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Universidad Pontificia Bolivariana
Catalina Zapata Castro
third semester 2022-1
Inflammation of the renal glomeruli causes nephrotic syndrome induced by
kidney damage, and nephrotic syndrome is resistant to steroids because it has
mutations in the WT1 gene.
kidney damage
Nephrotic syndrome is the most common renal syndrome in childhood, its
histological classification is: Minimal nephrotic change, focal segmental
glomerulosclerosis and diffuse mesangial sclerosis
- Wilm tumor-1 gene (WT1) is one
of the main genes involved in
podocyte survival and effective
renal filtration.
- In this paper we evaluate the
effect of pro-inflammatory
cytokines on the modulation of
WT1 expression and its
translocation to the cytoplasm.
- in adult podocalyxin, nephrin
(NPHS1) y paired-box
transcription factor.
- Wilms tumor 1 (WT1) is involved in
the development of the urogenital
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podocytes throughout life.
GENE WT1
Podocyte injury is a key event for progressive renal failure,
in this work renal damage was analyzed by means of
histology, proteinuria, and increased blood pro-
inflammatorycytokines in the WT1 tumor gene.
GENERAL OBJECTIVE
Metodología
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un tipo de prueba que tiene cómo
finalidad identificar la reacción entre un
antígeno y un anticuerpo. esta se
identifica por medio de un anticuerpo
secundario a través de una
electroforesis. ¿Para qué? Para evaluar la
expresión de unas proteínas específicas
para esta patologia .
ELISA


El ensayo inmunoabsorbente ligado a
enzimas (ELISA) utiliza como sus siglas lo
indican una enzima como marcador para
mediar la formación de complejos
antígeno-anticuerpo.
¿Para qué? mediremos las Citoquinas
proinflamatorias IL6, IL1β y TNFα que se
presentan.
Metodología
INMUNOFLUORESCENCIA PCR Q
- técnica en donde se emplean
anticuerpos para detectar y
localizar, antígenos específicos en
células y/o tejidos.
¿Para que? en este caso me sirve
para evaluar la ubicación de la
proteína WT1.
- la prueba de Reacción en Cadena de
la Polimerasa cuantitativa , es una
variante de la PCR sirve para
amplificar y simultáneamente
cuantificar la cantidad de patógenos
en la muestra.
¿Para qué? se analiza la expresión de
mRNA de WT1 y nefrina en muestras
de riñón de ratones tratados con LPS.
Resultados
El panel B nos muestra el
análisis del gen, con las
isomorfas KTS Y 17 AA de WT1.
El panel C nos muestra el
análisis de la proteina WT1
despues del tratamiento con
lipolisacarido.
Figura 3


Ejemplo que muestra la localizacion del
gen WT1 a las 36 horas después de haber
aplicado el lipolisacarido en el riñón.
Figura 4
Figura 5 Figura 6
Análisis de la expresión de ARNm
de nefrina y tumor de Wilms 1,
expuestos a las diferentes
citoquinas.
Resultados
Análisis de la expresión de ARNm de
nefrina (NPHS1) y tumor de Wilms 1
(WT1).
Author what he said agree/disagree
Yu G, et al.
Inflammation has become a center of interest
in kidney injury, along with increased levels of
inflammatory cytokines, such as IL1β, TNFα
and monocyte chemoattractant protein-1 both
in patients and in experimental models


Trostel J and Garcia GE
There is evidence that inflammation plays an
important role in damage to various organs,
including kidneys


Ruf RG, et al.
About 80% of all children with sporadic
nephrotic syndrome respond to steroid
treatment, however, no mutations were
found in WT1 in a large cohort study


Discussion
conclusions
Molecular biology is a science
that explains and shows with
evidence the most microscopic
such as a gene, showing a good
or a damage that transfuses
cellularly, as in this case,
cytokines at the renal level.
in this research we were able to
discover kidney damage in gloremural
filtration thanks to the cytoplasmic
translocation of the WT1 protein
analyzed through histology,
molecular tests from the RNA and
DNA of the pathogen, how important
it is for a good diagnosis.
citoquinas pro-inflamatorias
en el daño renal
se acompaña de
GEN WT1 ¿Con que citoquinas
se trabajó?
Parte renal
¿Que técnicas se
utilizaron?
la histología,
inmunofluorescencia
indirecta,
inmunohistoquimica,
ensayos de transferencia
Western, ensayo de
reacción en cadena de la
polimerasa cuantitativa
y Elisa.
Los diferentes
procesos inflamatorios
llevan a un deficit de la
expresión de la
nefrina, proteína
importante junto con
los podocitos a
mantener diafragma
de filtración
glomerural
El TNFα e IL1β, estas
citoquinas inducidas
a explantes renales,
fueron las causantes
sobre la modulacion
de la expresión de
WT1 y su
translocacion al
citoplasma.
El genWT1 juega un papel
en la embriogénesis,
importante en el
desarrollo gonadal y
renal; en adultos su
expresión se da en células
viscerales especializadas
en el riñón (podocitos) y
sirve para la expresion de
la nefrina.

