PRIMER SEMINARIO INTERNACIONAL DE LA TRUCHA 2015 PUNO - PERÚ

1. Biología Reproductiva y Manejo de la
Reproducción de los Salmónidos
Francisco Estay

2. Género
Oncorhynchus
Oncorhynchus mykiss
(Trucha arco iris)
Oncorhynchus kisuth
(Salmón coho o plateado)
Oncorhynchus nerka
(Salmón rojo)
Oncorhynchus gorbuscha
(Salmón rosado)
Oncorhynchus tshawyscha
(Salmón rey o chinook)
Oncorhynchus masou
(Salmón cereza)
Oncorhynchus keta
(Salmón perro)
Oncorhynchus mykiss
(Trucha arco iris)

3. Trucha arco iris ( Oncorhynchus mykiss )

4. Anatomía del aparato reproductor de la hembra
Vista ventral

5. Anatomía del aparato reproductor de la hembra
Vista lateral

6. Anatomía del aparato reproductor de la hembra
Vista transversal

7. Anatomía del aparato reproductor del macho

8. Determinación del sexo en los salmónidos

9. Cromosomas, forma organizada del ADN

10. Determinación del sexo en los salmónidos

11. Diferenciación del sexo en salmónidos

12. Desarrollo
gonadal primario
pre-pubertad
Testículo
Ovario

13. Fotoperíodo, principal modulador de la reproducción

14. Temperatura del agua actúa en conjunto al fotoperíodo

15. Temperatura del agua modulador secundario

16. Cascada de señales
que determinan la
maduración gonadal

17. Patrones hormonales
durante el ciclo
reproductivo

18. Los niveles plasmáticos de
hormonas reproductivas
constituyen un indicador del ciclo
reproductivo

19. Estay, F. ; Díaz, N. y L. Valladares. (1995) “Ovarian morphological changes and plasma
sex steroid profiles in two cultured salmon (Oncorhynchus kisutch and Salmo salar)
broodstock populations in Chile”.
Proceeding of 5th International Symposium of Reproductive Physiology of Fish.
University of Texas, Austin, Texas.July 2-8 . pp 115.
Estay, F. Ronco, A. M. y Cáceres, L. (1996) “Respuesta ovulatoria y niveles séricos de
GtH II alcanzados en hembras de trucha arco iris Oncorhynchus mykiss), inducidas a
ovular con GnRHa D-Ala6 ”.
Archivos de Medicina Veterinaria, XXVIII, Nº2 :73-79.
Estay, F., Neira , R., Díaz, N., Valladares, L. and Torres, A. (1998) “Gametogenesis and
sex steroid profiles in cultured coho salmon (Oncorhynchus kisutch, Walbaum)”
Journal of Experimental Zoology, 280 : 429-438.
Estay, F., Díaz, A., Pedraza, R. Colihueque, N. (2003) “Oogenesis and plasma levels of
sex steroids in cultured females of brown trout (Salmo trutta Linnaeus, 1758)” in Chile.
Journal of Experimental Zoology, 298 : 60-66.
Estay F. ; Colihueque N.R.; and C. Araneda (2012) “Comparison of oogenesis and sex
steroid profiles between twice and once annually spawning rainbow trout females”.
The Scientific World Journal, Article ID 986590 : 7 pages.

20. Maduración sexual
1) Gametogénesis
3) Conducta
reproductiva
2) Características
sexuales
secundarias

21. Regulación hipofisiaria
de la maduración
ovocitaria
1) Gametogénesis

22. El progreso del ciclo reproductivo implica un
sostenido aumento del Indice Gonado Somático (IGS)

23. Evolución del IGS PSSAD07
Centro Ojos del Caburgua- 2009-2010
0
3
6
9
12
15
18
21
Sep Nov Feb Mar Abr Abr2
IGS

24. El ovocito y su envoltura folicular

25. Crecimiento en volumen del ovocito a expensas de la
acumulación de vitelogenina hepática

26. Inicio de la vitelogénesis
secundaria, con almacenamiento
de vitelo en el ovoplasma

27. Activa vitelogénesis secundaria, con masiva acumulación
de glóbulos vitelinos, ovocitos app. 1 mm de diámetro

28. Vitelogénesis secundaria
avanzada

29. Secuencia de la ovogénesis a través
del ciclo reproductivo gonadal

30. Célula folicular
micropilar

31. Ultraestructura
micrópilo

32. Fertilización en vertebrados superiores

33. www.acuicultura.uct.cl
Salmónidos :
Esquema estructura del
micrópilo y penetración
de los espermatozoides
durante la fertilización
Corion

34. Ovocitos recién obtenidos
ahora denominados ovas

35. Esquema
ovocito recién
obtenido

36. Esquema de la exocitosis de gránulos corticales hacia el
espacio perivitelino durante la reacción cortical

37. Microfotografía exocitosis de gránulos
corticales hacia el espacio perivitelino

38. Fenómenos durante la activación del ovocito
1) Reacción cortical 2) Hidratación espacio perivitelino 3) Formación disco germinal
4) Polimerización del corion 5) Cierre del micróplilo

