2. Ácidos nucleicos
◼ Son biomoléculas de muy elevado peso molecular.
En el caso humano, 3,6 x 1012, (equivalente a 5,6 x
109 pares de nucleótidos).
◼ Fueron aisladas por primera vez por F. Miescher
en 1869, a partir de células del pus. Su nombre se
debe a que se identificaron por primera vez en el
núcleo celular y además se observó que eran
ácidos.
3. Descubrimiento de los ácidos nucleicos
◼ Miescher llamó nucleína al precipitado
obtenido al tratar con ácido diluído los núcleos
de los glóbulos blancos.
◼ Posteriormente al encontrar que la sustancia
era muy ácida cambio el nombre a ácido
nucleico.
◼ Poco después Hoppe-Seyler aisló una
sustancia similar de levaduras.
4. Características generales de los
ácidos nucleicos
◼ En las células se encuentran dos variedades de ácidos nucleicos:
el ácido desoxirribonucleico (ADN).
el ácido ribonucleico (ARN)
◼ El ADN constituye el material hereditario de las células, y contiene
las instrucciones para la producción de todas las proteínas que el
organismo necesita.
◼ El ARN está asociado a la transmisión de la información genética
desde el núcleo al citoplasma, donde tiene lugar la síntesis de
proteínas.
ARN mensajero (ARNm),
ARN de transferencia (ARNt)
ARN ribosómico (ARNr),
5. Nucleótidos
◼ Los ácidos nucleicos son polímeros
formados por la unión de subunidades
denominadas nucleótidos.
Ion fosfato Pentosa Base nitrogenada
+ +
6. Nucleótidos
◼ Están formados por:
Una aldopentosa (monosacárido), que
puede ser la ribosa o desoxirribosa.
Una base nitrogenada que puede ser la
adenina (A), guanina (G), citosina (C), timina
(T) o uracilo (U).
Un ácido ortofosfórico, H3PO4..
10. Nucleósidos
◼ Resultan de la unión de una pentosa y una base
nitrogenada mediante un enlace N- Glicosídico entre el
C1’ de la pentosa y el N9 de las bases púricas o el N1 de
las bases pirimidínicas.
Desoxirribosa
+
Citosina
H2O
Desoxicitidina
1’
N-1
11. Nucleótidos
◼ El ácido fosfórico se une mediante un enlace éster al
alcohol del C5’ (o el C3’) de la pentosa para formar
los nucleótidos.
Adenosina-5’-monofosfato
Adenina
1’
N-9
17. Nucleótidos no nucleicos
◼ Son nucleótidos que no forman parte de los
ácidos nucleicos y se encuentran libres en las
células.
◼ Pueden actuar como:
◼ Intermediarios metabólicos: ATP/ADP
◼ Activadores de enzimas: AMPc
◼ Coenzimas: FMN, FAD, NAD+, NADP+ y Coenzima A
18. Adenosina Fosfatos (ATP)
◼ Actúan como intermediarios en las reacciones
metabólicas que liberan o consumen energía.
◼ La energía liberada en las reacciones
metabólicas se puede conservar por la síntesis
acoplada de ATP. El acoplamiento tiene lugar
mediante enzimas.
◼ También pueden actuar en estos procesos
nucleótidos de guanina (GTP/GDP)
19.
20. Función del ATP
◼ El ATP interviene en la transferencia de energía
de los procesos exergónicos a los endergónicos.
21. AMPcíclico
◼ Se forma a partir de
ATP en el interior
celular por la acción de
la adenilato ciclasa.
22. AMPcíclico
◼ Se forma como consecuencia de la unión a receptores
de membrana de determinadas hormonas que no
pueden atravesar la membrana.
◼ Es el AMPc el que activa las enzimas necesarias para
dar respuesta a la señal recibida del exterior de la célula.
24. Formación AMPc
◼ El enzima actúa por la unión a receptores de
membrana de determinadas hormonas.
◼ La formación del AMPc activa enzimas que
actúan en reacciones metabólicas
◼ Se le conoce también como segundo
mensajero (las hormonas son los primeros
mensajeros)
25. Coenzimas
◼ Son moléculas no proteicas que
intervienen en reacciones enzimáticas.