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SEMINARIO BIOLOGIA MOLECULAR

  • 1. Universidad Pontificia Bolivariana Catalina Zapata Castro third semester 2022-1
  • 2. Inflammation of the renal glomeruli causes nephrotic syndrome induced by kidney damage, and nephrotic syndrome is resistant to steroids because it has mutations in the WT1 gene. kidney damage Nephrotic syndrome is the most common renal syndrome in childhood, its histological classification is: Minimal nephrotic change, focal segmental glomerulosclerosis and diffuse mesangial sclerosis
  • 3. - Wilm tumor-1 gene (WT1) is one of the main genes involved in podocyte survival and effective renal filtration. - In this paper we evaluate the effect of pro-inflammatory cytokines on the modulation of WT1 expression and its translocation to the cytoplasm. - in adult podocalyxin, nephrin (NPHS1) y paired-box transcription factor. - Wilms tumor 1 (WT1) is involved in the development of the urogenital system and is expressed in podocytes throughout life. GENE WT1
  • 4. Podocyte injury is a key event for progressive renal failure, in this work renal damage was analyzed by means of histology, proteinuria, and increased blood pro- inflammatorycytokines in the WT1 tumor gene. GENERAL OBJECTIVE
  • 5. Metodología WESTERN BLOT un tipo de prueba que tiene cómo finalidad identificar la reacción entre un antígeno y un anticuerpo. esta se identifica por medio de un anticuerpo secundario a través de una electroforesis. ¿Para qué? Para evaluar la expresión de unas proteínas específicas para esta patologia . ELISA El ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) utiliza como sus siglas lo indican una enzima como marcador para mediar la formación de complejos antígeno-anticuerpo. ¿Para qué? mediremos las Citoquinas proinflamatorias IL6, IL1β y TNFα que se presentan.
  • 6. Metodología INMUNOFLUORESCENCIA PCR Q - técnica en donde se emplean anticuerpos para detectar y localizar, antígenos específicos en células y/o tejidos. ¿Para que? en este caso me sirve para evaluar la ubicación de la proteína WT1. - la prueba de Reacción en Cadena de la Polimerasa cuantitativa , es una variante de la PCR sirve para amplificar y simultáneamente cuantificar la cantidad de patógenos en la muestra. ¿Para qué? se analiza la expresión de mRNA de WT1 y nefrina en muestras de riñón de ratones tratados con LPS.
  • 7. Resultados El panel B nos muestra el análisis del gen, con las isomorfas KTS Y 17 AA de WT1. El panel C nos muestra el análisis de la proteina WT1 despues del tratamiento con lipolisacarido. Figura 3 Ejemplo que muestra la localizacion del gen WT1 a las 36 horas después de haber aplicado el lipolisacarido en el riñón. Figura 4
  • 8. Figura 5 Figura 6 Análisis de la expresión de ARNm de nefrina y tumor de Wilms 1, expuestos a las diferentes citoquinas. Resultados Análisis de la expresión de ARNm de nefrina (NPHS1) y tumor de Wilms 1 (WT1).
  • 9. Author what he said agree/disagree Yu G, et al. Inflammation has become a center of interest in kidney injury, along with increased levels of inflammatory cytokines, such as IL1β, TNFα and monocyte chemoattractant protein-1 both in patients and in experimental models Trostel J and Garcia GE There is evidence that inflammation plays an important role in damage to various organs, including kidneys Ruf RG, et al. About 80% of all children with sporadic nephrotic syndrome respond to steroid treatment, however, no mutations were found in WT1 in a large cohort study Discussion
  • 10. conclusions Molecular biology is a science that explains and shows with evidence the most microscopic such as a gene, showing a good or a damage that transfuses cellularly, as in this case, cytokines at the renal level. in this research we were able to discover kidney damage in gloremural filtration thanks to the cytoplasmic translocation of the WT1 protein analyzed through histology, molecular tests from the RNA and DNA of the pathogen, how important it is for a good diagnosis.
  • 11. citoquinas pro-inflamatorias en el daño renal se acompaña de GEN WT1 ¿Con que citoquinas se trabajó? Parte renal ¿Que técnicas se utilizaron? la histología, inmunofluorescencia indirecta, inmunohistoquimica, ensayos de transferencia Western, ensayo de reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa y Elisa. Los diferentes procesos inflamatorios llevan a un deficit de la expresión de la nefrina, proteína importante junto con los podocitos a mantener diafragma de filtración glomerural El TNFα e IL1β, estas citoquinas inducidas a explantes renales, fueron las causantes sobre la modulacion de la expresión de WT1 y su translocacion al citoplasma. El genWT1 juega un papel en la embriogénesis, importante en el desarrollo gonadal y renal; en adultos su expresión se da en células viscerales especializadas en el riñón (podocitos) y sirve para la expresion de la nefrina.