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LABORATORIO
MICROBIOLÓGICO
Chlamydia trachomatis Chlamidophila pneumoniaeChlamidophila psittaci
Se divide en base a composición antigénica, inclusiones intracelulares, sensibilidad a la sulfonamida y tipo de efermedad
que ocasiona.
Intracelulares estrictos, Gram -
Clínica:
 Ceguera
 Linfogranuloma
Clínica:
 Faringitis
 Otitis
Clínica:
 Necrosis
pulmonar
 Neumonia
CULTIVO
CELULAR
Medio de cultivo Mc
Coy y medio Martin
Lewis
FLUORESCENCI
A DIRECTA CON
ANTICUERPOS
(FDA) Ac contra C.
trachomatis
ENZIMOIMUNO
ENSAYOS (EIA)
detecta LPS de
clamidias
HIBRIDACION
DE ACIDOS
NUCLEICOS
sonda ADN marcada
con éter que permite la
detección directa de
clamidia
AMPLIFICACIO
N DE ACIDOS
NUCLEICOS
altamente sensible
y especifico
PRUEBAS
SEROLOGICAS
aunque no son tan
especificos
Diagnostico
de
laboratorio
Intracelulares estrictos, Gram -
Rickettsia rickettsii Rickettsia typhiRickettsia conirii
Clínica:
 Fiebre maculosa de montañas
Clínica:
 Fiebre exantema
 Mialgias
Clínica:
 Fiebre botonosa
 Escaras con necrosis dermica
Sospechas clínicas
epidemiológicas
Detección de ARN
rickettsial en muestras
de sangre por PCR
Tinción de
inmunoflorescencia o
enzimoinmunoensayo
para detección de
anticuerpos
Método de
inmunoinmunofloresce
ncia indirecta con el
uso de peroxidasa
Diagnostico de laboratorio
Intracelulares estrictos, Gram -
Mycoplsma pneumoniae Mycoplasma genitalis
Clínica:
 Traqueobronquitis
 Neumonia atipica
Clínica:
 Fiebre pos parto
diagnostico se obtiene muestra
de secreción vaginal, uretra o
endocervix con un hisopo o bien
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material de abscesos, secreciones
prostáticas, semen o biopsias de
tejidos
MICROSCOPIA
es útil porque los
microrganismos no tiene pared
celular y no se tiñen con los
reactivos convencionales
CULLTIVO
Es lenta ( 2- 6 semanas) y no es
sensible
DIAGNOSTICO MOLECULAR
Basadas en PCR disponen de
excelente sensibilidad
AGLUTINAS FRIAS
Sensibilidad 65%
Especificidad baja, y se producen
reacción cruzada con otros
patógenos respiratorios
ENZIMOINMUNOANALISIS
Las pruebas frente a proteínas
adhesinas podrían ser las mas
especificas
Diagnosticodelaboratorio
Urocultivo
Métodos de susceptibilidad antibacteriana Urocultivo,
hemocultivo, coprocultivo
CoprocultivoHemocultivo
Es la determinación de
elementos anormales, se
observa el sedimento urinario
 MATERIALES: muestra de
orina, agar sangre y agar
mac conkey.
 SE ENCUENTRA: E. coli, P.
aeruginosa, Enterococo,
Klebsiella
Se toma muestra de hisopo
embebido se introduce al
recto en unos 3cm. Es mas
parasitológico
SE ENCUENTRA Giardia lamblia
Para demostrar presencia de
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Con 10 ml sangre.
EN AGAR: corazón cerebro (
aerobias y anaerobias),
tioglicolato ( anaerobias)
BACTERIOLOGÍA MÉDICA
Técnicas de cultivoTinción de Gram
Gram representa uno de los
métodos con mayor valor y
utilidad entre los empleados
en el laboratorio de
microbiología
Proporciona las condiciones óptimas de
crecimiento a los patógenos que pueden
encontrarse comúnmente en una
determinada localización
Liquida
Semisolida
solida
BACTERIAS DE IMPORTANCIA MÉDICA
COCOS GRAMPOSITIVOS
Staphylococcus
enzima ligada a la pared celular
Coagulasa libre o no ligada
Streptococo
crecen bien agar sangre y agar
chocolate es preferible el agar
sangre (hemólisis)
Pruebasdiagnósticas
BACILOS
GRAMPOSITIVOS
Corinebacterium y Arcanobacterium
catalasas negativos y β
hemolíticas
Listeria
Agar sangre
Agar sangre cistina – telurito
(CT)
colonias pequeñas, de color gris azulado
Agar sangre
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catalasa, que es positiva en la primera y
negativa en los segundos.
