La MLPA es una técnica que permite amplificar y cuantificar múltiples secuencias de ADN en una sola reacción, utilizando sondas que reconocen sitios adyacentes. Esto permite determinar deleciones o duplicaciones en muestras de pacientes. El proceso implica desnaturalización, hibridación de las sondas, ligación y amplificación por PCR para luego analizar los fragmentos obtenidos y detectar alteraciones. La MLPA es útil para diagnosticar condiciones como síndromes de deleción.
Este documento describe técnicas moleculares para el estudio de los antígenos de histocompatibilidad HLA. Explica los métodos de tipificación serológica y molecular de HLA, destacando que los métodos moleculares permiten estudiar múltiples variaciones alélicas. Luego describe dos técnicas moleculares clave: PCR-SSO que usa sondas de secuencia específica y PCR-SSP que usa cebadores de secuencia específica, detallando los pasos de cada método. Finalmente, resume las ventajas y des
Este documento describe diferentes técnicas de citogenética molecular como la hibridación fluorescente in situ (FISH), que permite la detección y localización de secuencias específicas de ADN mediante el uso de sondas marcadas con sustancias fluorescentes. También se mencionan técnicas como la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), que permite la amplificación de una secuencia de ADN específica, y el análisis espectral de cariotipo (SKY), que utiliza sondas marcadas con diferentes fluor
Este documento resume la investigación sobre el sistema sanguíneo MNSs. Describe los antígenos M, N, S, s y U que se encuentran en las glicoproteínas GPA y GPB. Explica que estos antígenos son heredados de forma codominante y pueden dar lugar a nueve fenotipos diferentes. También analiza factores como genes híbridos y modificaciones en la glicosilación que pueden dar lugar a variantes raras en el sistema MNSs.
El documento presenta un resumen sobre el lupus eritematoso sistémico (LES). El LES es un proceso inflamatorio crónico que afecta múltiples órganos y sistemas debido a la producción de autoanticuerpos, depósito de complejos inmunes y activación del sistema del complemento. Los síntomas más comunes son manifestaciones cutáneas, articulares y hematológicas. El tratamiento incluye medicamentos antiinflamatorios, corticoides, antimaláricos y agentes citotóxicos.
Este documento describe la reacción entre antígenos y anticuerpos. Explica que los antígenos son moléculas reconocidas por el sistema inmune y que los anticuerpos son proteínas producidas por los linfocitos B en respuesta a los antígenos. También describe las dos etapas de la reacción entre antígenos y anticuerpos, la unión inicial y la reacción posterior, así como factores que afectan la afinidad y avidez en la unión antígeno-anticuerpo.
El documento describe la historia del descubrimiento del sistema Rh en la sangre humana. En 1939, Levine y Stetson observaron una reacción hemolítica en mujeres después del parto que no estaba asociada con los sistemas ABO, M, N o P. Más tarde, en 1940, Landsteiner y Wiener crearon un anticuerpo usando células de monos rhesus que aglutinó el 85% de las células sanguíneas de neoyorquinos blancos, lo que sugirió la existencia de un nuevo sistema. Finalmente, en 1962 se desc
Para una perfecta compatibilidad en transfusiones sanguíneas no basta la compatibilidad ABO y Rh. Existen otros antígenos y anticuerpos implicados y son necesarias un número mayor de pruebas, para evitar la aglutinación y la hemolisis asociadas al mezcla sangres incompatibles.
1. El documento describe las características de los antígenos y anticuerpos, incluyendo su distribución, estructura, tipos e interacción. 2. Explica que los antígenos inducen una respuesta inmune a través de la producción de anticuerpos específicos. 3. Detalla los procesos de sensibilización y aglutinación que ocurren cuando los anticuerpos reaccionan con antígenos en las células.
Este documento describe técnicas moleculares para el estudio de los antígenos de histocompatibilidad HLA. Explica los métodos de tipificación serológica y molecular de HLA, destacando que los métodos moleculares permiten estudiar múltiples variaciones alélicas. Luego describe dos técnicas moleculares clave: PCR-SSO que usa sondas de secuencia específica y PCR-SSP que usa cebadores de secuencia específica, detallando los pasos de cada método. Finalmente, resume las ventajas y des
Este documento describe diferentes técnicas de citogenética molecular como la hibridación fluorescente in situ (FISH), que permite la detección y localización de secuencias específicas de ADN mediante el uso de sondas marcadas con sustancias fluorescentes. También se mencionan técnicas como la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), que permite la amplificación de una secuencia de ADN específica, y el análisis espectral de cariotipo (SKY), que utiliza sondas marcadas con diferentes fluor
Este documento resume la investigación sobre el sistema sanguíneo MNSs. Describe los antígenos M, N, S, s y U que se encuentran en las glicoproteínas GPA y GPB. Explica que estos antígenos son heredados de forma codominante y pueden dar lugar a nueve fenotipos diferentes. También analiza factores como genes híbridos y modificaciones en la glicosilación que pueden dar lugar a variantes raras en el sistema MNSs.
El documento presenta un resumen sobre el lupus eritematoso sistémico (LES). El LES es un proceso inflamatorio crónico que afecta múltiples órganos y sistemas debido a la producción de autoanticuerpos, depósito de complejos inmunes y activación del sistema del complemento. Los síntomas más comunes son manifestaciones cutáneas, articulares y hematológicas. El tratamiento incluye medicamentos antiinflamatorios, corticoides, antimaláricos y agentes citotóxicos.
Este documento describe la reacción entre antígenos y anticuerpos. Explica que los antígenos son moléculas reconocidas por el sistema inmune y que los anticuerpos son proteínas producidas por los linfocitos B en respuesta a los antígenos. También describe las dos etapas de la reacción entre antígenos y anticuerpos, la unión inicial y la reacción posterior, así como factores que afectan la afinidad y avidez en la unión antígeno-anticuerpo.
El documento describe la historia del descubrimiento del sistema Rh en la sangre humana. En 1939, Levine y Stetson observaron una reacción hemolítica en mujeres después del parto que no estaba asociada con los sistemas ABO, M, N o P. Más tarde, en 1940, Landsteiner y Wiener crearon un anticuerpo usando células de monos rhesus que aglutinó el 85% de las células sanguíneas de neoyorquinos blancos, lo que sugirió la existencia de un nuevo sistema. Finalmente, en 1962 se desc
Para una perfecta compatibilidad en transfusiones sanguíneas no basta la compatibilidad ABO y Rh. Existen otros antígenos y anticuerpos implicados y son necesarias un número mayor de pruebas, para evitar la aglutinación y la hemolisis asociadas al mezcla sangres incompatibles.
