Este documento describe el procedimiento para realizar un frotis sanguíneo utilizando el método de los dos portaobjetos. Explica cómo extender una gota de sangre sobre un portaobjeto usando el borde de otro portaobjeto, y las zonas que se obtienen (gruesa, fina e ideal). Además, detalla los pasos para teñir el frotis usando el colorante de Wright, incluyendo dejar secar el frotis, aplicar el colorante y una solución amortiguadora, y lavar con agua antes de exam

1. CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLOGICO INDUSTRIAL Y DE SERVICIOS NO. 23
REALIZA ANALISIS DE SERIE ROJA
PRACTICA NO. 3 ELABORACION DE FROTIS SANGUINEOS
REALIZACIÓN Y TINCIÓN DEL FROTIS SANGUÍNEO
La prácticadel frotissanguíneo,tambiénllamadoextendido,esde gran importanciaen
hematologíayaque el diagnósticode muchasenfermedadeshematológicaspuede realizarse con
sóloobservarlascaracterísticas morfológicasde lascélulassanguíneas,de maneraque éste no
debe serexcesivamente gruesoni excesivamentefino.Todaslasláminasporusar,sobre todo
nuevas,debenserlimpiadasconalgodónyalcohol al 70% para eliminarlagrasa que viene
adherida.
1.- MÉTODO DE LOS DOS PORTAOBJETOS
Materiales
- Alcohol al 70%.
- Algodón.
- Lancetadescartable.
- Portaobjetosde vidrioslimpiosydesgrasados(25x 75 mm).
Fundamento
Consiste enlaextensiónde unagotade sangre sobre unportaobjeto(25 x 75), empleandoel
canto biseladode otroportaobjetode igual dimensión(Fig.12).
Procedimiento
1 Una vezextraídalasangre con cualquierade lasmetodologías,se colocaunapequeñagotade
sangre (5mL) (aprox.3 mm de diámetro) sobre unportaobjetoa2 cm aproximadamentede uno
de losextremos.
2 Colocarel canto de otroportaobjetoesmeriladosobre lasuperficiedel primerportaobjeto(en
la que se encuentralagota de sangre) formandounángulode 45º.
3 Deslizarsuavemente yavelocidadmoderadael portaobjetosobre el otroensentido
longitudinal,hastaque lagotade sangre quede bienextendidasobre lasuperficiedel primer
portaobjeto.El grosordel frotissanguíneopuede variarsegúnseael ánguloque formenentresí
ambosportaobjetos.Así,si essuperiora45º, la extensiónobtenida serágruesaycorta, si es
inferiora45º será larga yfina.El secadodel frotisesa temperaturaambiente yenposición
horizontal.

2. ❖ Zona excesivamente gruesa:Se hallaenlaregióninmediataal puntode partidade laextensión
(cabeza).Enellase apreciasiempre unaumentode linfocitos.
❖ Zona excesivamente fina:Corresponde al final de laextensiónyterminaenunárea donde las
célulasadoptanunaposiciónacartonada(barbas).Enestaregiónexiste unexcesode granulocitos
y monocitos.
❖ Zona ideal:Corresponde alaregiónintermediadel frotisyenellaexiste unrepartoequilibrado
de células.
COLORACIONES USADAS
Una vez secoel frotis,se procede ala tinciónhematológicaconel colorante de Romanowsky,
constituidoporlamezclade eosinay azul de metileno.Dentrode éstastenemos:
 Colorante de Giemsa.
 Colorante de May-Grunwald.
 Colorante de Wright.
 Colorante de Leishman.
TINCIÓNCON COLORANTE DE WRIGHT
5.3.1 Fundamento
El colorante de Wrightva a permitirsuministrarunmedioparaestudiar lasangre ydeterminarlas
variacionesyanormalidadesde estructura,formaytamañode loseritrocitos,sucontenidode
hemoglobinaysuspropiedadesde coloración.Lainformaciónobtenidade unfrotisde sangre
periféricadependeengranparte de la calidaddel extendidoylacoloración.
Materiales
1 Colorante de Wright(AnexoA).
2 Frasco gotero.
3 Soluciónamortiguadatamponada(AnexoA).

3. Procedimiento
1 Una vezobtenidoel frotissanguíneo,se le dejarásecarentre 15 y 20 minutos.
2 Luegose colocala preparaciónenunsoporte y se cubre con el colorante de Wright,dejándolo
por espaciode 5 minutos.
3 Posteriormente se añade soluciónamortiguadatamponadaenpartesigualeshastaobtenerun
brillometálico,dejando6minutosadicionales.
4 Finalmente se lavaconaguacorriente yse dejasecar.
5 Se coloca enel microscopioy,con pequeñoaumento,se revisalacalidadde lacoloración,la
cantidadaproximadade glóbulosblancosyse escoge el sitioparainiciarel recuento.Se colocauna
gota de aceite de inmersiónyse enfocaa unaumentode 100x.
La formade losglóbulosrojosse examinarádetenidamente observandoademásdel color
(cantidadde hemoglobina),presenciade plaquetas,suagrupaciónydistribución.
RESULTADOS:
DIBUJA LO OBSERVADOEN LOS OBJETIVOSDIFERENTESOBJETIVOS