◼ No son especificas de sustrato, cada
clase de coenzima actúa en una clase de
reacción.
26. Coenzimas
◼ Hacen posible la acción de la enzima de 2 formas
diferentes:
▪ Se unen temporalmente a la enzima para facilitar la
unión o acción catalítica sobre el sustrato. Los
siguientes intervienen en reacciones de oxido-reducción.
▪ Nucleótidos de flavina: FMN y FAD
▪ Nucleótidos de piridina: NAD+ y NADP+
▪ Se enlazan con el sustrato para provocar un cambio en
su estructura (activación) que facilite la acción de la
enzima: Coenzima A
27. Coenzimas de oxido-reducción
◼ Flavín nucleótidos: FMN/FMNH2 y FAD/FADH2
Derivan de la vitamina B2 (riboflavina)
FAD + 2H+ + 2e– FADH2
forma oxidada forma reducida
FMN + 2H+ + 2 e– FMNH2
forma oxidada forma reducida
29. NAD+ + 2H+ + 2e– NADH + H+
forma oxidada forma reducida
Coenzimas de oxido-reducción
◼ Piridín dinucleótidos: NAD+ y NADP+.
En un nucleótido la base nitrogenada es la Adenina, y en el
otro es la Nicotinamida (Vitamina P-P) que unida a la Ribosa
forma la PIRIDINA (que da nombre a este grupo de
Coenzimas).
NADP+ + 2H+ + 2e– NADPH + H+
forma oxidada forma reducida
31. Coenzima-A
◼ Es un derivado del ADP.
◼ Enlaza ác. orgánicos mediante
enlaces tio-éster (R-CO-SCoA).
activándolos para intervenir en
reacciones metabólicas.
(Vitamina del grupo B)
(β-aminoetanotiol)
32. POLINUCLEÓTIDOS
◼ Los nucleótidos pueden unirse en largas cadenas
mediante enlaces fosfodiester 5’-3’.
◼ Si la pentosa de los nucleótidos es la ribosa se tratará
de un polirribonucleótido que da lugar a los
diferentes ácidos ribonucleicos (RNA).
◼ Si la pentosa de los nucleótidos es la desoxirribosa se
tratará de un polidesoxirribonucleótido que da lugar
a los diferentes ácidos desoxirribonucleicos (DNA).
35. ADN Y ARN
◼ Diferencias a nivel químico:
▪ El ADN está formado por desoxirribonucleótidos
(desoxirribosa como azúcar) de A, G, C y T.
▪ El ARN está formado por ribonucleótidos (ribosa
como azúcar) de A, G, C y U.
▪ El DNA no presenta uracilo y el RNA carece de
timina.
▪ Generalmente el DNA es más largo, más estable y
de doble cadena de polinucleótidos.
▪ Generalmente el RNA es más corto, más inestable y
de cadena sencilla de polinucleótidos.
36. Funciones del ADN
◼ El ADN contiene la información genética. Dicha
información genética será utilizada por la célula y pasa de
una generación a otra. Para ello son necesarios varios
procesos:
Para que el mensaje genético se transmita invariable el DNA ha
de formar dos copias idénticas, REPLICACIÓN.
El mensaje genético contenido en el ADN es la especificación
para la síntesis de las proteínas que la célula necesita. Para ello
el mensaje genético (núcleo) ha de ser copiado a una molécula
de RNA (RNAm): TRANSCRIPCIÓN.
Siguiendo las instrucciones del RNA se sintetizará la proteína
correspondiente en el citoplasma (RNAt y RNAr): TRADUCCIÓN.
37. Dogma central de la Biología
Molecular
DNA RNA PROTEÍNAS
Replicación
Transcripción Traducción
38. Estructura del DNA
▪ La estructura primaria o
secuencia de nucleótidos.
▪ La estructura secundaria
o doble hélice.
▪ La estructura terciaria o
ADN superenrollado:
torsión de la doble hélice
sobre sí misma.
◼ En el ADN se distinguen tres niveles estructurales:
39. Estructura primaria del ADN
◼ Secuencia de nucleótidos de una
cadena.
◼ Se distingue un esqueleto de
pentosas y fosfatos y una
secuencia de bases nitrogenadas.
◼ El número de hebras diferentes que
se puede formar combinando las
cuatro bases nitrogenadas es muy
elevado.