1. El documento describe las características de los antígenos y anticuerpos, incluyendo su distribución, estructura, tipos e interacción. 2. Explica que los antígenos inducen una respuesta inmune a través de la producción de anticuerpos específicos. 3. Detalla los procesos de sensibilización y aglutinación que ocurren cuando los anticuerpos reaccionan con antígenos en las células.
Este documento describe un seminario sobre la esferocitosis hereditaria. Se define la enfermedad y se explican sus características clínicas, diagnóstico y tratamiento. También se detallan las técnicas de laboratorio para diagnosticar esta patología, como la prueba de resistencia osmótica de los glóbulos rojos y la autohemólisis, las cuales permiten evaluar la fragilidad de las membranas eritrocitarias.
1) Las pruebas cruzadas permiten determinar la compatibilidad entre la sangre del donante y el receptor mediante la mezcla de sus glóbulos rojos y suero. 2) Esto ayuda a prevenir reacciones transfusionales al detectar cualquier anticuerpo presente en el suero del receptor. 3) Siguiendo procedimientos estandarizados, las pruebas cruzadas identifican de forma confiable si la sangre es compatible y segura antes de una transfusión.
Este documento proporciona instrucciones para varias técnicas de laboratorio utilizadas en un banco de sangre, incluyendo la clasificación ABO-RhD en tubo, el Coombs directo, el Coombs indirecto o TAI, la identificación de anticuerpos irregulares y la titulación de anticuerpos irregulares. El documento enfatiza la importancia de registrar datos de pacientes y reactivos correctamente y organizar el tiempo para evitar retrasos.
Este documento describe los procedimientos para realizar recuentos de glóbulos blancos, plaquetas, eosinófilos y reticulocitos en sangre. Incluye los materiales necesarios, los pasos técnicos y las fórmulas de cálculo para cada examen, así como los valores de referencia e interpretación de los resultados.
El documento habla sobre la hematología. Explica que la teoría monofilética sostiene que el hematohistoblasto origina todas las células de la sangre, mientras que la polifilética dice que los precursores ya forman líneas de maduración. Describe que la formación de sangre ocurre en el tejido conjuntivo embrionario y luego en órganos como el hígado y bazo. En la vida adulta ocurre principalmente en la médula ósea. Enumera los tipos de leucocitos y eritrocitos,
Este documento resume los diferentes tipos de anemia hemolítica, incluyendo las causas hereditarias como las membranopatias eritrocitarias y las enzimopatias del metabolismo de la glucosa, así como las causas adquiridas como los mecanismos inmunes e inmunes. Explica los cambios que ocurren en el eritrocito maduro y las manifestaciones clínicas de la anemia hemolítica aguda y crónica. Además, proporciona una guía sobre el diagnóstico y tratamiento sistemático de las diferentes form
Este documento describe la alfa talasemia, una enfermedad hereditaria causada por mutaciones en los genes alfa de la globina que resultan en una producción deficiente de cadenas alfa de hemoglobina. Esto causa anemia debido a una eritropoyesis ineficaz y un exceso de cadenas beta y gamma. Los síntomas varían desde asintomáticos hasta una grave anemia e hidropes fetalis mortal. El diagnóstico se basa en estudios de laboratorio como electroforesis de hemoglobina.
Este documento describe las ventajas y aplicaciones de la PCR en tiempo real. Permite la detección y cuantificación de ADN o ARN en cada ciclo de reacción a través del uso de reporteros fluorescentes. Esto ofrece una mayor sensibilidad y especificidad en comparación con la PCR estándar. La PCR en tiempo real se ha convertido en una herramienta importante para aplicaciones de diagnóstico clínico, investigación biomédica y estudios de expresión génica.
Las pruebas cruzadas y fraccionamiento de la sangre ayudan a prevenir la transfusión de sangre incompatible y proveen al paciente el máximo de seguridad y beneficios. Se pueden separar los componentes de la sangre como glóbulos rojos, plaquetas y plasma para tratar diferentes condiciones como anemia, hemorragias o déficits de factores de coagulación. Cada componente se conserva de forma distinta y tiene una duración específica para su uso terapéutico.
Inclusiones citoplasmaticas y alteraciones morfologicasmarsanchez1919
Este documento describe varias alteraciones morfológicas que pueden ocurrir en los hematíes. Describe cambios en el tamaño, forma y color de los glóbulos rojos, así como inclusiones citoplasmáticas que pueden aparecer, como agregados ribosómicos, restos nucleares o acúmulos de hemosiderina. Explica alteraciones como la anisocitosis, microcitosis, macrocitosis, acantocitosis, drepanocitosis, esferocitosis, policromasia, punteado basófilo, cuerpos
3 obtención de componentes sanguineos fraccionamientoJuan Calderon
Este documento describe la historia y procesos de fraccionamiento de la sangre para obtener sus principales componentes como hematíes, plaquetas y plasma. Explica los cambios que ocurren en los hematíes durante su almacenamiento debido a la lesión por almacenamiento y las soluciones utilizadas para optimizar su conservación. También detalla los procesos de preparación y almacenamiento de plaquetas así como las condiciones óptimas como temperatura y pH para su viabilidad. Por último, brinda información sobre el plasma fresco congelado y el cri
1. La replicación del DNA es un proceso complejo mediante el cual una molécula de DNA original se copia para generar dos moléculas de DNA idénticas. 2. Inicia en orígenes de replicación donde proteínas iniciadoras reconocen secuencias específicas y activan la maquinaria de replicación. 3. La replicación progresa de forma bidireccional desde los orígenes formando horquillas de replicación a medida que las DNA polimerasas sintetizan nuevas cadenas complementarias de DNA de forma coordinada.
El documento habla sobre la interpretación del hemograma. Explica que el hemograma examina las células de la sangre y traduce los equilibrios de producción y destrucción de los elementos figurados. Detalla los componentes normales de la sangre como eritrocitos, leucocitos y plaquetas. Luego describe las series roja y blanca, incluyendo valores normales, causas de desviaciones y definiciones de términos como leucocitosis, neutrofilia y linfocitosis.
