Este documento describe un experimento en el que se intoxica a un cobayo con cloroformo para observar sus síntomas y efectos. Se administran 5 ml de cloroformo por vía intraperitoneal al cobayo y se observa que muere después de 28 minutos, presentando antes respiración agitada, pérdida de equilibrio, convulsiones e hipoxia. Luego de la muerte, se realizan pruebas en los órganos y destilado que confirman positivamente la presencia de cloroformo a través de varias re

1. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis” (PARACELSO)
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UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc.
Alumno: Valverde Durán Sergio Andrés
Curso: 5to Bioquímica y Farmacia Paralelo: A
Grupo: N°6
Fecha de Elaboración de la Práctica: Lunes, 23 de Junio del 2014
Fecha de Presentación de la Práctica: Lunes, 30 de Junio del 2014
PRÁCTICA N° 5
Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO
Animal de Experimentación: Cobayo
Vía de Administración: Vía Intraperitoneal
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA
1. Observar la reacción que presenta el Cobayo ante la Intoxicación por Cloroformo
2. Observar cuidadosamente las manifestaciones y controlar el tiempo en que actúa el
Cloroformo
3. Conocer mediante pruebas de identificación la presencia de Cloroformo
MATERIALES:
 Jeringuilla de 10 ml
 Soporte universal
 Vaso de 500 ml
 Agitador
 Panema
 Tabla de disección
 Aro metálico
 Gillette
 Erlenmeyer de 200 ml
 Corcho
 Lámpara de alcohol
 Perlas de Vidrio
 Balanza
 Probeta
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SUSTANCIAS
 Cloroformo
 Alcohol de 95ª
 AgNO3
 KOH
 Beta naftol
 Solución alcohólica concentrada de potasa
 Timol
 Resorcinol
 Piridina
 Cristal de yodo
 Clorhidrato de piperacina

2. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis” (PARACELSO)
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PROCEDIMIENTO
1. Tener todos los materiales listos en la mesa de trabajo
2. Con la debida asepsia que amérita el caso se procede a realizar la práctica
3. Administrar 5ml de Cloroformo por vía intraperitoneal
4. Colocar el cobayo en la panema
5. Observar las manifestaciones que se presentan y en qué tiempo hasta su muerte.
6. Con la ayuda de una Bisturí procedemos abrir al cobayo
7. Observamos órgano por órgano las repercusiones que provoco el Cloroformo en
el cobayo
8. Colocamos las vísceras (picadas lo más finas posibles) en el recipiente adecuado
(Vaso de precipitación) y trituramos en conjunto con una solución de Ácido
Tartárico
9. Una vez ya armado el equipo de destilación los vapores producidos por las
vísceras se recogerán en un matraz.
10. Y con esta solución procedemos a realizar las pruebas de caracterización para
Cloroformo
REACCIONES:
REACCIONES EN MEDIO BIOLÓGICO
El material de la investigación se somete a destilación con arrastre de vapor en medio
acido tartárico, y en el destilado se realiza las reacciones de identificación.
1. En el fondo de un tubo de ensayo se mezclan unas cuantas gotas de cloroformo con
otras tantas de alcohol de 95ª que contiene un poco de nitrato de plata, se inflama la
mezcla y se observa que esta arde con un llama bordeada de verde y que el ácido
clorhídrico formado reacciona con el nitrato de plata disuelto originando un precipitado
de cloruro de plata.
2. REACCIÓN DE DUMAS
Al adicionar unas gotas de destilado que contiene cloroformo a unos mililitros de potasa
alcohólica (proporción 1:10), se originan formiatos y cloruro de potasio.
CHCl3 + 4 KOH ----- ClK + HCO2K + H 2 O
Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos porciones a una porción se le agrega
percloruro de hierro produciendo un color rojo en frío o un precipitado en caliente.
A la otra porción se le agrega solución de nitrato de plata produciéndose un precipitado
de cloruro de plata que se disuelve en amoníaco diluido.
3. REACCIÓN DE LUSTGARTEN
Al calentar la muestra con unos miligramos de beta naftol y solución alcohólica
concentrada de potasa (preferentemente un trozo de potasa y algunas gotas de alcohol),
se obtiene un franco color azul.
Si se sustituye el B-naftol por timol el color es Amarillo mas o menos oscuro; con
resorcinol la coloración e roja – violáceo y con la piridina rojo.
 Balón volumétrico
 Cinta
 Tubos de ensayo
EQUIPOS:
 Equipo de destilación
 Equipo de disección