◼ El porcentaje de G, C, A y T es el
mismo para una misma especie.
42. Estructura del DNA
◼ Watson y Crick dedujeron la estructura del
DNA a partir de los datos obtenidos por otros
investigadores:
Fueron especialmente importantes las imágenes
de difracción de rayos X de Rosalind Franklin y
Maurice Wilkins.
También fueron cruciales los datos de Edwin
Chargaff.
45. Difracción de rayos X
◼ Franklin y Wilkins observaron entre 1950 y 1953 que el
ácido desoxirribonucleico tenía una estructura fibrilar de
20 Å de diámetro, en la que se repetían ciertas
unidades cada 3,4 Å, y que había otra repetición mayor
cada 34 Å.
Rosalyn Franklin (1920-1958)
46. Modelo de la doble hélice
◼ Fue deducido en 1953 por Watson y Crick.
◼ Está constituido por 2 cadenas de polinucleótidos
arrolladas alrededor de un eje imaginario originando
una doble hélice.
◼ El enrollamiento es dextrógiro y plectonémico (las 2
cadenas no pueden separarse sin desenrollarse).
◼ Las cadenas del ADN son complementarias. Las
bases nitrogenadas complementarias están unidas
por puentes de hidrógeno.
◼ Las dos cadenas son antiparalelas.
◼ La longitud de la molécula es, en general, enorme.
50. Modelo de la doble hélice
◼ En la estructura secundaria del ADN, los grupos
hidrófobos de las bases se disponen hacia el interior
estableciendo interacciones hidrófobas que colaboran
junto a los puentes de hidrógeno que se forman entre
las bases de ambas hebras en dar estabilidad a la
macromolécula.
◼ Las pentosas y los fosfato (carga negativa) quedan
en el exterior. Debido a la ionización, los ácidos
nucleicos tienen carácter ácido.
51.
52. Características de la doble hélice
◼ Dos cadenas antiparalelas y complementarias de polinucleótidos
unidas entre sí.
◼ Estabilizadas por puentes de hidrógeno entre bases
nitrogenadas.
◼ Enrolladas en espiral alrededor de un eje imaginario.
◼ Esqueleto azúcar fosfato hacia fuera.
◼ Planos de las bases perpendiculares al eje y paralelos entre sí.
◼ Enrollamiento plectonémico.
◼ Gira en sentido dextrógiro.
◼ 10 pares de nucleótidos por vuelta (3,4 nm)
◼ Diámetro 2 nm
53. Surcos del DNA
◼ Son las zonas donde las
bases nitrogenadas van a
ser accesibles desde el
exterior.
◼ Se van alternando así dos
tipos de surcos: un surco
mayor y un surco menor.
54. Variaciones de la estructura del DNA
◼ La estructura del DNA descrita por Watson y Crick es la
más habitual y corresponde al B-DNA
◼ Existen otras variantes de DNA que tienen la longitud
del paso de rosca o la separación entre bases diferente.
Estas conformaciones son el A-DNA y Z-DNA.
ADN A ADN Z
ADN B
55. A-DNA
◼ Esta forma aparece cuando se
deshidrata la forma B.
◼ Es también una hélice dextrógira, pero
las bases complementarias se
encuentran en planos inclinados.
◼ Es más ancha y corta que la forma B.
◼ Contiene 11 pares de bases por vuelta
(10 en la forma B)
◼ No se ha encontrado en condiciones
fisiológicas.
56. Z-DNA
◼ Hélice levógira con un enrollamiento
irregular que provoca una configuración
en zigzag.
◼ Esta estructura aparece en regiones del
ADN donde se alternan muchas C y G.
◼ Mas larga y estrecha que la forma B.
◼ Contiene 12 pares de bases por vuelta.
◼ Se piensa que la forma Z constituye una
señal para las proteínas reguladoras de la
expresión del mensaje genético.
◼ Esta estructura se asocia a la ausencia
de actividad del ADN.