En México el cáncer ocupa los primeros lugares como causa de muerte y la leucemia aguda corresponde al 4.2% de estas.
En el caso particular de la Leucemia promielocítica aguda es una patología de características especiales tanto por la morfología como por su comportamiento clínico, biológico y respuesta al tratamiento.
Clasificación FAB
La leucemia promielocítica aguda corresponde al subtipo M3 de las leucemias mieloide aguda, caracterizada por la presencia de promielocitos anormales.
En la leucemia promielocítica aguda existen dos variables morfológicas:
Hipergranular o clásica, que se presenta en la mayoría de los casos.
Hipogranular presente en 15 a 20% de los casos
Epidemiología
La leucemia promielocítica aguda representa del 5 al 8 % de las leucemias mieloide aguda, aunque se informa un incremento en la población latinoamericana hasta en 20 %.
La edad promedio al diagnóstico es de 40 años y la incidencia se incrementa con la edad.
Evaluación pronostica
Los más importantes factores pronósticos son: la edad, la cuenta inicial de leucocitos, el recuento plaquetario, así como el tipo de traslocación.
Las personas con este tipo de cáncer tienen abundancia de células inmaduras anormales dentro de su médula ósea, las cuales se multiplican muy rápidamente y reemplazan a las células sanguíneas sanas.
La médula ósea, que ayuda al cuerpo a combatir infecciones y que produce otros componentes de la sangre, finalmente dejan de trabajar correctamente.
El documento describe los sistemas de grupos sanguíneos, incluyendo el sistema ABO. Explica que el sistema ABO se determina por tres genes que codifican para enzimas que sintetizan los antígenos A, B y H. También describe la importancia clínica de los grupos sanguíneos en la transfusión sanguínea y la enfermedad hemolítica del recién nacido.
Leucorreduccion E Irradiacion De Hemocomponenteslucasmerel
Este documento describe la leucorreducción y la irradiación de hemocomponentes. Brevemente discute los métodos de leucorreducción como la filtración y sus beneficios clínicos como prevenir reacciones febriles y la transmisión de agentes infecciosos. También cubre la irradiación de hemocomponentes para prevenir la enfermedad injerto contra huésped pos-transfusional y sus efectos en las células sanguíneas.
Este documento trata sobre el enfoque de la anemia hemolítica. Explica los diferentes tipos de hemólisis como la compensada, descompensada, extravascular e intravascular. Detalla las causas como la malaria, sepsis y defectos en la hemoglobina. También cubre el diagnóstico a través de exámenes de laboratorio como el recuento de reticulocitos. Finalmente, clasifica los tipos de anemia hemolítica como la mediada por anticuerpos calientes y fríos, así como las talasemias.
Este documento resume los conceptos básicos de la citomorfología plaquetaria. Explica que las plaquetas se producen en la médula ósea y circulan inactivas, pero pueden cambiar de forma cuando son estimuladas. También describe los diferentes métodos para realizar recuentos plaquetarios basados en parámetros eritrocitarios y aproximación por campos. Finalmente, explica los criterios para evaluar plaquetas incluyendo cantidad, tamaño, forma y granulación.
La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) tiene múltiples aplicaciones como la huella digital genética para identificación, pruebas de paternidad, detección de enfermedades hereditarias, comparación de expresión génica, clonamiento de genes, mutagénesis dirigida, análisis de ADN antiguo, y genotipificación de polimorfismos para estudios poblacionales y de enfermedades. La PCR permite amplificar segmentos específicos de ADN o ARN para su posterior análisis.
Este documento describe diferentes tipos de marcadores moleculares, incluyendo marcadores morfológicos, RFLP, RAPD, AFLP y SSR. Explica cómo se usan estas técnicas para detectar polimorfismos en el ADN que permiten estudiar la herencia de caracteres y la diversidad genética. También discute las ventajas y desventajas de cada método de marcadores moleculares.
Este documento describe un seminario sobre la esferocitosis hereditaria. Se define la enfermedad y se explican sus características clínicas, diagnóstico y tratamiento. También se detallan las técnicas de laboratorio para diagnosticar esta patología, como la prueba de resistencia osmótica de los glóbulos rojos y la autohemólisis, las cuales permiten evaluar la fragilidad de las membranas eritrocitarias.
1) Las pruebas cruzadas permiten determinar la compatibilidad entre la sangre del donante y el receptor mediante la mezcla de sus glóbulos rojos y suero. 2) Esto ayuda a prevenir reacciones transfusionales al detectar cualquier anticuerpo presente en el suero del receptor. 3) Siguiendo procedimientos estandarizados, las pruebas cruzadas identifican de forma confiable si la sangre es compatible y segura antes de una transfusión.
Este documento proporciona instrucciones para varias técnicas de laboratorio utilizadas en un banco de sangre, incluyendo la clasificación ABO-RhD en tubo, el Coombs directo, el Coombs indirecto o TAI, la identificación de anticuerpos irregulares y la titulación de anticuerpos irregulares. El documento enfatiza la importancia de registrar datos de pacientes y reactivos correctamente y organizar el tiempo para evitar retrasos.
Este documento describe los procedimientos para realizar recuentos de glóbulos blancos, plaquetas, eosinófilos y reticulocitos en sangre. Incluye los materiales necesarios, los pasos técnicos y las fórmulas de cálculo para cada examen, así como los valores de referencia e interpretación de los resultados.
El documento habla sobre la hematología. Explica que la teoría monofilética sostiene que el hematohistoblasto origina todas las células de la sangre, mientras que la polifilética dice que los precursores ya forman líneas de maduración. Describe que la formación de sangre ocurre en el tejido conjuntivo embrionario y luego en órganos como el hígado y bazo. En la vida adulta ocurre principalmente en la médula ósea. Enumera los tipos de leucocitos y eritrocitos,
Este documento resume los diferentes tipos de anemia hemolítica, incluyendo las causas hereditarias como las membranopatias eritrocitarias y las enzimopatias del metabolismo de la glucosa, así como las causas adquiridas como los mecanismos inmunes e inmunes. Explica los cambios que ocurren en el eritrocito maduro y las manifestaciones clínicas de la anemia hemolítica aguda y crónica. Además, proporciona una guía sobre el diagnóstico y tratamiento sistemático de las diferentes form
Este documento describe la alfa talasemia, una enfermedad hereditaria causada por mutaciones en los genes alfa de la globina que resultan en una producción deficiente de cadenas alfa de hemoglobina. Esto causa anemia debido a una eritropoyesis ineficaz y un exceso de cadenas beta y gamma. Los síntomas varían desde asintomáticos hasta una grave anemia e hidropes fetalis mortal. El diagnóstico se basa en estudios de laboratorio como electroforesis de hemoglobina.
Este documento describe las ventajas y aplicaciones de la PCR en tiempo real. Permite la detección y cuantificación de ADN o ARN en cada ciclo de reacción a través del uso de reporteros fluorescentes. Esto ofrece una mayor sensibilidad y especificidad en comparación con la PCR estándar. La PCR en tiempo real se ha convertido en una herramienta importante para aplicaciones de diagnóstico clínico, investigación biomédica y estudios de expresión génica.
Las pruebas cruzadas y fraccionamiento de la sangre ayudan a prevenir la transfusión de sangre incompatible y proveen al paciente el máximo de seguridad y beneficios. Se pueden separar los componentes de la sangre como glóbulos rojos, plaquetas y plasma para tratar diferentes condiciones como anemia, hemorragias o déficits de factores de coagulación. Cada componente se conserva de forma distinta y tiene una duración específica para su uso terapéutico.
Inclusiones citoplasmaticas y alteraciones morfologicasmarsanchez1919
Este documento describe varias alteraciones morfológicas que pueden ocurrir en los hematíes. Describe cambios en el tamaño, forma y color de los glóbulos rojos, así como inclusiones citoplasmáticas que pueden aparecer, como agregados ribosómicos, restos nucleares o acúmulos de hemosiderina. Explica alteraciones como la anisocitosis, microcitosis, macrocitosis, acantocitosis, drepanocitosis, esferocitosis, policromasia, punteado basófilo, cuerpos
3 obtención de componentes sanguineos fraccionamientoJuan Calderon
Este documento describe la historia y procesos de fraccionamiento de la sangre para obtener sus principales componentes como hematíes, plaquetas y plasma. Explica los cambios que ocurren en los hematíes durante su almacenamiento debido a la lesión por almacenamiento y las soluciones utilizadas para optimizar su conservación. También detalla los procesos de preparación y almacenamiento de plaquetas así como las condiciones óptimas como temperatura y pH para su viabilidad. Por último, brinda información sobre el plasma fresco congelado y el cri
1. La replicación del DNA es un proceso complejo mediante el cual una molécula de DNA original se copia para generar dos moléculas de DNA idénticas. 2. Inicia en orígenes de replicación donde proteínas iniciadoras reconocen secuencias específicas y activan la maquinaria de replicación. 3. La replicación progresa de forma bidireccional desde los orígenes formando horquillas de replicación a medida que las DNA polimerasas sintetizan nuevas cadenas complementarias de DNA de forma coordinada.
El documento habla sobre la interpretación del hemograma. Explica que el hemograma examina las células de la sangre y traduce los equilibrios de producción y destrucción de los elementos figurados. Detalla los componentes normales de la sangre como eritrocitos, leucocitos y plaquetas. Luego describe las series roja y blanca, incluyendo valores normales, causas de desviaciones y definiciones de términos como leucocitosis, neutrofilia y linfocitosis.
En México el cáncer ocupa los primeros lugares como causa de muerte y la leucemia aguda corresponde al 4.2% de estas.
En el caso particular de la Leucemia promielocítica aguda es una patología de características especiales tanto por la morfología como por su comportamiento clínico, biológico y respuesta al tratamiento.
Clasificación FAB
La leucemia promielocítica aguda corresponde al subtipo M3 de las leucemias mieloide aguda, caracterizada por la presencia de promielocitos anormales.
En la leucemia promielocítica aguda existen dos variables morfológicas:
Hipergranular o clásica, que se presenta en la mayoría de los casos.
Hipogranular presente en 15 a 20% de los casos
Epidemiología
La leucemia promielocítica aguda representa del 5 al 8 % de las leucemias mieloide aguda, aunque se informa un incremento en la población latinoamericana hasta en 20 %.
La edad promedio al diagnóstico es de 40 años y la incidencia se incrementa con la edad.
Evaluación pronostica
Los más importantes factores pronósticos son: la edad, la cuenta inicial de leucocitos, el recuento plaquetario, así como el tipo de traslocación.
Las personas con este tipo de cáncer tienen abundancia de células inmaduras anormales dentro de su médula ósea, las cuales se multiplican muy rápidamente y reemplazan a las células sanguíneas sanas.
La médula ósea, que ayuda al cuerpo a combatir infecciones y que produce otros componentes de la sangre, finalmente dejan de trabajar correctamente.
El documento describe los sistemas de grupos sanguíneos, incluyendo el sistema ABO. Explica que el sistema ABO se determina por tres genes que codifican para enzimas que sintetizan los antígenos A, B y H. También describe la importancia clínica de los grupos sanguíneos en la transfusión sanguínea y la enfermedad hemolítica del recién nacido.
Leucorreduccion E Irradiacion De Hemocomponenteslucasmerel
Este documento describe la leucorreducción y la irradiación de hemocomponentes. Brevemente discute los métodos de leucorreducción como la filtración y sus beneficios clínicos como prevenir reacciones febriles y la transmisión de agentes infecciosos. También cubre la irradiación de hemocomponentes para prevenir la enfermedad injerto contra huésped pos-transfusional y sus efectos en las células sanguíneas.
Este documento trata sobre el enfoque de la anemia hemolítica. Explica los diferentes tipos de hemólisis como la compensada, descompensada, extravascular e intravascular. Detalla las causas como la malaria, sepsis y defectos en la hemoglobina. También cubre el diagnóstico a través de exámenes de laboratorio como el recuento de reticulocitos. Finalmente, clasifica los tipos de anemia hemolítica como la mediada por anticuerpos calientes y fríos, así como las talasemias.
Este documento resume los conceptos básicos de la citomorfología plaquetaria. Explica que las plaquetas se producen en la médula ósea y circulan inactivas, pero pueden cambiar de forma cuando son estimuladas. También describe los diferentes métodos para realizar recuentos plaquetarios basados en parámetros eritrocitarios y aproximación por campos. Finalmente, explica los criterios para evaluar plaquetas incluyendo cantidad, tamaño, forma y granulación.
