas que corresponden al plasma y a las células constituidas prácticamente en su totalidad por hematíes. La VSG es equivalente a la longitud del recorrido descendente de la parte superior de la columna de hematíes en un intervalo determinado de tiempo y varios factores contribuyen a este valor.
FUNDAMENTO
El test de velocidad de sedimentación globular (VSG) mide la sedimentación de eritrocitos en su plasma nativo.
VSG es un test no específico que puede ser utilizado para detectar un amplio rango de enfermedades y para monitorear el curso evolutivo de ciertas enfermedades crónicas como los procesos inflamatorios crónicos (artritis reumatoidea, polimialgia reumática y tuberculosis) o la respuesta a la terapia, por ejemplo con citostáticos (enfermedad de Hodgkin, linfomas y mieloma múltiple). Sin embargo en ocasiones cuadros tan graves como neoplasias y la cirrosis pueden presentar una VSG normal. Constituye uno de los tests más utilizados como screening en el laboratorio clínico. Se trata de un método sencillo para realizar y que requiere equipamiento simple.
OBJETIVO
o Que el estudiante realice el procedimiento de cómo se procesa la velocidad de sedimento globular.
o Que el estudiante conozca e investigue por que se realiza este tipo de prueba en el laboratorio clínico.
o Que el estudiante aprenda a realizar la lectura del VSG.
MATERIALES UTILIZADOS EN LA PRÁCTICA
Sangre total (extracción venosa)
Solución anticoagulante
Pipeta de eritrosedimentación (pipeta de Westergreen)
Soporte que inmovilice la pipeta en posición vertical.
Cronómetro
Aguja
Ligadura
Alcohol
Algodón
INDUMENTARIA
Mandilón
Guantes
INSTRUCTIVO PARA LA OBTENCIÓN DE SANGRE PERIFÉRICA POR PUNCIÓN VENOSA
1. Durante la toma de muestra deben guardarse las más estrictas normas de higiene.
2. El material descartable a usar se abrirá sólo al momento de su utilización y, una vez manipulado, no podrá guardarse nuevamente aun cuando se lo considere nuevo.
3. Una vez realizada la toma de muestra, descartar inmediatamente los materiales usados en recipientes para ese fin.
4. Al momento de hacer la extracción colocarse los guantes desechables, los cuales se mantendrán puestos durante todo el procedimiento.
5. Antes de iniciar la toma de muestra, tener TODO el material preparado.
6. Elegir una vena bien visible en el antebrazo, localizándola visualmente y por palpación.
Colocar el lazo y volver a palpar la vena, indicarle al paciente que abra y cierre el puño para facilitar la extracción.
7. Una vez identificada la vena, limpiar el área circundante con algodón empapado en alcohol. Dejar secar.
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Quiero compartir la información que recopilé, ya que estuve dudando por la variación de las fuentes y afirmaciones. Después de haber verificado que esto es correcto, decidí subirlo para facilitarle la vida a alguien. ¡Espero sirva de ayuda!
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REALIZAR EL ACOMPAÑAMIENTO TECNICO A LA MODERNIZACIÓN DEL SISCOSSR, ENTREGA DEL SISTEMA AL MINISTERIO DE SALUD Y PROTECCIÓN SOCIAL PARA SU ADOPCIÓN NACIONAL Y ADMINISTRACIÓN DEL APLICATIVO, EN EL MARCO DEL ACUERDO DE SUBVENCIÓN NO. COL-H-ENTERRITORIO 3042 SUSCRITO CON EL FONDO MUNDIAL.
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REALIZAR EL ACOMPAÑAMIENTO TECNICO A LA MODERNIZACIÓN DEL SISCOSSR, ENTREGA DEL SISTEMA AL MINISTERIO DE SALUD Y PROTECCIÓN SOCIAL PARA SU ADOPCIÓN NACIONAL Y ADMINISTRACIÓN DEL APLICATIVO, EN EL MARCO DEL ACUERDO DE SUBVENCIÓN NO. COL-H-ENTERRITORIO 3042 SUSCRITO CON EL FONDO MUNDIAL.
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1. Competencia: Conocer el fundamento inmunológico de los sistemas ABO y Rh
Academia de Inmunología Médica/Laboratorio de Inmunología Médica 2017-1 26
PRÁCTICA 5.
GRUPOS SANGUÍNEOS: SISTEMAS ABO Y Rh
I. INTRODUCCIÓN
Los eritrocitos, poseen moléculas en su superficie que además de su función biológica
pueden ser antígenos. Estos antígenos eritrocitarios se agrupan en sistemas que
permiten tipificar el grupo sanguíneo de los individuos. Los sistemas sanguíneos más
importantes por su prevalencia e inmunogenicidad son el ABO y el Rh. En la
actualidad se conocen más de 250 antígenos eritrocitarios agrupados en más de 26
sistemas.