57. levógira
ADN-A ADN-B ADN-Z
19º
dextrógira
Más
corta
Más
larga
TIPO DE ADN GIRO DE HELICE nm por Vuelta Plano entre bases
nº de nucleotidos
por vuelta
A Dextrógiro 2,8 inclinado 11
B Dextrógiro 3,4 perpendicular 10
Z Levógiro 4,5 zig-zag 12
El surco mayor
es muy poco
profundo
El surco menor
es profundo y
estrecho
Bases menos
inclinadas
9º
Los surcos son
más similares
Surco mayor
estrecho y más
profundo
Surco menor
ancho y
superficial
58. Desnaturalización DNA
◼ La doble hélice de ADN en estado natural es muy
estable, pero al calentar (~100ºC), las dos hebras se
separan: desnaturalización del ADN.
◼ Si se mantiene el ADN desnaturalizado,
posteriormente a 65°C, las dos hebras vuelven a
unirse.
◼ Esta restauración de la doble hélice es lo que se
llama renaturalización y es lo que permite la
hibridación si se parte de hebras de distintos ADN
60. Desnaturalización
◼ La temperatura a la cual permanece desnaturalizado
un 50% del ADN se llama temperatura de fusión (Tm)
y depende de la cantidad de pares G-C que haya en
la cadena.
61. Hibridación del DNA
◼ Si se mezclan moléculas desnaturalizadas de DNA de diferentes
procedencias (moléculas de diferentes individuos o especies), al
enfriar la solución se pueden obtener moléculas híbridas que
tengan cada cadena de distinta procedencia.
◼ Este método se emplea en las investigaciones policiales para
comparar el DNA extraído de sangre, semen o pelo, con el de
una persona sospechosa de un delito.
◼ El porcentaje de hibridación dará una idea de la relación entre
los dos organismos y es una técnica muy útil en la diagnosis de
enfermedades o en medicina forense.
62. Estructura terciaria del DNA en
procariotas
◼ Las moléculas de ADN circular, como el ADN bacteriano o el ADN
de mitocondrias o cloroplastos, presentan una estructura terciaria.
◼ Consiste en que la fibra de 20 Å se halla retorcida sobre sí misma
formando una superhélice asociada a proteínas no histónicas.
◼ Esta disposición se denomina ADN superenrollado.
63. Estructura terciaria del DNA en
eucariotas
◼ En eucariotas durante la interfase el DNA se
condensa en forma de cromatina. que está
formada por ADN y proteinas (histonas y no
histonas).
◼ En la división nuclear, la
cromatina se empaqueta
aún más tomando la
forma de cromosomas.
64. Niveles de empaquetamiento del DNA
Primer nivel de empaquetamiento
6 veces compactado
Segundo nivel de empaquetamiento
40 veces compactado
Tercer nivel de empaquetamiento
>1000 veces compactado
Niveles superiores de empaquetamiento
>10000 veces compactado
EUCARIOTAS
65. Cromatina
◼ La cromatina es la forma en la que se presenta el ADN en
el núcleo celular.
◼ Es la sustancia que forma
los cromosomas.
◼ Consiste en la asociación
de ADN y proteínas que
se encuentran en el
núcleo interfásico de las
células eucariotas y que
constituye el genoma de
dichas células.
66. Cromatina
◼ La unidad estructural de la cromatina es el Nucleosoma
formado por un filamento de DNA arrollado alrededor de
un octámero de histonas.
◼ Las histonas neutralizan la acidez del DNA (son
proteínas básicas con muchos aa de Lys y Arg) y lo
arrollan permitiendo que quepa en el núcleo.
67. Cromatina
◼ Esta estructura se
denomina fibra
nucleosómica o “collar de
perlas” y se corresponde
con la estructura terciaria
del DNA.
68. Nucleosoma
◼ Formado por un filamento de DNA
de doble cadena de 146 pb
enrollado a un octámero de
histonas.
◼ Una molécula de histona H1
neutraliza el DNA espaciador (54
pb) entre dos nucleosomas.
2H2A
2H2B
2H3
2H4
Con número fijo de
nucleótidos (146 pares) en
torno a cada octámero
69. Heterocromatina y eucromatina
◼ Se refieren a los niveles de compactación de la
cromatina en interfase.
◼ La eucromatina es la conformación más laxa,
que permite la expresión genética (90% de toda la
cromatina).
◼ La heterocromatina es la conformación
más compacta que no se puede transcribir.
La heterocromatina constitutiva nunca se expresa.