Para diferenciar
Erysipelothrix Gardnerella
catalasa
negativamente es
inmóvil y fermenta la
glucosa y la lactosa
G. Vaginalis
células clave con el borde
cubierto de bacterias
Examen directo en secreciones vaginales
Agar chocolate
Bacillus Nocardia
bacilos grampositivos
grandes y con los
bordes rectos
superficie muy irregular o un aspecto
rugoso aterciopelado, pigmentadas con
tonos que van del amarillo al
anaranjado
Agar chocolate
Agar sangre
Frotis directo
BACTERIAS GRAMNEGATIVAS
Enterobacterias Vibrio
Agar MacConkey
diferenciación inicial de los
gramnegativos fermentadores y
no fermentadores de la lactosa
Agar de TCBS
(tiosulfato, citrato y sales biliares)
crecimiento es en medios de cultivo que
contengan NaCl, por lo que es necesario
usar medios especiales en estos casos
Aeromonas Campylobacter
Crecen fácilmente en los medios de cultivo
convencional
La mayor parte son β hemolíticas y pueden
crecer en agar sangre.
Diferentes medios para el aislamiento
colonias son de color gris, planas, irregulares y
extensas
Helicobacter
MICROSCOPIA
examen histológico de
biopsias gástricas.
nitrato de plata
CULTIVO temperatura de 35-37 °C
5 a 10 días
colonias pequeñas, grisáceas y brillantes
de aproximadamente 1 mm de diámetro
C
O
N
D
I
C
I
O
N
E
S
atmósfera de microaerofilia
alta humedad
TEST RAPIDO DE UREASA
REACCIÓN EN CADENA
DE LA POLIMERASA
PRUEBA DEL
ALIENTO
hidrólisis de
la urea
forma CO2
difusión
Exhala CO2 a través del
aliento
tomar capsula
de urea c14
detectar el ácido desoxiribonucleico (ADN)
de H. pylori en concentraciones mínimas, a
partir de biopsias gástricas
coloración gris-plata en la superficie del
crecimiento bacteriano
Pseudomonas
Haemophilus
Agar chocolate
Agar sangre
crece en casi todos los medios de
cultivos, no son exigentes
Prueba de las porfirinas
Requerimiento de los factores V y X
Colonias pequeñas, translúcidas
Bordetella Brucella
Anticuerpos IgA, IgG e IgM
Inmunofluorescencia directa (anticuerpos)
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Seroaglutinación
ELISA para IgM, IgG e IgA específica
Rosa de Bengala
• Bacterias gram negativas delgadas con forma de hélice, se subdivide
en tres familias y 13 géneros de las cuales 3 generan enfermedad:
TREPONEMA
• La subespecie pallidum es agente
etiológico de la sífilis venérea, la
subespecie endemecum produce la
bejel, pertenue causa la frambesía y
treponema carateum origina la pinta.
MICROSCOPIA.
mediante el examen de los
exudados de las lesiones
cutáneas pero las
espiroquetas
confundiéndose los restos
tisulares con espiroquetas.
una prueba de mayor
utilidad es la prueba de
anticuerpos fluorescentes
directo
CULTIVO
Incapacidad del
microorganismo de crecer
en cultivos artificiales
PRUEBAS BASADAS EN ACIDOS NUCLEICOS.
detectar pallidum en
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del lactante y LCR
DETECCION DE
ANTICUERPOS
. Las pruebas no
treponémicas se emplean
para la detección selectiva
porque se realizan con
rapidez y son poco
costosas. La positividad de
una de estas pruebas se
confirma con una prueba
treponemica.