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4. REACCIÓN DE FUJIWARA
En un tubo de ensayo, se vierte 2 ml de lejía de sosa 1:2 con una capa de 2mm de
piridina y luego la muestra que contiene el cloroformo; se agitan, podemos por unos
instantes en baño de María y se deja en reposo; se convierte en una materia coloreada que
varía del rosa al rojo vivo, soluble en piridina .Esta reacción sensible para unos pocos
microgramos de cloroformo y es aplicable en la orina de algún sujeto que haya absorbido
de 15-20 g de agua clorofórmica.
5. REACCIÓN DE ROSEBOOM
Se disuelve un pequeño cristal de yodo en la solución muestra y se agregan unos pocos
miligramos de clorhidrato de piperacina ; si el cloroformo está presente en la muestra, la
coloración violeta inicial cambia a amarilla rojiza al disolverse el alcaloide.
6. REACCIÓN DE BENEDICT
Si la solución muestra contiene cloroformo, reduce el reactivo de Benedict, y de acuerdo
a la concentración del tóxico puede producirse una gama de colores que van desde el
verde, amarillo, naranja o rojo ladrillo.
GRÁFICOS:
Imagen #1 Imagen #2
Imagen #3 Imagen #4
Administrar 5 ml de Cloroformo
al Cobayo.
Colocarlo en la panema y
observar sus síntomas hasta su
deceso
Una vez muerto el cobayo lo
colocamos sujetado a la tabla de
disección
Con la ayuda de un Bisturí procedemos a hacer un
corte longitudinal para obtener las vísceras y
observar las repercusiones del Cloroformo
Imagen #4

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Imagen #5 Imagen #6
Imagen #7 Imagen #8
Imagen #9
Tener mucho cuidado con derramar el
primer líquido que se obtiene al hacer el
corte, debido que ese líquido ya forma
parte fundamental de los análisis
posteriores.
Una vez hecho el corte, analizamos
órgano por órgano las
repercusiones que causo el
Cloroformo en el cobayo.
Luego de esto preparamos la solución
de Ácido tartárico que nos servirá para
acidular las vísceras antes de
someterlas al equipo de destilación
Una vez trituradas las
vísceras con la solución de
ácido tartárico, armamos
el equipo de destilación y
recogemos los vapores
Triturar las vísceras lo más fino
posible, en conjunto con la
solución de ácido Tartárico

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REACCIONES DE RECONOCIMIENTO
 REACCIÓN #1: MEDIOS BIOLÓGICOS
POSITIVO CARACTERÍSTICO
 REACCIÓN #2: REACCIÓN DE DUMAS
EN FRIO:
POSITIVO CARACTERÍSTICO
EN CALIENTE:
POSITIVO CARACTERÍSTICO
CON AgNO3
POSITIVO CARACTERÍSTICO
Antes de la
reacción Después de la
reacción:
Presencia de
Precipitado de
AgNO3
Antes de la
reacción
Después de
la reacción:
Presencia
de un color
rojo.
Antes de la
reacción
Después de
la reacción:
Presencia
de un
Precipitado
Antes de la
reacción
Después de
la reacción:
Presencia
de un
Precipitado
de AgCl

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 REACCIÓN #3: REACCIÓN DE LUSTGARTEN
CON BETA NAFTOL:
POSITIVO CARACTERÍSTICO
CON RESORCINOL:
POSITIVO CARACTERÍSTICO
CON PIRIDINA ROJO:
POSITIVO CARACTERÍSTICO
Después de
la reacción:
Color
Franco Azul
Antes de la
reacción
Antes de la
reacción
Después de la
reacción:
Presencia de
color Rojo
Antes de la
reacción
Después de la
reacción:
Presencia de
coloración
Violácea

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REACCIÓN #5: REACCIÓN DE ROSEBOOM
POSITIVO CARACTERÍSTICO
OBSERVACIONES
La hora de administración de la dosis de Cloroformo fue a las 08:34 am se le
administro 5 ml Cloroformo por vía intraperitoneal, al 1 minuto de la aplicación,
el cobayo presentó respiración agitada, y así a los 5 minutos fue evidente la
pérdida de equilibrio y motricidad
Pasados 7 minutos de la primera dosis presentó convulsiones, 1 minuto después
presento una evidente hipoxia.
Pasados 18 minutos se le administro 5 ml más de Cloroformo, 2 minutos después
de la 2da dosis presento una notable hinchazón abdominal
Y finalmente después de 28 minutos, es decir a las 09:02 am el cobayo murió.
CONCLUSIONES
Al culmino de esta práctica las reacciones que presento el cobayo ante la
intoxicación por Cloroformo fueron varias entre las cuales cito las siguientes:
Respiración agitada, depresión del SNC, pérdida de Actividad Motora, Lagrimeo
y Convulsiones
La muerte se produjo tras la administración de un total de 10 ml de Cloroformo
en un tiempo de 28 minutos con lo que concluimos que el Cloroformo es altamente
tóxico, hasta la fecha por la duración de su muerte el más tóxico que hemos
utilizado
Antes de la
reacción
Después de la
reacción:
Presencia de
coloración
amarilla rojiza
Después de
Agregar Yodo y
Clorhidrato de
Piperacina