La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) tiene múltiples aplicaciones como la huella digital genética para identificación, pruebas de paternidad, detección de enfermedades hereditarias, comparación de expresión génica, clonamiento de genes, mutagénesis dirigida, análisis de ADN antiguo, y genotipificación de polimorfismos para estudios poblacionales y de enfermedades. La PCR permite amplificar segmentos específicos de ADN o ARN para su posterior análisis.
Este documento describe diferentes tipos de marcadores moleculares, incluyendo marcadores morfológicos, RFLP, RAPD, AFLP y SSR. Explica cómo se usan estas técnicas para detectar polimorfismos en el ADN que permiten estudiar la herencia de caracteres y la diversidad genética. También discute las ventajas y desventajas de cada método de marcadores moleculares.
Este documento describe los marcadores moleculares SSR o STR que se utilizan comúnmente en estudios forenses. Los SSR son secuencias repetitivas que varían entre individuos y que pueden amplificarse mediante PCR para distinguir entre alelos. También describe los métodos como electroforesis de gel y análisis de fragmentos para visualizar los alelos SSR y diferenciar entre muestras. Finalmente, explica el análisis de ADN mitocondrial que también se usa en estudios forenses debido a que hay muchas copias por célula
Curso de Biotecnología Animal para estudiantes de la Carrera de Ingenieros Agrónomos Zootecnistas. Facultad de Ciencias Agropecuarias - Universidad de Panamá
Este documento describe las técnicas de SNP (Single Nucleotide Polymorphism) y MSP (Methylation Specific PCR) para analizar polimorfismos en el ADN y los niveles de metilación. La técnica de SNP utiliza PCR en tiempo real y sondas Taqman marcadas con fluorocromos para detectar variaciones en un solo nucleótido. La técnica MSP implica un tratamiento con bisulfito de sodio para diferenciar citosinas metiladas y no metiladas, seguido de PCR con cebadores diseñados específic
Este documento describe un estudio que evaluó la expresión y frecuencia del gen de fusión formado entre Rad51C y ATXN-7 en tumores colorrectales. Los métodos incluyeron análisis de tejidos tumorales, PCR, clonación y tinción de inmunofluorescencia. Los resultados mostraron que la fusión génica estaba ausente en la vía de reparación del DNA FA y se expresaba en líneas celulares de cáncer colorrectal. El tratamiento con 5-azacitidina aumentó la expresión de la fusión. Las células
4.9 Técnicas de Biología Molecular.pptxjans velarde
La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es una técnica que permite amplificar una secuencia específica de ADN. Consiste en repetidos ciclos de calentamiento, enfriamiento y elongación que duplican la cantidad de ADN molde en cada ciclo. Requiere ADN molde, cebadores, ADN polimerasa, nucleótidos y sales. La PCR ha revolucionado la biología molecular al permitir la amplificación rápida e ilimitada de cualquier secuencia de ADN.
Este documento describe diferentes tipos de marcadores moleculares, incluyendo marcadores bioquímicos como isoenzimas y proteínas de reserva, y marcadores genotípicos como RFLP, RAPD y AFLP. Explica cómo estos marcadores permiten detectar polimorfismos a nivel genético que pueden usarse para mapeo genético y otros estudios.
Este documento describe la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (PCR en tiempo real). Explica que la PCR en tiempo real permite detectar y cuantificar secuencias de ácidos nucleicos usando reporteros fluorescentes. También describe los diferentes sistemas de detección utilizados como sondas de hidrólisis, sondas de hibridación y sondas de horquilla. Finalmente, menciona algunas aplicaciones de la PCR en tiempo real como diagnóstico molecular, investigación clínica y monitoreo de patógenos.
Biología molecular aplicada a inmunohematologíaTrishdeish
El documento presenta una introducción a las técnicas moleculares aplicadas a la inmunohematología, incluyendo sus utilidades para pacientes politransfundidos, con glóbulos rojos recubiertos de inmunoglobulinas, y para la resolución de discrepancias. Luego describe técnicas como PCR convencional, PCR alelo específico, PCR-RFLP, PCR multiplex, secuenciación, PCR en tiempo real y microarrays. Finalmente, concluye que estas técnicas facilitan la resolución de problemas serológicos y que se busca
Este documento describe los minisatélites, que son secuencias cortas de ADN que se repiten varias veces en el genoma humano. Se clasifican los tipos de ADN que se repiten en tandem, incluyendo satélites, minisatélites y microsatélites. También explica cómo las sondas multilocus y de locus simple se usan para analizar los minisatélites y producir huellas digitales de ADN únicas para identificación forense.
Este documento describe las técnicas de PCR y electroforesis utilizadas en el estudio molecular del ADN. La PCR permite amplificar fragmentos específicos de ADN mediante la acción de una ADN polimerasa termoestable y cebadores. La electroforesis separa los fragmentos amplificados por tamaño a través de un campo eléctrico, permitiendo su detección e identificación. La PCR en tiempo real permite cuantificar copias iniciales de ADN mediante la detección de productos amplificados durante cada ciclo.
En esta presentación se exponen las técnicas aplicadas para el aislamiento, purificación y cuantificación de ácidos nucleicos previos a su utilización para la aplicación de técnicas de diagnóstico molecular. Se exponen también los fundamentos y las principales caracteristicas de cada técnica.
El documento describe los conceptos clave de la transcriptómica y las técnicas genómicas de alta procesividad como los microarrays de DNA y las etiquetas SAGE. Explica que la transcriptómica estudia los perfiles de expresión de todos los genes presentes en el genoma mediante técnicas que permiten analizar miles de genes simultáneamente, proporcionando información sobre qué genes se están expresando y en qué niveles. También describe el flujo básico de un experimento de microarrays de DNA que incluye el diseño, preparación de muestr
La qPCR es una técnica que permite detectar y cuantificar ADN de forma cuantitativa y en tiempo real mediante el uso de reporteros fluorescentes. Se utiliza para detectar granulovirus en diferentes muestras como larvas, suelo y bioplaguicidas con el objetivo de desarrollar bioplaguicidas para el control biológico de plagas agrícolas. La metodología consiste en diseñar cebadores específicos para el gen de la granulina altamente conservado en granulovirus y utilizar una sonda Taqman para la
La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es un método para obtener un gran número de copias de un fragmento de ADN partiendo de una sola copia. Se basa en la capacidad de las ADN polimerasas para replicar hebras de ADN usando ciclos de altas y bajas temperaturas que separan y vuelven a unir las hebras de ADN nuevas. Requiere dNTPs, cebadores, iones, buffer y ADN polimerasa. Se usa ampliamente en medicina, investigación, paleontología y agronomía
Seminary.