BORRELIA
PRUEBAS BASADAS EN
ACIDOS NUCLEICOS
Sensibilidad en 65-75% en biopsias
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DETECCION DE
ANTICUERPOS
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Crecen lentamente en ellos
LEPTOSPIRA
MICROSCOPIA
OPTICA
CONVENCIONAL
• No se pueden
visualizar con
facilidad
• Filamentos de
eritrocitos se
pueden confundir
con estas bacterias
CULTIVOS
• Crecen lentamente
DETECCION DE
ANTICUERPOS
• Prueba de
referencia: Prueba
de aglutinación
microscópica MAT,
determina
capacidad del suero
para aglutinar
leptospiras vivas
Enfermedad de Carrión
“Verruga de los andes”
“ sirki ” (quechua)
“ fiebre de la oroya”
Lutzomyia verrucarrum
Bartonella bacilliformis
Bacilo gram -, pleomorfo,
intracelular, aerobio, no
fermentativo, con 2-16 flagelos
Se tiñen de color rojo con Giemsa
Cultivada en agar Columbia o
Seneckii
B. Baciliformes se adhiere a
eritrocitos la defroman, fagocitan y
la destruyen
a) Fase anémica. Anemia severa
b) Fase eruptiva. Lesion roja
purpurao violáceo no dolorosas
- Miliar 3mm
- mular  5mm
- Nodular o subcutánea en MMSS
y MMII
Diagnostico serologico
test de anticuerpos fluorescentes (IFI,
IFA), hemoaglutinacion indirecta, ELISA
y Western blot.
Inmunoprecipitacion
encuentran una sensibilidad del
método en 27.8%.
DIAGNOSTICO DE
LABORATORIO DE LAS
MICOSIS
MICOSIS
Se denomina Micosis a la infección causada por hongos de
diversos grupos, los cuales generaran un problema de salud en
la comunidad. Las micosis pueden ser clasificadas en:
 Micosis superficiales: producen infecciones en piel, cabello,
pelo y uñas.
 Micosis subcutáneas: Tienen crecimiento y diseminación
lentos.
 Micosis profunda: Pueden producir infecciones sistémicas y
causar la muerte.
MORFOLOGIA
DIAGNOSTICO DE LABORATORIO DE LAS
MICOSIS
A. Reconocimiento Clínico de las micosis:
 Se deben reconocer los factores predisponentes y de riesgo, así como observar y
explorar con detenimiento la cavidad oral, lesiones cutáneas, inspeccionar
dispositivos implantados, y exploración oftalmológica detallada.
 Para la obtención de muestras para el diagnóstico de laboratorio.
 Comprende exámenes: Microbiológico, Inmunológico y Anatomopatológico.
B. Diagnóstico convencional de laboratorio:
1. Recolección y procesamiento de muestras:
Recoleccion de
muestras
Transporte de la
muestra
Preparación de la
muestra para los
exámenes
2, TINCION Y EXPLORACION
TINCION DE CALCOFLÚOR TINCION DE GIEMSA COLORACIÓN GRAM
TINCION H&E
TINCION DE GOMORI-GROCOTT TINCION PAS
3. CULTIVO
ES EL METODO DE
DIAGNOSTICO MAS
EFECTIVO
MEDIOS ESPECÍFICOS
MEDIOS NO ESPECÍFICOS
AGAR SABHI
4. IDENTIFICACION DEL AGENTE CAUSAL
INFLUYE DIRECTAMENTE EN LA
TERAPIA Y PRONÓSTICO
IDENTIFICACION
ENTRE MOHO Y
LEVADURA
MOHOS
LEVADURAS
MACROSCOPICAMENTE MICROSCOPICAMENTE
DERMATOFITOSIS
 Se refiere a un complejo de patologías causadas por hongos filamentosos, pertenecientes a
los géneros Trichophyton, Epiermophyton y Microsporum.
DIAGNOSTICO DE LABORATORIO:
MUESTRA CON KOH (20%)
MICROSCOPIA DIRECTA.
OBSERVACION DE CONIDIOS
DE MICROSPORUM CANNIS
CULTIVO EN MEDIO BHI,
CRECIMIENTO FILAMENTOSO
DE M. CANNIS
OBSERVACION
MICROSCÓPICA DE
MACROCONIDIOS DE M.