Es importante estudiar los antígenos de los eritrocitos y sus implicaciones inmunológicas
en la práctica médica, en áreas como: medicina transfusional y trasplantes; y en
alteraciones como la enfermedad hemolítica del recién nacido y las enfermedades
hemolíticas autoinmunitarias.
El sistema ABO fue el primer sistema de grupos sanguíneos descubierto y descrito al
inicio del siglo XX por Karl Landsteiner, quién observó que eritrocitos de algunos
individuos aglutinaban cuando se mezclaban con suero de otros, pero no con su propio
suero. Mediante esto Landsteiner concluyó, que la aglutinación se debía a que en la
superficie de los eritrocitos de algunos individuos existía un tipo de antígeno que era
reconocido por los anticuerpos del suero de los individuos que no tenían ese antígeno.
Landsteiner clasificó a los individuos que estudió en tres grupos: A, B y O.
En la actualidad se sabe que el sistema ABO está determinado por los genes: ABO,
H y Se. El gene H codifica para una glicosiltransferasa que une un monosacárido, la L-
fucosa, a una ceramida en la membrana del eritrocito, este determinante antigénico se
llama H. El gene A codifica para una glicosiltransferasa diferente que une a la N-
acetilgalactosamina al Ag H. El gene B codifica para una glicosiltransferasa diferente
que une la galactosa al Ag H. Estos genes son de expresión dominante. La expresión
del gene A determina el fenotipo A, la expresión del gene B el fenotipo B, la expresión de
ambos el fenotipo AB y la ausencia de los genes A y B el fenotipo O, en presencia del
gene H. El gene secretor “Se” determina la capacidad de los individuos para secretar de
manera soluble los Ag A, B y H en los fluidos corporales y secreciones.
Los mismos determinantes antigénicos A y B, son expresados por células de varios
tejidos y es importante en la selección del donante en un procedimiento de trasplante de
órgano sólido.
2. Competencia: Conocer el fundamento inmunológico de los sistemas ABO y Rh
Academia de Inmunología Médica/Laboratorio de Inmunología Médica 2017-1 27
De manera natural los individuos producen Ab contra el Ag del sistema ABO que no
poseen, estos Ab se llaman isohemaglutininas que son de clase IgM. Así los individuos
del grupo A producen Ab anti-B, los del grupo B producen Ab anti-A, los del grupo AB no
producen Ab ni anti-A ni anti-B y los individuos del grupo O producen ambos Ab.
Los antígenos del sistema ABO se detectan al reaccionar éstos con su antisuero
conocido. La frecuencia de cada grupo sanguíneo varía en las diferentes poblaciones.
El sistema Rh: es el segundo en importancia por su inmunogenicidad y frecuencia. Está
constituido por unos 45 antígenos de naturaleza proteica, los principales son D, C, E, c y
e, de los cuales el de mayor importancia en medicina es el Ag “D”. La presencia del gene
RhD codifica para el antígeno D, y es de expresión codominante, mientras que la
ausencia de este gene no codifica para este Ag. A diferencia del sistema ABO, este grupo
sanguíneo no produce Ab naturales. Los individuos Rh negativo, sólo producirán Ab
anti-Rh posterior a la sensibilización con el Ag Rh, debido a transfusiones mal indicadas
o intercambio sanguíneo en el evento obstétrico. Los anticuerpos del sistema Rh son
generalmente de clase IgG.
Los Ab anti-Rh tienen importancia médica, ya que son los responsables de la
enfermedad hemolítica del recién nacido (EHRN) y de reacciones hemolíticas
postransfusionales, provocando hemólisis intra o extravasculares que pueden poner en
riesgo la vida del individuo.
II. OBJETIVOS
1. Realizar la técnica de aglutinación en placa y tubo.
2. Tipificar los antígenos y anticuerpos naturales del sistema ABO/Rh.
3. Determinar la frecuencia de los diferentes fenotipos del sistema ABO/Rh en una
población determinada.
III. MATERIAL, REACTIVOS Y EQUIPO
Material Reactivos Equipo
- Lancetas
- Torundas con alcohol al 70%
- Pipetas Pasteur
- Placa de aglutinación
- 10 tubos de 10x75mm
- 1 Gradilla
- Aplicadores de madera
- Muestra sanguínea
- Suero anti-A
- Suero anti-B suero anti-AB
- Suero anti-D (Rh)
- Eritrocitos tipificados “O”
- Eritrocitos tipificados “A”
- Eritrocitos tipificados “B”
- Eritrocitos tipificados “AB”
- Centrífuga clínica
3. Competencia: Conocer el fundamento inmunológico de los sistemas ABO y Rh
Academia de Inmunología Médica/Laboratorio de Inmunología Médica 2017-1 28
IV. PROCEDIMIENTO
a) Prueba en placa
1. Marcar la placa de aglutinación de la siguiente forma: A, B, AB y Rh.
2. Con una torunda desinfectar el pulpejo de un dedo, secar al aire y puncionar con
una lanceta estéril.
3. Presionar el dedo de arriba hacia abajo, colocar 1 gota de sangre directamente
sobre la placa, en cada uno de los cuatro pozos de aglutinación en su fila
correspondiente.