39. Ococito recien fertilizado,
ya es una ova

40. Espacio perivitelino

41. Se ha iniciado la segmentación ,
se distinguen los blastómeros

42. Ovas embrionadas
avanzadas : estado de
ojos bien pigmentados

43. Anatomía del
testículo

44. Cisto espermático, unidad estructural
básica de la espermatogénesis

45. Espermatogénesis

46. Espermiogénesis

47. Lobulos pletóricos de espermatozoides maduros
listos para ser evacuados y fertilizar

48. Extracción del semen, macho maduro

49. Estructura comparativa espermatozoides de peces

50. Semen trucha, microscopía
óptica 10.000 X, objetivo
inmersión, filtro verde

51. Modificaciones de la
morfología craneal, un
ejemplo de las
características
sexuales secundarias
2) Características
sexuales
secundarias

52. Craneo de
macho de
trucha maduro

53. Modificaciones de la
pigmentación de la
piel un ejemplo de las
características
sexuales secundarias
Adulto prepuber, forma oceánica
Macho maduro, colores nupciales
Hembra madura, colores nupciales
Ejemplos
notables en
salmones

54. Competencia y
agresividad entre
machos un ejemplo de
conducta reproductiva
3) Conducta reproductiva

55. Competencia y
agresividad entre
machos un ejemplo de
conducta reproductiva

56. Migración hacia desovaderos,
otro ejemplo de conducta
reproductiva

57. Cortejo, apareamiento
y desove, la mas
relevante de las
conductas
reproductivas

58. Centro de Reproducción y Mejoramiento Genético “Ojos del
Caburgua”, Huililco Ltda., Pucón, IX Región, Chile

59. Infraestructura orientada a la
producción de ovas del PMG

60. El plantel de
reproducción : Una
maquinaria biológica

61. La reproducción de los salmónidos :
Un proceso de alto costo energético

62. La alimentación de los reproductores es el soporte
fundamental de esta inversión en biomasa “no somática”.
1
2
34

63. Dieta comercial para
reproductores :
Diámetro pellet : 5 a 9 mm
Proteina : 47%
Lipidos: 20%
Humedad : 8%
Vitamina C : 500 mg/kg
Vitamina E 300 mg/kg
Astaxantina 50 mg/kg
Una buena nutrición de los reproductores implica
que la dieta aporte los nutrientes adecuados

64. Por lo tanto el reproductor es un
“depósito a plazo”

65. 1.- Maximizar la cantidad y calidad de ovas producidas a partir
del stock de reproductores disponibles.
2.- Producir ovas durante un amplio rango estacional para
optimizar el uso de la infraestructura.
3.- Producir ovas que garanticen el más alto
rendimiento productivo.
Objetivos fundamentales de un
plantel de reproducción

67. Tasa de fertilización vs. Dias post - ovulación
Sobremaduración : Rol clave

68. Springate and Bromage, 1984
Viabilidad a distintas etapas de desarrollo
vs. días post ovulación

69. Cada población que comienza su estación
reproductiva, debe comenzar a ser monitoreada

70. Palpación semanal de los reproductores, manejo
clave para la obtención de ovas de alta calidad

71. Iván Valdebenito, U. Católica de Temuco

72. Desove sobremaduro
o de mala calidad
Mayor cantidad de ovas con ruptura
de su membrana plasmática
Mayor salinidad en el fluído
ovárico que las acompaña
Salida de sal desde el
interior del ovoplasma

73. Neomachos : recurso imprescindible para la
producción de stocks monosexo todo hembra
Neomacho Hembra normal
Fertilización
Todo Hembra

74. Diagrama mecanismo biológico involucrado en la
obtención de ginogénesis
Ginogénesis
Herramienta para avanzar hacia el manejo de poblaciones
monosexo

75. Obtención y preparación del semen para irradiación UV

76. Irradiación del semen con UV Choque térmico para diploidizar
Incubación

77. Muestreo y fijación de
las ovas embrionadas en
Ac. Acético para envío a
diagnótico de ploidía

78. 1) Disección de los embriones 2) Aplastado tejidos
3) Tinción con nitrato de plata 4) Evaluación microscópica
Diagnóstico de ploidía de los embriones

79. 1) Haploide : 1 nucléolo
1) Diploide : 2 nucléolo
Diagnostico de la condición de ploidía
de los individuos por Nº de nucléolos

80. Protocolo tratamientos de reversión hormonal del sexo en alevines todo hembra
Hunter y Donaldson (1978)
17alfa metil testosterona

81. Alevines en masculinización mediante alimento con hormona masculina

82. Características del testículo del neomacho
- Forma globosa, a veces con estrangulaciones
- Obturación o ausencia del gonoducto
- Aguda asimetría de tamaño entre testículos
- Gonoducto con fluido gonoductal translúcido
- Algunas veces precencia de ovocitos