CANNIS, TINCIÓN:
ALGODÓN DE LACTOFENOL
HONGOS DIMORFICOS
FORMA
FILAMENTOSA
FORMA
LEVADURIFORME
NEUMOCISTOSIS
 Es una micosis oportunista generada por Pneumocystis jirovecii.
MICROSCOPIA, TINCION GMS
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Diagnóstico microbiológico de micosis

  • 2.
  • 3. Chlamydia trachomatis Chlamidophila pneumoniaeChlamidophila psittaci Se divide en base a composición antigénica, inclusiones intracelulares, sensibilidad a la sulfonamida y tipo de efermedad que ocasiona. Intracelulares estrictos, Gram - Clínica:  Ceguera  Linfogranuloma Clínica:  Faringitis  Otitis Clínica:  Necrosis pulmonar  Neumonia CULTIVO CELULAR Medio de cultivo Mc Coy y medio Martin Lewis FLUORESCENCI A DIRECTA CON ANTICUERPOS (FDA) Ac contra C. trachomatis ENZIMOIMUNO ENSAYOS (EIA) detecta LPS de clamidias HIBRIDACION DE ACIDOS NUCLEICOS sonda ADN marcada con éter que permite la detección directa de clamidia AMPLIFICACIO N DE ACIDOS NUCLEICOS altamente sensible y especifico PRUEBAS SEROLOGICAS aunque no son tan especificos Diagnostico de laboratorio
  • 4. Intracelulares estrictos, Gram - Rickettsia rickettsii Rickettsia typhiRickettsia conirii Clínica:  Fiebre maculosa de montañas Clínica:  Fiebre exantema  Mialgias Clínica:  Fiebre botonosa  Escaras con necrosis dermica Sospechas clínicas epidemiológicas Detección de ARN rickettsial en muestras de sangre por PCR Tinción de inmunoflorescencia o enzimoinmunoensayo para detección de anticuerpos Método de inmunoinmunofloresce ncia indirecta con el uso de peroxidasa Diagnostico de laboratorio
  • 5. Intracelulares estrictos, Gram - Mycoplsma pneumoniae Mycoplasma genitalis Clínica:  Traqueobronquitis  Neumonia atipica Clínica:  Fiebre pos parto diagnostico se obtiene muestra de secreción vaginal, uretra o endocervix con un hisopo o bien de muestras de orina, sangre, material de abscesos, secreciones prostáticas, semen o biopsias de tejidos MICROSCOPIA es útil porque los microrganismos no tiene pared celular y no se tiñen con los reactivos convencionales CULLTIVO Es lenta ( 2- 6 semanas) y no es sensible DIAGNOSTICO MOLECULAR Basadas en PCR disponen de excelente sensibilidad AGLUTINAS FRIAS Sensibilidad 65% Especificidad baja, y se producen reacción cruzada con otros patógenos respiratorios ENZIMOINMUNOANALISIS Las pruebas frente a proteínas adhesinas podrían ser las mas especificas Diagnosticodelaboratorio
  • 6. Urocultivo Métodos de susceptibilidad antibacteriana Urocultivo, hemocultivo, coprocultivo CoprocultivoHemocultivo Es la determinación de elementos anormales, se observa el sedimento urinario  MATERIALES: muestra de orina, agar sangre y agar mac conkey.  SE ENCUENTRA: E. coli, P. aeruginosa, Enterococo, Klebsiella Se toma muestra de hisopo embebido se introduce al recto en unos 3cm. Es mas parasitológico SE ENCUENTRA Giardia lamblia Para demostrar presencia de microorganismos en sangre. Con 10 ml sangre. EN AGAR: corazón cerebro ( aerobias y anaerobias), tioglicolato ( anaerobias)
  • 7. BACTERIOLOGÍA MÉDICA Técnicas de cultivoTinción de Gram Gram representa uno de los métodos con mayor valor y utilidad entre los empleados en el laboratorio de microbiología Proporciona las condiciones óptimas de crecimiento a los patógenos que pueden encontrarse comúnmente en una determinada localización Liquida Semisolida solida
  • 8. BACTERIAS DE IMPORTANCIA MÉDICA COCOS GRAMPOSITIVOS Staphylococcus enzima ligada a la pared celular Coagulasa libre o no ligada Streptococo crecen bien agar sangre y agar chocolate es preferible el agar sangre (hemólisis) Pruebasdiagnósticas
