El documento describe un método para determinar la capacidad antioxidante de muestras mediante la medición de su capacidad para secuestrar radicales libres DPPH. El procedimiento implica incubar muestras con reactivos Folin-Ciocalteu y carbonato de sodio, luego medir la absorción a 515 nm, y realizar cálculos estadísticos para cuantificar la capacidad antioxidante.

1. UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y
DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
ANÁLISIS DE MEDICAMENTOS
TEMA: DETERMINACIÓN DE LA CAPACIDAD ANTIOXIDANTE
SECUESTRADORA DE RADICALES LIBRES FRENTE AL DPPH.
ESTUDIANTE:
EVELYN MARIANA APOLO PÉREZ
DOCENTE:
BQF. CARLOS ALBERTO GARCÍA GONZÁLEZ, MGS.
CURSO:
NOVENO SEMESTRE “A”

2. EL ORO – MACHALA – ECUADOR
2018
MÉTODO DPPH
El método del radical libre 2,2-difenil-1-picrilhidracilo (DPPH) se utiliza para
determinar la capacidad antioxidante de alimentos y compuestos sintéticos.
PROCEDIMIENTO
1. Pesar 7,5 g de Carbonato
2. Llevar a un balón de 100 mL, aforar con agua destilada y proceder a
homogenizar.

3. 3. Luego se procede a preparar las muestras, las cuales fueron anticipadamente
incubadas y determinada la presencia de fenoles mediante el análisis
cualitativo.
4. Homogenizar con ayuda del equipo vortex y ordenamos las muestras.
5. Rotular los tubos Eppendorfs en los que se va a realizar la incubación, cada
muestra se realizará por triplicado.

4. 6. Se procede a colocar la cantidad indicada de reactivos, muestra y agua
destilada en los tubos de ensayo, utilizando pipetas automáticas de 1000 uL,
200 uL, 50 uL, sin tocar la pipeta con los bordes del tubo.
1000uL Na2 CO3
200uL Folin – Ciocalteu
50uL Extracto
50uL Agua Destilada
El procedimiento se lo realizará de la siguiente manera:
 Adicionamos 50 uL de agua destilada a los tubos Eppendorfs previamente
rotulados.
 Luego añadir 50 uL del extracto a los tubos Eppendorfs por triplicado.
 Después colocar 200 uL de la dilución de Folin – Ciocalteu.
 Agitar y esperar 4-5min y luego añadir 1000 uL de la dilución de Carbonato
de Sodio.
 A todo el procedimiento se le realizó un control de calidad para supervisar
que todo sea cumplido de manera correcta.

5. 7. Cuando ya terminemos de llenar los tubos los homogenizamos.
8. Llevamos los tubos Eppendorfs a un lugar oscuro, para incubarlos durante
dos horas.

6. 9. Luego de la incubación se procede a dar lectura de cada muestra en el
espectrofotómetro a una longitud de onda de 515nm.
10.Ya obtenidos los resultados de las lecturas, se realizan los cálculos
estadísticos.