29. MICROSATÉLITES (VNTR)
CA CA CA CA CA CA CA CA
CA CA CA CA CA CA CA CA
CA CA CA CA CA CA CA CA
CA CA CA CA CA CA CA CA
CA CA CA CA CA CA CA CA
CA CA CA CA CA CA CA CA
CA CA CA CA CA
CA CA CA CA CA
CA CA CA CA CA
CA CA CA CA CA
CA CA CA CA CA
CA CA CA CA CA
Laboratorio Pediatría IBGM/CSIC
38. Composición de los cromosomas en
metafase
• Patrón de bandas • Características
• ADN rico en AT (55-60%)
• Bandas G/Q • Replicación tardía en fase S
• Contiene pocos genes (la mayor
parte específicos de tejido)
• Abundantes miembros L1
• Bandas R • ADN rico en GC (50-60%)
• Replicación precoz en fase S
• Contiene la mayoría de los
genes
• Rico en secuencias Alu
• Abundantes islas CpG
48. Cuantificación de cromosomas mediante FISH
rápido prenatal en interfase
•Las trisomías del 13, 18, 21 y la monosomía del X son las
aneuploidías más frecuentes relacionadas con la edad materna
y las anomalías fetales
•El cariotipado prenatal precisa de 8 a 14 días para llevarse a
cabo
•El FISH prenatal un screening rápido de aneuploidías en
células de líquido amniótico no cultivadas en 2-3 días
49. Indicaciones clínicas diagnóstico rápido
prenatal mediante FISH
•Sospecha de anomalía cromosómica y/o embarazo avanzado
(20 semanas)
•Estudio ecográfico sugerente de aneuploidía
•Edad materna avanzada
•Indicación bioquímica de aneuploidía fetal
57. Transtornos monogénicos para los que existe detección selectiva
familiar y diagnóstico prenatal mediante estudio del ADN
•Neurofibromatosis Ligamto./mutación directa
•Distrofia miotónica Mutación directa
•A. Falciforme Mutación directa
•X frágil Mutación directa
•Hemofilia A Ligamto./mutación directa
•E. De Huntington Mutación directa
•D. M. Duchenne Ligamto./mutación directa
•Cáncer de mama familiar Rastreo/ ligamiento
•Hemocromatosis Mutación directa
•Fibrosis quística Ligamto./mutación directa
58. INDICACIONES PARA EL DIAGNÓSTICO PRENATAL MEDIANTE
AMNIOCENTESIS
•EDAD MATERNA>35 AÑOS
•UN HIJO ANTERIOR CON ANOMALÍA CROMOSÓMICA
•Hª DE ANOMALÍA CROMOSÓMICA EN UNO DE LOS PADRES
•Hª FAMILIAR DE DEFECTO GENÉTICO DIAGNOSTICABLE MEDIANTE
ANÁLISIS BIOQUÍMICO O DEL DNA
•RIESGO DE D.T.N.
59. ERRORES CONGÉNITOS DEL METABOLISMO DIAGNOSTICABLES
MEDIANTE AMNIOCENTESIS Y/O C.V.S
Aminoácidos
•Orina de jarabe de arce
•Acidemia metilmalónica
Hidratos de Carbono
•Glucogenosis tipo 2
•Galactosemia
Ezs. lisosómicas
•Gangliosidosis
•Mucopolisacaridosis
•Enf. de Tay-Sachs
Met. De las purinas
•Lesh Nyham
Met. Peroxisómico
•Enf. de Zellweger
60. Diagnóstico genético preimplantacional
• Uso de técnicas moleculares o citogenéticas durante la
fertilización in vitro (FIV) con el fin de seleccionar
embriones libres de una determinada característica
genética antes de ser transferidos al útero.
• Esta tecnología se desarrolló con el objeto de ofrecer
una opción a las parejas con un riesgo significativo de
una enfermedad genética severa, pero que se oponen al
aborto.
• El diagnóstico genético preimplantacioal se realiza a
partir de una sola célula de una blastómera de 6-10
células tras la FIV.
66. Diagnóstico genético preimplantacional
Margen de tiempo: 3 días post-inseminación
Las células se analizan por FISH para las anomalías
cromosómicas o PCR para análisis mutacional.