  • 9. BACILOS GRAMPOSITIVOS Corinebacterium y Arcanobacterium catalasas negativos y β hemolíticas Listeria Agar sangre Agar sangre cistina – telurito (CT) colonias pequeñas, de color gris azulado Agar sangre Colonia similar a streptococcus catalasa, que es positiva en la primera y negativa en los segundos. Para diferenciar
  • 10. Erysipelothrix Gardnerella catalasa negativamente es inmóvil y fermenta la glucosa y la lactosa G. Vaginalis células clave con el borde cubierto de bacterias Examen directo en secreciones vaginales Agar chocolate
  • 11. Bacillus Nocardia bacilos grampositivos grandes y con los bordes rectos superficie muy irregular o un aspecto rugoso aterciopelado, pigmentadas con tonos que van del amarillo al anaranjado Agar chocolate Agar sangre Frotis directo
  • 12. BACTERIAS GRAMNEGATIVAS Enterobacterias Vibrio Agar MacConkey diferenciación inicial de los gramnegativos fermentadores y no fermentadores de la lactosa Agar de TCBS (tiosulfato, citrato y sales biliares) crecimiento es en medios de cultivo que contengan NaCl, por lo que es necesario usar medios especiales en estos casos
  • 13. Aeromonas Campylobacter Crecen fácilmente en los medios de cultivo convencional La mayor parte son β hemolíticas y pueden crecer en agar sangre. Diferentes medios para el aislamiento colonias son de color gris, planas, irregulares y extensas
  • 14. Helicobacter MICROSCOPIA examen histológico de biopsias gástricas. nitrato de plata CULTIVO temperatura de 35-37 °C 5 a 10 días colonias pequeñas, grisáceas y brillantes de aproximadamente 1 mm de diámetro C O N D I C I O N E S atmósfera de microaerofilia alta humedad
  • 15. TEST RAPIDO DE UREASA REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA PRUEBA DEL ALIENTO hidrólisis de la urea forma CO2 difusión Exhala CO2 a través del aliento tomar capsula de urea c14 detectar el ácido desoxiribonucleico (ADN) de H. pylori en concentraciones mínimas, a partir de biopsias gástricas
  • 16. coloración gris-plata en la superficie del crecimiento bacteriano Pseudomonas Haemophilus Agar chocolate Agar sangre crece en casi todos los medios de cultivos, no son exigentes Prueba de las porfirinas Requerimiento de los factores V y X Colonias pequeñas, translúcidas
  • 17. Bordetella Brucella Anticuerpos IgA, IgG e IgM Inmunofluorescencia directa (anticuerpos) Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) Seroaglutinación ELISA para IgM, IgG e IgA específica Rosa de Bengala
  • 18. • Bacterias gram negativas delgadas con forma de hélice, se subdivide en tres familias y 13 géneros de las cuales 3 generan enfermedad:
  • 19. TREPONEMA • La subespecie pallidum es agente etiológico de la sífilis venérea, la subespecie endemecum produce la bejel, pertenue causa la frambesía y treponema carateum origina la pinta. MICROSCOPIA. mediante el examen de los exudados de las lesiones cutáneas pero las espiroquetas confundiéndose los restos tisulares con espiroquetas. una prueba de mayor utilidad es la prueba de anticuerpos fluorescentes directo CULTIVO Incapacidad del microorganismo de crecer en cultivos artificiales PRUEBAS BASADAS EN ACIDOS NUCLEICOS. detectar pallidum en lesiones genitales, sangre del lactante y LCR DETECCION DE ANTICUERPOS . Las pruebas no treponémicas se emplean para la detección selectiva porque se realizan con rapidez y son poco costosas. La positividad de una de estas pruebas se confirma con una prueba treponemica.
