laboratorio

1. INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL
ESCUELA SUPERIOR DE MEDICINA
EQUIPO 1:
Arredondo López Karen
Joseth.
Candia Jiménez Monserrat.
Rafael
Fernández Montejo
Alejandra
Ruíz Ceja Aline
Toledo Arrazola Vidaris
Solad
Práctica 10: Dagnóstico Inmunoserológico de
Mononucleosis Infecciosa.
Laboratorio de Microbíología y
parasitología médica.
Miércoles 19 de Abril del 2017.

2. Mononucleosis infecciosa.
Síndrome clínico que puede ser ocasionada por diversos
virus, predominantemente el virus de Epstein-Barr,
descubierto hace 36 años en células cultivadas de tejido con
linfoma de Burkitt por Epstein, Achong y Barr.

3. • Familia Herpesvirus.
• Subfamilia de los Gammaherpesvirinae.
• 150 nm.
• Codifica para 70 proteínas precoces inmediatas, precoces y tardías y.
• Tropismo tisular hacia el receptor C3d ( CR2 o CD21 )
• Antígenos nucleares de Epstein-Barr (EBNA), 1, 2, 3A, 3B, y 3C;
• Proteínas latentes (PL)
• Proteínas latentes de la memrana (PLM) 1 y 2 -> Acitivad oncogen.
• Moléculas de ARN codificadas por el virus, EBER-1 y EBER-2.
UNIÓN AL
DNA

4. • Proteínas tardías:
• Gp 350 / 220 -> Adhesión vírica a CD21, MHC II, LcB
• Durante la infección productiva:
• Antígeno precoz ( AP )
• Antígeno de cápside vírica ( VCA)
• Glucoproteínas del antígeno de membrana ( AM )

6. Manifestaciones clínicas relevantes
• fase prodrómica:
Diaforesis Cefaleas Artromialgias Astenia

7. Fiebre
Linfoadenopatía
Faringitis
Esplenomegalia

9. EPÍDEMIOLOGÍA
• Distribuído por todo el mundo,
estimándose que hasta el 95%
de los adultos entre 35 y 40
años han sido infectados.
• Enfermedad de jóvenes.
Mientras que las áreas con
mejores estándares sanitarios
la enfermedad se contrae más
tarde.

10. Etapa preanalítica

11. Tipo de muestra: sanguínea
• Preparación del paciente:
• El paciente debe mantener su dieta habitual.
• El día del examen no debe realizar deporte antes de tomarle la muestra.
• Evitar el estrés antes y después de la toma de la muestra.
• Para realizar este análisis NO se precisa estar en ayunas.
• No fumar después de las 10:00 p.m. la noche anterior al examen.
• No tomar licor durante 24 horas antes del examen.

12. Identificación del paciente
Debe incluir la información siguiente:
• Número de registro de identificación del paciente generado por el laboratorio.
• Nombre del paciente
• Edad y sexo
• Procedencia del paciente (sala, consulta externa, seguro, cuarto, cama, etc.)
• Teléfono y dirección del paciente (cuando aplique)
• En caso de pacientes menores y/o incapacitados: nombre y dirección del responsable.
• Fecha y hora de atención
• Horario de colecta (cuando aplique)
• Exámenes solicitados y tipo de muestra
• Cuando sea necesario: información adicional de acuerdo al examen (medicamentos en uso, ciclo
menstrual, etc.)
• Fecha prevista para entrega de los resultados.

13. Toma de muestra

14. La sangre extraída se traslada al laboratorio de análisis en un
tubo especial para Química clínica y serología, sin
anticoagulante.

15. Rechazo de muestra
• Formulario o consentimiento incompleto
• Muestra insuficiente
• Muestra diferente a la especificada (como en el caso de utilizar un
anticoagulante diferente al indicado, hemolizada, lipémica o
coagulada, o que no se haya utilizado el tubo de muestra especificado
para dicho estudio).
• Muestra que haya sido enviada después del tiempo indicado y/o a
distinta temperatura, que ponga en riesgo la confiabilidad del
resultado.