Los embriones seleccionados pueden implantarse al final
del día.
67. Diagnóstico genético preimplantacional
• Ventajas:
– Diagnóstico muy precoz
– Sólo se transfieren embriones no afectos (o
portadores)
• Desventajas:
– El coste es muy elevado.
– Baja tasa de éxito en la implantación
– Se descartan embriones afectados o no
utilizados. Lo que puede plantear dilemas éticos.
68.
69. aa Aa AA ♀
Bajo Alto
Bajo Alto
aabb aaBb aaBB AaBB AABB
Aabb AaBb AABb
AAbb
Bajo Alto
♂
Bajo Alto
Bajo Alto
70. Riesgo de recurrencia (%) en la estenosis pilórica
Familiares Probandos masculinos Probandos femeninos
Londres Belfast Londres Belfast
Hermanos 3,8 5,6 9,2 12,5
Hermanas 2,7 3,0 3,8 3,8
71. Riesgo de recurrencia en las enfermedades poligénicas
1. Mayor si hay más de 1 afecto en la familia.
2. Mayor si el probando presenta una forma severa.
3. Mayor si el probando es del sexo menos frecuentemente afectado.
4. Disminución rápida del riesgo en familiares más lejanos.
5. El riesgo está relacionado con la prevalencia en la población
Algunas enfermedades se comportan Aa
como monogénicas y multifactoriales
al mismo tiempo aa
AA
72. Causas genéticas y causas medioambientales en la enfermedad
1. Estudios en gemelos:
gemelos MZ vs. DZ ----- concordancia vs. discordancia
Del mismo sexo
Para rasgos cuantitativos -------> coeficiente de correlación
interclases
para un rasgo totalmente determinado por los genes:
genes
CCI MZ=1,0
CCI DZ=0,5
para un rasgo totalmente determinado por el ambiente:
ambiente
CCI MZ=CCI DZ
Heredabilidad h=2(CMZ-CDZ)
h≈1,0 cuando CMZ ≈ 1,0 y CDZ ≈0,5
74. Causas genéticas y causas medioambientales en la enfermedad
2. Estudios de adopción:
tasas de enfermedad en hijos de afectados vs. hijos de no afectados
Posibles sesgos:
- Factores ambientales prenatales
- Factores ambientales previos a la adopción
Notas del editor
ICSI: necesaria en casos de factor masculino asociado (p.ejemplo en portadores de translocaciones) y obligada siempre que el DGP se aborde por PCR. Algunos centros recurren siempre a ICSI en ciclos de DGP para asegurar fecundación, depende del centro. Revisión de datos del Consortium: .......... 81% de los embriones presentan 6-8 células en dia +3 y permiten ser biopsiados.
Obtención de las biopsias requiere de la utilización de micromanipuladores. En primer lugar se inmoviliza el embrión y se procede a realizar una abertura en la ZP. Método mecánico, disolución parcial (enzimática, medio ácido, haz de láser). Pequeño tamaño (aprox. 50 um). A continuación se procede a retirar una célula mediante succión con una pipeta (aprox. 40 um de diámetro). Cuidadosamente para no lisar (estropear la célula). VIP= el diagnóstico se va a basar en la célula retirada.
Obtención de las biopsias requiere de la utilización de micromanipuladores. En primer lugar se inmoviliza el embrión y se procede a realizar una abertura en la ZP. Método mecánico, disolución parcial (enzimática, medio ácido, haz de láser). Pequeño tamaño (aprox. 50 um). A continuación se procede a retirar una célula mediante succión con una pipeta (aprox. 40 um de diámetro). Cuidadosamente para no lisar (estropear la célula). VIP= el diagnóstico se va a basar en la célula retirada.
Obtención de las biopsias requiere de la utilización de micromanipuladores. En primer lugar se inmoviliza el embrión y se procede a realizar una abertura en la ZP. Método mecánico, disolución parcial (enzimática, medio ácido, haz de láser). Pequeño tamaño (aprox. 50 um). A continuación se procede a retirar una célula mediante succión con una pipeta (aprox. 40 um de diámetro). Cuidadosamente para no lisar (estropear la célula). VIP= el diagnóstico se va a basar en la célula retirada.