La facultativa puede pasar a eucromatina y expresarse.
70. Fibra de solenoide
◼ Es la estructura cuaternaria del DNA.
◼ Corresponde al arrollamiento de la
fibra de 10 nm.
◼ Cada vuelta tiene 6 nucleosomas con
6 histonas H1.
71. ◼ La fibra de 300 Å forma bucles llamados dominios estructurales
(20.000 pb-70.000 pb).
◼ Esta estructura está estabilizada por un andamiaje proteico
(proteínas no histonas) o armazón nuclear.
◼ Otras proteínas (no histónicas) tienen funciones relacionadas con
la actividad del ADN (la replicación, la transcripción y su
regulación).
◼ Otras proteínas (no histónicas) son necesarias para formar
estructuras del núcleo (nucléolo, matriz nuclear…). Bucle
Andamio proteico
Dominios en forma de bucle
72. Niveles superiores de empaquetamiento
◼ Se llega a un grado de reducción de longitud del DNA de 7.000
veces.
◼ El cromosoma en metafase representa el máximo nivel de
empaquetamiento del DNA.
◼ La longitud del ADN no siempre guarda relación con la complejidad
del organismo. Muchas especies tienen mucho más ADN que el
necesario para codificar su estructura y fisiología.
73. Ácido Ribonucleico
◼ Está constituido por nucleótidos de ribosa, con
las bases adenina, guanina, citosina y uracilo.
◼ Estos ribonucleótidos se unen entre ellos
mediante enlaces fosfodiéster en sentido 5 '- 3',
igual que en el ADN.
◼ El ARN es casi siempre monocatenario, excepto
en los reovirus que es bicatenario.
74. Dogma central de la Biología
Molecular
DNA RNA PROTEÍNAS
Replicación
Transcripción Traducción
75. Ácido Ribonucleico
◼ La transcripción del DNA da lugar a los
tres tipos de ARN existentes:
RNA mensajero: copia complementaria de
un fragmento de DNA con sentido biológico.
RNA ribosómico: forman los ribosomas
junto con proteínas.
RNA transferente: transporta los aa hasta
las moléculas de RNAm.
76. Transcripción
◼ Consiste en la síntesis de
ARN a partir de ADN.
◼ El ADN se encuentra en el
nucleo celular y la síntesis de
proteínas tiene lugar en el
citoplasma.
◼ Es por esto que la información
contenida en el ADN debe
transcribirse a una molécula
de ARN mensajero (ARNm).
79. Transcripción
◼ Sentido de la transcripción
◼ DNA
◼ RNA codificado
◼ Iniciación de la transcripción
◼ Distintas etapas en la
elongación del RNAm
◼ Región codificante del gen
◼ Terminación de la transcripción
◼ RNA polimerasa
80. Transcripción
1. Iniciación de la transcripción
2. Distintas etapas en la
elongación del RNAm
3. Terminación de la transcripción
4. DNA
5. RNA codificado
6. RNA polimerasa
7. Región codificante del gen
8. Sentido de la transcripción
81. RNA transferente
◼ En realidad la molécula está
replegada, adoptando una
estructura terciaria en forma
de L.
82. RNA transferente
◼ Se encuentran en el citoplasma. Hay unos 50
tipos de RNAt que tienen en común una
estructura denominada en “hoja de trebol”:
Es una molécula de cadena sencilla con 4 regiones
de bases complementarias que se aparean (bucles).
En el brazo aceptor, se une el aa transportado.
El anticodón, es el triplete de bases nitrogenadas
que aparece en el bucle opuesto al brazo aceptor e
indica el aa que puede unirse al RNAt. Cada RNAt
tienen un anticodón distinto.
84. RNA ribosómico
◼ Forma los ribosomas (junto
a proteínas).
◼ Responsable de la acción
catalítica de los ribosomas.
◼ El peso de los ARNr y de los
ribosomas se suele
expresar según el
coeficiente de
sedimentación (S) de
Svedberg.
◼ Las células procariotas
presentan ribosomas 70S, y
las células eucariotas 80S.
86. Otros ARN
◼ ARN nucleolar: precursor imprescindible
para la síntesis de los RNAr.
◼ ARN nuclear pequeño: implicado en la
maduración del ARN mensajero.