  • 20. BORRELIA PRUEBAS BASADAS EN ACIDOS NUCLEICOS Sensibilidad en 65-75% en biopsias 50- 85% en liquido sinovial 25% en LCR DETECCION DE ANTICUERPOS Mayor frecuencia los análisis de inmunofluorescencia y inmunoanalisis ligados a enzimas (ELISA) CULTIVO Crecen lentamente en ellos
  • 21. LEPTOSPIRA MICROSCOPIA OPTICA CONVENCIONAL • No se pueden visualizar con facilidad • Filamentos de eritrocitos se pueden confundir con estas bacterias CULTIVOS • Crecen lentamente DETECCION DE ANTICUERPOS • Prueba de referencia: Prueba de aglutinación microscópica MAT, determina capacidad del suero para aglutinar leptospiras vivas
  • 22. Enfermedad de Carrión “Verruga de los andes” “ sirki ” (quechua) “ fiebre de la oroya” Lutzomyia verrucarrum Bartonella bacilliformis Bacilo gram -, pleomorfo, intracelular, aerobio, no fermentativo, con 2-16 flagelos Se tiñen de color rojo con Giemsa Cultivada en agar Columbia o Seneckii B. Baciliformes se adhiere a eritrocitos la defroman, fagocitan y la destruyen a) Fase anémica. Anemia severa b) Fase eruptiva. Lesion roja purpurao violáceo no dolorosas - Miliar 3mm - mular  5mm - Nodular o subcutánea en MMSS y MMII Diagnostico serologico test de anticuerpos fluorescentes (IFI, IFA), hemoaglutinacion indirecta, ELISA y Western blot. Inmunoprecipitacion encuentran una sensibilidad del método en 27.8%.
  • 24. MICOSIS Se denomina Micosis a la infección causada por hongos de diversos grupos, los cuales generaran un problema de salud en la comunidad. Las micosis pueden ser clasificadas en:  Micosis superficiales: producen infecciones en piel, cabello, pelo y uñas.  Micosis subcutáneas: Tienen crecimiento y diseminación lentos.  Micosis profunda: Pueden producir infecciones sistémicas y causar la muerte.
  • 26. DIAGNOSTICO DE LABORATORIO DE LAS MICOSIS A. Reconocimiento Clínico de las micosis:  Se deben reconocer los factores predisponentes y de riesgo, así como observar y explorar con detenimiento la cavidad oral, lesiones cutáneas, inspeccionar dispositivos implantados, y exploración oftalmológica detallada.  Para la obtención de muestras para el diagnóstico de laboratorio.  Comprende exámenes: Microbiológico, Inmunológico y Anatomopatológico.
  • 27. B. Diagnóstico convencional de laboratorio: 1. Recolección y procesamiento de muestras: Recoleccion de muestras Transporte de la muestra Preparación de la muestra para los exámenes
  • 28. 2, TINCION Y EXPLORACION TINCION DE CALCOFLÚOR TINCION DE GIEMSA COLORACIÓN GRAM TINCION H&E TINCION DE GOMORI-GROCOTT TINCION PAS
  • 29. 3. CULTIVO ES EL METODO DE DIAGNOSTICO MAS EFECTIVO MEDIOS ESPECÍFICOS MEDIOS NO ESPECÍFICOS AGAR SABHI
  • 30. 4. IDENTIFICACION DEL AGENTE CAUSAL INFLUYE DIRECTAMENTE EN LA TERAPIA Y PRONÓSTICO IDENTIFICACION ENTRE MOHO Y LEVADURA MOHOS LEVADURAS MACROSCOPICAMENTE MICROSCOPICAMENTE
  • 31. DERMATOFITOSIS  Se refiere a un complejo de patologías causadas por hongos filamentosos, pertenecientes a los géneros Trichophyton, Epiermophyton y Microsporum. DIAGNOSTICO DE LABORATORIO: MUESTRA CON KOH (20%) MICROSCOPIA DIRECTA. OBSERVACION DE CONIDIOS DE MICROSPORUM CANNIS CULTIVO EN MEDIO BHI, CRECIMIENTO FILAMENTOSO DE M. CANNIS OBSERVACION MICROSCÓPICA DE MACROCONIDIOS DE M. CANNIS, TINCIÓN: ALGODÓN DE LACTOFENOL
  • 33. NEUMOCISTOSIS  Es una micosis oportunista generada por Pneumocystis jirovecii. MICROSCOPIA, TINCION GMS DETECCION DE ANTÍGENOS FLUORESCENTES; ESPECIFICIDAD DEL 90%