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Dentro de las 6 reacciones de reconocimiento que existen para Cloroformo
trabajamos las 4 posteriores, obteniendo los siguientes resultados:
Reacción de Medios Biológicos: Positivo Característico
Reacción de Dumas tanto en frio, caliente y con AgNO3: Positivo Característico
Reacción de Lustgarten tanto con Beta Naftol, Resorcinol y Piridina Rojo:
Positivo Característico
Reacción de Roseboom: Positivo Característico
El conjunto de pruebas nos da la pauta como Bioquímicos Farmacéuticos para la
comprobación si existió o no una intoxicación por Cloroformo
RECOMENDACIONES
 La utilización de reactivos en buenas condiciones para de esta manera realizar
una buena práctica.
 Preparar los reactivos a las concentraciones estipuladas para de esta manera
obtener buenos resultados
 Utilizar el equipo de Bioseguridad necesario para evitar cualquier contacto con
los tóxicos que estamos utilizando.
 Agregar las cantidades estipuladas en la técnica de reactivos, para así obtener un
resultado fiable.
CUESTIONARIO
¿Qué es el Cloroformo?
El cloroformo es el triclorometano (CHCl3). Inicialmente se empleó como agente
anestésico, pero poco después se abandonó este uso por s gran toxicidad hepática y
renal.es un líquido incoloro y no inflamable, de olor y sabor dulzón, extremadamente
volátil y muy liposoluble.
¿Cuáles son las fuentes de exposición del Cloroformo?
Está disponible como disolvente en laboratorios y en la industria química.se ha prohibido
su uso como sustancia aromática en pastas de dientes y otros productos como resultado
de su efecto carcinogénico en animales después de exposiciones crónicas. La intoxicación
aguda y crónica puede ocurrir por exposición a sus vapores
¿Cuáles son los usos más comunes del Cloroformo?
En el pasado, el cloroformo fue usado como anestésico en cirugía; en la actualidad tal uso
se ha abandonado. Hoy en día, el cloroformo se usa para manufacturar otros productos
químicos. Pequeñas cantidades de cloroformo se forman cuando se añade cloro al agua

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¿Qué síntomas se producen cuando se ingiere Cloroformo?
La severidad de los síntomas por exposición aguda, vía respiratoria, digestivo, dérmica,
está en relación directa con la dosis absorbida. El cloroformo, cuando se inhala, produce
todos los niveles de anestesia, teniendo un margen de seguridad muy estrecho, debido a
que causa fallo cardiaco y respiratorio de forma casi simultánea.
GLOSARIO
CONVULSIONES._ Un síntoma transitorio caracterizado por actividad neuronal en
el cerebro que conlleva a hallazgos físicos peculiares como
la contracción y distensión repetida y temblorosa de uno o varios músculos de forma
brusca y generalmente violenta
DISNEA.- Complicación respiratoria que se manifiesta como una sensación de falta de
aire en los pulmones.
HIPOXIA._ Es un estado del cuerpo donde se caracteriza por la falta de Oxígeno, es muy
común en las montañas.
PARESIAS.- Es una pérdida de una parte de la motricidad de uno o varios músculos del
cuerpo, de forma temporal o permanente.
TÓXICO._ La toxicidad es la capacidad de cualquier sustancia química de producir
efectos perjudiciales sobre un ser vivo, al entrar en contacto con él. Tóxico es cualquier
WEBGRAFÍA
http://www.enbuenasmanos.com/articulos/muestra.asp?art=2825
http://es.wikipedia.org/wiki/cloroformo
http://es.wikipedia.org/wiki/Carb%C3
http://es.wikipedia.org/wiki/Convulsi%C3%B3 n
 FIRMA DE LOS INTEGRANTES
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Cristian Trujillo Xavier Pineda Andrés Valverde

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ANEXOS: