Este documento describe un experimento para separar y demostrar la acción de la enzima láctica y la coenzima obtenidas de músculo de pollo. Se explica que la enzima fue extraída triturando el músculo, mientras que la coenzima se obtuvo calentando y triturando el músculo. Finalmente, se muestran los resultados del experimento donde se demuestra la acción de la enzima láctica al cambiar el color del azul de metileno.

1. ABSTRACT
The enzymes involved in oxidative
processes important in the
metabolism of our body, this is very
important to know how these work in
the same, in order to understand
this we must understand the ways in
which these come into operation
and how our body behaves as they
do, which is why both enzymes
known as co enzymes is of vital
importance and was visible
evidence in the development of
practice, through the submission of
a piece of chicken muscle to
demonstrate different reactions
functionality and how relationship
enzymes and co enzymes and how
these can be inhibited.
Introducción
Esta práctica es de gran importancia
ya que son bases esenciales para
nuestra formación como estudiantes
de medicina en este laboratorio
vamos a realizar procedimientos
interesantes para determinar
reconocimiento de enzima y
coenzimas hay que tener en cuenta
que la coenzima son pequeñas
moléculas orgánicas no proteicas
que transportan grupos químicos
entre enzimas y las enzimas son
moléculas proteicas que cumplen
una función de catalizar reacciones
químicas, consta como a partir de
un poco de musculo depollo se
puede obtener una coenzima y
enzima de cómo se separan y como
lograr que nuestra reacción tome el
color requerido se debe a la acción
de la enzima y coenzima asociadas.
Palabras claves
Enzima, coenzima, actividad
enzimática, oxidoreductasa,
citocromo oxidasa y deshidrogenasa
láctica.
Generalidades
Las enzimas que intervienen en
procesos de oxidación se conocen
como oxidasas y se puede dividir en
cinco grupos:
OXIDASAS: Catalizan la remoción
de hidrogeno de un sustrato y usan
solamente al oxigeno como aceptor
de hidrogeno. Forman agua como
un producto de la reacción.
DESHIDROGENASAS AEROBIAS:
Catalizan la remoción de hidrogeno
de un sustrato pero, a diferencia de
las oxidasas, pueden usar oxigeno u
otras sustancias artificiales como
aceptores.
DESHIDROGENASAS
ANAEROBIAS: Catalizan la

2. remoción del hidrogeno de un
substrato, pero que no son capaces
de usar oxigeno como aceptor de
hidrogeno. Realizan dos funciones
principales:
a. Transferencia de hidrogeno de un
sustrato a otro en una reacción de
óxido reducción acoplada que no
implica una cadena respiratoria.
b. Enzima inicial de una cadena
respiratoria de transporte de
electrones desde el substrato al
oxígeno.
HIDROPEROXIDASAS: Enzimas
que utilizan el peróxido de
hidrogeno como sustrato.
OXIGENASAS: Enzimas que
catalizan la transferencia directa e
incorporación del oxígeno a una
molécula de sustrato.
CITOCROMO OXIDASA: Enzima
de la cadena respiratoria que se
encuentra en todos los tejidos
principalmente en el miocardio. Esta
enzima contiene hierro, que pasa
alternativamente de una forma
reducida a una oxidada. La función
biológica de la citocromo oxidasa es
la catálisis de oxidación por O2 del
citocromo C. Es inhibida por el
cianuro que se acopla a la forma
oxidada del hierro, bloqueando así a
la enzima. Su actividad e inhibición
se puede demostrarse mediante la
oxidación secundaria de sustancias
tales como la p-fenilendiamina que
se vuelve roja o púrpura con la
oxidación.
Citocromo ------------------ Citocromo
------------------ p-fenilediamina
DESHIDROGENASA LÁCTICA:
Distribuida en todo el organismo,
pero se encuentra principalmente en
músculo, hígado, riñón y corazón.
Su función es catalizar la oxidación
reversible del lactato a piruvato,
quitando o agragando dos
hidrógenos. Para esto necesita NAD
y pasa a una forma oxidada
NADH+H+, este se re oxida con
flavoproteínas termolábiles que
reducen el azul de metileno a leuco
MATERIALES
 Equipo de disección
 Musculo de pollo
 Arena
 Hielo
 Cloruro de sodio
 Norita
 Azul de Metileno