◼ Material genético de virus. Generalmente
de cadena sencilla, a excepción de los
reovirus.
87. ARN nucleolar
◼ Constituye, en parte, el nucléolo.
◼ Se origina a partir de regiones de ADN, una de los
cuales es la región organizadora nucleolar (NOR).
◼ A partir de este ADN, se sintetiza un ARN de 45 S que
se asocia a proteínas.
◼ Esta ribonucleoproteína se escinde en 3 ARNs.
◼ A estas moléculas se suma un ARN 5 S, (también
asociado a proteínas), sintetizado en el nucleoplasma,.
◼ Todos ellos se forman las dos subunidades ribosómicas.
88. ARN nucleolar
Se origina a partir de una determina región de ADN, denominada región organizadora
nucleolar (NOR).
ADN
Núcleo
Nucléolo
Proteínas
ribosómicas
Nucleoplasma
Citosol
ARN nucleolar 45 S
ARNm
ARN 28 S
ARN 5,8 S
ARN 5 S
Subunidad
ribosómica
de 60 S
Subunidad
ribosómica
de 40 S
Ribosoma de 80 S
1
1
Constituye en parte el nucleolo.
89. ARN nucleolar
A partir de este ADN, se forma en el nucleolo un ARN 45 S que se asocia a proteínas
procedentes del citoplasma, muchas de las cuales conformarán los ribosomas.
ADN
Núcleo
Nucléolo
Proteínas
ribosómicas
Nucleoplasma
Citosol
ARN nucleolar 45 S
ARNm
ARN 28 S
ARN 5,8 S
ARN 5 S
Subunidad
ribosómica
de 60 S
Subunidad
ribosómica
de 40 S
Ribosoma de 80 S
2
2
90. ARN nucleolar
Posteriormente esta ribonucleoproteína se escinde en tres ARNs.
ADN
Núcleo
Nucléolo
Proteínas
ribosómicas
Nucleoplasma
Citosol
ARN nucleolar 45 S
ARNm
ARN 28 S
ARN 5,8 S
ARN 5 S
Subunidad
ribosómica
de 60 S
Subunidad
ribosómica
de 40 S
Ribosoma de 80 S
3
3
91. ARN nucleolar
A continuación, se añade un ARN 5S, asociado también a proteínas y sintetizado fuera
del nucleolo a partir de otro segmento de ADN.
ADN
Núcleo
Nucléolo
Proteínas
ribosómicas
Nucleoplasma
Citosol
ARN nucleolar 45 S
ARNm
ARN 28 S
ARN 5,8 S
ARN 5 S
Subunidad
ribosómica
de 60 S
Subunidad
ribosómica
de 40 S
Ribosoma de 80 S
4
4
92. ARN nucleolar
A partir de estas ribonucleoproteínas se forman las dos subunidades del ribosoma que
se ensamblan en el citoplasma tras atravesar la envoltura nuclear.
ADN
Núcleo
Nucléolo
Proteínas
ribosómicas
Nucleoplasma
Citosol
ARN nucleolar 45 S
ARNm
ARN 28 S
ARN 5,8 S
ARN 5 S
Subunidad
ribosómica
de 60 S
Subunidad
ribosómica
de 40 S
Ribosoma de 80 S
5
5
93. ARN pequeño nuclear (ARNpn)
◼ También se le denomina ARN-U por su elevado
contenido en uridina.
◼ El ARNpn se une a ciertas proteínas del núcleo
formando las ribonucleoproteínas nucleares (RNPpn),
que actúan en el proceso de eliminación de intrones
(maduración del ARNm).
94. Funciones del RNA
◼ Transmisión de la información genética desde el ADN a los
ribosomas. La ARN-polimerasa sintetiza un ARN mensajero
que llegará hasta los ribosomas.
◼ Conversión del ARNm en una secuencia de aminoácidos. La
traducción se realiza en los ribosomas. En él intervienen,
además del ARNm, el ARNr y el ARNt que transportan los
aminoácidos.
◼ Almacenamiento de la información genética. Algunos virus
contienen su información biológica en forma de ARN. Por
ejemplo, el virus de la gripe, el de la polio, el de la
inmunodeficiencia humana, los retrovirus (que poseen ARN
bicatenario), etc