Este documento describe la actividad enzimática y cómo se ve afectada por factores como la temperatura y el pH. Explica que las enzimas son proteínas que catalizan reacciones químicas y que su actividad puede ser alterada por la temperatura y el pH. A continuación, detalla tres experimentos para evidenciar la presencia de catalasa en tejidos, comprobar la acción de la amilasa e investigar el efecto de la temperatura en la actividad enzimática.

1. ACTIVIDAD ENZIMATICA
I. INTRODUCCIÓN.
Las enzimas son proteínas que catalizan reacciones químicas necesarias para el
metabolismo celular, es decir, aceleran la velocidad de las reacciones al disminuir la
energía de activación.
Como catalizadores, son específicas y solo influenciaran en sustratos específicos, lo
cual se debe a su estructura general; además de poseer otras propiedades como
eficacia de la catálisis, regulación y reversibilidad
Su actividad puede ser alterada por diversos factores como:
* Temperatura:lacual incrementalaactividad enzimática,hasta ser desnaturalizada.
* PH: la enzima aumenta su actividad mientras esté más cerca al pH 6.
II. OBJETIVOS.
- Evidenciar la presencia de la enzima catalasa en tejidos.
- Comprobar la acción hidrolítica de la amilasa.
- Comprobar la acción de la temperatura sobre la actividad de las enzimas.
III. MATERIALES.
MATERIALES
Laboratorio:
- Gradillas
- Pipetas
- Cocinillaomechero
- Soluciónde lugol
- Soluciónde almidón
- Beaker
Estudiante:
- Tubosde ensayo
- Aguaoxigenada
- Goteros
- pinzas
- papa e hígado
- vasodescartable pequeño
- plumónmarcador

2. IV. PROCEDIMIENTO.
1.- Reconocimientode la catalasa
La catalasa es una enzima que se encuentra en las células de los tejidos animales y vegetales.
La funciónde esta enzima en los tejidos es necesaria porque durante el metabolismo celular, se
formauna moléculatóxicaque esel peróxidode hidrógeno, H2O2 (agua oxigenada). Esta enzima,
lo descompone en agua y oxígeno, por lo que se soluciona el problema.
La reacción de la catalasa sobre el H2O2, es la siguiente:
Se procederá de la siguiente manera:
1. Colocar en un tubo de ensayo unos trocitos de hígado y en otro papa.
2. Añadir 5 mililitros de agua oxigenada.
3. Observar el burbujeo debido a la liberación de oxígeno.
Tubo n°1 Tubo n°2
En esta muestra de
célula animal,
utilizamos hígado de
pollo,el cual al añadirle
agua oxigenada
produce abundante
burbujeo debido a la
descomposición del
agua oxigenada por
acción de la catalasa.
En este tubo de
ensayo, utilizamos
trocitos de papa, y
al añadirle agua
oxigenada también
se puede evidenciar
burbujeo, pero no
tan abundante
como en la célula
animal, pero este
efecto ocurre
igualmente debido a la descomposición del
agua oxigenada.

3. 2 .- Desnaturalizacion de la catalasa
Mediante estaexperiencia, se va a comprobar una propiedad fundamental de proteínas, que es
la desnaturalización. La catalasa químicamente es una proteína, por lo que puede sufrir un
procesode desnaturalización al someterla a altas temperaturas. Al perder la estructura terciaria,
perderá también la función y como consecuencia su función catalítica, por lo que no podrá
descomponer el agua oxigenada y no se observará ningún tipo de reacción.
1. Colocaren untubo de ensayoo beakerpequeñovariostrocitos de hígado y en otro papa.
2. Añadir agua para hervir la muestra. Hervir durante unos minutos.
3. Después de este tiempo, retirar el agua sobrante.
4. Añadir el agua oxigenada.
5. Observar los resultados
Tubo n°1 Tubo n°2
Tras someter a altas
temperaturas la
muestra de hígado,
agregamos agua
oxigenada y
observamos que no
hay presencia de
burbujeoyesto ocurre
debidoaque la enzima
catalasa ha sido
desnaturalizada por
efecto de la temperatura y ya no es capaz de
degradar el agua oxigenada.
En la muestra de
células vegetales, en
este caso de papa,
evidenciamoslomismo
al experimento con el
hígado, ya no hay
presenciade catalasa y
no ocurre la
descomposición de
agua oxigenada,yaque
la enzima fue
desnaturalizada.

4. 3.- Hidrólisisdel almidón
La amilasaesunade lasenzimasencargadasde ladigestióndel almidón,concretamente hidroliza
enlaces 1-4 entre moléculas de glucosa. Es una enzima que se encuentra actuando a lo largo del
tracto digestivo de los mamíferos, y producida por las glándulas salivales y el páncreas.
1. Preparar 2 tubos de ensayo con los siguientes reactivos:
2. Agitar lostubosy esperar5 min.
3. Añadir1 mL de soluciónde almidónacada tubo.
4. Agitar lostubosy dejarlosreposar10 minpara que transcurra la reacciónenzimática.De
preferenciacolocarlosauna temperaturade 37°C.
5. Realizarlapruebadel Lugol a cada tubo.
6.- Observary anotarsus resultados.
TUBO 1 TUBO 2
En estamuestrade amilasayagua, agregamos
almidónyesperamos10 minpara que la
amilasahaga efectoydegrade el almidónen
maltosa.
Despuésdel tiempoestablecido,agregamos
lugol para comprobarque ya no haypresencia
de almidón omuy escaza.
En estamuestra,se evidenciaque nohubo
reacción,laamilasano degradael almidón
debidoal medioacidoenel que se encontraba
por la presenciade HCl,yse torna color azul
oscuro porel contacto entre almidónylugol.
TUBO 1 TUBO 2
Amilasa (escupir un poco de
saliva)
2 gotas de H2O
Amilasa (escupir un poco de
saliva)
2 gotas de HCL 1N

5. V. CONCLUSIONES.
 La temperatura es un factor determinante en las reacciones enzimáticas
porque acelera o retarda la acción de las encimas, lo que se evidencia al
producirse el burbujeo.
 La catalasa y la amilasa al igual que las demás enzimas, para que trabajen
adecuadamente deben encontrase en un ph neutro y a temperatura
ambiente.
VI. CUESTIONARIO
1.- ¿Qué funcióncumple el agua oxigenadaal agregarlo enuna herida? ¿Cuál es el fundamento
de su acción?
El agua oxigenadaoperóxidode hidrogenoenconcentraciones menores como en solución al 3%,
cumple lafunciónde desinfectante yantiséptico,manteniendola herida limpia de desechos, mas
no, eliminando a las bacterias que se encuentran en ella. Su acción desinfectante se debe a que
posee un pH acido, el cual debe utilizarse en concentraciones menores para no dañar los tejidos
de la piel.
2.- ¿Qué efecto tiene el HCl sobre la acción de la amilasa?
La amilasaal encontrarse enunmedioacidocomolo esenHCl, esdesnaturalizada,porlotantono
puede cumplir su función, y como hemos observado en el experimento anterior, no es capaz de
degradar el almidón.
3.- ¿Qué se entiende por desnaturalización de proteínas?
El procesobioquímico de desnaturalización consiste en el cambio estructural de la proteína o de
ácidos nucleicos, el cual altera su función ya que modifica su estructura terciaria la cual está
relacionada directamente con su función específica.
Este proceso se debe a diversos factores, entre ello, el cambio de temperatura o la acidez del
medio; y puede ser reversible o irreversible dependiendo del grado de cambios que se haya
sufrido en la desnaturalización.