16. TÉCNICA DE
HEMAGLUTINACIÓN
PARA LA DETERMINACIÓN DE ANTICUERPOS HETERÓFILOS

17. FUNDAMENTO DE TEST DE PAUL- BUNNELL
 En la mononucleosis infecciosa se producen anticuerpos
heterófilos IgM que tienen la propiedad de aglutinarse cuando
de mezclan con hematíes de carnero o de caballo porque el
antígeno del virus de Epstein-Barr tiene epitopos similares a los
de los antígenos de las células de estos animales.
 Los anticuerpos heterófilos son bastante sensibles y específicos
de los anticuerpos para el virus Epstein-Barr. La positividad
aumenta progresivamente durante las 6 semanas después de
contagio.

18.  La capacidad de los anticuerpos heterófilos de aglutinar los
eritrocitos de caballo o carnero y neutralizando simultáneamente
los anticuerpos no asociados a la mononucleosis (con extracto de
riñón de cobayo). La aglutinación se visualiza macroscópicamente.

19.  Se coloca una muestra de suero / plasma del paciente en un portaobjetos
de y se mezcla con antígeno de riñón de cobayo y eritrocitos de caballo.
Se mezcla con un palillo de madera durante un minuto.
 Si hay anticuerpos heterofilos en el suero / plasma, la sangre aglutina.
 Un título alto (> 1:56) se considera positivo.

20.  Después de la infección, el 85-90% de las personas producen
anticuerpos heterófilos que son detectados con el test de Paul-Bunnell
(20 a 30 % de los casos hay falsos negativos).
 En las dos primeras semanas de la enfermedad es sensible en el 60% de
los casos y sube al 90% a las 4 semanas del comienzo de los síntomas.
 Cuando un paciente tiene un título alto el diagnóstico es certero
excepto en falsos positivos que pueden ser debidos a la presencia de
un linfoma, un Lupus Eritematoso Sistémico, una leucemia, y alguna
forma de hepatitis crónica.

21. Citometría hemática.
El término citometría hemática es más adecuado para referirse a la
medición de las células de la sangre (citos, célula y metros, medida).
La interpretación correcta de la CH supone el análisis detallado de los
tres grupos:
 Serie Roja.
 Serie Blanca.
 Serie Trombocítica.
Idealmente, la medición de todos los parámetros e índices eritrocíticos
debe hacerse empleando contadores de partículas por citometría de
flujo.

22.  Linfocitos atípicos son células características de la MI, en su
mayoría Lc CD8 activados de forma policlonal.
Las características morfológicas de estos linfocitos atípicos son:
incremento en el tamaño, núcleos grandes con disminución de la
razón núcleo/citoplasma y apariencia de menor densidad del núcleo
en comparación con los linfocitos normales.
¿Por qué es útil la CH?

23. EIA indirecto

24. Antígenos VCA y EBNA
fijados a un soporte
Se añade el suero que
contiene los Ab
primarios

25. Se añade el Ab
secundario que tiene
conjugada una enzima

26. Sospecha de MI
Investigar otras causas
de MI
MI por el VEB
Ig M anti VCA (IFI)descartada MI por el VEB
Ig G anti EBNA 1 (ELISA)
MI por el VEB
Negativa o dudosaPositiva
Prueba de anticuerpos heterofilos
Positiva Negativa
Positiva Negativa

27. • 5 a 15 % de adultos y una proporción menor en
niños pequeños y neonatos no logran inducir
niveles detectables de anticuerpos heterofilos
• Además los niños pueden ser asintomáticos

28. Sospecha de MI
Investigar otras causas
de MI
MI por el VEB
Ig M anti VCA (IFI)descartada MI por el VEB
Ig G anti EBNA 1 (ELISA)
MI por el VEB
Negativa o dudosaPositiva
Prueba de anticuerpos heterofilos
Positiva Negativa
Positiva Negativa

29. Aparece entre los 3 y 6 meses desde el
inicio de los síntomas
Persiste a bajas concentraciones
por el resto de la vida
Ig G anti EBNA
-Su hallazgo junto con anticuerpos anti VCA
indica que la persona ha padecido una infección
anterior
- si aparece en la serología inicial indica que los
síntomas NO se pueden atribuir a la infección
aguda por VEB