Kelly Marisancén Carrasquilla
Laura Jaramillo Jaramillo
Medicine Students
"Molecular basis of acid ceramidase deficiency in a neonatal form of Farber disease:
Identification of the first large deletion in ASAH1 gene
Mariana Q. Alves a,b, Emmanuelle Le Trionnaire c, Isaura Ribeiro a, Stéphane Carpentier d, Klaus Harzer e,
Thierry Levade c,d, M. Gil Ribeiro"
Teoría sobre la prediccion de genessssssluisman9119
Este documento describe varias estrategias para predecir genes en secuencias de ADN, incluyendo: 1) métodos basados en similitud que comparan la secuencia contra bases de datos, 2) métodos intrínsecos como secuencias consenso, matrices de peso, modelos ocultos de Markov y redes neuronales, y 3) estrategias integradoras que combinan múltiples métodos. Explica que la predicción de genes es más sencilla en procariotas que en eucariotas debido a la ausencia de intrones en los primeros.
Sesión realizada por una EIR de Pediatría sobre aspectos clave de la valoración nutricional del paciente pediátrico en Oncología, y con tres mensajes para llevarse a casa:
- La evaluación del riesgo y la planificación del soporte nutricional deben formar parte de la planificación terapéutica global del paciente oncológico desde el principio.
- Existe suficiente evidencia científica de que una intervención nutricional adecuada es capaz de prevenir las complicaciones de la malnutrición, mejorar la calidad de vida como la tolerancia y respuesta al tratamiento y acortar la estancia hospitalaria.
- En los hospitales hay pocos dietistas que trabajen exclusivamente en la unidad de Oncología Pediátrica, y esto puede repercutir en mayores gastos sanitarios, peor estado general de los pacientes y menor supervivencia.
La medicina tradicional
Ñn´anncue Ñomndaa es el saber-conocimiento de mayor trascendencia en la vida de
quienes integran las comunidades amuzgas, vinculadas por cómo la
población se relaciona con el mundo donde vive .Es un elemento integrador de conductas,
saberes y prácticas sociales, simbólicas y
psicológicas en la que se puede apreciar su interrelación para resolver y afrontar los
problemas emocionales, espirituales y de
salud (equilibrio del cuerpo, la mente y el
espíritu).
Desde esta perspectiva de salud/enfermedad
SABEDORAS y SABEDORES
atienden diferentes enfermedades (malestares que están dentro y
fuera del cuerpo), entre ellas: el espanto, el empacho, el antojo o motolin, y el
coraje. La incidencia en la curación de acuerdo a los Ñonmdaa
depende de algunos elementos centrales: A la experiencia del Sabedor y al carácter
territorial.
Procedimientos Básicos en Medicina - HEMORRAGIASSofaBlanco13
En el presente Power Point se explica el tema de hemorragias en el curso de Procedimiento Básicos en Medicina. Se verán las causas, las cuales son por traumatismos, trastornos plaquetarios, de vasos sanguíneos y de coagulación. Asimismo, su clasificación, esta se divide por su naturaleza (externa o interna), por su procedencia (capilar, venosa o arterial) y según su gravedad. Además, se explica el manejo. Este puede ser por presión directa, elevación del miembro, presión de la arteria o torniquete. Finalmente, los tipos de hemorragias externas y en que partes del cuerpo se dan.
En esta presentación encontrarán información detallada sobre cómo realizar correctamente la maniobra de Heimlich y también información sobre lo que es la asfixia.
Fijación, transporte en camilla e inmovilización de columna cervical II.pptxmichelletsuji1205
Ante una lesión de columna cervical es vital saber como debemos proceder, por lo que este informe detalla los procedimientos y precauciones necesarios para la adecuada inmovilización de la misma, destacando su relevancia debido a la frecuencia de lesiones asociadas, así como los materiales requeridos y el momento oportuno para llevar a cabo esta práctica en la atención inicial a pacientes politraumatizados. El objetivo es asegurar la máxima supervivencia del paciente hasta su traslado al hospital."
La introducción plantea un problema central en bioética.pdfarturocabrera50
Este documento aborda un problema central en el campo de la bioética, explorando las complejas interacciones entre el avance científico y sus implicaciones éticas. Se analiza cómo la tecnología biomédica y las investigaciones emergentes plantean dilemas éticos relacionados con el tratamiento y el cuidado de la vida humana, la toma de decisiones informadas y la equidad en el acceso a los beneficios médicos. Este análisis proporciona una base para discutir cómo estas cuestiones afectan las políticas públicas, la práctica médica y la ética profesional.
Terapia cinematográfica (6) Películas para entender los trastornos del neurod...JavierGonzalezdeDios
Los trastornos del neurodesarrollo comprenden un grupo heterogéneo de trastornos crónicos que se manifiestan en períodos tempranos de la niñez y que, en conjunto, comparten una alteración en la adquisición de habilidades cognitivas, motoras, del lenguaje y/o sociales que impactan significativamente en el funcionamiento personal, social y académico. Tienen su origen en la primera infancia o durante el proceso de desarrollo y comprende a heterogéneos procesos englobados bajo esta etiqueta.
El Manual diagnóstico y estadístico de los trastornos mentales en su quinta edición (DSM-V) incluye dentro los trastornos del neurodesarrollo los siguientes siete grupos: Discapacidad intelectual, Trastornos de la comunicación, Trastorno del espectro del autismo (TEA), Trastorno de atención con hiperactividad (TDAH), Trastornos específico del aprendizaje, Trastornos motores y Trastornos de tics. Es importante tener en cuenta que en una misma persona puede manifestarse más de un trastorno del neurodesarrollo. Y, dentro de todos los trastornos del neurodesarrollo, el autismo adquiere una especial importancia, por lo que será considerado en el próximo capítulo de la serie “Terapia cinematográfica” de forma particular.