4. Adicionar a cada muestra de sangre, 1 gota de suero: anti-A, anti-B, anti- AB y anti-
D según la columna correspondiente (Figura 1).
5. Mezclar con un aplicador de madera, usar uno diferente en cada pozo.
6. Observar la presencia o ausencia de aglutinación en cada muestra.
7. En base a la información de la tabla 1, interpretar los resultados.
8. Anotar resultados por equipo en la tabla 2 y por grupo en la tabla 3.
Figura 1. Determinación de grupo sanguíneo en placa.
4. Competencia: Conocer el fundamento inmunológico de los sistemas ABO y Rh
Academia de Inmunología Médica/Laboratorio de Inmunología Médica 2017-1 29
V. RESULTADOS
Tabla 1. Guía para la interpretación de la aglutinación
Grupo
sanguíneo
Reacción
con anti-A
Reacción
con anti-B
Reacción
con anti-AB
Reacción con
anti-D (Rh)
Grupo ABO/Rh
A + - +
+ A Positivo
- A Negativo
B - + +
+ B Positivo
- B Negativo
AB + + +
+ AB Positivo
- AB Negativo
O - - -
+ O Positivo
- O Negativo
Aglutinación: + No Aglutinación: -
Tabla 2. Resultados por equipo
Nombre del Estudiante
SUEROS Grupo
SanguíneoAnti-A Anti-B Anti-AB Anti-D (Rh)
Tabla 3. Resultados por grupo.
Grupo
Sanguíneo
Factor Rh
Equipo
1 2 3 4 5 Total Frecuencia
A
Positivo
Negativo
B
Positivo
Negativo
AB
Positivo
Negativo
O
Positivo
Negativo
Total
5. Competencia: Conocer el fundamento inmunológico de los sistemas ABO y Rh
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b) Prueba en tubo
1. Homogenizar la suspensión de eritrocitos de su muestra problema.
2. Prueba directa: Adicionar 1 gota de la suspensión de eritrocitos a los tubos con
los sueros anti-A, anti-B, anti-AB y anti-Rh (Figura 2).
3. Prueba inversa: Agregar 1 gota de suero problema a los tubos con los
eritrocitos tipificados A, B, AB y O (Figura 3).
4. En el tubo marcado como autotestigo (AT) agregar 1 gota de eritrocitos y 1 gota
del suero problema.
5. Homogenizar los tubos y centrifugar a 1,500 rpm durante 1 minuto.
6. RESUSPENDER la muestra e interpretar los resultados.
7. Anota resultados en las tablas 4 y 5 según corresponda.
Figura 2. Determinación de grupo sanguíneo en tubo. Prueba directa.
Tabla 4.
Prueba
Directa
Suero
Anti- A
Suero
Anti- B
Suero
Anti- AB
Suero
Anti- Rh
Grupo
sanguíneo
Aglutinación
6. Competencia: Conocer el fundamento inmunológico de los sistemas ABO y Rh
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Figura 3. Determinación de grupo sanguíneo en tubo. Prueba inversa. Eritrocitos
previamente tipificados.
Tabla 5.
Prueba
Inversa
Eritrocitos
A
Eritrocitos
B
Eritrocitos
AB
Eritrocitos
O
Grupo
sanguíneo
Aglutinación
7. Competencia: Conocer el fundamento inmunológico de los sistemas ABO y Rh
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VI. CUESTIONARIO ADICIONAL
1. Investigue que son los aloanticuerpos y los autoanticuerpos.
2. En las anemias hemolíticas postransfusionales, el receptor recibe eritrocitos
compatibles del sistema ABO. Mencione tres sistemas responsables de la inducción de
anticuerpos por incompatibilidad.
3. En el plasma para transfusión se recomienda titulación de Ab´s ¿Si? ¿No? ¿Por qué?
4. Explique brevemente la hemólisis intravascular y extravascular en una reacción
inmunológica.
5. ¿Qué problema puede existir en un segundo embarazo si la madre es Rh negativo?
VII. BIBLIOGRAFÍA
1. Rodríguez-Moyado H. El Banco de Sangre y la Medicina Transfusional. 2ª ed.
México: Panamericana. 2014. 580 p. ISBN: 9786077743989.
2. Norma Oficial Mexicana NOM-017-SSA-1993. De los reactivos hemoclasificadores
para determinar grupos del sistema ABO.
3. Norma Oficial Mexicana NOM-003-SSA2-1993 Para la disposición de sangre
humana y sus componentes con fines terapéuticos.
4. Norma Oficial Mexicana NOM-018-SSA-1993. Del reactivo anti-Rh para identificar el
antígeno D.
5. García-Arbeláez CA. Fundamentos de banco de sangre y medicina transfusional.
Medicina & Laboratorio 2009; 15:37-68.
6. Parham P. El sistema inmune. 4ª ed. México: Manual Moderno., 2016. 600 p. ISBN:
9786074485646.