30. • Los antígenos EBNA aparece dentro del núcleo antes de la síntesis de
proteínas
Antígenos EBNA

31. • La elaboración de anticuerpos frente a EBNA requiere lisis de la célula
infectada y habitualmente indica el control por los linfocitos T de la
enfermedad activa
Antígenos EBNA

32. • La falta de anti EBNA después de 8 semanas es un
signo que advierte una evolución severa y
prolongada

33. Sospecha de MI
Investigar otras causas
de MI
MI por el VEB
Ig M anti VCA (IFI)descartada MI por el VEB
Ig G anti EBNA 1 (ELISA)
MI por el VEB
Negativa o dudosaPositiva
Prueba de anticuerpos heterofilos
Positiva Negativa
Positiva Negativa

34. Se detecta desde los momentos iniciales de
los síntomas
Desciende 4 a 6 semanas después
del inicio de los síntomas
Desaparece a los 3 meses
Ig M anti VCA
Es la primer anticuerpo que se detecta e indica
infeccion muy inicial (aguda) es el mas especifico y es
suficiente para confirmar el diagnostico

35. Ig M anti VCA
• es poco especifica
• Hay que descartar falsos positivos por factor reumatoide
y reacción cruzada con anti CMV y parvovirus B19 (anti
VCA positivo M)
• Títulos superiores a 5 son demostrables en 90% de los
casos en fase temprana
• Declinan rápidamente después de la infección aguda y a
los 4 meses solo 10% tienen niveles mayores de 5%
• Puede haber bajas concentraciones en una reactivación

36. Aparece entre la 2 semana y el 2 mes de la
infección aguda
Alcanza su máximo nivel a los 4
meses y se mantiene positivo toda la
vida
Ig G anti VCA
-Es un marcador de haber padecido la enfermedad
-Aparece junto con Ig M anti VCA al inicio de la
enfermedad

37. Ig G anti VCA
• Ambas están presentes desde el inicio de la enfermedad
debido a su largo periodo de incubación
• Ig G anti VCA es máxima en la fase aguda, declina en los
meses siguientes y permanece estable toda la vida por
lo tanto aunque Ig G anti VCA es positiva en la fase
aguda su presencia unica no distingue entre infección
reciente y antigua

38. Sospecha de MI
Investigar otras causas
de MI
MI por el VEB
Ig M anti VCA (IFI)descartada MI por el VEB
Ig G anti EBNA 1 (ELISA)
MI por el VEB
Negativa o dudosaPositiva
Prueba de anticuerpos heterofilos
Positiva Negativa
Positiva Negativa

39. Otras causas de mononucleosis infecciosa
• VIH: enfermedad aguda simula la MI causada por VEB
• Citomegalovirus: sin adenomegalia ni faringiti, menor proporcion de
linfomonocitosis sin antiecuerpos heterofilos ni especificos del VEB
• Toxoplasma gondii: puede ocasionar adenomegalia y linfomonocitosis
• Rubeola: produce fiebre, faringitis, exantema , adenomegalias, y
linfocitosis
• Hepatitits virales: cursan con linfommonocitosis leves y
adenomegalias

40. Antígenos tempranos
• La mayoría de las personas desarrollan Ig G anti EA que asciende
precozmente son transitorios y desaparecen en pocos meses
• Aparecen en la fase aguda y descienden hasta ser indetectables a los 3
a 6 meses e indican una infección muy reciente
• La persistencia de anticuerpos contra antígenos tempranos se
correlaciona con enfermedad grave carcinoma nasofaríngeo o con
linfoma africano pero no es de utilidad para detectar MI

43. ETAPA POST ANALÍTICA
El médico podrá confirmar o descartar el diagnóstico
nosológico de acuerdo al agente etiológico que se
encontró en las pruebas inmunoserológicas de MI.
Dx etiológico: Virus de Epstein Barr.
Dx nosológico: Mononucleosis infecciosa.