Y esta gran diversidad también la ha reflejado en la gran pantalla y en las historias “de cine” que el séptimo arte nos ha regalado. Y hoy proponemos un recordatorio de la amplia variedad y complejidad de los trastornos del neurodesarrollo en la infancia a través de 7 películas argumentales. Estas películas son, por orden cronológico de estreno:
- El milagro de Ana Sullivan (The Miracle Worker, Arthur Penn, 1962) 6, para valorar el milagro de la palabra, el milagro del lenguaje y de los sentidos.
- Forrest Gump (Robert Zemeckis, 1994) 7, para comprender el valor de la lucha por encontrar cuál es la meta de cada uno, una mezcla de destino y sueños propios.
- Estrellas en la Tierra (Taare Zameen Par, Aamir Khan, 2007) 8, para confirmar que cada niño y niña es especial, incluso con sus potenciales deficiencias psíquicas, físicas y/o sensoriales.
- El primero de la clase (Front of the Class, Peter Werner, 2008) 9, para demostrar el valor de la superación y como, a pesar de nuestras dificultades, somos merecedores de oportunidades.
- Cromosoma 5 (María Ripoll, 2013) 10, para entender la soledad del corredor de fondo ante los trastornos del neurodesarrollo.
- Gabrielle (Louise Archambault, 2013) 11, para intentar normalizar las relaciones afectivas y amorosas entre dos personas con enfermedades mentales y discapacidad.
- Línea de meta (Paola García Costas, 2014) 12, para interiorizar que la carrera de la vida es especialmente difícil para algunos.
Siete películas argumentales que el séptimo arte nos presenta con protagonistas afectos con diferentes trastornos del neurodesarrollo durante su infancia, adolescencia y juventud y que nos ayudan a comprender que cada persona es especial, diversa y con capacidades diferenciales que hay que respetar y potenciar.
3. Introducción
Variante de PCR
Amplificar diferentes fragmentos
de DNA (sondas ligadas)
En una misma reacción mediante
un solo par de cebadores y bajo
las mismas condiciones de ciclos
de temperatura
Se pueden amplificar regiones
génicas cercanas o
adyacentes con la finalidad de
determinar con certeza la
dosis génica en muestras de
DNA de pacientes con
mutaciones como deleciones o
duplicaciones grandes en
estado heterocigoto,
homocigoto o hemicigoto
4. Fundamento
Utiliza sondas de dos oligonucleótidos que reconocen sitios
adyacentes en el DNA
Cada región a analizar posee dos hemisondas con secuencias
inmediatamente adyacentes
Ambas sondas poseen una región de unión al primer (forward y
reverse) y solo una posee una secuencia de identificación
Todas las sondas que diseñemos para los targets utilizan un único
par de primers para la amplificación de todas las secuencias
7. Pasos:
Ligación:
• Adicionar ligasa master mix (buffer de ligasa y ligasa 65 que es termoestable)
Se incuba 15 min a 54°C
Para inactivar, poner a 98° durante 5 min. ( para que se termine la ligación)
Si encuentra alguna alteración en la
hibridación no liga
8. Pasos
Amplificación por PCR:
• Se añade otro master mix de la polimerasa
• Cebador Forward ( con fluorocromo)
• Cebador reverse
• dNTPs
• Los primers no amplifican secuencias diana
• Cantidad de producto ligado es medida del numero de secuencias diana
9. Pasos
Separar los fragmentos por tamaño
• Como se añadió el fluorocromo que viene en la amplificación se puede
diferenciar y cuantificar en la electroforesis capilar
• También hay marcador de peso molecular
• Amplicones y el cargador de peso molecular tienen fluorocromos
diferentes
10.
11. Análisis de MLPA
El análisis de los datos requiere varios pasos
Normalización de los datos: compara cada dato de la
muestra con datos de muestra de referencia
Intranormalización: esas intensidades absolutas que
se observan en el electroferograma se van a
convertir en valores relativos para poderlos comparar
con las muestras de referencia
Calcula asi una relación para cada sonda en cada
muestra
Se visualiza la intensidad de señal de cada sonda de
la muestra en el ratiochart
MRC-Holland desarrolló Coffalyser.net
12.
13.
14. Interpretación de resultados
Una disminución en el área de la señal indica deleción, al contrario un
incremento en el área de señal indica aumento del número de copias
Las deleciones o duplicaciones en heterocigosis producen una reducción o
aumento de la señal del 25% al 50% aprox de lo esperado para cada sonda
Cuidad con la interpretación de las deleciones o duplicaciones en
hemicigosis del cromosoma X en el varón
En ocasiones la interpretación es complicada y obliga a repetir el ensayo.
Cuidado con las deleciones o duplicaciones de una sola sonda
15. Como reconocer la calidad de la
muestra
Fragmento estándar: Es con el cual se hacen la comparación de todo lo demás
28. Tipos de MLPA
Según la técnica Técnica
clásica
Deleciones/Duplicaciones
Variantes puntuales
específicas
Variantes de
la técnica
MS-MLPA
RT-MLPA
29. Variantes de la técnica
MS-MLPA
• MLPA específico de
metilación
• Detectar alteraciones
epigenéticas
• Cambios en el patrón
de metilación del DNA
en genes concretos
RT-MLPA
• MLPA transcriptasa
reversa
• Cuantificar la cantidad
de mRNA sintetizados
por genes de interés
específicos
• Se inicia desde RNA
• Retrotranscripción
31. Limitaciones
Resultados dependen de la calidad de la muestra que
se analiza
Cambios en la secuencia de DNA donde se une la
sonda del MLPA puede modificar el resultado
Desnaturalización inadecuada de la muestra se
asocia a falsas deleciones
No detecta: reordenamientos genómicos balanceados o
del/dup fuera de la región donde se une la sonda
34. Referencias
• Pierce B; Genética, un enfoque conceptual, 2da edición, Panamericana.
• Mérida F. & Moreno E; Manual para técnico superior de Laboratorio Clínico y
Biomédico, Panamericana, 2015.