83. Macho verdadero Neomacho
Gonoducto obturado, lleno
de líquido seroso
Testículo neomacho con precencia ovocitos

84. Dilutor (extender) de Ingram para semen de neomacho

85. Semen femenino, dilutores, procesamiento

86. Inducción de triploidía mediante choque térmico

87. Anestesiado de los reproductores previo al desove

88. Desove manual de las hembras ovuladas

89. Distribución del semen de neomacho durante la fertilización

90. Análisis de algunas variables del semen, como
motilidad y densidad espermática

91. Recolección de las ovas siempre en forma
estrictamente individual

92. Fundamental el registro sistemático de las variables biométricas
Procedimientos durante el desove
Longitud
Peso Registro pit tag

93. Registro del timing o perfil de distribución desoves
Fecha Nº
Desove Hembras
16-02-2007 5
26-02-2007 9
09-03-2007 21
16-03-2007 24
23-03-2007 27
30-03-2007 33
10-04-2007 86
17-04-2007 97
24-04-2007 82
30-04-2007 79
08-05-2007 86
14-05-2007 68
24-05-2007 59
29-05-2007 10
0
20
40
60
80
100
120
16-02-0723-02-0702-03-0709-03-0716-03-0723-03-0730-03-0706-04-0713-04-0720-04-0727-04-0704-05-0711-05-0718-05-0725-05-07
Nºspawningfemales

94. Activador de Billard D532 (Billard 1977a)
NaCl ……………………5.52 gr.
Glicina………………….3.74 gr.
Tris………………………2.42 gr.
Es fundamental contar con el dilutor-activador
(buffer salino) durante el manejo de la fertilización

95. Screening sanitario individual de reproductores :
Batalla permanente en el control de los patógenos

96. Muestreo branquia para análisis ISAv

97. Muestras individuales de tejidos van
a laboratorio microbiológico

98. Resultados de laboratorio autorizado por
Sernapesca llegan en 24 hrs

99. Incubación de las
ovas fertilizadas e
hidratadas

100. Embriones tempranos (estado gástrula) evidenciados mediante acido
acético durante la estimación de tasa de fertilización (100 UTAs)

101. Una vez alcanzado el estado de ojos bien pigmentados :
Shoking, limpieza, picking, cuantificación.

102. Desinfección delas ovas con
ojos con yodósforo (10 min)
previo al despacho

103. Cuantificación final y embalaje

104. Embalaje

105. Traslado de las ovas desde centro de
cultivo a terminal de buses o aeropuerto

106. Registro básico variables biométricas del
stock en reproducción :
- Fecha desove
- Peso Hembra
- Longitud hembra
- Tasa de fertilización (100 UTA)
- Fecha de shocking (200 UTA)
- Fecundidad total
- Fecundidad relativa
- Diámetro de las ovas
- Tasa de sobrevivencia al estado de ojos
- Nº ojos/hembra
- Fecha despacho (280 UTA)

107. Correlación Peso de la hembra vs. Fecundidad total
Salmo salar Otoño 2011
y = 1042,3x + 3845,4
R = 0,56
5.000
9.000
13.000
17.000
21.000
3,00 5,00 7,00 9,00 11,00
Peso de la hembra (Kg.)
NºOvasverdes
Correlación Peso de la hembra vs Fecundidad
Relativa Salmo salar Otoño 2011
y = -74,723x + 2132,5
R = - 0,33
0
500
1.000
1.500
2.000
2.500
3.000
3,00 5,00 7,00 9,00 11,00
Peso de la hembra (kg)
Nºovas/kghembra
El análisis de las bases de datos biométrico-reproductivos, permite
conocer las correlaciones de las variables y simular futuros rendimientos

108. Fecundidad Total
Diámetro ova
(mm)
Fecundidad relativa
Relaciones biométrico-reproductivas
Estay et al (1997) Reproductive performance of cultured female coho salmon in Chile,
The Progresive Fish Culturist 59 : 36-40
Peso (Kg)
4.200
3.800
3.500
850850
950
1.170
5
4
3
7,29
7,11
6.93

109. Modificando el fotoperiodo se puede modelar la longitud
del ciclo reproductivo

110. Ciclo anual fotoperíodo
Hrs. Luz
21 dic
21 jun.
21 dic

111. Protocolo fotoperíodo para el adelantamiento en 6 meses del fotoperíodo
Período post desove Signos maduración Desove
Alfredo Klempau, U de Concepción
Hrs. Luz
21 dic 21 jun. 21 dic

112. Implementación del módulo para manejo del fotoperíodo

113. Raceways cubiertos, expuestos a tratamiento de fotoperíodo

114. Ecografía
Valiosa herramienta para monitorear el avance de la madurez sexual

115. Imagen ecográfica efectua cortes
transversales del cuerpo del pez

116. A medida que la ovogénesis progresa, los
ovarios crecen en sentido craneo - caudal

117. La sección transversal de los ovarios disminuye en sentido craneo - caudal
1 2 3
4 5 6