3. PROCEDIMIENTO
Preparación de la Coenzima:
1. Tome aproximadamente 1
gramo de músculo de una de
las piernas del conejo
2. Pongalo en 8 mL de agua
caliente (esto para inactivar
las enzimas del músculo, que
pueden destruir la coenzima
después de la muerte del
animal).
3. Caliente en baño de maría
hirviendo por 4 ó 5 minutos;
4. Luego se enfrie y se pasa
todo el contenido del tubo a
un mortero con1 gramo de
arena y triture hasta formar
una pasta fina.
5. Centrifugue la mezcla y
guarde el sobrenadante que
contiene la coenzima en un
baño de hielo hasta ser
usado.
Preparación de la enzima:
1. Tome aproximadamente 1
gramo de músculo de la otra
pierna y se colóco en un
mortero.
2. Añada 20 mL de NaCl 0.9% y
1 a 2 gramos de arena.
Triture hasta obtener una
pasta fina.
3. Centrifugue la mezcla y tome
el sobrenadante, que
contiene la enzima láctica.
Para remover cualquier resto
de la coenzima de la
preparación enzimática
añada ½ gramo de NORITA
(carbón activado).
4. Mezcle por inversión. Deje
reposar la mezcla con
agitaciones ocasionales por
media hora. Luego
centrifugue y guarde el
sobrenadante que será la
solución de enzima pura
también en hielo hasta ser
usada.

4. ANALISIS DE RESULTADOS
Para realizar este laboratorio fue
necesario una cantidad de enzimas
las cuales cumplen distintas
funcione en este caso realizamos la
practica con el musculo de pollo, el
cual no nos dio un valor exacto ya
que requería de mas tiempo,
independientemente, analizamos
que los extractos enzimáticos y
coenzima ticos mostrados en la
tabla los cuales encontramos en
tejidos animales, estas enzimas
deterioran rápidamente los tejidos
después de la muerte.
Podemos analizar que en el tubo 2
presenta una decoloración más
severa, debido a que los
componentes en el tubo se
disponen de diferentes factores que
hacen posible el resultado, teniendo
en cuenta que la deshidrogenasa
láctica la cual actúa en ambientes
faltos de oxígeno a la cual se le
otorga 2 ml de aceite mineral.
Lo único faltante en esta práctica
fue el tiempo, ya que necesitamos
de el para saber cuál de los tubos
cambio de color para poder acertar
más en nuestro análisis.
CONCLUSIONES
Se logró establecer
experimentalmente que los cambios
de temperatura son efectores
directos que alteran o inactivan las
enzimas del músculo que destruyen
en la coenzima después de la
muerte.Por medio de la
desnaturalización se logra
interaccionar biológica y
químicamente la actividad
enzimática de un tejido animal.
Las enzimas oxidativas representan
un papel químico y biológico
primordial dentro del metabolismo
aeróbico, sufren una variación
característica en su actividad.
Las enzimas son una bese
fisiológica importante en el cuerpo
humano, dado que las rutas
metabólicas que ellos median
permiten el funcionamiento óptimo
de diferentes componentes
estructurales del cuerpo humano.
Las enzimas se establecen como
órgano-específicas.
La coenzima NADH al momento de
interactuar durante la reacción con
la enzima se reduce generando
NADH, el cual es objeto de
oxidación por parte de las
flavoproteínas termolábiles que
reducen al mismo tiempo el azul de
metileno.
Se logró establecer que para
separar tanto coenzima como
enzima son necesarios los procesos
de centrifugado como maceración.