• Alecia S. Willis; Ignatia van den Veyver; Christine M. Eng (2012). Multiplex
ligation-dependent probe amplification (MLPA) and prenatal día
• Theophilus, Bimal D.M.; Rapley, Ralph (2011). [Methods in Molecular Biology]
PCR Mutation Detection Protocols Volume 688 || Multiplex Ligation-Dependent
Probe Amplification (MLPA®) for the Detection of Copy Number Variation in
Genomic Sequences. , 10.1007/978-1-60761-947-5(Chapter 8), 97–
126. doi:10.1007/978-1-60761-947-5_8gnosis. , 32(4), 315–
320. doi:10.1002/pd.3860
35. • No partes de un DNA total, si no de concentración 50-100 ng/ml
• Hibridacion dura mas porque son varias sondas
Notas del editor
En la técnica se recomienda emplear como controles muestras de DNA con deleciones o duplicaciones génicas grandes ya caracterizadas, desde un exón hasta varios de ellos o incluso loci contiguos
La capacidad de amplificar varias sondas en la misma reacción hace posible delimitar con mayor precisión los puntos de rotura y los sitios génicos de reunión de las deleciones o duplicaciones, asi como la extensión de dichos rearreglos
was developed by the “MRC-Holland” company and published in 2002 as a relative quantification method for the targeted screening for copy number changes in DNA
Ligasa termoestable es muy especifica: si ella encuentra que hay alguna alteración, de solo un nucleótido en las secuencias de hibridación, no se une y no genera el enlace covalente; por ende no se puede amplificar esas sondas y no se genera señal en la electroforesis
Ventaja: Se puede diferenciar genes de pseudogenes, hasta 60 sondas que se pueden unir a 60 secuencias diferentes al mismo tiempo.
Ligasa termoestable es muy especifica: si ella encuentra que hay alguna alteración, de solo un nucleótido en las secuencias de hibridación, no se une y no genera el enlace covalente; por ende no se puede amplificar esas sondas y no se genera señal en la electroforesis
Ventaja: Se puede diferenciar genes de pseudogenes, hasta 60 sondas que se pueden unir a 60 secuencias diferentes al mismo tiempo.
Ligasa termoestable es muy especifica: si ella encuentra que hay alguna alteración, de solo un nucleótido en las secuencias de hibridación, no se une y no genera el enlace covalente; por ende no se puede amplificar esas sondas y no se genera señal en la electroforesis
Ventaja: Se puede diferenciar genes de pseudogenes, hasta 60 sondas que se pueden unir a 60 secuencias diferentes al mismo tiempo.
Ligasa termoestable es muy especifica: si ella encuentra que hay alguna alteración, de solo un nucleótido en las secuencias de hibridación, no se une y no genera el enlace covalente; por ende no se puede amplificar esas sondas y no se genera señal en la electroforesis
Ventaja: Se puede diferenciar genes de pseudogenes, hasta 60 sondas que se pueden unir a 60 secuencias diferentes al mismo tiempo.
Separar los fragmentos por tamaño y es donde cobrra importancia la secuencia de relleno
Las líneas: promedio
El cuadrado muestra el intervalo de confianza de las muestras de referencia
Y los puntos negros es el intervalo de confianza estimado de la muestra que se esta estudiando.
Si el punto negro se sale del intervalo de confianza y se va hacia abajo: deleción, si se va hacia arriba : duplicacion
Interpretación de resultados:
Una disminución en el área de la señal indica deleción, al contrario un incremento en el área de señal indica aumento del número de copias
Las deleciones o duplicaciones en heterocigosis producen una reducción o aumento de la señal del 25% al 50% aprox de lo esperado para cada sonda
Cuidad con la interpretación de las deleciones o duplicaciones en hemicigosis del cromosoma X en el varón
En ocasiones la interpretación es complicada y obliga a repetir el ensayo. Cuidado con las deleciones o duplicaciones de una sola sonda
Existen estas señales al inicio del electroferograma, que son fragmentos cortos .
Fragmento estándar Pocas veces va a verse afectado por la desnaturalización. Es el fragmento con el cual se hacen la comparación de todo lo demas
Fragmentos q: permiten conocer si la cantidad de dna fue adecuada.
Si se tiene mucho dna, van a tender a irse a cero
Si hay poco dna , los fragmentos van a ser elevados
Si no hat dna, los fragmentos van a estar muy elevadas
El porcentaje para decir que esta optima la cantidad. Fragmentos q deben estar disminuidos en menos 33% del fragmento estandar
Fragmentos D: están a lado y lado del fragmento estándar. Lo que principalmente van a medir es , determinar si la denaturalizacion del dna fue completa
Lo normal es que se encuentren un poco mas elevados o al mismo nivel de el fragmento estándar.
Cuando hay denaturalizacion incompleta, se van a ver disminuidos
Se unen a islas de cpg.
Fragmentos xy
Es para identificar el sexo de la muestra
En las mutaciones puntuales, las sondas de MLPA van a ir con la función de buscar esa mutación que estamos sospechando en el paciente.
La persona que no tenga la mutación especifica que estoy buscando, el oligonucleótido no se va a unir adecuadamente a la secuencia objetivo y la ligasa no genera la ligación y no se va amplificar y por tanto no se va a ver el pico en la electroforesis
Para estudio de deleciones duplicaciones.
Ej: Duchenne (DMD)
A mano izquierda se ve la electroforesis. Se ven esos 4 puntos elevados que cuando se ven en la curva de normalización son los que están por arriba de la línea azul y aparte están fuera del rango de confianza.. Ahí se ve una duplicación.
La región gris se encuentra la lectura de sondas de referenica
En el electroferograma vemos zona donde no hay sondas probablemente donde esta la deleción y cuando vemos la curva de normlaizacion, la sonda se encuentra en cero.
Pero es posible que si hay alteración en la hibridación no va amplificar y se va a tomar como deleción. Se ha visto en Duchenne que hay mutaciones puntuales y por eso la sonda no se hibridaba
MS-MLPA:
En esta primero se utilizan enzimas de digestion que es especifica o que es sensible a la metilacion
La enzima donde esta metilada no va hacer digestion, no va a cortar
Donde no hay metilacion va haber digestion completa
Una de las muestras técnica convencional y la otra técnica de metilacion
}
Cuando si se corta es como si hubiera una alteración en la ligación y esos fragmentos no se van a amplificar
La calidad se afecta por tipo de muestra, método de extracción del DNA
La no localización exacta en el sitio de ligación de la sonda puede provocar disminución de la hibridación y una falsa deleción. Tener cuidado con las deleciones de una sola sonda o de un solo exón
Sales en la muestra de DNA provoca alteración en las zonas de desnaturalización en regiones ricas en GC
Se ven dos sondas disminuidos con respectoa los demás
Se ven los fragmentos q, d, x, estandar